RESUMEN
The objective of this study was to see the effect of purified heparin binding oviduct specific proteins (OSP) as media supplement on in vitro embryo developmental competence in cattle. The oviduct specific proteins were isolated from abattoir cattle oviducts and precipitated, dialyzed and at the end purified by high performance liquid chromatography system. The SDS-PAGE profile of eluted heparin binding protein (HBP) fraction showed bands between ~66 - ~97 kDa, while heparin unbinding protein (HUBP) fraction showed two bands at ~66 kDa and in total protein (TP) bands were ~60 - ~95 kDa. Collected all three OSP fractions were used as a media supplement in three different concentrations (0, 5 and 20 µg/mL) for in vitro maturation of immature oocytes, in vitro fertilization and culture of presumptive embryos at 38.5 ºC in 5% CO2 incubator with maximum humidity. The highest cleavage rate (73.40±2.36%) was observed at 5 µg/mL concentration level and lowest cleavage rate (27.63±1.89%) was obtained in 20 μg/mL total protein (TP) fraction. The highest blastocyst formation (26.47±1.47%) also occurred in 5 µg/mL concentration of total protein (TP) fraction and the lowest blastocyst rate (3.60±1.80%) was achieved at 20 µg/mL HBP fraction. The highest cleavage rate in the control group was 60.45±2.66% in TP fraction and blastocyst formation was 11.66±2.54% in HUBP fraction which was not significantly differ from HBP fraction. These results indicate that at 5 µg/mL of total OSP fraction (TP) and HBP used as media supplement increased the cleavage rate significantly as compared to HUBP fraction, and total OSP fraction (TP) increased blastocyst formation significantly (P<0.05) as compared to HBP & HUBP fraction.
Asunto(s)
Animales , Bovinos , Cromatografía Líquida de Alta Presión , Electroforesis en Gel de Poliacrilamida , Desarrollo Embrionario , Femenino , Heparina/metabolismo , Técnicas In Vitro , Masculino , Oviductos/metabolismo , Proteínas/metabolismo , Interacciones Espermatozoide-ÓvuloRESUMEN
In their journey through the oviduct some subpopulations of sperm are preserved in a reservoir, while others are negatively selected. Sperm binding glycoprotein (SBG) is a pig oviductal epithelial cell glycoprotein that produces, under capacitating conditions, acrosome alteration, p97 tyrosine-phosphorylation and reduction of the motility of sperm. In this paper, we show that SBG is accessible at the extracellular surface of the oviductal epithelial cells, supporting a sperm interaction biological role in situ. We analyze the possible dependence of the tyrosine-phosphorylation of p97 on the PKA mechanism, finding that apparently it is not PKA dependent. Also, after SBG treatment the phosphorylated proteins locate mainly at the detached periacrosomal region and at the tail of sperm; the latter may be related to SBG's motility reduction effect. The study of the time course effect of SBG on sperm as detected by chlortetracycline (CTC) staining and of its binding to sperm by immunodetection in conjunction with CTC, shows results in agreement with the hypothesis that this glycoprotein is involved in the alteration of acrosomes in a specific sperm subpopulation. The results suggest that SBG may be part of a mechanism for negative selection of sperm.
Asunto(s)
Animales , Femenino , Masculino , Oviductos/metabolismo , Proteínas de Plasma Seminal/fisiología , Capacitación Espermática/fisiología , Espermatozoides/fisiología , Sus scrofa , Interacciones Espermatozoide-Óvulo/fisiologíaRESUMEN
Antecedentes: Numerosos factores han sido implicados en el proceso de implantación, entre ellos se destaca la presencia de glicoproteínas de superficie. Se ha demostrado en ratones, entre otros, que los tipos y cantidades de azúcares de superficie varían según el período del ciclo reproductivo en el que se encuentran, lo que podría sugerir un importante papel de estas variaciones en la mayor receptividad del útero al blastocisto. Objetivos: Describimos los carbohidratos de superficie del aparato reproductor de la coneja, correlacionándolos con los cambios en sus genitales externos, y con los distintos períodos de su ciclo reproductivo. Métodos: Se usaron 15 conejas, ovuladoras coitales, en las que se identifica el período del ciclo según cambios en sus genitales externos; 5 tenían vulva blanca (poca receptividad al macho y bajo índice de embarazos), 5 tenían vulva rosa, y 5 roja (máxima receptividad al macho y alto índice de embarazos). Se estudiaron variaciones en los azúcares de superficie en el oviducto, útero distal, útero medio y cuello uterino, representados por el grado de tinción de 5 lectinas: eritrina cristagalli (ECL), dolichos biforus agglutinin (DBA), ulex europaeus aglutinin-1(UEA-1), pisum sativum agglutinin (PSA) y artocarpus integrifolia (Jacalin). Resultados: Hubo predominio del disacárido N-acetilgalactosamina alfa 1-3N-acetilgalac-tosamina (DBA) en todos los períodos y lugares del aparato reproductor, exceptuando el período de vulva roja en útero medio, donde prevalece la beta galactosa (Jacalina). Los residuos de manosa/alfa glucosa (PSA), presentan alta reacción en los períodos de vulva rosa y roja en el oviducto y útero distal. La galactosa beta 1-4 N-acetil glucosamina (ECL) y la L-fucosa (UEA-1) tienen bajo nivel de expresión en todos los sitios y períodos. Conclusión: La ausencia del disacárido N-acetilgalactosamina alfa 1-3N-acetilgalac-tosamina en el período de vulva roja y en el útero medio y la prevalencia de la beta galactosa en...
Asunto(s)
Animales , Femenino , Embarazo , Conejos , Implantación del Embrión , Endometrio/fisiología , Endometrio/metabolismo , Glicoproteínas/biosíntesis , Oviductos/fisiología , Oviductos/metabolismo , Carbohidratos/biosíntesis , Genitales Femeninos/fisiología , Genitales Femeninos/metabolismo , Reproducción/fisiologíaRESUMEN
Se estudiaron los niveles lipídicos y proteícos del fluido uterino y oviductal de conejas blancas de Nueva Zelandia NZW hipercolesterolémicas y su relación con la capacidad fecundante de espermatozoides homólogos. Hembras hipercolesterolémicas en estro presentaron nivele aumentados de colesterol tanto en fluido uterino como oviductal, mientras los niveles de fosfolípidos aumentaron solo en fluido uterino, en fluido oviductal hubo aumento en la relación colesterol: fosfolípidos. Las proteínas totales no mostraron variación a lo largo del ciclo y del tratamiento. La cinética de la reacción acrosómica de espermatozoides controles, en medio capacitante para conejos fue la misma que cuando se utilizó fluido uterino u oviductal de hembras controles o hipercolesterolémicas como medio capacitante in vitro. El aumento de colesterol observado en fluido uterino y oviductal de las hembras tratadas, aunque fue estadísticamente significativo, respecto a los controles, probablemente no es suficiente para modificar el flujo de colesterol desde los gametos al medio y modificar así la cinética de la reacción acrosómica
Asunto(s)
Animales , Femenino , Masculino , Conejos , Reacción Acrosómica , Hipercolesterolemia , Estudios de Casos y Controles , Colesterol en la Dieta , Estradiol/metabolismo , Fosfolípidos/sangre , Oviductos/metabolismo , Progesterona/metabolismo , Útero/metabolismoRESUMEN
Effect of oestradiol was studied on the angiotensin converting enzyme (ACE)--a component of renin angiotensin system, in oviduct of immature quails of 15 days of age. ACE was studied in whole oviduct, magnum, shell gland and the glandular epithelium of magnum and shell gland. It was found that whole oviduct had a significantly higher level of ACE in control than those treated with exogenous estrogen at three dose levels (200, 400 or 600 micrograms). ACE contents of whole muscle and glandular epithelium did not differ but magnum had higher ACE level than the shell gland. Results are explained on the basis of functional role of oviductal parts.
Asunto(s)
Análisis de Varianza , Animales , Estradiol/farmacología , Femenino , Oviductos/metabolismo , Peptidil-Dipeptidasa A/metabolismo , Codorniz , Sistema Renina-Angiotensina/efectos de los fármacosRESUMEN
La inervación noradrenérgica del oviducto parece estar bajo la influencia de una modulación hormonal. El nivel de noradrenalina (NA) es específicamente afectado, pero otros procesos como el de liberación del neurotransmisor no han sido estudiados en el oviducto de la rata. En este trabajo se estudió la liberación de 3H-noradrenalina (3H-NA) durante el ciclo estral y en particular su modificación por el efecto de la progesterona "in vitro". La liberación espontánea de 3H-NA no varía durante el ciclo pero sí la inducida por concentraciones depolarizantes de K+, que fue máxima durante el estro. La progesterona inhibió la liberación inducida de 3H-NA (K+ 80 mM) desde bajas concentraciones (5 micronM). A mayores concentraciones (50 micronM), el efecto persistió, pero, además, fue aumentada la liberación de radiactividad basal. Este efecto fue potenciado por RU-486 (antagonista sintético de la hormona). Los resultados sugieren un papel modulador para la progesterona, el cual podría relacionarse con interacciones sobre la membrana de los terminales nerviosos y no con los clásicos receptores nucleares