Avaliação in vitro do sêmen congelado de carneiros com diluidor suplementado com miricetina / In vitro evaluation of ram sperm frozen with extender supplemented with myricetin

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da suplementação do diluidor de congelação de sêmen ovino com o flavonoide miricetina contra os danos ocasionados aos espermatozoides. Oito pools de sêmen, obtidos de quatro reprodutores ovinos, foram congelados com diferentes concentrações de miricetina (0, 1, 10, 100 e 1000nM). Após o descongelamento, o sêmen foi avaliado quanto à cinética espermática, à integridade das membranas plasmática e acrossomal, ao potencial de membrana mitocondrial, aos níveis de ROS intracelular, à peroxidação lipídica e à estabilidade de membrana. Amostras tratadas com miricetina 10nM apresentaram menor percentual de células rápidas (P≤0,05), quando comparadas ao grupo miricetina 1000nM. Amostras do grupo controle apresentaram maior (P≤0,05) VAP que o grupo 10nM de miricetina, enquanto amostras criopreservadas com miricetina (10, 100 e 1000nM) evidenciaram maior (P<0,05) BCF, quando comparadas ao grupo controle. O grupo tratado com miricetina 1000nM apresentou maior percentual (P<0,05) de células com peroxidação lipídica, quando comparado ao grupo controle. Em conclusão, a suplementação do diluidor de criopreservação de sêmen ovino com 10 e 100nM de miricetina afeta a cinética espermática sem provocar alterações na estrutura geral do gameta, enquanto 1000nM de miricetina provoca mudanças na cinética associadas à danos peroxidativos.(AU)

The aim of this study was to evaluate the effect of the supplementation of ram semen frozen with extender with the flavonoid myricetin against damage to sperm. Eight pools of semen obtained from four ram breeders, were frozen with different concentrations of myicetin (0, 1, 10, 100 and 1000nM). After thawing, the semen was evaluated for spermatic kinetics, plasma and acrosome membrane integrity, mitochondrial membrane potential, intracellular ROS levels, lipid peroxidation, and membrane stability. Samples treated with 10nM myricetin preserved a lower percentage of rapid cells (P≤0.05) when compared to the 1000nM myricetin group. Samples from the control group presented higher (P≤0.05) VAP than 10nM group of myricetin, while cryopreserved samples with myicetin (10, 100 and 1000nM) showed greater (P<0.05) BCF, when compared to control group. The group treated with 1000nM myricetin had a higher percentage (P<0.05) of cells with lipid peroxidation, when compared to the control group. In conclusion, supplementation of ram semen cryopreservation extender with 10 and 100nM myricetin affects sperm kinetics, without causing changes in the overall structure of the gamete, while 1000nM myricetin causes changes in the kinetics associated with peroxidative damage.(AU)

Although it induces synchronized ovulation, hCG reduces the fertility of Santa Ines ewes submitted to TAI / Embora induza a ovulação sincronizada, hCG reduz a fertilidade de ovelhas Santa Inês submetidas à IATF

The aim of this study was to evaluate hCG treatment on ovarian response and on pregnancy rate using a 9-day oestrus synchronization protocol in Santa Ines ewes. On a random oestrus cycle day, ewes received an intravaginal progesterone device (Primer-PR®, Tecnopec, Brazil). Nine days later (Day 9), 30µg of d-cloprostenol (Prolise®, Syntex, Argentina) and 250IU of eCG (Folligon®, Intervet, Brazil) were administered and the progesterone device was removed. This moment, the ewes were randomly assigned on two groups: Control Group and hCG Group. In the hCG Group, the ewes received 500IU of hCG (Vetecor®, Hertape-Calier, Spain) 24h after device removal. In the Control Group, the ewes did not receive any ovulation inductor. Control and hCG Groups ewes were inseminated 60h and 48h after device removal, respectively. There was no difference between the groups regarding the first ovulatory follicle diameter and the second ovulatory follicle. hCG Group ewes had shorter interval between device removal and ovulation (Control: 79.9±15.4h and hCG: 54.7±4.9h; P=0.001) and more synchronized ovulations. However, the treatment with hCG decreased the pregnancy rate after TAI (P=0,009). In conclusion, hCG administration improves ovulatory synchronisation, but causes a decrease in the pregnancy rate.(AU)

Avaliou-se o tratamento com hCG na resposta ovariana e na taxa de prenhez utilizando protocolo de sincronização do estro de nove dias em ovelhas Santa Inês. As ovelhas receberam um dispositivo intravaginal de progesterona em fase aleatória do ciclo (dia zero= D0). No momento da remoção do dispositivo (D9), as fêmeas receberam 30µg de d-cloprostenol (Prolise®, Syntex, Argentina) e 250UI de eCG (Folligon®, Intervet, Brasil). Nesse momento, as ovelhas foram aleatoriamente distribuídas em dois grupos de tratamento: controle sem indução de ovulação e tratamento com 500UI hCG para indução de ovulação. As ovelhas dos grupos controle e hCG foram inseminadas 60h e 48h após a remoção do dispositivo, respectivamente. Não houve diferença entre os grupos para o diâmetro do primeiro e do segundo folículo pré-ovulatório. As avelhas do grupo hCG apresentaram menor intervalo entre a remoção do dispositivo e a ovulação (grupo controle: 79.9±15.4h e grupo hCG: 54.7±4.9h; P=0.001) e maior sincronização das ovulações. No entanto, o tratamento com hCG diminuiu a taxa de prenhez após a IATF (P=0,009). Conclui-se que, apesar de a administração de hCG aumentar a sincronização da ovulação, reduz a taxa de prenhez.(AU)

Viability of ovine spermatozoa collected from epididymides stored at 18°-25°C for 48 hours post mortem / Viabilidade dos espermatozoides ovinos coletados de epidídimos armazenados a 18°-25°C até 48 horas após a morte

The objectives of this study were to verify the time during which viable ovine spermatozoa could be recovered from the cauda epididymis kept at ambient temperature (18-25°C). Sperm collected in an artificial vagina (AV) were used as control. Spermatozoa samples were collected with an AV and from epididymis at 0 (G0), 6 (G6), 12 (G12), 24 (G24), and 48 (G48) hours post mortem. Total motility (TM), progressive motility (PM), hypo-osmotic membrane integrity test (HOST) and morphological changes were assessed. TM decreased (P<0.05) from 24 hours post mortem (70.0±1.9%) compared to AV (86.4±1.0%). PM decreased (P<0.05) from 12 hours after death (31.3±4.0%) compared to AV group (73.2±1.4%). The percentage of viable cells in HOST decreased (P<0.05) in the G48 (60.0±8.9%). Spermatozoa recovery was lower (P<0.05) 48 hours after death (2064.2±230.7 x 106 spermatozoa) compared to G0(2623.6±288.4 x 106 spermatozoa). In conclusion, under the conditions of this study, it would be possible to use epididymal spermatozoa recovered up to 24 hours after death for artificial insemination or in vitro fertilization; however, fertility trials are necessary to prove this hypothesis.(AU)

Os objetivos deste estudo foram avaliar o período pelo qual era possível recuperar espermatozoides ovinos viáveis da cauda de epidídimos mantidos em temperatura ambiente (18-25°C). O sêmen coletado em vagina artificial (AV) foi utilizado como controle. Os espermatozoides foram coletados dos epidídimos à zero hora (G0), às seis (G6), 12 (G12), 24 (G24) e 48 (G48) horas post mortem. A motilidade total (TM), a motilidade progressiva (PM), a integridade de membrana plasmática em solução hiposmótica (HOST) e a morfologia espermática foram avaliadas. A TM diminuiu (P<0,05) a partir de 24 horas após a morte (70,0±1,9%) comparado ao sêmen coletado em AV (86,4±1,0%). A PM diminuiu (P<0,05) a partir de 12 horas após a morte (31,3±4,0%) comparado ao grupo AV (73,2±1,4%). A porcentagem de espermatozoides viáveis no HOST diminuiu (P<0,05) no G48 (60,0±8,9%). A recuperação espermática foi menor (P<0,05) 48 horas após a morte (2064,2±498,1 x 106 espermatozoides) comparado ao G0 (2298,4±288,4 x 106 espermatozoides). Em conclusão, nas condições deste estudo, é possível utilizar espermatozoides epididimários recuperados até 24 horas após a morte para inseminação artificial ou fertilização in vitro, porém testes de fertilidade são necessários para comprovar essa hipótese.(AU)

Use of aqueous extract of noni in extender for sheep semen freezing / Utilização do extrato aquoso de noni em diluente para congelação de sêmen ovino

The study aimed to evaluate the action of aqueous extract of noni in an extender for sheep semen freezing. Treatments differed in inclusion of aqueous extract of noni in the extender: T1 ˗ no addition; T2 ˗ 24µg/mL; T3 ˗ 72µg/mL; and T4 ˗ 120µg/mL. Ejaculates were collected, diluted in the four treatments, and frozen. After thawing, the semen was subjected to a thermoresistance test and evaluated for subjective motility, vigor, membrane integrity assessment by hypo-osmotic swelling test, live-dead assay, computer-assisted sperm analysis and the status of sperm capacitation and acrosome reaction. Data were subjected to ANOVA, and then to Student Newman Keuls's test at 5% significance level. In the thermoresistance test after two hours of incubation, motility in T4 (120µg/mL) was lower than in the other treatments, with no differences in the HoS test in either diluted semen or in the semen evaluated immediately post-thawing, while for the other times, treatments showed similar responses. Regarding the motility parameters, a difference was observed for progressive motility, curvilinear velocity, average path velocity, and amplitude of lateral head displacement. As to the sperm capacitation status, a difference was observed between treatments for the sperm capacitated with intact acrosome.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar a ação do extrato aquoso de noni em diluente para congelação de sêmen de carneiro. Os tratamentos diferiram quanto à inclusão de extrato aquoso de noni ao meio diluidor em: T1˗ sem adição de extrato; T2˗ 24µg/mL ; T3- 72µg/mL e 120µg/mL. Por meio de vagina artificial, 16 ejaculados foram coletados, diluídos entre os quatro tratamentos e congelados. Após o descongelamento, o sêmen foi submetido ao teste de termorresistência e avaliado quanto à motilidade subjetiva, ao vigor espermático, à integridade de membrana pelo teste hiposmótico, bem como ao teste supravital, à análise de sêmen assistida por computador (CASA) e ao status de capacitação espermática e de reação acrossomal. Os dados foram submetidos a uma análise de variância, seguida pelo teste de Student-Newman-Keuls com 5% de significância. No teste de termorresistência, após duas horas de incubação, a motilidade do T4 (120µg/mL) apresentou-se inferior aos demais tratamentos. Não houve diferença significativa no teste HOS tanto para o sêmen diluído quanto para o sêmen avaliado imediatamente pós-descongelação; para as demais horas, os tratamentos apresentaram comportamento semelhante. Para os parâmetros de cinética, foi observada diferença estatística para motilidade progressiva, velocidade curvilinear, velocidade do percurso médio e amplitude de deslocamento lateral da cabeça. Quanto ao estado de capacitação espermática, observou-se diferença entre os tratamentos para espermatozoide capacitado com acrossomo intacto.(AU)

Macroscopic and microscopic analysis of 2 embryos and 1 foetus derived from a sheep (Ovis aries) without breed / Análise macroscópica e microscópica de 2 embriões e 1 feto derivados de ovelha (Ovis aries) sem raça

The interest in embryology, the science of the development of a zygote into a completely developed foetus, has increased greatly in recent years due to a number of studies involving embryonic and induced pluripotent stem cells. In addition, the development of techniques such as cloning has aided to understand the critical events that occur during embryonic development. In this study, we describe the morphology of two sheep embryos and one foetus using macroscopic and microscopic techniques. We investigated sheep without defined breed on days 24, 32, and 50 of gestation (estimated by crown-rump length [CR]). Macroscopically, we observed the development of E1 (24 days), with visible optic vesicle, but without retinal pigmentation and the forelimbs bud in development. In the E2 (32 days), we noticed the presence of optic retinal pigmentation and forelimbs more developed in comparison with E1. As expected, F1 revealed an eyeball already covered and the forelimbs developed. Meanwhile, microscopic analysis revealed somite, ventricle, atrium, and oral cavity in development in E1. However, in F1 we were able to identify more complex structures, such as ossification in the spine, ventricle, atrium, intraventricular septum, pericardial sac, and oral cavity with tongue. This work brings more precise and detailed data on the morphological characteristics of the major organ systems (nervous, circulatory, respiratory, digestive, and urinary) at each embryonic and foetal stage analysed.(AU)

O interesse em Embriologia, a ciência do desenvolvimento de um zigoto em um feto completamente desenvolvido, tem aumentado consideravelmente nos últimos anos devido a uma série de estudos envolvendo células-tronco pluripotentes embrionárias e induzidas. Além disso, o desenvolvimento de técnicas como a clonagem tem ajudado a compreender os eventos críticos que ocorrem durante o desenvolvimento embrionário. Neste estudo, descrevemos a morfologia de dois embriões de ovinos e um feto utilizando técnicas macroscópicas e microscópicas. Obtivemos ovelhas sem raça definida com 24, 32 e 50 dias de gestação (estimado pelo método de Crown-Rump, CR). Os conceptos foram mensurados, pesados e caracterizados a olho nu. Macroscopicamente, observamos o desenvolvimento dos embriões E1 (24 dias), apresentando globo ocular sem pigmentação de retina e broto do membro torácico e pélvico. Já o E2 (32 dias), apresentava globo ocular com pigmentação na retina e os membros torácicos e pélvicos mais desenvolvidos. O F1 apresentou olhos cobertos com uma membrana e membros torácicos e pélvicos mais desenvolvidos. Enquanto isso, microscopicamente observamos no E1 somitos, ventrículo, átrio e cavidade oral ainda em desenvolvimento. Porém, no F1 já era possível observar ossificação da coluna espinhal, coração com estruturas mais complexas, como ventrículo, átrio, septo interventricular e saco pericárdio. Além disso, na cavidade oral observamos a formação da língua. Este trabalho fornece informações precisas e detalhadas sobre as características morfológicas dos principais órgãos dos sistemas (nervoso, circulatório, respiratório, digestivo e urinário) em cada fase embrionária e fetal analisadas.(AU)

Effect of ß-mercaptoetanol and cysteine on post-thawing quality and oxidative activity of ram sperm and on the viability of vitrified sheep embryos / Efeito do ß-mercaptoetanol e da cisteína sobre a qualidade e a atividade oxidativa do sêmen ovino após o descongelamento e sobre a viabilidade de embriões ovinos vitrificados

The effects of ß-mercaptoethanol (BME) and cysteine on the viability and oxidative activity of ram sperm after thawing and on development in vitro and viability of vitrified sheep embryos were evaluated. Ejaculates from four rams were pooled and extended, composing six treatments: no antioxidants; 2mM BME; 5mM BME; 2mM BME and 5mM cysteine; 5mM BME and 5mM cysteine; and 5mM cysteine. Sperm motility, membrane and acrosome integrity, mitochondrial functionality, production of reactive oxygen species and total antioxidant capacity were similar across treatments (P>0.05). A medium with no antioxidant presented cleavage and blastocyst development rates (60.3% and 33.6%, respectively) similar (P>0.05) to those of a medium with 50µM BME and 600µM cysteine (64.3% and 36.6%, respectively). Post-thawing viability of vitrified embryos was similar between media (P>0.05). Cysteine and BME had no influence on the post-thawing viability and oxidative activity of ram sperm and on the viability of vitrified sheep embryos.(AU)

Foram avaliados os efeitos do ß-mercaptoetanol (BME) e da cisteína sobre a viabilidade e a atividade oxidativa após o descongelamento do sêmen ovino e sobre o desenvolvimento in vitro e a viabilidade de embriões ovinos vitrificados. Ejaculados de quatro carneiros foram agrupados e diluídos, compondo seis tratamentos: sem antioxidantes; com BME 2mM; com BME 5mM; com BME 2mM e cisteína 5mM; com BME 5mM e cisteína 5mM; e com cisteína 5mM. Motilidade, integridade da membrana e do acrossoma, função mitocondrial, produção de espécies reativas de oxigênio e capacidade antioxidante total foram semelhantes entre os tratamentos (P>0,05). Em um meio sem antioxidantes, as taxas de clivagem e de desenvolvimento embrionário até blastocisto (60,3%, e 33,6%, respectivamente) foram semelhantes (P>0,05) às obtidas em um meio com BME 50µM e cisteína 600µM (64,3% e 36,6%, respectivamente). A viabilidade pós-descongelamento dos embriões vitrificados não diferiu entre os meios (P>0,05). O BME e a cisteína não influenciaram a viabilidade e a atividade oxidativa do sêmen ovino após o descongelamento e a viabilidade de embriões ovinos vitrificados.(AU)

Produção de embriões em ovinos Morada Nova e Somalis Brasileira / Embryo production in Morada Nova and Somalis Brasileira ewes

Superovulatory response and embryo yield in 19 Morada Nova and 20 Somalis Brasileira ewes was analyzed. All animals were synchronized with the insertion of an intravaginal device (CIDR®) on Day 0, replaced by a new device on Day 7, which remained in place until Day 14 and superovulated with 133mg of porcine FSH (pFSH) in decreasing doses at 12h intervals from Day 12 until Day 15 of the treatment, and a single dose of equine chorionic gonadotropin (eCG, 200UI) on Day 14 (i.e., administered in CIDR removal). Fifty hours after CIDR® removal, females were inseminated by laparoscopy. All embryos were recovered by laparotomy 5 days after insemination. Sheep which responded to the superovulation protocol (P>0.05) included 74% of the Morada Nova ewes and 50% of the Somalis Brasileira ewes. Morada Nova showed better results (P<0.05) than Somalis Brasileira in number of ovulations (15.38 ± 5.24 vs. 10.56 ± 2.83), total structures (11.00 ± 7.55 vs. 3.33 ± 1.94) and embryo yields (6.79 ± 5.35 vs. 2.90 ± 2.18). Despite the high fertilization rate, degenerate embryo rate was high for both breeds, with an overall rate of 39% (57/145). In conclusion, superovulatory response and embryo yields in Morada Nova ewes were considered sufficient to justify the use of this procedure in genetic resources conservation programs. However, improvements to embryo quality and control of precocious regression of corpus luteum are necessary to produce better results in the MOET program, with minimal variations and maximum embryo yield in Morada Nova and Somalis Brasileira ewes.(AU)

Piribedil and Pathological Gambling in six Parkinsonian patients / Piribedil e Jogo Patológico em seis pacientes parkinsonianos

Impulse control disorders (ICD) in Parkinson's disease (PD) have attracted increasing interest. They are characterized by the inability to control the impulse to perform an act that can be detrimental to them or to others. Although dopamine agonists (DA), as a group, have been associated with impulse control disorders (ICD), piribedil has rarely been reported to cause them. Method Case reports of six parkinsonian patients on piribedil presenting pathological gambling (PG). Results All of the patients presented ICD associated with piribedil use. Two of them received this medication as first treatment and four of them who had developed ICDs secondary to other DA that reappeared with piribedil. Conclusion Despite piribedil is commercially available in only a few countries, it should be considered in the differential diagnosis of PG in patients with PD. .

Os distúrbios do controle do impulso (DCI) na doença de Parkinson (DP) têm atraído crescente interesse. Eles são caracterizados pela incapacidade da pessoa em controlar o impulso para realizar um ato que pode ser prejudicial a ela própria ou aos outros. Embora os agonistas dopaminérgicos (AD), como um grupo, têm sido associados com distúrbios do controle do impulso, o piribedil tem sido relatado raramente como causa dos mesmos. Método Relatos de seis casos de pacientes parkinsonianos em uso de piribedil apresentando jogo patológico (JP). Resultados Todos os pacientes apresentaram DCI com o uso do piribedil. Dois deles receberam piribedil como primeiro tratamento e quatro deles que haviam desenvolvido DCI devido a outro AD, reapresentaram o quadro com piribedil. Conclusão Apesar de o piribedil estar disponível comercialmente apenas em alguns países, deveria ser considerado no diagnóstico diferencial de JP em pacientes com DP. .

Progesterone and Follicle Stimulating Hormone interact and promote goat preantral follicles survival and development in vitro / Progesterona e Hormônio Folículo-Estimulante interagem e promovem a sobrevivência e o desenvolvimento in vitro de folículos pré-antrais caprinos

We investigated the effects of progesterone and follicle stimulating hormone (FSH) on survival and growth of caprine preantral follicles. Pieces of ovarian tissue were cultured for 1 or 7 days in minimum essential medium (MEM) alone or containing progesterone (1, 2.5, 5, 10 or 20ng/mL), FSH (50ng/mL) or the interaction between progesterone and FSH. Fresh (non-cultured control) and cultured ovarian tissues were processed for histological and ultrastructural studies. After 7 days the addition of FSH to all progesterone concentrations maintained the percentage of normal follicles similar to fresh control. At day 7 of culture, a higher percentage of developing follicles was observed only in 2.5ng/ml of progesterone associated with FSH or 10ng/ml of progesterone alone when compared with control. From day 1 to day 7 of culture, a significant increase in the percentage of developing follicles was observed in MEM and 2.5ng/ml of progesterone + FSH. In addition, after 7 days, in all treatments, there was a significant increase in follicular diameter when compared with control, except for MEM alone and in 5ng/ml of progesterone + FSH or 10ng/ml of progesterone alone. Ultrastructural studies confirmed follicular integrity after 7 days of culture in 2.5ng/ml of progesterone with FSH. In conclusion, this study demonstrated that the interaction between progesterone and FSH maintains ultrastructural integrity, stimulates primordial follicles activation and further growth of cultured caprine preantral follicles.

Este trabalho verificou os efeitos da progesterona e do hormônio folículo-estimulante (FSH) na sobrevivência e no crescimento de folículos pré-antrais caprinos. Fragmentos de tecido ovariano foram cultivados por 1 ou 7 dias em Meio Essencial Mínimo (MEM) sozinho ou contendo progesterona (1, 2.5, 5, 10 ou 20ng/mL), FSH (50ng/mL) ou a combinação entre esses dois hormônios. O tecido fresco (controle não-cultivado) e o cultivado foram processados para análise histológica e ultra-estrutural. Após 7 dias a adição de FSH a todas as concentrações de progesterone manteve o percentual de folículos normais similar ao controle fresco. No dia 7 de cultivo, um alto percentual de folículos em desenvolvimento foi observado somente no tratamento com 2,5ng/ml de progesterona associada ao FSH ou com 10ng/ml de progesterona sozinha, em relação ao controle fresco. Do dia 1 para o dia 7 de cultivo, um aumento significativo no percentual de folículos em desenvolvimento foi observado no MEM sozinho e adicionado de 2,5ng/ml de progesterona + FSH. Além disso, após 7 dias, em todos os tratamentos, houve um aumento significativo no diâmetro folicular em relação ao controle, exceto nos tratamentos com MEM sozinho, 5ng/ml de progesterona + FSH ou 10ng/ml de progesterona sozinha. A análise ultra-estrutural confirmou a integridade follicular após 7 dias de cultivo no tratamento com 2,5ng/ml de progesterona + FSH. Em conclusão, este estudo demonstrou que a interação entre progesterona e FSH mantém a integridade ultra-estrutural, estimula a ativação de folículos primordiais e o posterior crescimento de folículos pré-antrais caprinos cultivados in vitro.

Pathological findings in fetuses of goats and cattle poisoned by Sida carpinifolia (Malvaceae) / Achados patológicos em fetos de caprinos e bovinos intoxicados por Sida carpinifolia (Malvaceae)

In Brazil, the consumption of Sida carpinifolia by livestock has been associated with neurological diseases linked to lysosomal storage disorders. This paper describes the pathological findings in two caprine fetuses from dams that were experimentally poisoned with S. carpinifolia. The goats were orally dosed with 10 and 13g/kg of a paste of green chopped S. carpinifolia for 30 days and were observed for an additional 15 days period after the last dosage with the plant; thereafter they were euthanized and necropsied. The dams showed only slight clinical signs. The study also includes the findings in one bovine fetus from a naturally S. carpinifolia poisoned cow which showed mild incoordination, generalized tremors, staggering, and frequent falls. The cow was euthanized and necropsied. While there were no significant histopathological changes in the goats, in the cow vacuolation of Purkinje neurons of the cerebellum, pancreatic acinar cells, and thyroid follicular cells were observed. The main microscopic changes observed in the caprine and bovine fetuses were vacuolation in the epithelium of renal tubules, thyroid follicular cells, and Purkinje neurons of the cerebellum. Transmission electron microscopy of sections from CNS of the cow and its fetus revealed vacuoles containing fine granular material surrounded by membrane. Lectin-histochemistry of CNS sections from goat fetuses marked lightly to sWGA lectins, WGA, and Con-A.

No Brasil, o consumo de Sida carpinifolia por animais de produção tem sido associada a doenças neurológicas relacionadas com doença de depósito lisossômico. Este trabalho descreve os achados patológicos observados em dois fetos caprinos de mães que foram experimentalmente intoxicadas por S. carpinifolia. As cabras foram intoxicadas experimentalmente com S. carpinifolia nas doses de 10 e 13g/kg durante 30 dias e foram acompanhadas durante 15 dias após o consumo da planta. Após este período foram eutanasiadas e necropsiadas. O estudo também inclui os achados patológicos encontrados em um feto de uma fêmea bovina intoxicada naturalmente pela planta, que mostrou leve incoordenação, tremores generalizados, andar desequilibrado e quedas frequentes. A vaca foi eutanasiada e necropsiada. Embora não houvesse alterações histológicas significativas nas cabras, vacuolização dos neurônios de Purkinje do cerebelo, das células acinares do pâncreas e nas células foliculares da tireoide foram observadas na vaca. As principais alterações histológicas observadas nos fetos caprinos e no feto bovino foram vacuolização no epitélio dos túbulos renais, nas células foliculares da tireoide e nos neurônios de Purkinje do cerebelo. Na microscopia eletrônica de transmissão do sistema nervoso central da vaca e de seu feto revelaram-se vacúolos contendo material finamente granulado e delimitado por membrana. Na técnica de lectina-histoquímica dos fetos caprinos houve marcação leve no SNC para as lectinas sWGA, WGA e para Con-A.

Aspectos morfológicos da cérvice de ovelhas / Morphological aspects of ovine cervix

The major barrier to accomplishment of artificial insemination in ewes is the anatomy of the cervix combined with low viability and survival of frozen ram semen. Thus, the aim of the present study was to evaluate the morphology of the cervix in ewes. Eighty-one specimens were obtained from a slaughterhouse and the following characteristics were evaluated: type of external cervical os, cervical size, integrity and interdigitation of cervical rings, gross characteristics and size of the ovaries (follicles and corpus luteum), and the time spent to pass an insemination catheter through the lumen of the cervix. The most frequent was the slit type cervical opening and grade II internal ring arrangement. The time spent to pass the insemination catheter through the cervix was 6 minutes and 15 seconds, and the dye was spread throughout the cervical lumen reaching the uterus in most sheep. The average values of cervical opening diameter and cervical length were 0.68cm and 4.4cm respectively. Ovarian follicular activity was found in 75 percent of the ewes. A positive correlation was established between some of the variables. We conclude that cervical opening size is influenced by estrogen, slit type cervical os and grade III cervical ring arrangement; also, the greater length of the cervix was associated with greater difficulty to pass the insemination catheter.

A principal barreira para a aplicação da inseminação artificial transcervical é a anatomia cervical aliada à baixa viabilidade e sobrevida do sêmen ovino congelado. Assim, este experimento teve como objetivo estudar a morfologia da cérvice de ovelhas. Para tal, foram adquiridas, em matadouro, 81 peças do trato reprodutor de ovelhas, nas quais se avaliou a morfologia cervical, segundo as seguintes características: tipo de óstio cervical, mensuração do tamanho da cérvice, integralidade e interdigitação entre os anéis das pregas cervicais, tamanho e características macroscópicas dos ovários (folículos e corpo lúteo) e tempo da passagem do aplicador de sêmen pela cérvice. Foi identificada maior frequência do tipo liso de abertura da cérvice e integralidade e interdigitação dos anéis grau II. O tempo de passagem do aplicador pela cérvice foi em média de seis minutos e 15 segundos, sendo que o corante aplicado se difundiu por todo o canal, atingindo o útero na maioria das ovelhas. A média do diâmetro da abertura cervical foi de 0,68cm e o comprimento cervical de 4,4cm. A atividade folicular ovariana foi encontrada em 75 por cento das fêmeas. Foi possível estabelecer várias correlações entre as variáveis. Conclui-se que o tamanho da abertura cervical sofre influência estrogênica, e o tipo liso de abertura cervical, o grau III de integralidade e interdigitação dos anéis e o maior comprimento da cérvice foram associados à maior dificuldade de passar o cateter no lúmen cervical.

[Developmental study of the cervicothoracic [stellate] ganglion in ovine fetus]

Sheep as an experimental animal has been used in many veterinary researches. The developmental study of the ovine cervicothoracic ganglion in the fetal stages will reveal the anatomy of the sympathetic nervous system in the adult sheep and morphological and morphometrical relation between this ganglion and surrounding structures. The aim of this research was to follow morphological and morphometrical development of cervicothoracic ganglion in sheep during fetal stages and its relation to the body sides and sex. This study was performed on 18 ovine fetuses. The approximate age of fetnses were 11 to 16 weeks and were divided in 3 groups. Coalescence of the caudal cervical ganglion and few primary ganglia of the thoracic part of sympathetic trunk were morphologically studied. In Morphometrical studies, the length and width of the ganglia were measured. The results were statistically analyzed using 1-way ANOVA. The caudal cervical and first thoracic ganglia were the most frequent cervicothoracic ganglion. Variations in the length and width of ganglia between 11 to 16 weeks were not significant [p > 0.05], but with increasing of age interval become significant [p < 0.05]. There were not any correlation between length of ganglia and side of body and sex [p> 0.05]. The results of this study can be useful for evaluation of developmental and cell changes in neuropeptides of the sympathetic ganglia especially cervicothoracic ganglion

Efeito da restrição pré e pós-natal sobre o crescimento dos depósitos de gordura de cordeiros Santa Inês / Effects of pre and postnatal nutritional restriction on internal fats growth of Santa Ines lambs

Avaliaram-se os efeitos da restrição pré e pós-natal sobre o tamanho e o crescimento dos depósitos de gordura de cordeiros Santa Inês. Foram utilizados 68 cordeiros, distribuídos em três tratamentos: com restrição pré-natal (RPRE), com restrição pós-natal (RPOS) e sem restrição (controle). Dentro de cada tratamento, os animais foram aleatoriamente sorteados para serem abatidos após o nascimento e com 10, 15, 25, 35 e 45kg de peso vivo. Os depósitos de gordura (omental, mesentérica, perirenal, pélvica e inguinal) foram registrados. Ao nascimento, os depósitos de gordura foram menores nos animais do tratamento RPRE. Entre 15 a 35kg de peso, a quantidade de gordura foi igual nos animais dos três tratamentos e, a partir desse peso (35kg), com exceção da gordura pélvica, os depósitos no animais do tratamento RPRE foram significativamente maiores. A restrição pré-natal elevou consideravelmente as taxas de ganho da gordura omental, mesentérica, perirenal e pélvica, enquanto a restrição pós-natal influenciou somente a taxa de ganho da gordura inguinal. Cordeiros de todos os grupos apresentaram taxas de desenvolvimento tardias (b>1).

Effects of pre and postnatal nutritional restriction on allometric growth of internal fat deposits in Santa Ines lambs were evaluated Sixty eight lambs were randomly alloted to three different nutritional restriction:prenatal nutritional restriction (PRER), postnatal nutritional restriction (POSR), and a control group without nutritional restriction. Lambs of each group were randomly sampled and slaughtered at birth and weighing 10, 15, 25, 35 and 45kg. Fat depositts (omental, mesenteric, perirenal, pelvic and inguinal) of slaughtered lambs were recorded. At birth fat deposits were small for animals from treatment RPRE. From 15 to 35kg of live weight the amount of fat was similar for animals from all groups but lambs from PRER group, with live body weight heavier than 35kg, showed higher fat deposits except for pelvic fat. Prenatal nutritional restriction increased increased the omental, mesenteric, perirenal, and pelvic fat deposits and postnatal restriction decreased the inguinal fat deposits. Lambs from all groups showed a positive heterogenic development (b>1).

Chronic Hypoxia Alters Vasoconstrictive Responses of Femoral Artery in the Fetal Sheep

The purpose of this study was to determine if mild hypoxia alters the responsiveness to vasoactive agents in the renal and the femoral arteries in the fetal sheep. Ten pregnant sheep were operated under halothane anesthesia at 116 to 124 days' gestation. A maternal tracheal catheter was placed for infusing compressed air (control group, n=5) or nitrogen (hypoxia group, n=5) starting on post operative day 6 and maintained for 5 days. Femoral and renal arteries were harvested from the fetus to study the constriction response to phenylephrine (PE 10(-9) to 10(-5) mol/L). To determine the involvement of nitric oxide as a modulator of vessel constriction, N-nitro-Larginine methyl ester (L-NAME) was used at a concentration of 10(-4) mol/L in parallel chambers. In the hypoxia group, maternal Pao2 significantly decreased from a base-line of 110.4 +/-1.4 to 80.5 +/-1.6 (mmHg, p <0.01), fetal Pao2 significantly decreased from a baseline of 20.9 +/-0.3 to 15.5 +/-0.1 (mmHg, p <0.01). Hypoxia was associated with a significant increase in PE maximal response in the absence (184.5 +/-6.6 vs. 146.2 +/-4.3) and presence (166.9 +/-6.3 vs. 145.0 +/-4.5) of L-NAME, and a decrease in EC50 in the absence (6.0 +/-1.1 vs. 27.0 +/-4.1) of L-NAME of femoral arteries. However, there were no significant differences in PE maximal response and EC50 in the absence and presence of L-NAME of renal arteries. We concluded that mild chronic hypoxia seems to increase the fetal femoral artery response to PE, but not in the fetal renal artery. This observation is consistent with a redistribution of cardiac output away from the carcass.

The Fetal Sheep: A Unique Model System for Assessing the Full Differentiative Potential of Human Stem Cells

The naturally occurring stem cell migratory patterns, the availability of expanding homing and engraftment sites, and the presence of tissue/organ-specific signals in the developing mammalian fetus provide the ideal setting for stem cells to exhibit their full biological potential. These characteristics combined with the relative immunological naivete of the early gestational age fetus that permits the engraftment and long- term persistence of allogeneic and xenogeneic donor stem cells make it possible to use the developing fetus to assess the in vivo potential of a variety of stem cells. We have taken advantage of these permissive characteristics of the fetus to develop a large animal model of human hematopoiesis in sheep that permits not only the long-term engraftment of human hematopoietic stem cell/progenitor cells and their differentiation into the full range of lymphohematopoietic elements, but also the relatively robust expression of their potential to contribute to the formation of non-hematopoietic tissues.

Efecto del líquido folicular equino y la somatotropina bovina en la sobrevivencia de embriones ovinos transferidos asincrónicamente / Effect of equine follicular fluid and bovine somatotropin in the survival of ovine embryos asynchronously transferred

La asincronía materno-embrionaria pudiera resolverse incrementando los niveles de progesterona (P4) para promover el desarrollo embrionario, o retrasando la luteólisis. Para tal fin se administró somatotropina bovina (ST), líquido folicular equino (LFE) o ambos, a receptoras de embriones en asincronía. Se recolectaron embriones en 25 donadores el día 6 posestro. Las receptoras se sincronizaron con acetato de fluorogestona y PGF2Ó, y en las asincrónicas de todos los grupos se retiró el progestágeno 3.5 días antes que en las donadoras. Se dividieron en cinco tratamientos: sincronía (sin), n=16; asincronía + LFE (asinlfe), n=19; asincronía + ST (asins), n=7; y asincronía + LFE + ST (asinlfst), n=10. Las concentraciones de progesterona (3.3 ng/ml) fueron mayores en el grupo asinlfe (P< 0.05). Las menores concentraciones (1.4 ng/ml) se presentaron en el asinst. La fase lútea de mayor duración, 16.8 días promedio, se presentó en las no gestantes del grupo asin. En cuatro ovejas del asinlfe se retrasó la luteólisis hasta el día 19. La fertilidad del grupo sin (86.6 por ciento) no fue diferente a la del asin (68.7 por ciento). Los tratamientos no mejoraron la fertilidad a pesar de inrementarse la P4 en las gestantes asinlfe y asinlfst o retrasarse la luteólisis en las asinlfe. Se propone que antes de modificar la asincronía materno-embrionaria se determine el grado de asincronía tolerable de manera natural en los ovinos

Fertilidad de Ovinos de pelo en el tropico de Santa Cruz / Fertility of hairy ovines in the tropic of Santa Cruz

El Objetivo principal del trabajo fue la evaluacion de la reproduccion de los genotipos de ovinos tropicales dentro de un cruzamiento absorbente de ovejas criollas de lana y reproductoras de pelo de las razas Katadhin y San Javierino, a travez del CIAT y la MBAT, en la zona de la colonizacion de Chane-Pirai. La evaluacion de 120 casos referente a la edad al primer parto (E.P.P.), d ovinos en cruzamiento absorbente entre ovejas criollas de lana y machos de la raza Katadhin y San Javierino, registrandose un promedio general de 466 +-11.52 dias un coeficientes de variacion de 25.37 por ciento. Las ovejas criollas presentaron un promedio de 634 dias para la E.P.P. (20.8 meses), entre tanto, las ovejas puras de pelo por cruza se encontro un promedio de 429 dias (14,5 por ciento). Los analisis estadisticos, muestran una tendencia ecentuada de disminucion en la edad al primer parto de acuerdo al aumento de sangre tropical (de pelo), en los genotipos que se generaron en el programa de cruzamiento absorvente. Al mismo tiempo se analizaron 225 casos de intervalo entre partos (I.E.P.), de los genotipos de ovinos en estudios, registrandose un promedio general de 234+-4.01 dias(7.7meses), para ovejas con mas de dos partos y un coeficiente de variacion de 25,62 por ciento. La evaluaciones de los grupos raciales dentro del programa de cruzamiento absorvente verificaron que las ovejas criollas de lana presentaron el mayor I.E.P., 268 dias (8.8meses), entre tanto, las ovejas puras de pelo por cruza registraron un promedio de 229 dias (7.5meses), observaron una tendencia marcada de la disminucion de los intervalos entre partos, en la medida como aumento el porcentaje de sangre tropical en el rebaño. La estacion de parto no afecto significativamente la duracion de los intervalos, sin embrago, las ovejas paridas en la estacion de primavera (oct-nov-dic), registran los menores I.E.P. (213 dias) y la otoño (abr-may-jun), los mayores intervalos, (250 dias).

Embriogénesis del área mandibular en oveja y gato / Embryonic development of mandibule in sheep and cat

Se describe en forma comparada la ontogenia del cartílago del primer arco faríngeo y su relación con la formación de la mandíbula, en dos especies: oveja y gato, que presentan diferencias fenotípicas y funcionales a nivel de ese carácter. Se utilizó una muestra de 18 embriones y fetos felinos con un desarrollo entre 20 y 48 días de gestación y 12 fetos ovinos de 27 a 45 días. Un grupo de embriones fue procesado con la técnica de doble tinción "in toto" con alizarina y azul de Alcian, y el otro grupo fue analizado con técnica histológica corriente: hematoxilina eosina-azul de Alcian. En ovinos de 31 a 35 días y felinos de 32 a 39 días, se observa el cartílago diferenciado en sínfisis, centro o cuerpo y componente caudal. Los primeros componentes evidenciaron diferencias entre ambas especies. En la oveja, el centro del cartílago del primer arco no sufre osificación endocondral. La sínfisis mantiene el diámetro y se prolonga para formar el proceso rostral que promueve el crecimiento de la mandíbula. En gatos, la sínfisis es poco desarrollada y la parte anterior del centro del cartílago sufre osificación ondocondral, la que aumenta la distancia transversa entre las mandíbulas derecha e izquierda. Las diferencias encontradas en la estructura del cartílago de Meckel y su diferenciación posterior estarían relacionadas con la forma definitiva de la mandíbula en ovinos (dolicocefálicos) y en felinos (braquiocefálicos).

Efectos del sulindaco e indometacina en fetos de ovejas monitorizados crónicamente / Sulindac and indometacin effects in chronically monitorized lamb fetus

El sulindaco y la indometacina son inhibidores de la síntesis de prostaglandinas, con similar eficacia tocolítica, y al parecer, con diferentes efectos sobre el feto. Para estudiar mejor estas diferencias, nos propusimos comparar los efectos de la infusión de sulindaco con algunos efectos conocidos de la indometacina. Se operaron 6 fetos de oveja en los cuales se insertaron en forma crónica catéteres de polivinilo para el registro continuo de frecuencia cardíaca, presión arterial media, movimientos respiratorios fetales y obtención de muestras sanguíneas para pH y presión de gases arteriales. Los efectos fueron infundidos por 2 horas con el vehículo, y luego con 150 mg de sulindaco o indometacina por un período de 6 horas, en días alternos. Los resultados muestran que la infusión de sulindaco en fetos de oveja no tiene efectos en la presión arterial media, frecuencia cardíaca, pH y gases arteriales fetales, similar a lo observado con la infusión de indometacina. Sin embargo, la indometacina aumentó significativamente la incidencia de movimientos respiratorios fetales, hecho no observado con el sulindaco. La explicación de esta diferencia no es clara y requiere de mayores estudios, sin embargo, estos resultados, sumados a lo reportado previamente, avalan la hipótesis que el sulindaco pudiera ser una droga de elección en la frenación de parto prematuro cuando no se requieran efectos colaterales sobre el feto