Modelo macrófago humano-amastigote para la identificación de aislados quimio-resistentes de leishmania, prueba de concepto / A human macrophage-amastigote model for chemo-resistant isolates identification in Leishmania, a proof of concept

Este trabajo utilizó un modelo macrófago humano-amastigote como herramienta para recrear in vitro la infección causada por aislados de pacientes con fracaso terapéutico y valorar su utilidad en la identificación de aislados de Leishmania con fenotipo quimio-resistente. Objetivos: (1) Evaluar un modelo in vitro de macrófago humano-amastigote y (2) Determinar su utilidad en la identificación de aislados de Leishmania con fenotipo quimio-resistente. Métodos: Se evaluó un protocolo de purificación basado en la capacidad de los monocitos de adherirse al plástico. Monocitos purificados de sangre humana fueron infectados con promastigotes metacíclicos de especies de referencia y aislados de Leishmania de tres pacientes con falla terapéutica a antimoniales. Se determinó el porcentaje de infección inicial y el efecto leishmanicida de glucantime, anfotericina­B y pentamidina; se correlacionó la capacidad leishmanicida con los niveles de producción de óxido nítrico en cada condición estudiada. Resultados: Los resultados sugieren que el modelo macrófago humano-amastigote empleado recrea in vitro la infección causada por especies de referencia, o con aislados de pacientes con fracaso terapéutico. Adicionalmente sugieren que en monocitos infectados (1) con el aislado VE98MR no puede definirse una IC50 para glucantime ni para pentamidina y (2) con el aislado VE96ZC no puede definirse una IC50 para glucantime mas si para pentamidina. De igual forma, se evidencia una disminución efectiva del porcentaje de infección susceptible a anfotericina-B, para todos los aislados y cepas de referencia. El efecto leishmanicida no se correlaciona con aumentos significativos de la producción de óxido nítrico. Conclusiones: El modelo macrófago humano-amastigote empleado constituye una prueba de concepto que permitió identificar como aislados potencialmente quimio-resistentes a L. (L.) amazonensis (VE98MR) y L. (L.) mexicana (VE96ZC), mas no al aislado L. (L.) amazonensis (VE2000MM)(AU)

This work used a human-amastigote macrophage model as a tool to recreate in vitro infection caused by isolates from patient's with therapeutic failure and assess its usefulness in the identification of chemo-resistant Leishmania isolates. Objectives: (1) Evaluate in vitro a human-amastigote macrophage model and (2) determine its usefulness in the identification of Leishmania isolates with chemo-resistant phenotype. Methods: A purification protocol based on the ability of monocytes to adhere to plastic was evaluated. Monocytes purified from human blood were infected with metacyclic promastigotes of reference species and Leishmania isolates from three patients with antimonial therapeutic failure. The percentage of initial infection and the leishmanicidal effect of glucantime, amphotericin-B and pentamidine were determined; the leishmanicidal capacity was correlated with the levels of nitric oxide production in each condition studied. Results: Results suggest that the human-amastigote macrophage model recreates in vitro the infection caused by reference species, or isolates from patients with therapeutic failure. In addition, they suggest that (1) an effective IC50 for glucantime and pentamidine could not be defined in monocytes infected with the isolate VE98MR and (2) an effective IC50 for pentamidine but nor for glucantime could be defined in monocytes infected with the isolate VE96ZC. On the contrary, an effective decrease in the percentage of infection susceptible to amphotericin-B was observed for all isolates and reference strains. The leishmanicidal effect did not correlate with significant increases in nitric oxide production. Conclusion: The human-amastigote macrophage model used constitutes a proof of concept to identify as potentially chemo-resistant isolates L. (L.) amazonensis (VE98MR) and L. (L.) mexicana (VE96ZC), but not L (L.) amazonensis (VE2000MM)(AU)

Kidney involvement in leishmaniasis ? a review

Leishmaniasis is an infectious disease caused by protozoa of the genus Leishmania transmitted by insects of the genus Lutzomyia sp. or Phlebotomus sp. The main syndromes are cutaneous leishmaniasis, mucocutaneous leishmaniasis, visceral leishmaniasis (kala-azar) and post-kala-azar dermal leishmaniasis. This article reviews kidney involvement in cutaneous and visceral leishmaniasis, highlighting the aspects of their pathophysiology, clinical manifestations, histopathological findings, outcome and treatment.

First survey of cutaneous leishmaniasis in Borujerd county, western Islamic Republic of Iran

Lorestan province in the Islamic Republic of Iran has not previously been known as a focus for cutaneous leishmaniasis [CL]. Clinical and epidemiological studies were carried out on patients diagnosed with active CL at the central laboratory in Borujerd city during 1998-2010. A total of 137 patients with corroborated CL were studied [mean estimated annual incidence 4.36 per 100 000 inhabitants]. The male:female ratio was > 11:1. Patients ranged in age from 8-63 years but > 70% were aged 21-40 years and only 1 was

Leishmanioses / Leishmaniasis

As leishmanioses são zoonoses causadas por protozoários e podem ser divididas em dois grupos: leishmaniose cutaneomucosa e leishmaniose visceral, essa última também conhecida como calazar. O diagnóstico é feito com base em dados clínicos e epidemiológicos, sendo confirmado através de exames laboratoriais específicos. As drogas de escolha para o tratamento são os antimoniais.

Leishmaniose tegumentar americana: primeiros casos autóctones notificados no Rio Grande do Sul desde 2001 e revisão da literatura / American cutaneous leishmaniasis: the first autochthonous cases reported in Rio Grande do Sul since 2001 and review of the literature

A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é uma doença infecciosa, não contagiosa, causada por protozoários do gênero Leishmania, que acomete pele e mucosas. O homem é infectado através da picada dos flebotomíneos e na maioria das vezes a doença apresenta-se como uma lesão ulcerada única. A confirmação do caso de LTA é realizada pelo diagnóstico clínico, epidemiológico e laboratorial. Relatamos três casos de LTA autóctones diagnosticados em 2002 e 2003 na cidade de Porto Alegre, RS. Evidenciamos a necessidade de atenção para a detecção de novos casos e o controle ambiental, já que segundo registros do Ministério de Saúde do Brasil, no período de 1997-1999, o Rio Grande do Sul não apresentou caso autóctone de LTA (AU)

American Cutaneous Leishmaniasis (ACL) is an infectious, non-contagious disease caused by a genus Leishmania Protozoa, which affects the skin and the mucosae. Man is infected by bites of phlebotominea and the disease presents mostly as a single ulcerated lesion. The confirmation of the case of ACL is performed by clinical, epidemiological and laboratory diagnosis. We report three cases of autochthonous ACL diagnosed in 2002 and 2003 in the city of Porto Alegre. We show the need to watch out for new cases and to perform environmental control, since, according to the records of the Brazilian Ministry of Health, during the 1997-1999 period, Rio Grande do Sul did not present autochthonous cases of ACL (AU)

Leishmaniose Tegumentar Americana: o caso do conjunto residencial Inocente Vila Nova Júnior no município de Maringá, Estado do Paraná, 2001-2004 / American Tegumentary Leishmaniais: about the residential complex Inocente Vila Nova Júnior in Maringá, state of Paraná, 2001 – 2004

A prevalência da Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) historicamente tem sido associada à degradação do meio ambiente em áreas urbanas e rurais. A LTA é uma doença de notificação obrigatória, mantendo-se endêmica em Maringá. O objetivo deste trabalho foi identificar a natureza dos casos de Leishmaniose ocorridos no Conjunto Residencial Inocente Vila Nova Júnior e as ações realizadas para o controle do vetor. As amostras foram coletadas junto ao banco de dados da Secretaria Municipal de Saúde, Coordenação Municipal de Epidemiologia, no qual foram levantados os casos de LTA de 2001 a 2003 no Sistema de Informação dos Agravos de Notificação (Sinan), verificando-se um surto da doença localizado no referido bairro e, após a investigação dos casos,considerados autóctones, foram desenvolvidas ações de combate ao vetor na reserva de mata do local. Com este estudo, avaliamos que as áreas verdes urbanas, consideradas como referência e sociabilidade do homem com a natureza, passa a ter caráter de espaço agravante, quando cria formas de vida dentro de um sistema de desequilíbrio que possa infectar o indivíduo. Portanto, são necessários estudos científicos e planejamento para essas áreas, resguardando suas funções e impactos na sociedade

Leishmaniasis cutánea. Experiencia en el Hospital Central Militar / Cutaneous leishmaniasis. Experience at the Military Central Hospital

Objetivo . Conocer la frecuencia y el comportamiento clínico de la leishmaniasis cutánea en el Servicio de Dermatología del Hospital Central Militar. Material y método : Estudio retrospectivo, longitudinal, observacional, analizando los expedientes clínicos de pacientes con diagnóstico de leishmaniasis en el Hospital Central Militar en el periodo comprendido de enero de 1993 a diciembre de 1998, estudiando la historia clínica, los antecedentes de estancia en área endémica y los tratamientos recibidos. Resultados . Se analizaron 39 expedientes. Todos los pacientes del sexo masculino, con edad entre 1 y 38 años, promedio de 22.2. Todos con antecedente de haber estado en Chiapas por un lapso de 7 meses previo al inicio de la enfermedad. El periodo de incubación en promedio fue de 4.8 meses. En el cuadro clínico la topografía más frecuente con 40.98 por ciento fue la cabeza, (p < 0.05) y de ella los pabellones auriculares. La morfología más frecuente fue la úlcera con 61.53 por ciento (p < 0.06), predominando las lesiones únicas. El tamaño de las lesiones varió de 4 mm a 4 cm siendo lo más frecuente la úlcera entre 1-2 cm de diámetro (p < 0.05). Se utilizaron los siguientes tratamientos: glucantime en 27 pacientes, la termoterapia en 25 pacientes y ambos en 16 pacientes. Se observó recidiva en cinco pacientes a los cuales se agregó itraconazol y/o alopurinol con buena evolución. Conclusión . Los resultados encontrados concuerdan con los datos de otras instituciones de salud en México donde la leishmaniasis cutánea de lesión única (úlcera) en pabellón auricular es la presentación más frecuente.

Detection of early apoptosis and cell death in T CD4+ and CD8+ cells from lesions of patients with localized cutaneous leishmaniasis

Human localized cutaneous leishmaniasis (LCL), induced by Leishmania braziliensis, ranges from a clinically mild, self-healing disease with localized cutaneous lesions to severe forms which can present secondary metastatic lesions. The T cell-mediated immune response is extremely important to define the outcome of the disease; however, the underlying mechanisms involved are not fully understood. A flow cytometric analysis of incorporation of 7-amino actinomycin D and CD4+ or CD8+ T cell surface phenotyping was used to determine whether different frequencies of early apoptosis or accidental cell death occur at different stages of LCL lesions. When all cells obtained from a biopsy sample were analyzed, larger numbers of early apoptotic and dead cells were observed in lesions from patients with active disease (mean = 39.5 + or - 2.7 per cent) as compared with lesions undergoing spontaneous healing (mean = 17.8 + or - 2.2 per cent). Cells displaying normal viability patterns obtained from active LCL lesions showed higher numbers of early apoptotic events among CD8+ than among CD4+ T cells (mean = 28.5 + or - 3.8 and 15.3 + or - 3.0 per cent, respectively). The higher frequency of cell death events in CD8+ T cells from patients with LCL may be associated with an active form of the disease. In addition, low frequencies of early apoptotic events among the CD8+ T cells were observed in two patients with self-healing lesions. Although the number of patients in the latter group was small, it is possible to speculate that, during the immune response, differences in apoptotic events in CD4+ and CD8+ T cell subsets could be responsible for controlling the CD4/CD8 ratio, thus leading to healing or maintenance of disease.

Influence of microbiota in experimental cutaneous leishmaniasis in Swiss mice

Neste trabalho, estudamos a infeccao experimental de camundongos Suicos/NIH com Leishmania major em comparacao com camundongos isogenicos C57BL/6 e BALB/c que sao resistentes e suceptiveis a esta infeccao, respectivamente. Camundongos Suicos mostraram lesoes que se curaram espontaneamente e se restringiram ao local de inoculacao. Celulas linfoides derivadas destes animais desenvolveram uma resposta do tipo Th1, caracterizada pela producao de niveis altos de IFN-gama e niveis baixos de IL-4. Com o objetivo de estudar a importancia da microbiota no desenvolvimento da leishmaniose cutanea neste modelo, camundongos Suicos sem germes foram infectados na pata com promastigotas de L. major, convencionalizados apos 3 semanas de infeccao e as lesoes comparadas com as observadas em camundongos convencionais...

Immunologic patterns associated with cure in human American cutaneous leishmaniasis

Patients with American cutaneous leishmaniasis were studied before therapy (active lesion) and at the end of therapy (cured patients). Assays of lymphocyte proliferative responses of peripheral blood mononuclear cells induced in vitro by Leishmania braziliensis promastigote antigens (Lb) were performed. Antigen-stimulated cells were harvested for CD4 and CD8 phenotype analysis and the levels of gamma interferon (IFN-gamma) and interleukin 4 (IL-4) produced were also determined in the culture supernatants. Two different patterns of Lb-induced T cell responses were observed: a) predominance of responding CD4+ cells and mixed type 1 and type 2 cytokine production (IFN-gamma and IL-4) during the active disease, and b) similar proportions of responding CD4+ and CD8+ cells, and type 1 cytokine production (presence of INF-gamma and very low IL-4) at the end of therapy (healed lesions). This last pattern is probably associated with a beneficial T cell response.

La leishmaniosis del nuevo mundo

La leishmaniosis es una enfermedad tropical de gran importancia en nuestro país, pero algunas veces los clínicos pasan por alto este diagnóstico debido a que no reconocen sus manifestaciones clínicas ni conocen los métodos diagnósticos. Se presenta una revisión sobre la leishmaniosis del nuevo mundo-tanto la visceral como la tegumentaria-, partiendo del agente causal del vector- género Lutzomyia-, con énfasis en los aspectos clínicos y epidemiológicos. Finalmente, se describen los métodos para su diagnóstico; los directos encaminados a la demostración del parásito y los indirectos que evalúan la respuesta inmunológica del huésped frente a la infección.

Alteraciones clínicas, hematológicas y parasitarias en la infección experimental con leishmania mexicana / Clinical, hematological and parasitic alterations in leishmania mexicana experimental infection

En la infección experimental con leishmania mexicana de animales susceptibles y resistentes se analizaron diversos parámetros clínicos, hematológicos y multiplicación parasitaria durante un período de 11 semanas. El desarrollo de la infección reveló escasas alteraciones en el comportamiento general de los animales así como en las determinaciones del peso. hematocrito y fórmula blanca. En ninguno de ellos se encontró visceralización del parásito. La proliferación de leishmania fue mas manifiesta en los hamsters mientras que en los ratones se obtuvo básicamente dos tipos de multiplicación denotando en este huésped una variable susceptibilidad individual

Estudio comparativo sobre el curso de la infección experimental por leishmania SP en varios modelos vertebrados / Comparative study about the course of the experimental infection by leishmania SP in several vertebrate models

En este trabajo, se determinó el curso de la infección por leishmania en tres modelos vertebrados (perro, didelphis marsupialis y hámster). Se estableció una marcada diferencia en la infectividad y en las características de las lesiones. Ulceración, metástasis, visceralización y muerte se produjo en los hámsteres y lesiones discretas en diferentes partes de la piel se observó en los perros y didelphis marsupialis al ser inoculados con L. garnhami, L. braziliensis y L. mexicana. La posibilidad de los hemocultivos y aspirado ganglionar de D. marsupialis inoculado con promastigotos de la cepa OC de L. mexicana permiten además establecer que los patrones de desarrollo de la infección en los animales domésticos y silvestres son distintos al observado en los hámsteres

Cura espontânea da leishmaniose causada por leishmania viannia braziliensis em lesöes cutâneas / Spontaneous healing of leishmaniasis caused by leishmania viannia braziliensis in cutaneous lesions

Os autores relatam que durante 14 anos de trabalho clínico em campo, realizado nas comunidades de Três Braços e Corte de Pedra, bahia, acompanharam 1.416 pacientes portadores de Leishmaniose Tegumentar Americana, cuja espécie envolvida na transmissäo, é predominamente a Leishmania Viannia brasilienses. A terapêutica utilizada rotineiramente nos casos é o antimoniato-N-metilglucamina (Glucantime). Contudo, 16 pacientes do sexo masculino recusaram-se a utilizar a medicaçäo e 6 do sexo feminino encontravam-se em período gestacional, portanto näo utilizaram o medicamento. Estes pacientes foram acompanhados por um período entre 4 a 12 anos, a partir do diagnóstico. observou-se que em 9 pacientes (40.9%) desta casuística, o tempo de cicatrizaçäo após o aparecimento da lesäo, pode ser calculado em 6 meses de evoluçäo. Quando se eleva a observaçäo para 12 meses, temos que 19 pacientes (86,3%) cicatrizaram suas lesöes neste período. Em 3 casos (13.6%) as lesöes permaneceram ativas por mais de 12 meses. Conclui-se que os determinantes da cicatrizaçäo natural das lesöes produzidas por Leishmania Viannia brasiliensis permanecem desconhecidos, dificultando para nós entedermos e compararmos aos efeitos das drogas utilizadas no tratamento da leishmaniose tegumentar