Anti-PP₁P(k) (Tj(a)) Antibody in a Korean Female Patient with p Phenotype Confirmed by Genotyping

Serological and genetic study of a pedigree featuring a rare p phenotype / 中华医学遗传学杂志

<p><b>OBJECTIVE</b>To explore genetic background of a pedigree with a rare p phenotype from Guangdong province.</p><p><b>METHODS</b>The rare p phenotype was identified by a conventional serologic method. With genomic DNA of proband and family members extracted, exon 3 of alpha-(1,4)galactosyltransferase (A4GALT) gene was amplified with PCR and analyzed by direct sequencing. The mutation found in the pedigree was screened in a normal population using direct sequencing.</p><p><b>RESULTS</b>The proband and 4 family members with the rare p phenotype have all carried a point mutation c.100G>A (p.Val34Ile) in combination with a deletion-insertional mutation c.418_428del11ins34(p.Gln139Trpfs*72), which renders a compound mutation of A4GALT gene. One family member with P2 phenotype has carried a same heterozygous mutation. Of the 100 healthy donors, 5 have carried a heterozygous point mutation c.100G>A, and none carried the deletion-insertional mutation c.418_428del11ins34.</p><p><b>CONCLUSION</b>The rare p phenotype of the pedigree has resulted from a compound mutation of the A4GALT gene, which is in keeping with a recessive inheritance pattern of the p phenotype.</p>

Un caso de grupo sanguíneo raro: fenotipo p / A rare blood group: p phenotype

Un individuo con un fenotipo eritrocitario raro carece de uno o varios antígenos presentes en la mayor parte de la población de pertenencia. Cuando presenta el anticuerpo correspondiente, se pueden producir complicaciones perinatales, transfusionales y/o transplantológicas. Se presenta el caso de una embarazada aloinmunizada derivada a nuestro servicio en la semana 12 de su tercera gesta para su evaluación y seguimiento. El diagnóstico inmunohematológico le asignó el excepcional fenotipo "p" (aproximadamente 1/200 000 individuos), asociado con una mayor tasa de abortos espontáneos y a reacciones transfusionales graves cuando se transfunden unidades incompatibles. El estudio del gen A4GALT demostró la presencia de la mutación c.752C > T en doble dosis. Esta mutación lleva a un cambio de una prolina por una leucina en el residuo 251 de la 4-α-galactosiltransferasa. Por parto inducido por sufrimiento fetal, nace a las 36 semanas una bebé con prueba de antiglobulina (Coombs) directa negativa, eluido reactivo, con ictericia que requirió luminoterapia. Una semana después el neonato fue externado sin secuelas aparentes. Posteriormente, a raíz de una cirugía inminente y la improbabilidad de encontrar sangre compatible, se elaboró un plan para cubrir las posibles demandas. Este caso pone en evidencia la necesidad de contar a nivel nacional con un laboratorio de referencia de inmunohematología y un banco de sangre de grupos raros, que permita resolver con celeridad situaciones que requieran transfundir a estos individuos.

A rare blood group is usually defined as the absence of a high prevalence antigen or the absence of several antigens within a single blood group system. These individuals may develop clinically significant red cell antibodies to the high incidence red cell antigens they lack. A 33-year-old alloimmunized woman was referred to our center at the 12th week of her third pregnancy for evaluation and follow up. The laboratory work-up grouped her as belonging to "p" phenotype, associated with difficulties to find compatible blood for transfusion and a high incidence of recurrent miscarriage. At 36 weeks, a baby girl was born by induced labor due to fetal suffering. With a negative direct antiglobulin test but a positive elution test, she was in the neonatology ward for one week receiving luminotherapy. Homozygosity for a missense mutation at position 752 (c.752C > T) in the A4GALT gene was found to be responsible for the p phenotype. This mutation changes a proline to a leucine at codon 251 of the 4-α-galactosyltransferase. Recently, due to an imminent chirurgical intervention and the impossibility to have compatible blood available for transfusion, an autologous donation plan was designed to satisfy probable demand. This case showed the need for blood bank facilities capable to respond satisfactorily to these situations in Argentina. This would facilitate the storage of cryopreserved blood from individuals with rare blood groups for homologous use or to develop rare blood donors programs.

Ascaris lumbricoides: Capacidad inhibitoria relacionada al antígeno P1 / Ascaris lumbricoides: Inhibitory capacity in relation to P1 antigen

El Sistema de Grupo Sanguíneo P tiene un único antígeno: P1 que fue identificado en varias especies parásitas. El objetivo de este trabajo fue determinar la capacidad inhibitoria de A. lumbricoides en relación al antígeno P1. Se trabajó con 11 extractos parasitarios (EA). Para evaluar la capacidad inhibitoria de los extractos en relación a los epitopes P1, se realizó la técnica semicuantitativa de inhibición de la aglutinación. Se prepararon dos series de diluciones de anticuerpo monoclonal anti- P1; a la primera se le agregó PBS a todos los tubos y a la otra, igual volumen de EA. El sistema revelador fue una suspensión de eritrocitos P1. Se determinó el título del anticuerpo monoclonal en ambas series. Se consideró significativa la aglutinación cuando hubo una diferencia de 2 o más diluciones entre ambos títulos. De los 11 EA estudiados, 8 presentaron epitopes P1. A estos 8 extractos se les calculó el Poder Inhibitorio y se lo relacionó con su contenido proteico a los fines de poder comparar la capacidad inhibitoria entre los extractos. La técnica aplicada permitió evidenciar la presencia de epitopes del Sistema P en extractos de A. lumbricoides y comparar la capacidad inhibitoria de los extractos en relación a epitopes P1.

P Blood Group has a unique antigen: P1. It was identified in various parasite species. The aim of this work was to determine A. lumbricoides´s Inhibitory Capacity in relation to P1 antigen. The work was based on 11 parasite extracts (AE). The semiquantitative inhibition agglutination technique was used to assess the extracts´ Inhibitory Capacity in relation to P1 antigen. Two series of anti- P1 monoclonal antibody dilutions were prepared. PBS was added to the first series and an equal volume of AE to the second. Suspensions of P1 red cells were used as a revealing system. Monoclonal antibody titres were determined in both series. The agglutination was considered significative when there was a difference of two or more dilutions between the titres. Eight of the 11 extracts studied presented P1 epithopes. Inhibitory power of these 8 extracts was calculated and it was related with their protein concentrations to compare the Inhibitory Capacity among the extracts. The technique used made it possible to prove P System epithopes presence and to compare the extracts´ Inhibitory Capacity in relation to P1 epithopes.

Ascaris lumbricoides: epitopes del Sistema P por método de cinética de la hemaglutinación / Ascaris lumbricoides: P system epithopes by haemogglutination kinetics method

Experiencias previas demostraron epitopes P1 en Ascaris lumbricoides por inhibición de la aglutinación. La cinética de la hemaglutinación aplica la extinción óptica relativa producida por un haz de luz trasmitido a través de una suspensión de pequeñas partículas, y permite obtener una estimación paramétrica de la tasa de hemaglutinación. El objetivo de este trabajo fue utilizar este método para demostrar la presencia de epitopes del Sistema P en extractos de A. lumbricoides. La técnica de inhibición de la aglutinación permitió seleccionar 10 extractos: 3 con y 7 sin epitopes P1. Se registró la cinética de la reacción Control: anti- P1- eritrocitos - P1 y la cinética de la misma reacción, previo contacto del anticuerpo con el extracto. Se calcularon y se compararon los valores de ³ EOR % (variación en el porcentaje de extinción óptica relativa) para ambas reacciones. Los resultados evidenciaron la presencia de epitopes P1, que no habían sido detectados por inhibición de la aglutinación, en 3 extractos. Para los extractos restantes, hubo coincidencia entre los resultados obtenidos por los dos métodos. La cinética de la hemaglutinación es sencilla, rápida y fácilmente adaptable para las experiencias en que se necesite evaluar una reacción antígeno-anticuerpo a través de la hemaglutinación.

Summary Previous experiences have demonstrated P1 epithopes in Ascaris lumbricoides by inhibition agglutination. Haemogglutination kinetics applies the relative optical extinction produced on a light beam transmitted through a suspension of small particles, giving a parametric estimate of the haemagglutination rate.The aim was to use this method for the demonstration of P System epithopes presence in A. lumbricoides extracts. inhibition agglutination test enabled the selection of 10 extracts: 3 with and 7 without P1 epithopes. Kinetics of anti- P1 - P1 erythrocyte control reaction and kinectics of the same reaction with a previous contact between antibody and extract were registered. ³ EOR % values (relative optical extinction variation) for both reactions were calculated and compared between themselves. The results proved P1 epithopes presence in 3 extracts, which had not been detected by inhibition agglutination. The results coincided for the remaining extracts by both methods. Haemogglutination kinetics is simple and fast and it is easily adapted for experiences in which the investigator needs to assess the antibody-antigen reaction by haemogglutination.

P system antigenic determiners expression in Ascaris lumbricoides

The P System antigens have been detected in numerous parasites, bacterias and viruses, nevertheless the clinical significance is still unknown. The aim was to study the presence of P1 antigenic determiners in A. lumbricoides extracts by means of the use of 6 different monoclonal antibodies of well-known concentrations and Ig class. We worked with 14 A. lumbricoides extracts. Inhibition Agglutination Test was made in a bromelin enzymatic medium and 4 ºC temperature. Titre, Score and Sensitivity Parameter were determined for each monoclonal antibody against red cells suspension used as revealing system. Ten extracts inhibited the agglutination of all anti P1 monoclonal antibodies. The 4 remaining extracts only inhibited the agglutination of some of them. It is demonstrated that the extracts have P1 activity. This activity is independent of titre, Score, Sensitivity Parameter, concentration and Ig class and it depends on the epitope at which the monoclonal antibody is directed

Anticuerpo anti-P1 y embarazo / Antibody anti-P1 and pregnancy

La presentación de un embarazo en una mujer con anticuerpos anti-P1 positivo, los efectos fetales, el tratamiento y seguimiento del feto. Anti-P1 es asociada con insuficiencia de la placenta y la muerte del feto. Este es el primer caso en la literatura donde hubo recuperación del crecimiento durante el segundo y el tercer trimestre.

Asociación de marcadores eritrocitarios (ABO, MNSs, Rh, Lewis, P1) con recurrencias y anomalías anatómicas y funcionales en niños con infección del tracto urinario / Association of erythrocyt markers (ABO, MNSs, Rh, Lewis, P1) with recurrences and anatomical-functional abnormalities in children with urinary tract infection

Para contribuir a la identificación de niños con infección del tracto urinario con mayor riesgo de ubicación alta o baja, recurrencias y alteraciones radiológicas o ultrasonográficas (complicaciones) se estudiaron las asociaciones entre éstas y la distribución de marcadores eritrocitarios (ABO, MNSs, Rh, Lewis, P1) en 309 casos de infección urinaria. No se encontró asociación entre algún polimorfismo eritrocitario en particular con las mencionadas categorías, pero si entre el fenotipo P1 y la etiología Escherichia coli (OR=3,07; IC 95 porciento=1,13 a 8,6; p<0,02) y la ausencia de etiología no E. coli con el fenotipo B+(0/26) sin llegar a niveles de significación. Estos hallazgos sugieren que en niños con infección urinaria, estos fenotipos, por separado, probablemente tienen acciones independientes y aditivas

Grupo sanguíneo P1 y su relación con cicatriz renal en pacientes con infección urinaria / Blood group P1 and its relation to renal cicatrix in patients with urinary infection

En los últimos años se ha insistido en la relación que existiría entre la infección urinaria, la cicatriz renal y el subgrupo sanguíneo P. La infección urinaria, producida la mayoría de las veces por determinados tipos de E. coli tendría importancia en el daño renal dado que la E. coli tiene capacidad de adherirse al epitelio urinario por medio de fimbrias, reconociendo un receptor de estructura química relacionada, a su vez con el subgrupo P. Determinamos el subgrupo P1 en 30 niños con infección urinaria, reflujo vesicoureteral y sin cicatriz renal, comparándolo con otro grupo de igual cantidad de pacientes portadores de infección urinaria y reflujo, pero con cicatriz renal. El grupo P1 se encontró presente en 66,7%de los pacientes sin daño renal y en 56,7%de los que tenían cicatriz renal. Así, pues, no logramos demostrar que el subgrupo P1 sirva como marcador indirecto de riesgo de formación de cicatriz renal, ya que no hubo diferencias entre los dos grupos de pacientes estudiados

Anti-P1, allohemagglutinins associated with Clonorchis sinensis and opisthorchis viverrini infections in patients from Southeast Asia.

An automated assay of anti-P1 allohemagglutinins has been carried out on sera of 61 individuals from Southeast Asia : 28 with clonorchiasis, 18 with opisthorchiasis and 15 control subjects. Anti-P1 activity was detected in 61% of the opisthorchiasis sera, 57% of the clonorchiasis sera and in 26.6% of the control subjects. Their concentration, in the sera, was low in control subjects and exceptionally high in clonorchiasis and opisthorchiasis (up to 13 and 22 times the maximum concentration of the control subjects, respectively). In all cases the anti-P1 antibodies were of IgM class. The results suggested that Clonorchis and Opisthorchis were responsible for immunization of the patients, with P1 alloantigen.

Further study of Rh, Kell, Duffy, P, MN, Lewis and Gerbiech blood groups of the Thais.

Blood and saliva from unselected blood donors at the Blood Bank, Siriraj Hospital were studied. Two Kell positive, two Rh negative and one Gerbiech negative were found, which could be considered as rare blood type in Thailand. The commonest Rh gene complex was CDe (R11 and the presence of CDE (Rz) in this study are the usual pattern of people in Southeast Asia. Fya is very common as in other people of Asia. In the Lewis system, the incidence of Le (a + b -) was 28.48% which agree well with our previous report 30.9%. There were 410 out of 1,668, (23.17%) who were found to be Lea non-secretor and 95 of them have Lewis antibodies in their sera. Aberrant secretion patterns were also found in this study, 5 people were found to secrete A or B substances according to their blood groups but no H substance was detectable. Further investigation of Lewis groups and secretion in Thailand are needed.