RESUMEN
Ascosphaera apis is a bee pathogen that causes bee larvae infection disease, to which treatment is not yet well investigated. The aim of this study was to investigate antifungal susceptibility in vitro against A. apis and to identify a new antifungal agent for this pathogen through minimal inhibitory concentration (MIC) assay and western blot analysis. Macelignan had 1.56 and 3.125 μg/mL MIC against A. apis after 24 and 48 h, respectively, exhibiting the strongest growth inhibition against A. apis among the tested compounds (corosolic acid, dehydrocostus lactone, loganic acid, tracheloside, fangchinoline and emodin-8-O-β-D-glucopyranoside). Furthermore, macelignan showed a narrow-ranged spectrum against various fungal strains without any mammalian cell cytotoxicity. In spite of miconazole having powerful broad-ranged anti-fungal activity including A. apis, it demonstrated strong cytotoxicity. Therefore, even if macelignan alone was effective as an antifungal agent to treat A. apis, combined treatment with miconazole was more useful to overcome toxicity, drug resistance occurrence and cost effectiveness. Finally, HOG1 was revealed as a target molecule of macelignan in the anti-A. apis activity by inhibiting phosphorylation using S. cerevisiae as a model system. Based on our results, macelignan, a food-grade antimicrobial compound, would be an effective antifungal agent against A. apis infection in bees.
Asunto(s)
Animales , Ascomicetos/efectos de los fármacos , Abejas/microbiología , Lignanos/farmacología , Proteínas Quinasas Activadas por Mitógenos/efectos de los fármacos , Proteínas de Saccharomyces cerevisiae/efectos de los fármacos , Antifúngicos/farmacología , Sales de Tetrazolio , Factores de Tiempo , Pruebas de Sensibilidad Microbiana , Western Blotting , Proteínas Quinasas Activadas por Mitógenos/análisis , Proteínas de Saccharomyces cerevisiae/análisis , Sinergismo Farmacológico , Formazáns , Larva/efectos de los fármacos , Larva/microbiología , Larva/patogenicidad , Micosis/tratamiento farmacológicoRESUMEN
Em eucariotos, a formação das subunidades ribossomais envolve múltiplos fatores, responsáveis pelas etapas de maturação dos rRNAs e por sua associação a proteínas ribossomais. A via de processamento de pré-rRNA é bastante complexa e inclui várias etapas de modificação de nucleotídeos e clivagens endo- e exonucleolíticas. As modificações de nucleotídeos são dirigidas por snoRNPs, formados por snoRNAs e proteínas, que são divididos em duas classes gerais, de box H/ACA (pseudouridilação) e de box C/O (metilação). Dentre os snoRNP de box C/D esta o U3, que embora apresente as sequências características e se associe a proteínas desse grupo de snoRNPs, não dirige metilações no rRNA, mas sim as clivagens iniciais no pré-rRNA 35S. O snoRNA U3 de Saccharomyces cerevisiae é codificado por dois genes que contêm introns, snR17A e snR17B. Embora a via de montagem do snoRNP U3 ainda não tenha sido determinada com precisão, sabe-se que algumas proteínas do core de box C/O ligam-se ao pré-snoRNA U3 co-transcricionalmente, afetando o splicing e o processamento da extremidade 3´ deste snoRNA...