Effects of Gamma Interferon on Intestinal Epithelial Cells Stimulated with Salmonella Enterica serovar Typhimurium and Candida albicans.

Aims: The objective of this study was to determine the level of secretion of gammainterferon by interferon-primed and unprimed Caco-2 intestinal epithelial cells and their survival or growth following infection with Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium (ATCC 14028), Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium DT104 (ATCC 700408), and Candida albicans (Robin) Berkhout, anamorph (ATCC 10231) as well as the survival of the test microorganisms following infection. Study Design: Controlled laboratory experiments were performed using two different species of Salmonella and adenocarcinoma Caco-2 cells. Untreated/ unprimed Caco-2 cells served as control; Caco-2 cells’ growth and interferon production were then determined using, Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) and flow cytometry. Place and Duration of Study: Department of Biological & Environmental Sciences Alabama A& M University and Center for Excellence in Post-Harvest Technologies, North Carolina A&T University USA April 2008 and February 2010. Methodology: Cell culture supernatants of Caco-2 intestinal epithelial cells, primed and unprimed with IFN-γ were infected with either wild-type Salmonella Typhimurium 14028, Candida albicans10231 or multi-drug resistant Salmonella Typhimurium DT104 were collected and analyzed. ELISA and flow cytometry were used to determine apoptosis, cell growth and interferon production. The Bioscreen-C Automated Growth Curve Analysis System was used under controlled environment to determine the growth of the microorganisms in the presence of different concentrations of IFN-γ. Results: Secretion of IFN-γ from Caco-2 cells that were previously treated with 50μg/ml, 20μg/ml, 10μg/ml, 5μg/ml, and 2.5 μg/ml of IFN-γ were not concentration dependent. However, the amount of IFN-γ released from Caco-2 cells was dependent on microbial stimulus type. Cells that were pretreated with 5 μg/ml and 2.5 μg/ml of IFN-γ and then infected with Salmonella Typhimurium DT104 showed an increase in the amount of IFN-γ in the culture medium after 5 minutes. IFN-y induced CaCo-2 cell death was dose-dependent for S.Typhimurium DT104 and Candida albicans. Results are reported as mean ± SEM fortriplicate values from three independent experiments at each time point and IFN-γ dose. Conclusion: These findings indicate that IFN-γ may serve as alternative antimicrobial compounds to reduce the persistence of multi-drug resistant microorganisms such as S. Typhimurium DT104. Induction of interferon-gamma production may be related to microbial virulence/pathogenicity. The potential of IFN-γ as a natural therapeutic for persistent infections in the immune-compromised populations still needs to be further investigated.

Efeito da suplementação oral de l-glutamina na parede colônica de ratos submetidos à irradiação abdominal / Effect of oral supplement of l-glutamine in colonic wall of rats subjected to abdominal irradiation

OBJETIVO: Avaliar as alterações estruturais na parede do cólon irradiado, em ratos, verificando se a suplementação de L-glutamina pode prevení-las. MÉTODOS: Foram empregados 30 ratos Wistar, machos, adultos, divididos em três grupos: I - controle, II- irradiado e III - irradiado, com suplementação de L-glutamina durante os 14 dias do estudo. O Grupo Controle foi mantido em condições-padrão de laboratório, enquanto os grupos II e III foram submetidos à irradiação abdominal, com dose única de 1000 cGy, no 8°. dia da experimentação. Todos os animais foram operados no 15°. dia, para ressecção de segmento colônico para análise estereológica. RESULTADOS: O grupo II apresentou volume total da parede colônica significativamente menor que o Grupo Controle, sem alterar os volumes parciais de cada camada histológica. No grupo III, houve manutenção do volume total da parede do cólon, próxima ao Grupo Controle, com aumento significativo da camada mucosa, quando comparada aos grupos I e II. Na camada mucosa do grupo III, houve a manutenção do volume parcial do epitélio, comparado ao Grupo Controle, sem melhora significativa da superfície epitelial. CONCLUSÃO: Sugere-se que a suplementação de L-glutamina seja benéfica na parede do cólon irradiado, em ratos.

WR2721 intestinal radioprotection: morphometrical analysis

En base al elevado grado de radio-sensibilidad de la mucosa intestinal, ha sido estudiada la acción radio-protectora del acido S-2(3-an-dnopropilamino) etilfosforotioico (WR272 1) sobre el epitelio de recto de ratones expuestos cuerpo entereo a los rayos X, dosis única de 7 Gy, y sacrificados después de 1, 3, 6 y 10 días. Al comparar las muestras de segmentos del recto de animales protegidos y no protegidos, fue observado, de manera general, que en los protegidos, ha ocurrido aumento estadísticamente significativo en el número de células de la crypta por crypta (CrC/Cr) después de 1, 3, 6 y 10 días luego de la irradiación, y en el número de figuras de mitosis por crypta (MF/Cr) después de 3, 6 y 10 días. Se puede concluir que los parámetros morfométricos referidos, permitieron estimar cuantitativamente la radio-protección por el WR2721 en el recto de los ratones, evaluada por la celularidad de la cripta y por la cinética de las células epiteliales intestinales

Morfologia e morfometria da parede do íleo terminal de camundongos expostos aos raios X / Morphology and morphometry of the terminal ileum wall of mices exposed to X ray

Foram estudados os aspectos morfológicos da parede do ileo de camundongos da linhagem C57BL expostos aos raios X, corpo inteiro, na dose única de 154,8mC/Kg (600 R) e também a morfometria das figuras de mitose e das células calciformes à microscopia de luz comum. Observamos alteraçöes morfológicas intensas no epitélio da mucosa ileal no período de 24 horas após irradiaçäo, tendência à recuperaçäo às 72 horas e normalizaçäo às 144 horas. A análise morfométrica demonstrou o índice mitótico significantemente baixo (quase nulo) no período de 24 horas depois da irradiaçäo, rebote às 72 horas e normalizaçäo do mesmo às 144 horas. O índice de células caliciformes evidenciou diminuiçäo significante no período de 72 horas após irradiaçäo e recuperaçäo às 144 horas

Alteraçöes morfológicas e morfométricas do epitélio da mucosa retal de camundongos expostos a dose única de raios x / Morphological and morphometric epithelium alterations of rectal mucosa in mice exposed to a single dose of x-rays

O objetivo deste trabalho, acompanhando a linha de pesquisa da Disciplina de Gastroenterologia Círurgica da Escola Paulista de Medicina, foi o de estudar as alteraçöes agudas morfológicas e morfométricas do epitélio da mucosa retal de 60 camundongos Mus musculus, da linhagem C57BL, dos quais 45 foram expostos aos raios X, dose única de 154,8mC/Kg (600R), corpo inteiro, sendo que os 15 restantes utilizados como controle. Os camundongos foram sacrificados após 24h, 72h e 144h, sendo o reto ressecado e submetido a estudo histológico morfológico e morfométrico de seu epitélio. A análise dos resultados permitiu as seguintes conclusöes: a) as alteraçöes morfológicas das células do epitélio das criptas foram hipertrofia nuclear, picnose, criólise, cariólise, cariorréxis e hipertrofia das células califormes; b) o número das criptas diminuiu às 24h, diminuiçäo que se acentuou às 72h, havendo, no entanto, um aumento significante às 144h; c) tanto o número de mitoses quanto o índice mitótico sofreram acentuada diminuiçäo às 24h, recuperando-se a partir das 72h, e mantendo-se normal às 144h