Equine yolk sac: a stem cells source / Saco vitelino equino: una fuente de células madre

SUMMARY: Mesenchymal stem cells are characterized by in vitro high proliferation and multilineage potential maintenance. This study aimed to isolate and characterize equine YS mesenchymal stem cells and compare these with amniotic membranes. The yolk sac (YS) and amniotic membranes (AM) were obtained from 20 pregnant mares with gestational age around 30 days. Cells were cultured in α-MEM supplemented with 15 % FBS, 1 % antibiotic solution, 1 % L-glutamine and 1 % nonessential amino acids. To cell characterization we used cytogenetic analysis, fibroblast colony-forming unit assays, cell growth curves, immunophenotyping, flow cytometry, differentiation assays and teratoma formation. Results: Both cell sources presented fibroblastoid and epithelioid-like format. The YS cells have lower colony formation potential then AM ones, 3 versus 8 colonies per 103 plated cells. However, YS cells grew progressively while AM cells showed steady. Both, the YS and amnion cells immunolabeled for Oct-4, Nanog, SSEA-3, cytokeratin 18, PCNA, and vimentin. In addition, presented mesenchymal, hematopoietic, endothelial and pluripotency markers in flow cytometry. Discussion: Both cell sources presented high plasticity and differed into osteogenic, adipogenic, and chondrogenic lineages, and no tumor formation in nude mice was observed. The results suggest that horse YS may be useful for cell therapy such as amnion-derived cells.

RESUMEN: Las células madre mesenquimales se caracterizan por una alta proliferación in vitro y un mantenimiento potencial de múltiples líneas. Este estudio tuvo como objetivo aislar y caracterizar las células madre mesenquimales del saco vitelino equinas y compararlas con las membranas amnióticas. Se obtuvo el saco vitelino (SV) y las membranas amnióticas (MA) de 20 yeguas preñadas con edad gestacional de aproximadamente 30 días. Las células se cultivaron en α -MEM suplementado con 15 % de FBS, 1 % de solución antibiótica, 1 % de L-glutamina y 1 % de aminoácidos no esenciales. Para la caracterización celular utilizamos análisis citogenéticos, ensayos de unidades de colonias de fibroblastos, curvas de crecimiento celular, inmunofenotipaje, citometría de flujo, ensayos de diferenciación y formación de teratomas. Ambas fuentes celulares presentaron formato fibroblastoideo y epitelioide. Las células SV tienen un potencial de formación de colonias más bajo que las de MA, 3 versus 8 colonias por 103 células en placa. Sin embargo, las células SV crecieron progresivamente mientras que las células MA se mostraron estables. Tanto las células YS como las células amnios están inmunomarcadas para Oct-4, Nanog, SSEA-3, citoqueratina 18, PCNA y vimentina. Además, presentó marcadores mesenquimales, hematopoyéticos, endoteliales y pluripotenciales en citometría de flujo. Ambas fuentes celulares presentaron alta plasticidad y diferían en linajes osteogénicos, adipogénicos y condrogénicos, y no se observó formación de tumores en ratones. Los resultados sugieren que el SV de caballo puede ser útil para la terapia celular, como las células derivadas de amnios.

Partial rescue of the Na+-Ca2+ exchanger (NCX1) knock-out mouse by transgenic expression of NCX1

The null mutation of cardiac Na+-Ca2+ exchanger (NCX1) gene in mice caused death of embryo in utero at embryonic day (ED) 9.0-9.5 and this embryonic lethality appears resulted from abnormal heart development. In the present study, we investigated whether transgenic re-expression of NCX1 in mutant cardiac myocytes could rescue these lethal defects. Transgenic mice expressing the canine NCX1 in a cardiac specific manner were bred into the NCX1 knock-out background but did not prevent the fetal lethality associated with the NCX1 null allele. However, the NCX1 knock-out embryos with an NCX1 transgene survived with heart beatings until ED 10.5 which was one day longer than the survival of the NCX1 knock-out embryos (ED 9.5). At ED 10.5, however, the partially rescued NCX1 embryos might have succumbed to the lack of an organized vasculature in the yolk sacs. The placental labyrinth layer was reduced in size and largely avascular. The transgenic re-expression of NCX1 rescued heart beatings and survived longer, but was still insufficient for the mice to be completely rescued. Importantly, NCX1 was observed to express in the yolk sac and the placenta of wild type mice. The results suggest that defects in extra-embryonic compartments are causal to the lethality, and that NCX1 may play an important role in establishing vascularization in extra-embryonic tissues.

Correlación entre embriocardia, saco vitelino y cuerpo lúteo en embarazo menor de diez semanas para eveluar su viabilidad y evolución

Existen reportes en la literatura mundial que, considerando algunos parámetros de ecografía temprana, hacen predicciones sobre le evolución del embarazo. Se pretendió demostrar estos hallazgos reportados universalmente para su aplicabilidad a la población que consulta al Hospital Militar Central, para la cual se realizaron ecografías transvaginales a 220 pacientes con embarazos menores de 10 semanas, en la Unidad de Ecografía Ginecoobstétrica del Hospital Militar Central o en la Unidad de Diagnóstico obstétrico y Ginecológico, (Obgyn), midiendo el diámetro del saco vitelino, cuantificando la embriocardia y valorando la presencia de cuerpo lúteo. Se realizó el seguimiento de las pacientes al final del período de estudio. Fueron excluidas 56 pacientes y con las 164 restantes no fue posible corroborar lo reportado en la bibliografía. Por tal motivo no podemos hacer ninguna predicción sobre el pronóstico del embarazo basados en las mediciones de ciertos parámetros por ecografía transvaginal en embarazos tempranos