Investigação de marcadores moleculares sanguíneos durante a infecção pelo vírus Chikungunya / Investigation of blood molecular markers during Chikungunya virus infection

A febre Chikungunya (CHIKF) é uma infecção viral causada pelo vírus Chikungunya (CHIKV). Os sintomas agudos incluem febre alta de início súbito, erupção cutânea, poliartrite e poliartralgia. Embora a infecção geralmente seja resolvida em menos de duas semanas, muitos pacientes experenciam recorrente dor e inflamação nas articulações, que podem persistir por anos. Esse estudo buscou marcadores moleculares no sangue de infectados pelo CHIKV que estejam associados a dor articular e cronicidade da CHIKF. O sequenciamento de receptores de células B (BCR) e T (TCR) demonstrou que a infecção por CHIKV diminui a diversidade desses receptores. Essa diversidade é ainda menor, durante a fase aguda da infecção, naqueles pacientes que irão desenvolver cronicidade. A menor diversidade de BCR em infectados está associada a um aumento na expressão de genes envolvidos na diferenciação e ativação de osteoclastos pela sinalização RANK/RANKL. Em adição, a cronicidade pode estar relacionada um aumento na expressão do gene ZBTB7A cuja expressão confere maior resistência a apoptose em precursores de osteoclastos naqueles pacientes que vão se tornar crônicos. Caso o envolvimento dos osteoclastos durante a patogênese de CHIKF seja confirmado, os pacientes poderão se beneficiar de abordagens terapêuticas já existentes como alternativas adicionais ao tratamento de CHIKF

Chikungunya fever (CHIKF) is a viral infection caused by the Chikungunya virus (CHIKV). Acute symptoms include sudden-onset high fever, rash, polyarthritis, and polyarthralgia. Although the infection usually resolves within two weeks, many patients experience recurrent joint pain and inflammation, which can persist for years. This study sought molecular markers in the blood of CHIKV-infected individuals that are associated with joint pain and chronicity of CHIKF. Sequencing of B (BCR) and T (TCR) cell receptors demonstrated that CHIKV infection decreases the diversity of these receptors. The diversity is even lower, during the acute phase of the infection, in those patients who will develop chronicity. The lower diversity of BCR in infected individuals is associated with an increase in the expression of genes involved in the differentiation and activation of osteoclasts by RANK/RANKL signaling. In addition, chronicity may be related to an increase in the expression of the ZBTB7A gene whose expression confers greater resistance to apoptosis in osteoclast precursors in those patients who will become chronic. If osteoclast role during CHIKF pathogenesis is confirmed, patients may benefit from existing therapeutic approaches as additional alternatives to CHIKF treatment

Relationship between preoperative inflammatory indexes and prognosis of patients with rectal cancer and establishment of prognostic nomogram prediction model / 中华肿瘤杂志

Objective: To compare the prognostic evaluation value of preoperative neutrophil-to-lymphocyte ratio (NLR), platelet-to-lymphocyte ratio (PLR), lymphocyte-to-monocyte ratio (LMR), and systemic immune-inflammation index (SII) in rectal cancer patients. Nomogram survival prediction model based on inflammatory markers was constructed. Methods: The clinical and survival data of 585 patients with rectal cancer who underwent radical resection in the First Affiliated Hospital of Xi'an Jiao tong University from January 2013 to December 2016 were retrospectively analyzed. The optimal cut-off values of NLR, PLR, LMR, and SII were determined by the receiver operating characteristic (ROC) curve. The relationship between different NLR, PLR, LMR and SII levels and the clinic pathological characteristics of the rectal cancer patients were compared. Cox proportional risk model was used for univariate and multivariate regression analysis. Nomogram prediction models of overall survival (OS) and disease-free survival (DFS) of patients with rectal cancer were established by the R Language software. The internal validation and accuracy of the nomograms were determined by the calculation of concordance index (C-index). Calibration curve was used to evaluate nomograms' efficiency. Results: The optimal cut-off values of preoperative NLR, PLR, LMR and SII of OS for rectal cancer patients were 2.44, 134.88, 4.70 and 354.18, respectively. There was statistically significant difference in tumor differentiation degree between the low NLR group and the high NLR group (P<0.05), and there were statistically significant differences in T stage, N stage, TNM stage, tumor differentiation degree and preoperative carcinoembryonic antigen (CEA) level between the low PLR group and the high PLR group (P<0.05). There was statistically significant difference in tumor differentiation degree between the low LMR group and the high LMR group (P<0.05), and there were statistically significant differences in T stage, N stage, TNM stage, tumor differentiation degree and preoperative CEA level between the low SII group and the high SII group (P<0.05). The multivariate Cox regression analysis showed that the age (HR=2.221, 95%CI: 1.526-3.231), TNM stage (Ⅲ grade: HR=4.425, 95%CI: 1.848-10.596), grade of differentiation (HR=1.630, 95%CI: 1.074-2.474), SII level (HR=2.949, 95%CI: 1.799-4.835), and postoperative chemoradiotherapy (HR=2.123, 95%CI: 1.506-2.992) were independent risk factors for the OS of patients with rectal cancer. The age (HR=2.107, 95%CI: 1.535-2.893), TNM stage (Ⅲ grade, HR=2.850, 95%CI: 1.430-5.680), grade of differentiation (HR=1.681, 95%CI: 1.150-2.457), SII level (HR=2.309, 95%CI: 1.546-3.447), and postoperative chemoradiotherapy (HR=1.837, 95%CI: 1.369-2.464) were independent risk factors of the DFS of patients with rectal cancer. According to the OS and DFS nomograms predict models of rectal cancer patients established by multivariate COX regression analysis, the C-index were 0.786 and 0.746, respectively. The calibration curve of the nomograms showed high consistence of predict and actual curves. Conclusions: Preoperative NLR, PLR, LMR and SII levels are all correlated with the prognosis of rectal cancer patients, and the SII level is an independent prognostic risk factor for patients with rectal cancer. Preoperative SII level can complement with the age, TNM stage, differentiation degree and postoperative adjuvant chemoradiotherapy to accurately predict the prognosis of rectal cancer patients, which can provide reference and help for clinical decision.

Evaluation of vitamin D and inflammatory markers in elderly

Abstract Vitamin D is an immune modulator, in addition to being interrelated with calcium homeostasis and bone metabolism. Recent studies have associated vitamin D with inflammatory processes. C-reactive protein (CRP), platelet/lymphocyte ratio (PLR) and neutrophil/lymphocyte ratio (NLR) have been used to determine inflammation. There is no consensus on the use of these markers to determine an association between inflammation and vitamin D levels. The objective of this study was to evaluate the association between inflammatory markers and vitamin D in the elderly. A cross-sectional, descriptive study was performed based on the analysis of vitamin D, CRP (quantitative determination of C-Reactive Protein by the ultra-sensitive method) and blood count of institutionalized elderly. In this study, 64% showed vitamin D deficiency, with mean value of 22 ng/mL. In the vitamin D deficient group, the mean values found were: CRP 4.5 mg/L; NLR 2.35 and PLR 119. In the group without vitamin D deficiency the mean values were: CRP 4 mg/L; NLR 1.87 and PLR 111 without statistical difference between the values of the analyzed parameters. The results point to a predominant profile of vitamin D deficiency in the evaluated individuals. No association was found between vitamin D values and the inflammatory markers analyzed.

The Effect of Anakinra on Acrylamide-induced Peripheral Neuropathy and Neuropathic Pain in Rats

Abstract Acrylamide is a neurotoxic compound. Moreover, anakinra is an interleukin-1 (IL-1) receptor antagonist used in rheumatoid arthritis treatment. This study investigated the effect of anakinra on acrylamide-related neuropathy and neuropathic pain. Acrylamide exposure caused a significant decrease in the pain threshold; an increase in malondialdehyde (MDA), tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), and interleukin-1 beta (IL-1ß) levels; and a decrease in total glutathione (tGSH) values in the sciatic nerve. This indicates hyperalgesia presence, oxidative stress, and peripheral nerve tissue inflammation. Anakinra treatment significantly reduced the MDA, IL-1ß, and TNF-α levels, and increased the pain threshold and mean tGSH values. The analgesic effect of anakinra was 67.9% at the first hour, increasing to 74.9% and 76.7% at the second and third hours, respectively. The group receiving acrylamide exhibited histopathological changes (e.g., swollen and degenerated axons, hypertrophic and hyperplasic Schwann cells, and congested vessels). The use of anakinra significantly improved these morphological changes. Anakinra is concluded to reduce neuropathic pain and prevent neurotoxic effect of acrylamide on peripheral nerves due to its analgesic, antioxidant, and anti-inflammatory properties

Análise dos mecanismos pró-inflamatórios do ácido úrico solúvel: efeito sobre proteínas sensíveis à modulação redox e sobre a polarização de células THP-1 / Analysis of the pro-inflammatory mechanisms of soluble uric acid: effect on redox sensitive proteins and THP-1 cell polarization

Vários estudos epidemiológicos estabelecem correlação positiva entre os níveis de ácido úrico sérico e o aumento do risco para doenças cardiovasculares. Fatores dietéticos e socioeconômicos, além da presença de comorbidades estão diretamente associados aos níveis séricos de ácido úrico. Países desenvolvidos apresentam maior incidência e prevalência da gota e alguns grupos étnicos são particularmente susceptíveis à hiperuricemia. Cristais de ácido úrico são descritos por iniciar e perpetuar resposta inflamatória, e sinalizar um padrão de resposta molecular associado ao dano (DAMP), permitindo a diferenciação de macrófagos para perfis pró-inflamatórios. Por outro lado, os efeitos do ácido úrico em sua forma solúvel ainda carecem de estudos. Macrófagos derivados de precursores monocíticos apresentam diferenciação específica e respondem a um conjunto de fatores extrínsecos, resultando em perfis distintos, um fenômeno conhecido como polarização. Assim, os macrófagos podem ser classicamente ativados para uma resposta Th1 (T helper 1) e polarizados a um perfil pró- inflamatório (M1, resposta Th1) ou a um perfil alternativo e oposto, um perfil de resolução da inflamação (M2, resposta Th2, T helper 2). Nesse sentindo, buscamos analisar os efeitos do ácido úrico solúvel sobre vias de modulação da polarização fenotípica de macrófagos e modificação redox. Utilizamos a linhagem monocítica humana THP-1, a qual foi diferenciada em macrófagossímile por acetato miristato de forbol (PMA; 5 ng.mL-1) por 48 h, seguidas da incubação com ácido úrico em meio ausente de tióis e soro fetal bovino por 8h ou 24h (0-1000 µM). A expressão de fatores de transcrição e marcadores de polarização foi realizada através de citometria de fluxo, western-blotting e por microscopia de fluorescência com alto conteúdo de imagens (HCI). Em concentrações fisiológicas, verificamos que o ácido úrico solúvel regulou positivamente a frequência de células para receptor manose CD206, um marcador clássico de perfil alternativo/M2 e regulou negativamente a expressão óxido nítrico sintase induzível (iNOS), um marcador M1, sugerindo inicialmente uma modulação para o perfil de polarização M2. Além disso, as proteínas redoxsensíveis, heme oxigenase-1 (HO-1) e tiorredoxina (Trx) tiveram sua expressão reduzida e aumentada, respectivamente, pelo tratamento com ácido úrico. Os fatores de transcrição Nrf2 e STAT3 tiveram regulação negativa após a exposição ao ácido úrico solúvel. Os resultados apresentados nesta tese sugerem uma função do urato no priming de macrófagos através da alteração da polarização destas células

Several epidemiological studies have established a positive correlation between high serum uric acid levels and increased risk for cardiovascular diseases. Developed countries have a higher incidence and prevalence of gout and some ethnic groups are particularly susceptible to hyperuricemia. Although hyperuricemia is a prevalent condition, it has still controversy biological consequences. Uric acid crystals are described as capable of initiating and perpetuating inflammatory responses, by activating the damage-associated molecular response pattern (DAMP) cascade, allowing macrophage differentiation to inflammatory profiles. In spite of that, biological response to soluble uric acid are not completely understood. Monocyte-derived macrophages respond to a set of extrinsic factors that result in different profiles and can be polarized to a proinflammatory (M1) or anti-inflammatory (M2) profile. In this thesis, we analyzed the effects of soluble uric acid on redox-modulated pathways and the phenotypic polarization of macrophages. We used human monocytic THP-1 cell line, differentiated into macrophage by phorbol myristate acetate (PMA; 5 ng.mL-1) for 48 h. After differentiation, cells were incubated with soluble uric acid in medium without thiols and fetal bovine serum for 8 h and 24 h (0-1000 µM). The expression of transcription factors and polarization markers were assessed by flow cytometry, western-blotting and fluorescence microscopy with high content imaging (HCI). At physiological concentrations, soluble uric acid positively regulated the frequency of cells for mannose receptor CD206, a classic marker of the anti-inflammatory M2 profile and negatively regulated the inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression, a proinflammatory M1 marker, suggesting that the soluble uric acid changes the polarization profile to M2 profile. In addition, the redox-sensitive proteins heme oxygenase-1 (HO-1) and thioredoxin (Trx) had their expression decreased and increased, respectively, after exposure to urate. STAT3 and Nrf2 transcription factors were downregulated upon soluble uric acid exposure. The results presented in this thesis suggest a role of uric acid in macrophage priming through the alteration of cell polarization

Once upon a time, inflammation

Inflammation has accompanied humans since their first ancestors appeared on Earth. Aulus Cornelius Celsus (25 BC-50 AD), a Roman encyclopedist, offered a still valid statement about inflammation: "Notae vero inflammationis sunt quatuor: rubor et tumor cum calore and dolore", defining the four cardinal signs of inflammation as redness and swelling with heat and pain. While inflammation has long been considered as a morbid phenomenon, John Hunter (18th century) and Elie Metchnikoff (19th century) understood that it was a natural and beneficial event that aims to address a sterile or an infectious insult. Many other famous scientists and some forgotten ones have identified the different cellular and molecular players, and deciphered the different mechanisms of inflammation. This review pays tribute to some of the giants who made major contributions, from Hippocrates to the late 19th and first half of the 20th century. We particularly address the discoveries related to phagocytes, diapedesis, chemotactism, and fever. We also mention the findings of the various inflammatory mediators and the different approaches designed to treat inflammatory disorders.(AU)

Effect of prodigiosin on the alleviation of the intestinal inflammation of weaned rats based on 1H-NMR spectroscopy study and biochemistry indexes

Weaning results in intestinal dysfunction, mucosal atrophy, transient anorexia, and intestinal barrier defects. In this study, the effect of prodigiosin (PG) on the intestinal inflammation of weaned rats was investigated by using 1H-NMR spectroscopy and biochemistry indexes to regulate the intestinal metabolism. After administration for 14 days, the body mass of the PG group was increased by 1.29- and 1.26-fold compared with those of the control and alcohol groups, respectively, using a dose of 200 µg PG·kg-1 body weight per day. PG increased organic acid content and decreased moisture, pH values, and free ammonia in feces. In addition, PG alleviated the intestinal inflammation of weaned rats. The analysis of 1H-NMR signal peak attribution and the model validation of metabolic data of feces contents showed that PG significantly affected the metabolism of small molecular compounds in the intestinal tract of weaned rats. This study presents the promising alternative of using PG to alleviate intestinal inflammation effectively in the intestinal tract of weaned rats.

A suplementação de pacientes com diabetes mellitus tipo 2 com castanha-do-brasil, pode alterar o estado nutricional relativo ao selênio, o grau de inflamação e a microbiota intestinal? / Can supplementation of patients with type 2 diabetes mellitus with brazil nuts affect the nutritional status of selenium, the degree of inflammation and the intestinal microbiota?

O diabetes mellitus tipo 2 está intimamente ligado a formação de espécies reativas de oxigênio, as quais aumentam os produtos de glicação avançada e consequentemente a inflamação e o desenvolvimento das complicações associadas a doença. Nesse contexto, destaca-se o papel do microbioma intestinal, visto que esta pode ser capaz de modificar fatores ligados ao sistema imune e sua modulação pode ser uma boa alternativa para melhora do quadro inflamatório e complicações da doença. A castanha-do-brasil, fonte de selênio, além de outros nutrientes, poderia atuar no sistema de defesa antioxidante e anti-inflamatório, além de influenciar a microbiota intestinal, resultando benefícios aos pacientes. Portanto, este estudo teve como objetivo avaliar estes efeitos da suplementação de indivíduos com diabetes mellitus tipo 2, com uma nóz de castanha-do-brasil (Bertholletia excelsa H.B.K.) por dia, durante 60 dias. Para tanto, foi delineado um ensaio clínico, longitudinal, com 29 pacientes voluntários com diabetes mellitus tipo 2, atendidos no Ambulatório de Endocrinologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo. Os participantes foram avaliados antes e após a intervenção, e realizaram uma coleta de fezes (caracterização da microbiota intestinal e concentração de selênio) e uma coleta de sangue (análises de status de selênio, marcadores inflamatórios, glicêmicos e lipídicos, e da permeabilidade intestinal), a avaliação da ingestão alimentar foi por meio de Registro Alimentar de 3 dias Inicialmente, determinou-se a composição centesimal e a concentração de selênio da castanha-do-brasil utilizada. A análise bioinformática foi conduzida usando o Quantitative Insight into Microbial Ecology (QIIME, versão 1.9.0). A análise estatística foi realizada com os softwares Statistical Package for the Social Sciences, versão 23.0, e R versão 1.1.463. A concentração de selênio na castanha in natura foi de 79,8µg/g. A idade média dos participantes foi 54,9±3,6 anos. A ingestão de castanha-do-brasil foi capaz de melhorar significativamente os parâmetros: concentrações de selênio no plasma (Δ 95,82, p<0,001), nos eritrócitos (Δ 163,16, p<0,001) e nas fezes (Δ 166,31 p<0,001), assim como na selenoproteína P (Δ 5,36 p<0,026) e atividade da enzima glutationa peroxidase (Δ 30,61 p<0,040) e redução da hemoglobina glicada (Δ -0,8, p=0,001). No entanto, não houve alteração do perfil lipídico, inflamatório, ingestão alimentar e marcadores antropométricos. Apesar de não verificarmos mudança na composição global da microbiota intestinal, a diversidade interpessoal (ß diversidade) variou conforme a concentração de selenoproteína P (p=0,03) e porcentagem de hemoglobina glicada (p=0,04). A suplementação com castanha-do-brasil melhorou o perfil glicêmico e o status de selênio. Apesar de não ser observada influência na composição global da microbiota, a segregação observada indica certa resistência da microbiota frente a intervenção com a castanha

Type 2 diabetes mellitus is closely linked to the formation of reactive oxygen species, such as those that increase advanced glycation products (AGEs) and, consequently, inflammation and the development of complications associated with this disease. In this context, the study of the intestinal microbiome is of extreme importance, since it may be able to alter the factors related to the immune system and its modulation may be a good alternative for the improvement of the clinical and inflammatory status. Brazil nut is rich in selenium, in addition to other nutrients, which could act in the anti-inflammatory and antioxidant defense system and influence intestinal microbiota composition. Therefore, this study had the objective of determining the supplementation with type 2 diabetes mellitus. This longitudinal clinical trial was designed with 29 patients with type 2 diabetes mellitus, attended at the Endocrinology Outpatient Clinic of the Hospital das Clínicas, Faculdade de Medicina of the University of São Paulo. The intervention with Brazil nuts lasted 60 days and the participants were evaluated before and after by a collection of feces (intestinal microbiota characterization and selenium concentration) and blood collection (analyzes of selenium status, inflammatory markers, glycemic and lipid levels, and intestinal permeability), and dietary intake by means of a 3-day Food Registry. Initially, the centesimal composition and the selenium concentration of the nut were determined used. Bioinformatic analysis was conducted using the Quantitative Insight into Microbial Ecology (QIIME, version 1.9.0). Statistical analysis was performed with the software Statistical Package for the Social Sciences, version 23.0, and R version 1.1.463. The concentration of selenium in the nut in natura was 79.8 µg / g. The mean age of the participants was 54.9 ± 3.6 years, the mean time of diagnosis of the disease was 11.7 ± 6.9 years. The Brazil nut intake was able to significantly improve the parameters: plasma selenium concentrations (Δ 95,82, p<0,001), nem da circunferência da cintura (Δ-1 p=0,217) and GPX (Δ30.61 p <0.040) and reduction in HbA1c (Δ -0.8, p = 0.001). However, there were no changes in the lipid profile, inflammation, food intake and anthropometric markers. Although we did not verify a change in the global composition of the intestinal microbiota, the interpersonal diversity (ß diversity) varied according to the concentration of SELENOP (p = 0.03) and HbA1c percentage (p = 0.04). We conclude that brazil nut supplementation improved the glycemic profile and the status of selenium. Although no influence was observed on the overall composition of the microbiota, the observed segregation indicates some resistance of the microbiota to the intervention with the chestnut

Effects of a new thiazolidine compound (GQ-11) on tissue repair process in models of insulin resistance and ischemia-reperfusion / Efeitos de um novo derivado tiazolidínico (GQ-11) no processo de reparo tecidual em modelos de resistência à insulina e isquemia-reperfusão

The thiazolidinediones (TZDs) class comprises drugs with hypoglycemic effects, reducing insulin resistance in peripheral tissues. Our group has demonstrated in preliminary in vivo studies that a new TZD, GQ-11, improves insulin resistance as well as modulates cytokines involved in inflammatory process, suggesting an interesting approach for therapeutic alternatives in tissue repair, especially in metabolic decompensation cases, as insulin resistance and ischemia-reperfusion. In this context, the aim of this study was to investigate GQ-11 effects in tissue repair in three different models: insulin resistance in db/db mice, reconstructed human epidermis (RHE) in glycated collagen matrix and ischemia/reperfusion induced by aorta clamping in Wistar rats. In insulin resistance context, GQ-11 treatment upregulated the expression of anti-inflammatory mediators, such as IL-10, TGF-ß and Arg-1, downregulated the expression of pro-inflammatory cytokines both in db/db mice wounds and in macrophage, besides increasing re-epithelization and collagen deposition. In addition, the treatment also induced keratinocytes proliferation and fibroblasts differentiation in RHE. In ischemia-reperfusion model, the same anti-inflammatory effect was observed along with anti-oxidant properties through regulation of enzymes, such as catalase and GPx, as well as by decreasing TBARS formation. Animals imaging by positron emission tomography (PET) indicated significant less 18F-FDG uptake in animal treated with GQ-11 compared to controls, suggesting decrease of the inflammation process related to reperfusion after aorta clamping. Concluding, the dual PPARα/γ agonist GQ-11 has an important antiinflammatory effect, suggesting a new approach to tissue repair management in diabetes and in prevention of ischemia-reperfusion syndrome post-surgery

As tiazolidinadionas (TZDs) compreendem uma classe de fármacos hipoglicemiantes que reduzem a resistência à insulina pelos tecidos periféricos. Dados preliminares in vivo obtidos em nosso grupo de pesquisa mostraram que um dos novos derivados tiazolidínicos, GQ-11, além de aumentar a resposta à insulina, pode inibir citocinas pró-inflamatórias, o que a torna uma alternativa terapêutica promissora no reparo tecidual, em especial, nos casos de descompensação metabólica como ocorre na resistência à insulina e na isquemia/reperfusão. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi investigar os efeitos da GQ-11 nas etapas do processo de reparo tecidual em três modelos: resistência à insulina utilizando camundongos db/db, epiderme humana reconstruída em matriz de colágeno glicado e isquemia/reperfusão induzida por clampeamento da aorta em ratos Wistar. No contexto de resistência à insulina, o tratamento com GQ-11 induziu a expressão de mediadores anti-inflamatórios como IL-10, TGF-ß e Arg-1 e diminuiu a expressão de citocinas pró-inflamatórias em lesões de camundongos db/db e em macrófagos, além de aumentar a capacidade de re-epitelização e a deposição de colágeno. Além disso, o tratamento também induziu a proliferação de queratinócitos e a diferenciação de fibroblastos em epiderme humana reconstruída em matriz de colágeno glicado. No modelo de isquemia-reperfusão, o mesmo efeito anti-inflamatório da GQ-11 foi observado ao lado de efeitos anti-oxidantes através da regulação de enzimas como catalase, GPx e diminuição de TBARS. O imageamento dos animais através de tomografia por emissão de pósitrons (PET) demonstrou menor captação de 18F-FDG (18F-fluordesoxiglicose), indicando diminuição do processo inflamatório decorrente da reperfusão pós clampeamento aórtico. Dessa forma, conclui-se que GQ-11, um agonista dual de PPARα/γ, tem efeito anti-inflamatório importante, podendo ser um candidato à fármaco com possível aplicação no reparo tecidual no diabetes e na prevenção da síndrome de isquemia-reperfusão desenvolvida após procedimentos cirúrgicos

Metaloproteinases no tecido laminar do casco de equinos submetidos à obstrução intraluminal do cólon menor / Metalloproteinases in hoof laminar tissue of equine submitted to intraluminal small colon obstruction

O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão das MMP-2 e MMP-9 no tecido laminar do casco e o perfil leucocitário de equinos submetidos à obstrução intraluminal do cólon menor. Realizaram-se laparotomia e obstrução do cólon menor de oito equinos hígidos, utilizando-se uma bola inserida no lúmem intestinal. A bola foi inflada à pressão de 80mmHg e a obstrução foi mantida por quatro horas. Foram realizadas coletas sanguíneas antes da obstrução (M0), imediatamente após a desobstrução (M4) e a cada 12 horas após M4, até completar 72 horas (M12, M24, M36, M48, M60 e M72). As biópsias de casco foram realizadas em M0, M4 e M72, e as amostras foram submetidas à análise zimográfica. Foi observado aumento nos leucócitos em M12 e M24, decorrente do aumento de neutrófilos segmentados e bastonetes, os quais diminuíram a partir de M36. Segundo a técnica zimográfica, não se observaram alterações nos valores de MMP-2 e -9, possivelmente devido à baixa intensidade das lesões ocasionadas no cólon menor. Com isso, conclui-se que as alterações inflamatórias decorrentes da obstrução do cólon menor não foram suficientes para ocasionar alterações na expressão das MMP-2 e -9 no tecido laminar podal.(AU)

The aim of this study was to evaluate the blood leukocytes and the MMP-2 and -9 expression in the hoof laminar tissue of horses undergoing intraluminal small colon obstruction. Laparotomy and the small colon obstruction was performed in eight healthy horses, inserting a ball in the intestinal lumen. The ball was inflated to 80 mmHg pressure and the occlusion was maintained for 4 hours. The blood was collectedBlood samples were taken before the obstruction (M0), immediately after intestinal clearance (M4), and every 12 hours until completeuntil 72 hours (M12, M24, M36, M48, M60 and M72). The hoof biopsies were performed at M0, M4, and M72 and the samples were subjected to zymography analysis. There was an increase in leukocytes in M12 and M24, due to the increase in segmented neutrophils and band neutrophils, which decreased as of M36. According to zymography technique not observed changes were not not observed in MMP-2 and -9, possibly due to the low intensity of the small colon lesions. Wherefore, it is concludedIn conclusion, that the inflammatory changes resulting from small colon obstruction were not enough to cause changes in the expression of MMP-2 and -9 in the hoof laminar tissue.(AU)

Efeito do consumo de castanhas-do-brasil (Bertholettia excelsa H.B.K. ) sobre os biomarcadores inflamatórios e o estado nutricional relativo ao selênio de mulheres obesas / Effect of Brazil nut (Bertholettia excelsa H.B.K. ) consumption on inflammatory biomarkers and nutritional status of selenium in obese women

A inflamação e o estresse oxidativo são processos que ocorrem simultaneamente na obesidade e contribuem para o aumento da síntese de mediadores inflamatórios e de espécies reativas de oxigênio e nitrogênio. O mineral selênio (Se), cuja principal fonte alimentar é a castanha-do-brasil, possui propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias. Considerando a importância do processo inflamatório na obesidade e o potencial papel do Se como anti-inflamatório por meio da atuação de selenoproteínas, o estudo da influência deste micronutriente neste contexto é de grande relevância. Desse modo, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do consumo da castanha-do-brasil sobre os biomarcadores inflamatórios e o estado nutricional relativo ao Se de mulheres obesas. No total, foram recrutadas 72 participantes alocadas randomicamente no grupo que consumiu a castanha-dobrasil (BN) ou no grupo controle (CO) e, acompanhadas por um período de 2 meses. O grupo BN consumiu 1 unidade de castanha-do-brasil (~409,5 µg/Se) por dia e o grupo CO não recebeu nenhum tipo de intervenção. Antes e após o período da intervenção, foram realizadas as avaliações antropométrica e do consumo alimentar, e dos parâmetros bioquímicos relacionados ao Se, estresse oxidativo, perfil lipídico e biomarcadores inflamatórios. Completaram o estudo 29 participantes do grupo BN e 26 do grupo CO com idade média de 40,3 (9,0) e 39,4 (9,5) anos (p=0,714), respectivamente. No baseline do estudo, observou-se que a população estudada não apresentava deficiência de Se. No grupo BN, verificou-se um aumento de todos biomarcadores de Se avaliados. Após 8 semanas de intervenção, um aumento significativo foi observado na expressão gênica de diversos parâmetros pró-inflamatórios no grupo BN (IL-6, TNF-α, TLR2 e TLR4). Apesar de não ter havido mudanças nas concentrações plasmáticas referentes a estes parâmetros, o aumento significativo da expressão gênica pode ser um indicativo de estímulo pró-inflamatório induzido pelo consumo da castanha-do-brasil com altas concentrações de Se

Inflammation and oxidative stress are processes that occur simultaneously in obesity and contribute to an increase in the synthesis of inflammatory mediators and reactive oxygen and nitrogen species. The mineral selenium (Se), whose main food source is the Brazil nut, has antioxidant and anti-inflammatory properties. Considering the importance of the inflammatory process in obesity and the potential role of Se as an anti-inflammatory by means of selenoproteins, the study of the influence of this micronutrient in this context is of great relevance. Thus, the aim of this study was to evaluate the effect of Brazil nut intake on inflammatory biomarkers and nutritional status of Se in obese women. In total, 72 participants randomly assigned to Brazil nut group (BN) or control group (CO) were recruited and followed up for 2 months. The BN group consumed 1 unit of Brazil nut (~ 409.5 µg/Se) per day and the CO group did not received any intervention. On baseline and after two months of follow-up, the evaluation of anthropometry and food consumption, and of the biochemical parameters related to Se, oxidative stress, lipid profile and inflammatory biomarkers were performed. Twenty-nine participants of BN group and twenty-six of the CO group completed the trial, with a mean age of 40.3 (9.0) and 39.4 (9.5) years (p= 0.714), respectively. At the baseline of the study, it was observed that this population did not present Se deficiency. In BN group, there was an increase in all Se biomarkers evaluated. After 8 weeks of intervention, a significant increase was observed in gene expression of several pro-inflammatory parameters in BN group (IL-6, TNF-α, TLR2 and TLR4). Although there have been no changes in plasma concentrations related to these parameters, a significant increase in gene expression may be an indicative of a pro-inflammatory stimulus induced by the intake of Brazil nuts with high Se concentrations

Avaliação dos compostos bioativos presentes na semente de Passiflora spp. e sua influência sobre marcadores bioquímicos, oxidativos e inflamatórios de camundongos submetidos à dieta hiperlipídica / Evaluation of bioactive compounds present in Passiflora spp. seed and its influence on oxidative stress and inflammation in a high fat-fed mice

O consumo de dieta hiperlipídica e consequente acúmulo de lipídios nos adipócitos é uma condição associada ao estresse oxidativo e à perpetuação de um quadro inflamatório de leve intensidade que leva ao desenvolvimento de doenças crônicas não transmissíveis. Uma vez que alguns componentes da dieta são reconhecidos como fortalecedores do sistema antioxidante exógeno dos organismos vivos, o objetivo deste trabalho foi investigar o efeito metabólico do extrato de sementes do gênero Passiflora sobre parâmetros bioquímicos, oxidativos e inflamatórios de camundongos submetidos a uma dieta hiperlipídica. Para tanto, inicialmente realizou-se um estudo de composição química (centesimal, teores de minerais e ácidos graxos) e de otimização da extração de sementes de P. edulis Flavicarpa para obtenção de maiores teores de compostos polifenólicos com expressiva capacidade antioxidante in vitro, segundo os parâmetros de processo tempo, temperatura e concentração de etanol. Determinada a condição ideal de extração, esta foi empregada para as demais espécies em estudo P. alata BRS Mel do Cerrado e BRS Doce Mel, P. tenuifila BRS Vita e P. edulis BRS Sol do Cerrado e BRS Gigante Amarelo e P. setacea BRS Pérola do Cerrado e foi realizada o estudo de composição química. Os extratos etanólicos obtidos possuíram interessante atividade antioxidante, com destaque para a espécie P. setacea. O composto piceatanol foi o polifenol majoritário (0,41-10,28 g/ 100 g de semente em base seca) nas sementes de Passifloras analisadas, com exceção para a amostra P. setácea BRS Vita, cujo composto de íon molecular m/z 747,2 não foi identificado. As sementes ainda apresentaram alto teor de óleo, com o ácido linoleico em sua composição, e proteína. Os extratos das sementes de P. setacea BRS Pérola do Cerrado e Passiflora edulis Flavicarpa, nas concentrações de 500 e 1000 mg/Kg de ração foram utilizados para a realização do ensaio biológico. O consumo dos extratos, dependendo da dose, apresentou efeitos biológicos importantes, tais como a diminuição das concentrações séricas de colesterol, glicose, insulina e leptina a níveis aproximados ao determinado para os animais em consumo de dieta normolipídica. Adicionalmente, verificou-se a atenuação do estresse oxidativo hepático, por elevação da atividade enzimática das enzimas catalase e glutationa peroxidase e diminuição da lipoperoxidação, e do processo inflamatório, por redução da concentração tecidual das citocinas IL-6 e MCP-1. Os resultados obtidos neste estudo contribuem para o conhecimento a respeito das passifloras brasileiras e na potencial utilização das sementes, consideradas subprodutos, na contribuição da manutenção da saúde

The consumption of a high fat diet and consequent excessive lipid accumulation in adipocytes is a condition associated with oxidative stress and perpetuation of a mild inflammatory condition that leads to the development of chronic diseases. Since some dietary components are recognized as empowering exogenous antioxidant system defenses of living organisms, the aim of this study is to investigate the metabolic effects of passion fruit seeds that possess a high content of bioactive compounds and high antioxidant capacity in vitro on oxidative stress and inflammatory conditions in mice subjected to a high fat diet. For this purpose, initially were performed a chemical composition study (proximate, minerals and fatty acids content) and extraction optimization of P. edulis Flavicarpa seed for obtaining higher levels of polyphenolic compounds with expressive antioxidant capacity in vitro through process parameters such as time temperature and ethanol concentration. Once the optimum condition of extraction was determined, it was applied to others studied species P. alata BRS Mel do Cerrado e BRS Doce Mel, P. tenuifila BRS Vita e P. edulis BRS Sol do Cerrado e BRS Gigante Amarelo e P. setacea BRS Pérola do Cerrado and the chemical composition study was carried out. The obtained ethanolic extracts had high antioxidant activity, particularly the species P. setacea. The piceatannol compound was the major polyphenol (0.41 to 10.28 g / 100 g seed in dry basis) in the analyzed Passiflora, except for the sample P. setacea BRS Vita, which molecular íon m/z 747.2 was not identified. The seeds also showed high content of oil, with linoleic acid in its composition, and protein. P. setacea BRS Pérola do Cerrado and Passiflora edulis Flavicarpa seed extracts at concentrations of 500 and 1000 mg / kg of feed were used to carry out the biological assay. The consumption of the extracts, depending on the concentration, exhibited significant biological effects, such as the reduction of serum cholesterol, glucose, insulin and leptin levels to those one observed in animals with normolipidic diet consumption. Additionally, hepatic oxidative stress was attenuated by elevating enzymatic activity of catalase and glutathione peroxidase and decrease in the lipid peroxidation and inflammation by reducing the tissue concentrations of IL-6 and MCP-1 cytokines. The results obtained in this study contributes to the knowledge of the Brazilian passiflora and potential use of the seeds, considered a by-products, in health maintenance

Novas perspectivas para o papel de amilóide sérica A (SAA) na obesidade e resistência à insulina / New insights into the role of serum amyloid A (SAA) on obesity and insulin resistance

Chronic low-grade endotoxemia is an important player in obesity and insulin resistance associated to a high-fat diet (HFD). On the other hand, although it is known that intense endotoxemia and infection reduce appetite and induce intense catabolism, leading to weight loss during the acute inflammatory phase, the late effects of an intense endotoxemia were previously unexplored. Here we report that, besides the concurrent effects, multiple and intense endotoxemia causes long lasting biochemical alterations in the adipose tissue that intensify the harmful effects of a HFD. Mice submitted to multiple and severe endotoxemia had increased the adipose tissue expression of TLR-4, CD14 and SAA3, remaining altered after one week in recovery. When associated to a HFD, mice previously submitted to acute endotoxemia showed a more severe weight gain and impaired insulin sensitivity. Adopting the HFD as an obesogenic stimulus, we evaluated the participation of the protein serum amyloid A (SAA) in obesity development. Using a SAA-targeted antisense oligonucleotide, we observed that the depletion of SAA prevented metabolic alterations, endotoxin elevation, weight gain and insulin resistance in a diet-induced obesity protocol. Inadequate sleep is another important factor to be considered in the obesity epidemic. We found that sleep restriction (SR) causes biochemical and morphological alterations in mice adipose tissue. The levels of serum resistin and the adipose tissue mRNA expression of resistin, TNF-α and IL-6 were increased after SR. When associated to a HFD, mice previously submitted to SR gained more weight with increased macrophage infiltration in the epididymal adipose tissue, and insulin resistance. SAA is also part of the initial biochemical alterations caused by SR. It was observed that the expression of SAA in liver and adipose tissue is upregulated, with return to baseline when sleep is restored. Furthermore, 48 hours of total sleep restriction in healthy human volunteers also caused a serum elevation in SAA concentrations. Considering that SAA induces cell proliferation, we suggest that situations with an increase in SAA production and the consecutive preadipocyte proliferation would prime the adipose tissue to further adipocyte differentiation and hypertrophy. Furthermore, we suggest that SAA alter LPS signaling, possibly inhibiting its clearance. The mechanism associating inflammation and obesity is complex and encompass a diversity of factors; the inflammatory protein SAA may be one of them. In conclusion, our data describes the relationship between SAA, acute inflammation, sleep restriction and obesity

Endotoxemia crônica de baixo grau tem um importante papel na obesidade e resistência à insulina associada a uma ração hiperlipídica. Por outro lado, embora se saiba que a endotoxemia intensa e infecção reduzam o apetite e induzam a um intenso catabolismo, conduzindo a perda de peso durante a fase aguda da inflamação, os efeitos tardios da endotoxemia intensa nunca foram explorados. Aqui mostramos que, além dos efeitos correntes, a endotoxemia aguda provoca alterações bioquímicas prolongadas no tecido adiposo que intensificam os efeitos deletérios de uma ração hiperlipídica. Camundongos submetidos à endotoxemia aguda apresentaram aumento na expressão de TLR-4, CD14 e SAA3 no tecido adiposo, permanecendo alteradas após uma semana em recuperação. Quando associado a uma ração hiperlipídica, os camundongos previamente submetidos à endotoxemia aguda mostraram um ganho de peso mais pronunciado e uma maior resistência à insulina. Adotando a ração hiperlipídica como um estímulo obesogênico, foi avaliada a participação da proteína amilóide sérica A (SAA) no desenvolvimento da obesidade. Usando um oligonucleotídeo antisense anti-SAA, observamos que a depleção da SAA previne as alterações metabólicas, elevação de endotoxina, ganho de peso e resistência à insulina associadas a ração rica em gordura. O sono inadequado é outro fator importante a ser considerado na epidemia de obesidade. Descobrimos que a restrição do sono (SR) provoca alterações bioquímicas e morfológicas no tecido adiposo de camundongos. A concentração de resistina no soro e a expressão de mRNA no tecido adiposo de resistina, TNF-α e IL- 6 foram aumentadas após SR. Quando associado a uma ração hiperlipídica, os camundongos submetidos previamente à SR ganharam mais massa com aumento da infiltração de macrófagos no tecido adiposo epididimal, e resistência à insulina. SAA também faz parte das alterações bioquímicas iniciais provocadas pelo SR. Observou-se que a expressão de SAA no fígado e tecido adiposo é regulada positivamente, com retorno ao basal quando o sono é restaurado. Além disso, 48 horas de restrição de sono total em voluntários humanos saudáveis também causou uma elevação nas concentrações séricas de SAA. Considerando que SAA induz proliferação, sugerimos que situações onde ocorra aumento na produção de SAA e a consecutiva proliferação celular, o tecido adiposo se tornaria predisposto a futura diferenciação e hipertrofia. Além disso, sugerimos que SAA altera a sinalização de LPS, possivelmente inibindo sua depuração. O mecanismo de associação entre a inflamação e a obesidade é complexo e inclui uma diversidade de fatores; a proteína inflamatória SAA pode ser um deles. Em conclusão, nossos dados descrevem a relação entre SAA, inflamação aguda, restrição do sono e obesidade

Relationship between C -reactive protein and other cardiovascular risk factors in hypercholesterolemic individ alsa / Relação entre a proteína C reativa e os fatores de risco para doenças cardiovasculares em indivíduos hipercolesterolêmicos

Objective: To evaluate the correlation between ultrasensitive C-reactive protein (us-CRP) and markers of cardiovascular risk in hypercholesterolemic adults of differing nutritional status. Methods: Forty-six hypercholesterolemic subjects (7 men: 30 to 70 years; 39 women: 45 to 70 years) with total cholesterol >240 mg/dL were studied. Anthropometric variables (weight, height, and waist and hip circumference) were measured, as well as us-CRP, total cholesterol (TC), HDL-C, LDL-C, VLDL-C, triglycerides, apolipoprotein AI, apolipoprotein B, glucose and fasting insulin, and homeostasis model assessment (HOMA-IR) of insulin resistance. Spearman correlations and multiple linear regression analysis were performed at a level of significance of 5%. Results: Plasma levels of triglycerides, VLDL-C, glucose, HDL-C and us-CRP were higher in overweight subjects (p<0.05). Ultrasensitive CRP was positively correlated with body mass index (r=0.32) and hip circumference (r=0.30), as well as with TC (r=0.33), apolipoprotein B (r=0.36) and glucose (r=0.42). Regression analysis showed that us-CRP concentration was positively associated with TC, glucose, and waist-hip ratio. These parameters explained 41% of the variability in us-CRP. Conclusion: Obese individuals present a higher concentration of us-CRP, fasting glucose, triglycerides, and VLDL-C. Excess weight is associated with us-CRP, a finding highlighting the importance of this biomarker for the detection of individuals at cardiovascular risk.

Objetivo: Avaliar a correlação entre a proteína C reativa ultrasensível (PCR-us) e os marcadores clássicos de risco cardiovascular em adultos hipercolesterolêmicos em diferentes estados nutricionais. Métodos: Amostra de 46 indivíduos hipercolesterolêmicos (7 homens: 30 a 70 anos e 39 mulheres: 45 a 70 anos) com colesterol total (CT) >240 mg/dL. Realizou-se determinações antropométricas como peso, altura, circunferência da cintura (CC) e do quadril (CQ), além de medidas plasmáticas de PCR-us, CT, HDL-C, LDL-C, VLDL-C, triglicerídeos (TG), apolipoproteína AI (Apo AI), apolipoproteína B (Apo B), glicose e insulina de jejum e HOMA-IR. Realizou-se correlações de Spearman e análise de regressão linear múltipla ao nível de significância de 5%. Resultados: Os níveis plasmáticos de TG, VLDL-C, glicose, HDL-C e PCR-us foram maiores em indivíduos com sobrepeso (p<0,05). A PCR-us foi positivamente correlacionada com o índice de massa corporal (r=0,32) e com a CQ (r=0,30), bem como com o CT (r=0,33), Apo B (r=0,36) e glicose (r=0,42). A análise de regressão mostrou que a concentração de PCR-us foi positivamente associada ao CT, glicose e razão cintura-quadril. Esses parâmetros explicam a variabilidade da PCR-us em 41%. Conclusão: Os indivíduos obesos têm maior concentração plasmática de PCR-us, glicose, TG e VLDL-C. O excesso de peso está correlacionado com a PCR-us, mostrando a importância deste biomarcador para triagem de indivíduos de risco cardiovascular.

Obesidade, inflamação e complicações metabólicas / Obesity, inflammation and metabolic complications

The prevalence of obesity has increased in the past two decades. This growth has been attributed to changes in dietary habits, especially increased consumption of fats and sugars. It is clear that obesity is a risk factor for cardiovascular disease and insulin resistance, and the inflammatory process favors this context. Aim: To address the inflammatory aspects of obesity and associated metabolic complications. Data Sources: Original data from articles found through search of scientific databases. Summary of findings: Micro hypoxia, reticulum stress, and activation of toll-like receptor 4 are responsible for triggering inflammation in adipose tissue, which is the place where the process begins. Thus, there is an increased production of various adipokines, such as IL-6 and TNF-?, which impair insulin signaling pathway, leading to resistance to hormone, one of the first complications of obesity. From this, with the intensity of stimulation, the condition may worsen triggering type 2 diabetes and other comorbidities. Conclusion: Thus, the elucidation of the roles and mechanisms of the main adipokines lead to a better understanding of the pathogenesis of obesityrelated disorders.

A prevalência da obesidade tem aumentado durante as duas últimas décadas. Esse crescimento tem sido atribuído a mudanças no hábito dietético, principalmente maior consumo de gorduras e açúcares. É evidente que a obesidade é um fator de risco para doenças cardiovasculares e resistência insulínica, e o processo inflamatório favorece esse contexto. Objetivo: Abordar os aspectos inflamatórios da obesidade e as complicações metabólicas associadas. Fonte de dados: Artigos levantados por meio de pesquisa em base de dados. Síntese dos dados: A microhipóxia, o estressedo retículo e a ativação dos receptores toll-like 4 são responsáveis por desencadear a inflamação no tecido adiposo, sendo esse o local onde se inicia o processo. Dessa forma, há um aumento na produção de diversas adipocinas, como IL-6 e TNF-?, as quais prejudicam a via de sinalização da insulina, levando à resistência a esse hormônio, uma das primeiras complicações da obesidade. A partir disso, com a intensidade desse estímulo, o quadro pode agravar-se, desencadeando diabetes melito tipo 2 e outras comorbidades. Conclusão: Assim, a elucidação das funções e mecanismos de ação das principais adipocinas levará a uma melhor compreensão da patogênese de desordens ligadas à obesidade.

Avaliação da composição química de óleos brasileiros de semente de uva (Vitis vinífera L) e seu efeito sobre parâmetros bioquímicos e inflamatórios em ratos / Brazilian grapeseed oils (Vitis vinífera L) evaluation and it effect of biochemical and inflammatory parameters in rats

O óleo de semente de uva (OSU) caracteriza-se como um importante subproduto do processamento agroindustrial (vinicultura) que vem recebendo destaque como fonte alternativa de óleos vegetais. Os componentes químicos presentes nos óleos vegetais sofrem influência de fatores relacionados ao cultivo e ao processamento industrial. Esses componentes são capazes de modular importantes funções fisiológicas no organismo. Este trabalho objetivou avaliar a composição química de OSU brasileiros e sua influência em parâmetros bioquímicos, de estresse oxidativo e inflamatório sérico e tecidual em ratos. Inicialmente, sete diferentes marcas de OSU disponíveis no mercado brasileiro foram avaliadas e comparadas em relação a dois processos de extração, refino e prensagem a frio. As amostras prensadas a frio apresentaram concentrações significativamente maiores de compostos fenólicos, teores do isômero γ-tocotrienol da vitamina E, de fitosteróis, tendo como principal constituinte o ß-sitosterol, e diversos compostos voláteis característicos. Para a investigação biológica, ratos saudáveis da linhagem Wistar foram suplementados com OSU - amostra comercial que possuía maior teor do isômero γ-tocotrienol e compostos fenólicos; e com o óleo de soja (ODS) - óleo mais consumido no país, utilizado para efeito comparativo. Os dois óleos foram suplementados por intubação orogástrica nas concentrações de 3,0 e 6,0 mL/Kg de peso corpóreo, por 65 dias. Observou-se que os resultados da intervenção não foram dose-dependente para os dois óleos e, apesar do elevado teor de lipídios oferecido aos animais, estes não modificaram o padrão de ganho de peso. Porém, foram observados elevados teores de peroxidação lipídica sérica nos animais tratados com OSU, quando comparados aos tratados com ODS na menor dose administrada. Nos animais do grupo suplementado com OSU na maior dose, verificou-se aumento do peso do tecido adiposo retroperitoneal, caracterizado pela hipertrofia dos adipócitos. Em relação ao tecido hepático, houve maior incorporação do ácido linoleico, principal ácido graxo presente nos OSU e ODS e precursor do ácido araquidônico na cadeia dos eicosanoides, interferindo no aumento da razão das citocinas inflamatórias TNF-α/IL- 4 e IL-6/IL-4, para todos os grupos suplementados com os dois óleos nas maiores concentrações. Quanto aos marcadores de estresse oxidativo no tecido cardíaco, pode-se verificar que os grupos administrados com OSU foram relacionados com a maior atividade das enzimas antioxidantes, acompanhado de maior peroxidação lipídica. Os resultados permitem concluir que os compostos bioativos presentes no OSU não ocasionaram a redução do estresse oxidativo causado pela alta presença do ácido linoleico, porém, os marcadores inflamatórios pouco se alteraram com o tratamento

Grapeseed oil (GSO) is characterized as an important by-product of the agro-industry (winemaking) which has received attention as an alternative source of vegetable oils. Chemical compounds are influenced by cultivation and industrial processing, and these components modulate some important physiological functions in the body. This study aimed to evaluate the chemical composition of Brazilian GSO and its influence on biochemical parameters and inflammation in rats' serum and tissue. Firstly, seven different GSO samples were obtained from Brazilian market and were evaluated and compared for two type of extraction processes, refining and cold pressing. Cold pressed samples showed high significant phenolic concentrations, γ-tocotrienol isomer content and phytosterols concentrations, and presence of several characteristic of volatiles compounds. For biological research, healthy Wistar rats were supplemented with GSO - commercial sample had higher levels of γ-tocotrienol isomer and phenolic compounds; and soybean oil (SBO) - the most consumed oil in the country, used for comparative purposes. Both oils were supplemented daily by orogastric intubation in concentrations of 3.0 and 6.0 mL/kg body weight for 65 days. After intervention was observed no dose dependency behavior for both oils, and despite high level of lipids provided to the animals, they did not change the pattern of the animals weight gain. However, high levels of lipid peroxidation were observed in the animal's serum within GSO treatment when compared to SBO. GSO6 group was an increase of final weight of retroperitoneal adipose tissue, characterized by hypertrophy of adipocytes. Regarding the hepatic tissue, it was observed that there was a greater uptake of linoleic acid, mainly fatty acids present in GSO and SBO and it is a precursor of arachidonic acid in eicosanoids chain, interfering with the ratio increase of the inflammatory cytokines TNF-α/IL-4 and IL-6/IL-4 for all groups supplemented with both oils at higher concentrations. For the parameters of oxidative stress in the cardiac tissue, it can be seen that GSO groups were related to increased activity of the antioxidant enzymes, followed by an increase in TBARS content. The results suggest that the bioactive compounds present in the GSO caused the reduction of the oxidative stress caused by the high presence of linoleic acid, though, inflammatory markers present few changes within treatment

Efeito da suplementação com castanha-do-brasil (Bertholletia excelsa H. B. K) como fonte de selênio sobre os marcadores de estresse oxidativo, citocinas inflamatórias e sua relação com o polimorfismo Pro198Leu no gene da glutationa peroxidase 1 em pacientes com artrite reumatoide / Effect of Brazil-nut supplementation (Bertholletia excelsa HBK) as a source of selenium on markers of oxidative stress, inflammatory cytokines and their relationship with the polymorphism Pro198Leu of glutathione peroxidase-1 gene in patients with rh

A artrite reumatoide (AR) é uma doença inflamatória crônica, caracterizada por inflamação das articulações e se manifesta por inchaço e incapacidade funcional das mesmas. A patologia da doença envolve a produção excessiva de radicais livres pelos neutrófilos ativados, podendo induzir à peroxidação lipídica nas membranas celulares o que leva ao aumento da inflamação. Nesse sentido, o selênio (principal fonte é a castanha-do-brasil) é um importante fator por diminuir a atividade dos hidroperóxidos por meio da ação da enzima antioxidante glutationa peroxidase (GPx). No entanto, estudos que avaliem a associação do estado nutricional relativo ao selênio em pacientes com AR com os biomarcadores do estresse oxidativo e de inflamação são escassos na literatura. Desse modo, a avaliação do efeito potencial in vivo da suplementação com castanha-do-brasil, como fonte de selênio, sobre os parâmetros descritos anteriormente e sua relação com o polimorfismo Pro198Leu no gene da GPx1, em pacientes com artrite reumatoide (AR), vêm a suprir essa lacuna. Inicialmente foi realizada a caracterização da castanha-do-brasil quanto à composição de macronutrientes e teor de selênio. O estudo em pacientes com artrite reumatoide foi de natureza longitudinal. Foram avaliados 46 pacientes com AR, com idade média de 55,2 ± 10,9 anos, atendidos no Setor de Reumatologia da Universidade Federal de São Paulo. O estudo foi dividido em duas fases: antes (T0) e após a suplementação (T1) com 1 nóz de castanha-do-brasil. Foi realizada a avaliação da composição corporal e do consumo alimentar. Além disso, foram avaliados parâmetros bioquímicos relativos ao status de selênio por espectrofotometria de absorção atômica por geração de hidretos; atividades da GPx e SOD com uso de kits comerciais; concentração da GPx1 por kits comerciais, sua expressão gênica (qRT-PCR) e genotipagem do Pro198Leu no referido gene por PCR em tempo real; determinação de 8-isoprostanos por kit comercial, assim como níveis circulantes de fibrinogênio, proteína C reativa, IL-6, IL-10, TNF-α, IL-1ß, IL-2, VCAM, ICAM, PAI-1 e sE-selectina pelo ensaio ELISA. O genótipo selvagem (Pro/Pro) foi observado em 57,63% das participantes; 35,59% para as heterozigotas para o alelo variante (Pro/Leu) e 6,78% apresentaram os dois alelos variantes. As pacientes com artrite reumatoide apresentaram baixa ingestão de selênio e, após a intervenção, o consumo aumentou significantemente. Em relação ao status de selênio, houve um aumento em sua concentração no plasma e eritrócitos após o período de intervenção com castanha-do-brasil, assim como na atividade da GPx, na concentração da GPx1 e em sua expressão gênica. Níveis urinários reduzidos de 8-isoprostano e nenhuma alteração quanto à capacidade antioxidante total plasmática e quanto aos marcadores inflamatórios foram observados após o período de intervenção. Por outro lado, houve um aumento nas concentrações séricas das moléculas de adesão celulares. Portanto, pode-se concluir que a suplementação com castanha-do-brasil mostrou-se efetiva em melhorar o estado nutricional relativo ao selênio dos pacientes e os marcadores de estresse oxidativo, todavia a ingestão de 350 µgSe/dia não foi suficiente para promover uma melhora do quadro inflamatório. Além disso, a presença do polimorfismo Pro198Leu modificou as respostas dos indivíduos CT e TT em relação à suplementação, sendo inferior à dos indivíduos CC

Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic inflammatory disease characterized by joint inflammation, manifested by swelling and joint impairment. These pathology involves excessive free radicals production by activated neutrophils leading to lipid peroxidation in cell membranes and increased inflammation. Accordingly, selenium (Brazil-nut as main source) is an important factor reducing hydroperoxides through the improvement of glutathione peroxidase (GPx) activity. However, studies evaluating their association with oxidative stress biomarkers and inflammation in RA patients are scarce. Thus, the assessment of the in vivo potential Brazil nut supplementation on the parameters described above and its relationship to the polymorphism Pro198Leu in GPx1 gene in patients with rheumatoid arthritis, come to fill this gap. First of all, we analysed macronutrients and selenium content in Brazil nut. This is a longitudinal study with 46 RA patients attending rheumatologic treatment at Federal University of São Paulo and whose mean age were 55.2 ± 10.9 years. The present study was carried out by two phases, before and after one Brazil ingestion. We evaluated selenium status by spectrophotometry absorption with hydride generation; body composition, SOD, GPx activites, GPx1 concentration and 8- isoprostane levels, using commercial Kits; gene expression by RT-PCR and genotyping using real time PCR. Besides, inflamatory biomarkers were performed (fibrinogen, C reactive protein, IL-6, IL-10, TNF-α, IL-1ß, IL-2, VCAM, ICAM, PAI-1 e sE-selectin by ELISA. The wild genotype (Pro/Pro) was observed in 57.63% of the participants, 35.59% were heterozygote for variant allele (Pro/Leu) and 6.78% had two variant alleles. Patients with rheumatoid arthritis had low selenium intake and after the intervention, consumption of this element increased significantly. Selenium status increased significantely after Brazil nut ingestion, as well as GPx activity, GPx1concentration and its gene expression. Reduced urinary levels of 8-isoprostane and no change for total plasma antioxidant capacity and markers for inflammation were observed after the intervention period. On the other hand, there was an increase in serum concentrations of cell adhesion molecules. Therefore, it can be concluded that Brazil-nut supplementation proved to be effective in improving selenium status and markers of oxidative stress in RA patients, however ingestion of 350 µgSe/day wasn't enough to ameliorate inflammation. Besides, the presence of Pro198Leu polymorphisms interfere in supllementation response in CT and TT groups, being less responsive than CC ones

Papel de inibidores da síntese e absorção do colesterol na modulação de biomarcadores de inflamação e adesão celular in vivo e in vitro / Role of inhibitors of the cholesterol synthesis and absorption on modulation of inflammation and cell adhesion biomarkers in vivo and in vitro

O processo inflamatório tem um papel fundamental na gênese e desenvolvimento da aterosclerose, sendo que a disfunção endotelial é considerada um dos estágios iniciais da aterogênese. Por meio da inibição da enzima hidroxi-metil-glutaril coA redutase (HMGCR), as estatinas reduzem a biossíntese do colesterol e a formação de isoprenóides, produtos intermediários da síntese do colesterol que são importantes na modificação pós-transcricional de GTPases pequenas que estão envolvidas na disfunção endotelial e inflamação vascular. A ezetimiba é um inibidor da absorção do colesterol através da inibição da proteína NPC1L1. Com a finalidade de esclarecer os mecanismos moleculares da inibição da síntese e da absorção do colesterol sobre a modulação de biomarcadores inflamatórios e de adesão celular foram utilizados modelos in vitro com células endoteliais (HUVEC) e monócitos (células THP-1), e in vivo com células mononucleares do sangue periférico (CMSP) de indivíduos hipercolesterolêmicos (HC). O efeito das estatinas, atorvastatina e sinvastatina, e da ezetimiba na expressão de RNAm e proteínas de moléculas de adesão endoteliais e moduladores do processo inflamatório, como citocinas e óxido nítrico (NO), foi estudado em células HUVEC. O efeito desses fármacos sobre a expressão de moléculas de adesão monocitárias foi estudado em células THP-1. O efeito da terapia hipolipemiante sobre essas moléculas foi também estudada em CMSP de HC tratados com ezetimiba (10 mg/dia/4 semanas), sinvastatina (10 mg/dia/8 semanas) e sinvastatina combinada com ezetimiba (10 mg de cada/dia/4 semanas). A expressão de RNAm foi avaliada por RT-qPCR. A expressão de moléculas de adesão na superfície de células THP-1 e HUVEC foi estudada por citometria de fluxo. A quantificação de citocinas secretadas no sobrenadante de células HUVEC e no plasma dos HC foi analisada pela tecnologia Milliplex. A quantificação do perfil lipífico, Proteína C reativa ultra-sensível (PCRus) e NO foi realizada por métodos laboratoriais convencionais. O papel do NO na modulação dos marcadores inflamatórios pelas estatinas foi também estudada, usando modelo de células HUVEC com NOS3 silenciado por interferência de RNAm e também por meio do uso do inibidor da síntese do óxido nítrico, L-NAME. Também foi avaliado o efeito de hipolipemiantes na expressão dos microRNAs (miRs) 221, miR-222 e miR-1303 em células HUVEC por meio do stem-loop RT-qPCR. O tratamento com atorvastatina e sinvastatina reduziu a expressão de RNAm e proteínas das moléculas de adesão LSelectina, PSGL-1 e VLA-4, em células THP-1 pré-tratadas com TNFα por 12 h. A ezetimiba reduziu a expressão de L-Selectina apenas no nível transcricional. Em células HUVEC, as estatinas diminuíram a expressão de RNAm de IL1B e SELP, entretanto aumentaram a de VCAM1. A ezetimiba reduziu a expressão de RNAm do IL1B. Entretanto as expressões de SELE, MMP9, IL6 e MMP9 não foram afetadas pelos tratamentos. A expressão das proteínas ICAM-1 e P-Selectina, na superfície de células HUVEC, foi diminuída pelo tratamento com as estatinas, mas não pela ezetimiba. Da mesma forma, a secreção das citocinas IL-6 e MCP-1 foram reduzidas pelas estatinas, entretanto a secreção de IL-8 não foi modificada por nenhum dos tratamentos. A expressão de NOS3 e a liberação de NO em células HUVEC foi aumentada pelas estatinas, porém não foi estimulada pela ezetimiba. Entretanto, os efeitos antiinflamatórios exercidos pelas estatinas foram independentes dessa via devido a que estes efeitos foram mantidos em células HUVEC com NOS3 silenciado por interferência de RNAm. Apesar de que o efeito sobre ICAM-1 e MCP-1 foi atenuado quando as células foram simultaneamente tratadas com L-NAME, os efeitos das estatinas parecem ser independentes da liberação de NO. As estatinas e a ezetimiba reduziram a expressão do miR-221, em células HUVEC. A expressão do miR-222 foi reduzida só pelo tratamento com atorvastatina. A expressão do miR-1303 não foi modulada pelos tratamentos hipolipemiantes. Em pacientes HC, a terapia de associação da sinvastatina e ezetimiba demonstrou melhorar o perfil lipídico de forma mais efetiva que ambas monoterapias. Da mesma forma, o tratamento combinado resultou em maior beneficio pela redução da expressão de RNAm em CMSP e da concentração plasmática das proteínas IL-1 ß, MCP-1, IL-8 e TNFα. A expressão de ICAM1 foi diminuída apenas no nível transcricional, entretanto a expressão de RNAm mas não da proteína do TNFα foi também reduzida pela sinvastatina em monoterapia. Não houve modulação de RNAm ou proteínas de outros marcadores estudados no modelo in vivo. Por outro lado, os efeitos anti-inflamatórios observados nos indivíduos HC foram independentes da modulação de PCRus e NO que não foram modificados pelos tratamentos hipolipemiantes. Neste estudo, foram confirmados os propostos efeitos pleiotrópicos das estatinas em modelos células de monócito e endotélio vascular in vitro e em pacientes HC. Por outro lado, apesar de ser menos potente que as estatinas foi mostrado que a inibição da absorção do colesterol tem também um efeito anti-inflamatório. A redução adicional do colesterol causado pela combinação das terapias hipolipemiantes outorga um maior beneficio cardiovascular em pacientes hipercolesterolêmicos

The inflammatory process has a key role in the genesis and development of atherosclerosis and the endothelial disfunction is considered as a first step in atherogenesis. By inhibiting the hydroxyl-methyl-glutaryl coA reductase (HMGCR)m statins reduce the cholesterol synthesis and isoprenoid generation, which are intermediary products of cholesterol synthesis with important role in posttranscriptional modifications of small GTPases that are involved in endothelial disfunction and vascular inflammation. The ezetimibe is an inhibitor of cholesterol absorption by inhibiting the NPC1L1 protein. To clarify the molecular mechanisms of the inhibition of cholesterol synthesis and absorption modulating inflammatory and cell adhesion biomarkers we used in vitro models of endothelial cells (HUVEC) and monocytes (THP-1), and an in vivo model of peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from hypercholesterolemic (HC) patients. The effect of the statins, atorvastatin and simvastatin, and the ezetimibe on mRNA and protein expression of endothelial adhesion molecules and modulators of the inflammatory process, as citokynes and nitric oxide (NO), was analyzed in HUVEC. The effect of these drugs on the expression of monocyte adhesion molecules was also studied in THP-1. The influence of hypolipemiant therapy on the adhesion molecules was also analyzed in PBMC from HC treated with ezetimibe (10 mg/day/4-weeks), simvastatin (10 mg/day/8-weeks) and simvastatin combined with ezetimibe (10 mg each/day/4-weeks). The mRNA expression was evaluated by RT-qPCR. The expression of adhesion molecules on the surface of THP-1 and HUVEC cells was analyzed flow cytometry. The citokynes in the supernatants of HUVEC were quantified using the milliplex technology. The Lipid profile, high-sensivity PCR (hsPCR) and NO were determined by conventional laboratory methods. The role of the NO on the statin-modulation of inflammatory markers was also studied using a model with silenced NOS3 by interference of mRNA and by the use of the inhibitor of NO synthesis, L-NAME. The effect of hypolipemiants on the expression of microRNAs (miRs) 221, miR-222 and miR-1303 was also evaluated in HUVEC using the stem-loom RT-qPCR. Atorvastatin and simvastatin reduced the mRNA and protein expression of the adhesion molecules L-Selectin, PSGL-1 and VLA-4 in THP-1 cells pre-treated with TNFα for 12 h. The ezetimibe reduced the L-Selectin expression only at transcriptional level. In HUVEC, statins diminished IL1B and SELP mRNA expression, whereas VCAM1 was increased. The ezetimibe reduced the IL1B mRNA expression. However, SELE, MMP9, IL6 and MMP9 mRNA expressions were not affected by the treatments. The protein expression of ICAM-1 and P-Selectin on the surface of HUVEC was reduced by statins, but not by the ezetimibe. Similarly, IL-6 and MCP-1 secretion were reduced by statins, whereas IL-8 secretion was not modified by the treatments. The NO release and NOS3 expression in HUVEC was increased by the statins, however it was not stimulated by ezetimibe. Moreover, the anti-inflammatory statin effects were independent of this pathway due to statin effects were maintained in HUVEC with silenced NOS3. Although the statin effect on ICAM-1 and MCP-1 were attenuated by L-NAME co treatment, the statin effects seem to be independent of NO release. Statins and ezetimibe reduced miR221 in HUVEC. miR-222 expression was reduced only by atorvastatin. miR-1303 was not affected by the treatments. In HC patients, the improvement of the lipid profile simvastatin combined with ezetimibe was more efficient than both monotherapies. Similarly, the association therapy was better in reducing the mRNA expression in PBMC and plasma concentration of IL-1ß, MCP-1, IL-8 and TNFα. ICAM1 expression was reduced only at transcriptional level, whereas mRNA but not protein expression of TNFα was also reduced by the simvastatin monotherapy. There was no modulation mRNA or protein expression of other studied markers in the in vivo model. Additionally, the anti-inflammatory effects observed in the HC were independent of PCRus or NO modulation, which were not altered by the hypolipemiant treatments. In this study, the proposed plitropic effects of statins were confirmed in monocytes and endothelial cells in vitro and in HC patients. Moreover, although it was less potent than statins, an anti-inflammatory effect was also observed for the inhibition of cholesterol absorption. An additional reduction of the cholesterol caused by combined hypolipemiant therapies gives a greater cardiovascular beneffict in hypercholesterolemic patients

Sistema imunitário: Parte I. Fundamentos da imunidade inata com ênfase nos mecanismos moleculares e celulares da resposta inflamatória / Immune system: Part I. Fundamentals of innate immunity with emphasis on molecular and cellular mechanisms of inflammatory response

O sistema imunológico é constituído por uma intrincada rede de órgãos, células e moléculas, e tem por finalidade manter a homeostase do organismo, combatendo as agressões em geral. A imunidade inata atua em conjunto com a imunidade adaptativa e caracteriza-se pela rápida resposta à agressão, independentemente de estímulo prévio, sendo a primeira linha de defesa do organismo. Seus mecanismos compreendem barreiras físicas, químicas e biológicas, componentes celulares e moléculas solúveis. A primeira defesa do organismo frente a um dano tecidual envolve diversas etapas intimamente integradas e constituídas pelos diferentes componentes desse sistema. A presente revisão tem como objetivo resgatar os fundamentos dessa resposta, que apresenta elevada complexidade e é constituída por diversos componentes articulados que convergem para a elaboração da resposta imune adaptativa. Destacamos algumas etapas: reconhecimento molecular dos agentes agressores; ativação de vias bioquímicas intracelulares que resultam em modificações vasculares e teciduais; produção de uma miríade de mediadores com efeitos locais e sistêmicos no âmbito da ativação e proliferação celulares, síntese de novos produtos envolvidos na quimioatração e migração de células especializadas na destruição e remoção do agente agressor, e finalmente a recuperação tecidual com o restabelecimento funcional do tecido ou órgão.

The immune system consists of an intricate network of organs, cells, and molecules responsible for maintaining the body's homeostasis and responding to aggression in general. Innate immunity operates in conjunction with adaptive immunity and is characterized by rapid response to aggression, regardless of previous stimulus, being the organism first line of defense. Its mechanisms include physical, chemical and biological barriers, cellular components, as well as soluble molecules. The organism first line of defense against tissue damage involves several steps closely integrated and constituted by different components of this system. The aim of this review is to restore the foundations of this response, which has high complexity and consists of several components that converge to articulate the development of adaptive immune response. We selected some of the following steps to review: perception and molecular recognition of aggressive agents; activation of intracellular pathways, which result in vascular and tissue changes; production of a myriad of mediators with local and systemic effects on cell activation and proliferation, synthesis of new products involved in the chemoattraction and migration of cells specialized in destruction and removal of offending agent; and finally, tissue recovery with restoration of functional tissue or organ.

Síndrome de Cogan / Cogan's Sryndrome

El síndrome de Cogan es una enfermedad inflamatoria crónica, infrecuente y de etiología no establecida, en la que se sugiere un carácter autoinmune. Se caracteriza, principalmente, por una queratitis intersticial, una sordera neurosensorial y una disfunción vestibular, que aparecen en un período menor de dos años. Otros tipos de compromisos tanto ocular, del oído interno y sistémico, como vasculitis, se pueden observar. Ningún hallazgo de laboratorio es específico de esta entidad. El diagnóstico diferencial es amplio. El tratamiento agresivo con inmunosupresores está indicado, especialmente cuando existe compromiso auditivo, ya que la pérdida de la audición es su principal secuela