RESUMEN
Streptococcus mutans y Streptococcus sobrinus han sido indicados como los principales agentes etiológicos de la caries dental. Sin embargo, los métodos microbiológicos y bioquímicos, disponibles actualmente en Chile, no permiten la rápida detección e identificación de estas bacterias. El objetivo de este trabajo fue implementar la metodología de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para detectar la presencia de S. mutans y S. sobrinus en saliva. Participaron de este estudio 51 escolares (5 a 17 años), provenientes de cinco diferentes colegios de la ciudad de Temuco; a los cuales se les realizó recuento de estreptococos del grupo mutans en saliva por método microbiológico y la diferenciación de especies por la técnica de PCR. Los resultados mostraron que la sensibilidad para la técnica de PCR fue 1000 UFC/mL de saliva, diez veces superior a la sensibilidad del método microbiológico utilizado (10.000 UFC/mL). Además, el análisis de la especificidad de la amplificación, evaluada por restricción enzimática, confirmó la presencia de las bacterias investigadas. La prevalencia de S. mutans fue de 88.2 por ciento y para S. sobrinus de 11.8 por ciento. La presencia conjunta de ambas bacterias fue observada en 7.8 por ciento de los individuos. En conclusión, podemos señalar que la metodología implementada es útil para la detección rápida de S. mutans y S. sobrinus en saliva.
Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus are the main causative organisms of dental caries. Nevertheless, the microbiological and biochemical methods, available at the moment in Chile, do not allow to the fast detection and identification of these bacteria. The aim of this investigation is implement the polymerase chain reaction (PCR) technique to detect the presence of S. mutans and S. sobrinus in saliva. A total of 51 schoolchildren (5 to 17 years old) from five different schools from Temuco city (Chile) participated in this study. The presence of salivary mutans streptococci was determined by microbiological method, and the species differentiation was assessed using PCR technique. The sensitivity for the PCR technique was 1000 cfu/mL of saliva, ten times superior to the sensitivity of the microbiological method used (10,000 cfu/mL). In addition, the analysis of the specificity of the amplification, evaluated by enzymatic restriction, confirmed the presence of the investigated bacteria. The prevalence of S. mutans was of 88.2 percent and for 5. sobrinus was 11.8 percent. The combined presence of both bacteria was observed in 7.8 percent of the individuals. In conclusion, the obtained results indicate that the implemented methodology is useful for the rapid detection of S. mutans and S. sobrinus in saliva.
Asunto(s)
Humanos , Masculino , Adolescente , Femenino , Niño , Reacción en Cadena de la Polimerasa , Saliva/microbiología , Streptococcus mutans/aislamiento & purificación , Streptococcus mutans/genética , Streptococcus sobrinus/aislamiento & purificación , Streptococcus sobrinus/genética , ADN Bacteriano/genética , Chile , Caries Dental/microbiología , Electroforesis en Gel de Agar , Medición de RiesgoRESUMEN
Dental caries is a transmissible infectious disease in which Streptococcus mutans is a principal protagonist. Although it is widely believed that pregnancy is harmful to teeth, the effect of pregnancy on the development of caries is not clear. Considering this situation, the aim of the present study was to evaluate the levels of infection and to differentiate bacterial species with cariogenic potential in pregnant women from the Araucania region in Chile, by bacteriological and molecular analysis. In this work, we evaluated 51 pregnant women aged 15 to 40 years. The results show that 100 percent of women are infected by mutans streptococci Group, and 70.6 percent exhibited high levels of infection (> 500.000 cfu/mL). The molecular analysis shows that Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus frequencies were 92.1 percent and 1.9 percent, respectively. In conclusion, our data suggest that pregnant women are a high risk group for caries development.
La caries dental es una enfermedad infecciosa, en la cual Streptococcus del grupo mutans, son los principales protagonistas. Aunque está ampliamente difundida la creencia de que el embarazo es perjudicial para la salud dental, el real efecto de esta condición sobre el desarrollo de caries aún no está claro. Considerando esta situación, el objetivo de nuestro trabajo fue evaluar los niveles de infección en mujeres embarazadas de la Región de La Araucanía (Chile) y diferenciar especies bacterianas con potencial cariogénico, de aquellas sin este potencial, mediante análisis bacteriológico y molecular. En el presente estudio fueron evaluadas 51 mujeres gestantes con edades que fluctuaron entre 15 y 40 años. Los resultados muestran que 100 por ciento) de las mujeres se encuentran infectadas por Streptococcus del grupo mutans, de las cuales 10,6 por ciento muestra un riesgo elevado de desarrollar caries (>500.000 ufc/ml). El análisis molecular mostró que las frecuencias de Streptococcus mutans y Streptococcus sobrinus fueron 92,1 por ciento y 1,9 por ciento, respectivamente. En conclusión, nuestros datos sugieren que las mujeres embarazadas son un grupo de alto riesgo para el desarrollo de caries dental.
Asunto(s)
Adolescente , Adulto , Femenino , Humanos , Embarazo , Caries Dental/microbiología , Complicaciones Infecciosas del Embarazo/microbiología , Streptococcus mutans/genética , Streptococcus sobrinus/genética , Chile , Índice CPO , Factores de Riesgo , Streptococcus mutans/aislamiento & purificación , Streptococcus sobrinus/aislamiento & purificaciónRESUMEN
The purposes of this study were to detect S. mutans and S. sobrinus by polymerase chain reaction (PCR) amplification, and to relate their presence to the incidence of dental caries in 42 Brazilian preschool children. Dental plaque samples were collected from the cervical margin of all erupted teeth of 5-6 years old children with primary dentition, using a sterile explorer. Examination of the dmft (decayed, missing, filled teeth) index, performed following the World Health Organization (WHO) caries diagnostic criteria, showed a 2.71 score. Prevalence of S. mutans and S. sobrinus was respectively, of 85.7 percent and 14.3 percent; no dental plaque sample was either positive or negative for both bacterial species. Children harboring either S. mutans or S. sobrinus presented the same caries prevalence. PCR showed good discriminative ability for differentiation between these species, and suggested that it is a technique suitable for epidemiological studies on mutans streptococci.
A presença de Streptococcus mutans e S. sobrinus, detectadas através da técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) foi comparada com a incidência de cárie dental em 42 crianças pré-escolares brasileiras. As amostras da placa dental foram obtidas utilizando-se um explorador estéril, o qual foi passado na margem cervical de todos os dentes erupcionados nas crianças de 5-6 anos de idade, as quais possuíam a dentição primária. Foi realizado um exame dental para a avaliação do índice ceod (índice de dentes decíduos cariados, extraídos por cárie ou obturados) de acordo com os critérios de diagnóstico de cárie preconizados pela Organização Mundial de Saúde (OMS). O índice ceod foi de 2,71. A presença de S. mutans e S. sobrinus foi detectada em 85,7 por cento e 14,3 por cento das crianças analisadas respectivamente, nenhuma amostra da placa dental foi positiva ou negativa para a presença das duas bactérias ao mesmo tempo. As crianças que apresentavam S. mutans ou S. sobrinus isoladamente apresentaram o mesmo índice de cárie. A técnica de PCR apresentou um grande poder discriminatório entre as duas espécies o que sugere que ela é adequada para estudos epidemiológicos no grupo mutans.