Nitrogen source and pH interact and modulate lipase secretion in a non-clinical strain of Candida parapsilosis

Lipases (E.C. 3.1.1.3) are serine-hydrolases, and act on long chain fatty acid ester bonds. They exhibit specific and enantioselective activities, which are desirable for many industrial applications. This study aimed at screening and optimizing the production of lipases by wild yeast strains from a variety of substrates, as well as characterizing the enzyme. An initial selection was made in oxygenated oil-supplemented minimum medium, and the enzymatic activity of the supernatant was tested over p-nitrophenyl palmitate. One-hundred and twenty-four yeast strains from different substrates were tested, and twenty-three showed significantly higher lipolytic activity (p<0.01). One yeast in particular, QU110, showed best lipase production and therefore was selected for the optimization and characterization processes. This yeast exhibits enzyme secretion in initial pH 6.0, with olive oil and tryptone as carbon and nitrogen sources, respectively. There was a strong interaction between nitrogen source and initial pH, and pH 9.0seems to inhibit enzyme secretion. The crude enzyme (cell-free supernatant) shows stability in surfactants and n-hexane, but not in ethanol or methanol. A Response Surface Model was created and optimal enzyme activity conditions were observed at 36°C and pH 8.0. The lipase is appropriate for transesterification reactions, as the enzyme is more stable in strong apolar solvents than moderately apolar ones. Also, secretion by pH was not reported elsewhere, which should be further investigated and contribute for other yeast bioprocesses as well.

Validación de una metodología por cromatografía líquida de alta eficiencia para la determinación simultánea de vitaminas A, D3 y E en inyectables de uso veterinario / x

Se presentan en este artículo los resultados del desarrollo y de la validación de una metodología analítica para la cuantificación simultánea de vitamina A palmitato, vitamina D3 y vitamina E acetato en inyectables de uso pecuario. El procedimiento consiste en una separación por cromatografía líquida de alta eficiencia (CLAE) en fase inversa empleando como fase móvil una mezcla de acetonitrilo, metanol, agua (45:50:2.5), una columna C18 a 45 ºC y detección a una longitud de onda de 280 nm. Se encontró que el método es selectivo, lineal y preciso. Estas características junto con su sencillez hacen que el método sea adecuado y conveniente para el objetivo propuesto. La robustez de la metodología fue también investigada. El método validado se aplicó para la determinación de las vitaminas en tres productos inyectables del mercado colombiano con registro sanitario del Instituto Colombiano Agropecuario (ICA).

Neste artigo se apresentam os resultados do desenvolvimento e validação da metodologia analítica para a determinação simultânea de palmitato de vitamina A, vitamina D3 e vitamina E em injetáveis para uso de acetato na pecuária. O procedimento consiste na separação cromatográfica por cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE) em fase reversa, utilizando como fase móvel mistura de acetonitrila, metanol, água (45:50:2.5), coluna C18 a 45 ºC e detecção em comprimento de onda de 280 nm. O método mostrou-se seletivo, linear e preciso. As características e a facilidade de execução do método indicam que ele é adequado e conveniente para o objetivo proposto. A robustez do método também foi pesquisada. O método validado foi aplicado para a determinação de vitaminas em três produtos injetáveis do mercado colombiano com registro no ICA (Instituto Colombiano Agropecuário).