Síntesis y caracterización de anfolitos TEPA / Synthesis and characterization of carrier ampholytes TEPA

Se sintetizaron anfolitos carrier (AC) mediante la reacción entre tetraetilenpoentamina (TEPA) y ácido acrílico (AA). El producto obtenido se utilizó en la separación de proteínas séricas mediante isoelectroenfoque (IEF) en geles de agarosa y de poliacrilamida (PAA). Se determinó el gradiente de pH obtenido y se analizó el comportamiento isotacoforético de las distintas fracciones del anfolito carrier, obtenidas luego de su IEF sobre gel de agarosa

Síntesis de anfolitos y su aplicación al fraccionamiento de proteínas de lisados eritrocitarios / Synthesis of carrier ampholytes and their applications to fractionate proteins of hemolysed erythrocytes

Se describe un procedimiento para la síntesis de anfolitos aplicables a la formación de gradientes de pH para isoelectroenfoque. Se utiliza tetraetilenpentamina a la cual se le agrega N, N'-metilenbisacrilamida como reactivo de condensación, con las finalidades de incrementar la diversidad de componentes anfotéricos, y/o de aumentar el número de grupos amino en la molécula resultante del acoplamiento de tetraetilenpentamina de a pares. En una operación posterior se hacen reaccionar estos productos con un ácido alfa, ß-insaturado. El procedimiento utilizando ácido acrílico se describe en detalle. Se estudia la uniformidad del gradiente de pH cortando el gel de poliacrilamida en fracciones de 1 x 1 cm y efectuando la medición del pH en cada una de ellas por el método de elución. La capacidad de formar gradientes estables de pH del producto sintetizado se demuestra realizando isoelectroenfoques de lisados eritrocitarios en geles de poliacrilamida de 1 mm de espesor

Isoelectroenfoque de proteínas: desarrollo de una técnica simple y económica / Isoelectrofocusing of proteins: development of a simple and economic technic

Se detallan todos los pasos a llevar a cabo para realizar isoelectroenfoque en geles de poliacrilamida de 1 mm de espesor adheridos a un celofán como soporte. El gel se adhiere firmemente al celofán durante todos las operaciones (corrida, tinción y desteñido) y el soporte lo protege de las roturas, razón por la cual es fácilmente manejable. Se discute la optimización de las condiciones de trabajo para anfolito no comercial. Se muestra la buena resolución obtenida con dicho anfolito de sueros humanos normales y patológicos