Simultaneous detection of 7 important Rickettsiales pathogens by TaqMan-probe quantitative real-time PCR / 中华流行病学杂志

Objective: To establish and optimize a TaqMan-probe quantitative real-time PCR (qPCR) assay for the detection of 7 important Rickettsiales pathogens and simultaneous identification of the infection types. Methods: Based on the ompB gene of Rickettsia prowazekii, Rickettsia mooseri and spotted fever group rickettsiae, the groEL gene of Orientia tsutsugamushi, the 16S rRNA of Ehrlichia chaffeensis, the gltA gene of Anaplasma phagocytophilum and the com1 gene of Coxiella burnetii, we synthesized primers and TaqMan-probes and optimized the reaction system and reaction process to same solution. The sensitivity, specificity and reproducibility of this assay were evaluated and the assay was used for the detection of simulated and actual samples. Results: The Ct value of the standard curves of the 7 pathogens showed a good linear relationship with the number of DNA copies (all R2 >0.990 0), the minimum detection limit was 10 copies/μl, showing good specificity. In the 96 tick nucleic acid extracts, Coxiella burnetii was detected in 1 sampleand spotted fever group Rickettsiae was detected in 3 samples. In the 80 blood samples from patients with undefined febrile illness, Orientia tsutsugamushi was detected in 1 sample and spotted fever group rickettsiae was detected in 2 samples. Conclusions: In this study, based on the established TaqMan-probe qPCR assay, the reaction system and reaction condition of the 7 important pathogens of Rickettsiales were optimized to the same solution. This method overcomes the shortcomings of using different reaction systems and reaction conditions for different pathogens, which can precisely identify the species of 7 important pathogens of Rickettsiales in clinical sample detections and is important for the infection type identification and laboratory detection time reduction to facilitate precise treatment of the patients.

Historical geographic overlap of human rickettsiosis with animal reservoirs in Juiz de Fora, Minas Gerais, Brazil / Sobreposição geográfica histórica da riquetsiose humana com reservatórios animais em Juiz de Fora, Minas Gerais, Brasil

Background and objectives: we investigated the existence of a historical geographic overlap between the location of spotted fever group rickettsiosis human cases, a disease caused by the gram-negative bacterium Rickettsia sp., and that of mammalian reservoirs, specifically domestic horses and capybaras, in the urban perimeter of the city of Juiz de Fora, Minas Gerais, Brazil. Methods: cases of human rickettsiosis that occurred during a period of 17 years (2003-2020) were geolocated and the distribution of cases in time and geographic space was assessed using 1st and 2nd order geospatial association indicators. We also analyzed the overlap between the locations of human rickettsiosis cases and the area of occurrence of domestic horses and capybaras. Results: men were diagnosed more often than women, but a large proportion of affected women died. The results indicate an aggregation of human rickettsiosis cases in time (cases tend to occur close to each other at each epidemic event) and in geographic space (cases are concentrated in a specific geographic region of the urban perimeter). Human cases seem to be more associated with city regions with: i) higher local frequency of domestic horses and not capybaras; ii) lower rates of family development. Conclusion: it is suggested that, in the local epidemiological scenario, domestic horses appear to be the main sources of the rickettsia infecting humans, not capybaras.(AU)

Justificativa e objetivos: foi investigada a existência de uma sobreposição geográfica histórica entre a localização dos casos de riquetsiose humana do grupo da febre maculosa, um grupo de doenças causadas pela bactéria Gram-negativa Rickettsia sp., e dos reservatórios mamíferos, especificamente cavalos domésticos e capivaras, no perímetro urbano do município de Juiz de Fora, Minas Gerais, Brasil. Métodos: foram geolocalizados os casos de riquetsiose humana ocorridos durante um período de 17 anos (2003-2020), sendo avaliada a distribuição dos casos no tempo e espaço geográfico através de indicadores de associação geoespacial de 1a e 2a ordem. Também analisamos a superposição dos locais dos casos de riquetsiose humana com a área de ocorrência de cavalos domésticos e capivaras. Resultados: homens foram diagnosticados mais frequentemente que as mulheres, mas grande proporção das mulheres acometidas faleceu. Os resultados indicam uma agregação dos casos de riquetsiose humana no tempo (os casos tendem a ocorrer próximos entre si a cada evento epidêmico) e no espaço geográfico (os casos se concentram em uma região geográfica específica do perímetro urbano). Os casos humanos aparentam ser mais associados às regiões da cidade com: i) maior frequência local de cavalos domésticos e não das capivaras; ii) menores índices de desenvolvimento familiar. Conclusão: sugere-se que, no cenário epidemiológico local, são os cavalos domésticos que aparentam ser as principais fontes da riquétsia infectando os humanos, não as capivaras.(AU)

Justificación y objetivos: investigamos la existencia de una superposición geográfica histórica entre la localización de casos de rickettsiosis exantemáticas humana, enfermedad causada por la bacteria gramnegativa Rickettsia sp., y la de mamíferos reservorios, específicamente caballos domésticos y capibaras, en el perímetro urbano de la ciudad de Juiz de Fora, Minas Gerais, Brasil. Métodos: se geolocalizaron los casos de rickettsiosis humana ocurridos durante un período de 17 años (2003-2020), y se evaluó la distribución de casos en el tiempo y espacio geográfico utilizando indicadores de asociación geoespacial de 1er y 2do orden. También analizamos la superposición entre las ubicaciones de los casos de rickettsiosis humana y el área de ocurrencia de los caballos domésticos y capibaras. Resultados: los hombres fueron diagnosticados con más frecuencia que las mujeres, pero una gran proporción de mujeres afectadas fallecieron. Los resultados indican una agregación de casos de rickettsiosis humana en el tiempo (los casos tienden a ocurrir cerca uno del otro en cada evento epidémico) y en el espacio geográfico (los casos se concentran en una región geográfica específica del perímetro urbano). Los casos humanos parecen estar más asociados con regiones urbanas con: i) mayor frecuencia local de caballos domésticos y no de capibaras; ii) menores tasas de desarrollo familiar. Conclusión: se sugiere que, en el escenario epidemiológico local, los caballos domésticos parecen ser las principales fuentes de la rickettsia que infecta a los humanos, no los capibaras.(AU)

Human parasitism by the exotic tick Dermacentor variabilis (Parasitiformes: Ixodida) in Brazil: report of an imported case / Parasitismo humano pelo carrapato exótico Dermacentor variabilis (Parasitiformes: Ixodida) no Brasil: relato de um caso importado

Abstract In June 2012, a tick was found parasitizing a man in the city of São Paulo, who had recently returned from a visit to Pennsylvania, in the northeast of the United States. The tick was removed and sent to the São Paulo State Department of Health, where it was identified as a male of the species Dermacentor variabilis (Say, 1821), according to the literature and taxonomic keys. The tick was subjected to a PCR test to search for rickettsiae, but the result was negative. The fact that a human entered Brazilian territory unaware that he was parasitized by a hard tick not belonging to the national tick fauna is significant because of the possibility that an exotic species could be introduced and take hold in this country. Another major risk to public health is that this arthropod could be infected with the bacterium Rickettsia rickettsii, as this ectoparasite is the main vector of Spotted Fever on the East Coast of North America.

Resumo Em junho de 2012, foi enviado ao serviço da Secretaria de Estado da Saúde de São Paulo um carrapato que foi encontrado em parasitismo sobre um homem adulto na cidade de São Paulo, que havia chegado recentemente de uma viagem de turismo aos Estados Unidos, onde visitou o estado da Pensilvânia, situado na região Nordeste Americana. O carrapato foi identificado como um macho da espécie Dermacentor variabilis, (Say, 1821), de acordo com a literatura e chaves taxonômicas, sendo submetido ao teste da PCR para pesquisa de riquétsias, porém o resultado foi negativo. O fato de um ser humano ter cruzado a fronteira do Brasil, parasitado, sem o seu prévio conhecimento, por um carrapato duro, não pertencente à ixodofauna nacional, é de grande importância pela chance de introdução e estabelecimento no território brasileiro de uma espécie exótica. Outro grande risco para a saúde pública é que esse artrópode poderia estar infectado com a bactéria Rickettsia rickettsii, pois esse ectoparasito é o principal vetor da Febre Maculosa na costa Leste Norte Americana.

Boletín Integrado de Vigilancia N 504 SE 28 / Integrated Surveillance Bulletin N 504 SE 28

Generado por el Ministerio de Salud de la Nación Dirección Nacional de Epidemiología y Análisis de la Información. En primer lugar se muestra una Actualización de Eventos Priorizados donde se muestra semanalmente un panorama más sucinto de algunos eventos seleccionados. En segundo término se presentan Eventos de Notificación Obligatoria seleccionados, donde se ofrecen casos a nivel provincial comparando con el año anterior en forma de actualización semanal. Por último se muestran informes Especiales, donde se ofrece un análisis en profundidad de aquella o aquellas enfermedades escogidas

Boletín Integrado de Vigilancia N 506 SE 30 / Integrated Surveillance Bulletin N 506 SE 30

Generado por el Ministerio de Salud de la Nación Dirección Nacional de Epidemiología y Análisis de la Información. En primer lugar se muestra una Actualización de Eventos Priorizados donde se muestra semanalmente un panorama más sucinto de algunos eventos seleccionados. En segundo término se presentan Eventos de Notificación Obligatoria seleccionados, donde se ofrecen casos a nivel provincial comparando con el año anterior en forma de actualización semanal. Por último se muestran informes Especiales, donde se ofrece un análisis en profundidad de aquella o aquellas enfermedades escogidas

Boletín Integrado de Vigilancia N 499 SE 23 / Integrated Surveillance Bulletin N 499 SE 2

Generado por el Ministerio de Salud de la Nación Dirección Nacional de Epidemiología y Análisis de la Información. En primer lugar se muestra una Actualización de Eventos Priorizados donde se muestra semanalmente un panorama más sucinto de algunos eventos seleccionados. En segundo término se presentan Eventos de Notificación Obligatoria seleccionados, donde se ofrecen casos a nivel provincial comparando con el año anterior en forma de actualización semanal. Por último se muestran informes Especiales, donde se ofrece un análisis en profundidad de aquella o aquellas enfermedades escogidas

Boletín Integrado de Vigilancia N 498 SE 22 / Integrated Surveillance Bulletin N 498 SE 22

Generado por el Ministerio de Salud de la Nación Dirección Nacional de Epidemiología y Análisis de la Información. En primer lugar se muestra una Actualización de Eventos Priorizados donde se muestra semanalmente un panorama más sucinto de algunos eventos seleccionados. En segundo término se presentan Eventos de Notificación Obligatoria seleccionados, donde se ofrecen casos a nivel provincial comparando con el año anterior en forma de actualización semanal. Por último se muestran informes Especiales, donde se ofrece un análisis en profundidad de aquella o aquellas enfermedades escogidas

Boletín Integrado de Vigilancia N 497 SE 21 / Integrated Surveillance Bulletin N 497 SE 21

Generado por el Ministerio de Salud de la Nación Dirección Nacional de Epidemiología y Análisis de la Información. En primer lugar se muestra una Actualización de Eventos Priorizados donde se muestra semanalmente un panorama más sucinto de algunos eventos seleccionados. En segundo término se presentan Eventos de Notificación Obligatoria seleccionados, donde se ofrecen casos a nivel provincial comparando con el año anterior en forma de actualización semanal. Por último se muestran informes Especiales, donde se ofrece un análisis en profundidad de aquella o aquellas enfermedades escogidas

Linfadenopatía transmitida por garrapata. Un caso pediátrico de rickettsiosis en atención primaria / Lymphadenopathy transmitted by tick. A pediatric case of rickettsiosis in primary care

La entidad llamada tick-borne lymphadenopathy, también conocida como dermacentor-borne necrosis eritema lymphadenopathy, se incluye dentro del diagnóstico diferencial de enfermedades transmitidas por garrapatas, que han aumentado considerablemente en los últimos años debido a una mayor observación clínica-epidemiológica y mejoría diagnóstica. Es una zoonosis causada por Rickettsia slovaca y transmitida por la picadura de la garrapata Dermacentor marginatus. Los pacientes afectados tienen una escara necrótica rodeada de un halo eritematoso en el cuero cabelludo y adenopatías regionales dolorosas. Se presenta a un varón de siete años que mostró, tras la extracción de una garrapata, una escara necrótica en el cuero cabelludo, con adenopatías y febrícula. La reacción en cadena de la polimerasa y el cultivo de la lesión confirmaron la presencia de Rickettsia slovaca. El paciente recibió azitromicina oral con buena respuesta. En Atención Primaria, es importante el seguimiento de las picaduras de garrapatas para detectar posibles enfermedades transmitidas por estas.

The entity called tick-borne lymphadenopathy, also known as dermacentor-borne necrosis eritema lymphadenopathy, is included in the differential diagnosis of diseases transmitted by ticks, which have increased considerably in recent years due to greater clinical-epidemiological observation and diagnostic improvement. It is a zoonosis caused by Rickettsia slovaca and transmitted by the bite of the Dermacentor marginatus tick. Affected patients have a necrotic eschar surrounded by an erythematous halo in the scalp, as well as painful regional lymphadenopathy. Linfadenopatía transmitida por garrapata. Un caso pediátrico de rickettsiosis en atención primaria Lymphadenopathy transmitted by tick. A pediatric case of rickettsiosis in primary care We present a seven-year-old male who shows, after the extraction of a tick, a necrotic eschar on the scalp, accompanied by lymphadenopathy and low-grade fever. The study of polymerase chain reaction and culture of the lesion confirm the presence of Rickettsia slovaca. The patient received oral azithromycin with a good response. In Primary Care, it is important to monitor the tick bites, to detect possible diseases transmitted by them.

Boletín Integrado de Vigilancia N 495 SE 19 / Integrated Surveillance Bulletin N 495 SE 19

Generado por el Ministerio de Salud de la Nación Dirección Nacional de Epidemiología y Análisis de la Información. En primer lugar se muestra una Actualización de Eventos Priorizados donde se muestra semanalmente un panorama más sucinto de algunos eventos seleccionados. En segundo término se presentan Eventos de Notificación Obligatoria seleccionados, donde se ofrecen casos a nivel provincial comparando con el año anterior en forma de actualización semanal. Por último se muestran informes Especiales, donde se ofrece un análisis en profundidad de aquella o aquellas enfermedades escogidas

Boletín Integrado de Vigilancia N 494 SE 16 / Integrated Surveillance Bulletin N 494 SE 16

Generado por el Ministerio de Salud de la Nación Dirección Nacional de Epidemiología y Análisis de la Información. En primer lugar se muestra una Actualización de Eventos Priorizados donde se muestra semanalmente un panorama más sucinto de algunos eventos seleccionados. En segundo término se presentan Eventos de Notificación Obligatoria seleccionados, donde se ofrecen casos a nivel provincial comparando con el año anterior en forma de actualización semanal. Por último se muestran informes Especiales, donde se ofrece un análisis en profundidad de aquella o aquellas enfermedades escogidas

Boletín Integrado de Vigilancia N 493 SE 15 / Integrated Surveillance Bulletin N 493 SE 15

Generado por el Ministerio de Salud de la Nación Dirección Nacional de Epidemiología y Análisis de la Información. En primer lugar se muestra una Actualización de Eventos Priorizados donde se muestra semanalmente un panorama más sucinto de algunos eventos seleccionados. En segundo término se presentan Eventos de Notificación Obligatoria seleccionados, donde se ofrecen casos a nivel provincial comparando con el año anterior en forma de actualización semanal. Por último se muestran informes Especiales, donde se ofrece un análisis en profundidad de aquella o aquellas enfermedades escogidas

Boletín Integrado de Vigilancia N 492 SE 14 / ntegrated Surveillance Bulletin N 492 SE 154

Generado por el Ministerio de Salud de la Nación Dirección Nacional de Epidemiología y Análisis de la Información. En primer lugar se muestra una Actualización de Eventos Priorizados donde se muestra semanalmente un panorama más sucinto de algunos eventos seleccionados. En segundo término se presentan Eventos de Notificación Obligatoria seleccionados, donde se ofrecen casos a nivel provincial comparando con el año anterior en forma de actualización semanal. Por último se muestran informes Especiales, donde se ofrece un análisis en profundidad de aquella o aquellas enfermedades escogidas

Boletín Integrado de Vigilancia N 491 SE 12 / Integrated Surveillance Bulletin N 491 SE 12

Generado por el Ministerio de Salud de la Nación Dirección Nacional de Epidemiología y Análisis de la Información. En primer lugar se muestra una Actualización de Eventos Priorizados donde se muestra semanalmente un panorama más sucinto de algunos eventos seleccionados. En segundo término se presentan Eventos de Notificación Obligatoria seleccionados, donde se ofrecen casos a nivel provincial comparando con el año anterior en forma de actualización semanal. Por último se muestran informes Especiales, donde se ofrece un análisis en profundidad de aquella o aquellas enfermedades escogidas

Boletín Integrado de Vigilancia N 489 SE 10 / Integrated Surveillance Bulletin N 489 SE 10

Generado por el Ministerio de Salud de la Nación Dirección Nacional de Epidemiología y Análisis de la Información. En primer lugar se muestra una Actualización de Eventos Priorizados donde se muestra semanalmente un panorama más sucinto de algunos eventos seleccionados. En segundo término se presentan Eventos de Notificación Obligatoria seleccionados, donde se ofrecen casos a nivel provincial comparando con el año anterior en forma de actualización semanal. Por último se muestran informes Especiales, donde se ofrece un análisis en profundidad de aquella o aquellas enfermedades escogidas

Boletín Integrado de Vigilancia N 487 SE 08 / Integrated Surveillance Bulletin N 487 SE 08

Generado por el Ministerio de Salud de la Nación Dirección Nacional de Epidemiología y Análisis de la Información. En primer lugar se muestra una Actualización de Eventos Priorizados donde se muestra semanalmente un panorama más sucinto de algunos eventos seleccionados. En segundo término se presentan Eventos de Notificación Obligatoria seleccionados, donde se ofrecen casos a nivel provincial comparando con el año anterior en forma de actualización semanal. Por último se muestran informes Especiales, donde se ofrece un análisis en profundidad de aquella o aquellas enfermedades escogidas

Serosurvey on rickettsiae of the spotted fever group and Rickettsia bellii among dogs in the state of Goiás, Brazil / Inquérito sorológico sobre riquétsias do grupo da febre maculosa e Rickettsia bellii entre cães no estado de Goiás, Brasil

Abstract The purpose of this study was to do a serological survey on three rickettsial species: Rickettsia rickettsii and Rickettsia parkeri, two species of the spotted fever group (SFG) that are considered to be great importance for public health; and Rickettsia bellii, a species of unknown pathogenicity that infects a variety of human-biting ticks. Serum samples from 273 dogs were tested using the indirect immunofluorescence assay (IFA). A total of 52 samples (19.04%) were seropositive for at least one of the three Rickettsia spp. antigens. Thirty-eight (73.07%), twelve (23.07%) and one (1.92%) of these dogs showed homologous reactions to R. bellii, R. rickettsii and R. parkeri, respectively. Our results showed that the seroprevalence of Rickettsia spp. was relatively low. However, the positive serological tests indicated that these dogs had become infected by these agents at some point in their lives. Lastly, our study adds to the previous knowledge on the epidemiology of rickettsiosis in the state of Goiás by doing the first record of detection of anti-R. rickettsii, R. parkeri and R. bellii antibodies by IFA among dogs, thus indicating that these agents may be circulating in the dog population analyzed.

Resumo O objetivo deste estudo foi realizar um levantamento sorológico para três espécies de rickettsias: Rickettsia rickettsii e Rickettsia parkeri, duas espécies do grupo da febre maculosa (GFM) consideradas de grande importância para a saúde pública; e Rickettsia bellii, uma espécie de patogenicidade desconhecida que infecta uma variedade de carrapatos que parasitam seres humanos. Amostras de soro de 273 cães foram testadas, usando-se a técnica de reação de imunofluorescência indireta (RIFI). O total de 52 amostras (19,04%) foram soropositivas para pelo menos um dos três antígenos de Rickettsia spp. Trinta e oito (73,07%), doze (23,07%) e um (1,92%) desses cães apresentaram reações homólogas à R. bellii, R. rickettsii e R. parkeri, respectivamente. Esses resultados demonstraram uma baixa soroprevalência para Rickettsia spp. No entanto, as amostras positivas indicam que esses cães foram infectados por esses agentes em algum momento de suas vidas. Por fim, este estudo contribui para o conhecimento sobre a epidemiologia das rickettsioses no estado de Goiás, realizando a primeira detecção de anticorpos anti-Rickettsia rickettsii, R. parkeri e R. bellii pela RIFI em cães, indicando que esses agentes podem estar circulando na população canina analisada.

Spotted fever group rickettsial infection in dogs and their ticks from domestic-wildlife interface areas in southeastern Brazil / Infecção por rickettsias do Grupo da Febre Maculosa em cães e carrapatos de áreas de interface doméstico-silvestre no sudeste Brasileiro

Abstract Rickettsia rickettsii is the causative agent of Brazilian spotted fever (BSF), for which humans and dogs are both susceptible. Dogs are sentinels in serological surveys, however, canine disease is rarely reported. Therefore, we aimed to evaluate natural infection by spotted fever group (SFG) Rickettsia spp. in dogs and ticks collected from domiciles close to forest fragments, featuring domestic-wildlife interface areas. Samples from 115 dogs and 135 ixodids were assessed by polymerase chain reactions (PCR) targeting the gltA gene for Rickettsia spp. and the ompA gene for the SFG rickettsial species. One dog (0.87%; 1/115) was positive for R. rickettsii. This dog presented nonspecific laboratory and clinical abnormalities (thrombocytopenia, hyperproteinemia, lymph node enlargement, emaciation, anorexia, and lethargy). Rickettsia parkeri was identified in 2.96% (4/135) of the ticks (Amblyomma sculptum, A. aureolatum, and Rhipicephalus sanguineus). This study confirmed the presence of SFG bacteria in non-endemic and preserved locations, where domestic and wild populations interact. We reinforce the fact that the dog is susceptible to natural R. rickettsii infection. Although this is a rare finding, preventive measures should be taken against BSF in the studied areas. Finally, R. parkeri infection is possibly being demonstrated in A. sculptum for the first time.

Resumo Rickettsia rickettsii é o agente causador da Febre Maculosa Brasileira (FMB), doença na qual humanos e cães são susceptíveis. Os cães são sentinelas nos inquéritos sorológicos, contudo, a doença canina é raramente descrita. Assim sendo, objetivou-se avaliar a infecção natural por Rickettsia spp. do Grupo da Febre Maculosa (GFM) em cães e carrapatos obtidos de domicílios próximos a fragmentos de mata, caracterizando áreas de interface doméstico-silvestre. Amostras de 115 cães e 135 ixodídeos foram avaliadas pela reação em cadeia da polimerase (PCR) tendo como alvo o gene gltA de Rickettsia spp. e o gene ompA das espécies do GFM. Um cão (0,87%; 1/115) foi positivo para R. rickettsii. Este animal apresentou alterações clínicas e laboratoriais inespecíficas (trombocitopenia, hiperproteinemia, linfonodos edemaciados, emagrecimento, anorexia e letargia). Rickettsia parkeri foi identificada em 2,96% (4/135) dos carrapatos (Amblyomma sculptum, A. aureolatum e Rhipicephalus sanguineus). Este estudo confirmou a presença de bactérias do GFM em locais preservados e não endêmicos, onde populações domésticas e silvestres interagem. Reforçamos o fato do cão ser susceptível à infecção natural por R. rickettsii. Embora este seja um achado raro, medidas preventivas devem ser tomadas contra a FMB nas áreas estudadas. Em última análise, a infecção por R. parkeri possivelmente está sendo demonstrada pela primeira vez em A. sculptum.