Análise molecular para Toxoplasma gondii em linguiças suínas defumadas / Molecular analysis for Toxoplasma gondii in smoked swine sausages

A toxoplasmose é causada pelo protozoário Toxoplasma gondii, o qual acomete os humanos através da ingestão de carne mal passada ou crua. O presente trabalho descreve o emprego de PCR em linguiças suínas defumadas (salames) para detecção de T. gondii, aliado a utilização do teste de imunofluorescência indireta na avaliação sorológica de suínos encaminhados para abate. No estudo, avaliaram-se 18 amostras de salames e 50 amostras de soro sanguíneo de suínos. Na PCR todas as amostras de salames se apresentaram negativas e no teste de imunofluorescência indireta 8% dos animais foram positivos para T. gondii. Embora PCR-negativas, as linguiças produzidas originaram-se de matéria-prima suína proveniente de estabelecimento de abate, cujo presente estudo identificou soroprevalência de 8% para o protozoário. Dessa forma, o consumo de carne mal passada ou crua e de produtos a base de carne crua, como os salames, devem ser evitados, principalmente, em grupos de risco como crianças e idosos.

Reproductive disorders caused by Toxoplasma gondii in sheep / Alterações reprodutivas causadas por Toxoplasma gondii em ovinos / Alteraciones reproductivas causadas por Toxoplasma gondii en ovinos

Toxoplasma gondii is a cosmopolitan, intracellular, obligatory parasite protozoan of importance to public and animal health. In sheep, this species is a causative agent of reproductive disorders. The main sign produced by T. gondii infection in this species is abortion, which causes economic losses to sheep ranching. The main purpose of this review is to summarize the abortion outbreaks and reproductive disorders caused by T. gondii infection in sheep, also addressing aspects of biology, diagnosis, prevention and control of the parasite.

Toxoplasma gondii es un parásito protozoario intracelular obligatorio cosmopolita, de importancia para la salud pública y animal. En la especie ovina es reconocido como agente causador de trastornos reproductivos. El principal síntoma producido por la infección con Toxoplasma en ovinos es el aborto, lo que provoca pérdidas económicas. Este artículo tiene como objetivo estudiar los brotes de aborto y alteraciones reproductivas causadas por la infección con T. gondii en la especie ovina, abordando también aspectos de la biología, diagnóstico, prevención y control del parásito.

Toxoplasma gondii é um parasito protozoário intracelular obrigatório cosmopolita de importância para saúde pública e animal. Na espécie ovina é reconhecido como agente causador de distúrbios reprodutivos. O principal quadro clínico causado pela infecção pelo Toxoplasma em ovinos é o abortamento, que causa perdas econômicas. O principal objetivo deste artigo é fazer um levantamento dos surtos de abortamentos e alterações reprodutivas causadas pela infecção por T. gondii na espécie ovina, abordando ainda aspectos da biologia, diagnóstico, prevenção e controle do parasito.

Detection of antibodies to Toxoplasma gondii in wild animals in Brazil

Toxoplasmosis is a worldwide zoonosis caused by an obligate intracellular protozoan parasite, Toxoplasma gondii, that affects all warm-blooded animals, including wild animals. The increased number of cases of parasitic infections is mainly due to the destruction of environmental conservation areas, which is driving wild animals out of their habitats and towards urban areas. In this study, the occurrence of T. gondii infection was investigated by the modified agglutination test (MAT) in 26 different species of run over and injured wild animals that were treated at a Brazilian university veterinary hospital, from June 2007 to August 2008. Of the studied animals, six (23.1%; CI95% 11.1-42.2%) had T. gondii antibodies, with titers equal to 10 (4; 66.7%) and 40 (2; 33.3%). The species Pseudalopex vetulus, Cerdocyon thous, Hydrochoerus hydrochaeris and Tapyrus terrestris had titers of 10, while Alouatta caraya and Puma concolor had titers of 40. There was no significant association regarding age, gender or purpose of care (p > 0.05). Carnivorous, herbivorous and omnivorous wild animals are potential sentinels of human toxoplasmosis, especially when wild felids are present, maintaining the environmental contamination.

Isolamento de Toxoplasma gondii em tecidos de ovinos destinados ao abate em um matadouro sem fiscalização sanitária do estado do Rio de Janeiro / Isolation Toxoplasma gondii in sheep tissues destined for slaughtering in a seaghterhouse without sanitary inspection in Rio de Janeiro / Aislamiento de Toxoplasma gondii en tejidos de ovinos destinados al masacre en un matadero sin vigilancia sanitaria en el estado de Rio de Janeiro

O principal objetivo deste estudo foi avaliar a presença do Toxoplasma gondii em tecidos de ovinos destinados ao abate sem fiscalização sanitária, por meio do teste molecular, determinando assim a porcentagem da infecção nos ovinos e o melhor órgão para o diagnóstico molecular. As amostras foram coletadas em um matadouro sem fiscalização sanitária localizado no Estado do Rio de Janeiro. No momento do abate foram coletados fragmentos de cérebro, coração, fígado, rim, pulmão e musculatura esquelética de 25 ovinos, totalizando 150 amostras para a análise molecular e histopatológica. Para verificar a associação entre os resultados obtidos, o teste de McNemar foi utilizado. Dos ovinos avaliados pela PCR, 64% (16/25) apresentaram DNA do agente parasitário em pelo menos um tecido avaliado. Além disso, nenhum tecido avaliado mostrou equivalência (P<0,05), ou seja, as variações existentes entre as marcações desses órgãos em relação à classificação geral do animal foram aleatórias, podendo ser usado qualquer tecido avaliado neste estudo para o diagnóstico molecular de T. gondii. Não foi possível encontrar parasitos de T. gondii nos tecidos avaliados pela histopatologia, porém as lesões microscópicas encontradas são sugestivas da infecção. Conclui-se que o consumo de carne e vísceras ovina crua ou mal cozida, devem ser consideradas como importantes fontes de infecção para os humanos, pois os resultados deste estudo demonstraram um nível elevado de infecção por toxoplasmose em ovinos abatidos sem fiscalização no RJ. Ainda, para diagnóstico de T. gondii pela PCR poderia ser escolhido um único órgão para representar o animal, evitando assim, gastos desnecessários.

The main objective of this study was to evaluate the presence of Toxoplasma gondii in tissues of naturally infected sheep sent to slaughter without prior sanitary inspection, by means of molecular testing to determine the percentage of infection in sheep and the best organ for molecular diagnosis. Samples were collected from a slaughterhouse without sanitary inspection located in the state of Rio de Janeiro. During slaughtering, fragments of brain, heart, liver, kidney, lung and skeletal muscle from 25 sheep were collected, resulting in a total of 150 specimens for molecular and histopathological analysis. McNemar test was used to identify the existence of an association among the results obtained. Sixty-four percent (16/25) of the sheep evaluated by PCR presented DNA from the parasitic agent in at least one of the tissues evaluated. However, none of the evaluated tissues presented equivalence (P<0.05), i.e., the existing variations in the markings of these organs in terms of the animal’s general classification were random, and any tissue evaluated in this study can be used for molecular diagnosis of T. gondii. T. gondii parasites were not detected in the tissues subjected to histopathological examination, but microscopic lesions found could be considered suggestive of infection. It is concluded that the consumption of raw or undercooked mutton meat and offals should be considered as an important source of infection for humans, since the findings of this study demonstrated a high level of toxoplasmosis infection in sheep slaughtered without prior sanitary inspection in Rio de Janeiro. In addition, it is suggested that, for PCR detection of T. gondii, a single organ can be chosen to represent the animal, thus avoiding unnecessary expenses.

El objetivo principal de este estudio fue evaluar la presencia de Toxoplasma gondii en tejidos de ovinos destinados a matanza sin fiscalización sanitaria, por medio de prueba molecular, determinando así el porcentaje de infección en los ovinos y el mejor órgano para el diagnóstico molecular. Las muestras han sido colectadas en un matadero sin inspección sanitaria ubicado en el Estado de Río de Janeiro. En el momento del abate se ha colectado fragmentos de cerebro, corazón, hígado, riñón, pulmón y músculo esquelético de 25 ovinos, totalizando 150 muestras para el análisis molecular e histopatológica. Para verificar la asociación entre los resultados obtenidos, se utilizó la prueba de McNemar. De los ovinos evaluados por PCR, 64 % (16/25) presentaron ADN del agente parasitario en al menos un tejido evaluado. Además, ningún tejido evaluado mostró equivalencia (P<0,05), es decir, las variaciones existentes entre las marcas de esos órganos en la clasificación general del animal fueron aleatorios, pudiendo ser utilizado cualquier tejido evaluado en este estudio para el diagnóstico molecular de T. gondii. No fue posible encontrar parásitos de T. gondii en los tejidos evaluados por histopatología, pero las lesiones microscópicas encontradas son sugestivas de infección. Se concluye que el consumo de carne y vísceras ovinas crudas o poco cocidas, deben ser consideradas como importantes fuentes de infección para el hombre, ya que los resultados de este estudio demostraron un alto nivel de infección de toxoplasmosis en ovinos sacrificados sin inspección en el Estado de RJ. También, para el diagnóstico de T. gondii por PCR podría ser elegido un solo órgano para representar el animal, evitando así, gastos innecesarios.

Prevalence and geographical distribution of Toxoplasma gondii in dogs in the urban area of Botucatu, SP, Brazil / Prevalência e distribuição geográfica do Toxoplasma gondii em cães na área urbana de Botucatu, SP, Brasil

Toxoplasmosis is a worldwide zoonosis caused by Toxoplasma gondii, and can infect a wide variety of animals including humans. Domestic animals can be an important sentinel population for infection in the community. Occurrence of T. gondii infection was assessed in dogs in the urban area of Botucatu city, SP, Brazil. In the sample, 10% rate for error estimate, 95% confidence interval, and 5% significance level were established. Serum samples were collected from dogs during a rabies vaccination campaign, and were processed using modified agglutination test (MAT). Blood samples were collected from 670 dogs, with homogeneous distribution in five regions in the urban area, representing 3.74% of 17,910 animals vaccinated. In this sample, 17.3% (116/670) dogs (68 – 58.6% female and 48 – 41.4% male) were positive for T. gondii infection (p<0.03). Regarding age of the infected dogs 4.6% (4/88) were younger and 95.4% (84/88) were older than one year (p<0.01); the age of 28 positive animals were undetermined. The serum titers of anti-T. gondii antibodies were: 16 (69.8%; 81/116), 64 (13.8%; 16/116), 256 (15.5%; 18/116), and 1024 (0.9%; 1/116). Prevalence was distributed among the North 14.2% (19/134), South 18.0% (31/172), East 15.7% (19/121), West 21.6% (27/125), and Central 16.9% (20/118) regions of the municipality (p=0.5). In all these regions, females and dogs aged more than one year showed a higher occurrence of T. gondii infection (p<0.05).

Toxoplasmose é uma zoonose de distribuição mundial causada pelo Toxoplasma gondii, que pode infectar uma grande variedade de animais, inclusive seres humanos. Animais domésticos podem ser sentinelas importantes para infecções na comunidade. Ocorrência de infecção pelo T. gondii foi avaliada em cães na área urbana de Botucatu (SP, Brasil). Para amostragem, considerou-se uma taxa de erro na estimativa de 10%, um intervalo de confiança de 95% e um nível de significância de 5%. As amostras de sangue dos cães foram coletadas durante uma campanha de vacinação antirrábica e processadas usando-se o teste de aglutinação modificado (MAT). Foram coletadas 670 amostras de sangue, com distribuição homogênea em cinco regiões da área urbana, representando 3.74% dos 17.910 cães vacinados. Dessa amostra, 17,3% (116/670) dos cães, sendo 58,6% (68/116) fêmeas e 41,4% (48/116) machos, foram positivos para infecção pelo T. gondii (p<0,03). Entre os cães infectados 4,6%; (4/88) deles tinham idade menor e 95,4% (84/88) maior que um ano (p<0,01); em 28 animais positivos a idade não era conhecida Os títulos séricos de anticorpos anti-T. gondii estavam distribuídos entre 16 (69,8%; 81/116), 64 (13,8%; 16/116), 256 (15,5%; 18/116) e 1024 (0,9%; 1/116). Os animais positivos estavam distribuídos nas regiões Norte 14,2% (19/134), Sul 18,0% (31/172), Leste 15,7% (19/121), Oeste 21,6% (27/125) e Centro 16,9% (20/118) do município (p=0,5). Em todas essas regiões, fêmeas e animais com mais de um ano de idade tiveram maior taxa de positividade para a infecção (p<0.05).

Reproductive failures associated with antibodies against caprine arthritis-encephalitis virus, Toxoplasma gondii and Neospora caninum in goats in the state of Sao Paulo, Brazil / Falhas reprodutivas associadas com a presença de do vírus da artrite-encefalite caprina, Toxoplasma gondii e Neospora caninum em caprinos no estado de São Paulo, Brasil

This study aimed at assessing the occurrence of antibodies against the caprine arthritis-encephalitis virus (CAEV), Toxoplasma gondii and Neospora caninum, as well as the associations between the presence of antibodies and the occurrence of reproductive failures in goats. Serum samples were collected from 923 goats of both sexes, over 3 months of age, from 17 dairy farms located in different municipalities of São Paulo State, Brazil. Infections by T. gondii, N. caninum and CAEV were evaluated by indirect methods of diagnosis based on indirect fluorescence antibody test (IFAT), Neospora agglutination test (NAT), and agar gel immunodiffusion (AGID), respectively. A survey was conducted on the farms to obtain information about reproduction dates (abortions, stillbirths and births of weak and premature kids) and zoosanitary management. Antibodies against CAEV, T. gondii and N. caninum was found in 37.81%, 23.62% and 17.23% respectively. There was no significant association between the presence of anti-CAEV antibodies and CAEV/T. gondii or CAEV/N. caninum co-infection, suggesting that CAEV does not predispose goats to infection by these agents. However, when CAEV/T. gondii (p<0.01) or CAEV/N. caninum (p<0.001) co-infection was present, the occurrence of reproductive failures was significantly higher what could indicate that CAEV-induced immunosuppression may predispose goats to develop the clinical symptoms of toxoplasmosis and neosporosis increasing the risks of the reproductive failures.

O objetivo do presente estudo foi avaliar a ocorrência de anticorpos para o vírus da atrite-encefalite caprina (CAEV), Toxoplasma gondii e Neospora caninum e de possíveis associações entre a presença de anticorpos e a ocorrência de problemas reprodutivos em caprinos. Para tanto, foram colhidas amostras sangüíneas de 923 caprinos de ambos os sexos, acima de três meses de idade e oriundos de 17 propriedades leiteiras, de diferentes municípios do estado de São Paulo, Brasil. Os diagnósticos para T. gondii, N. caninum e CAEV foram baseados, respectivamente, na reação de imunofluorescência indireta (RIFI), teste de aglutinação para Neospora (NAT) e a imunodifusão em gel de ágar (IDGA). Um inquérito epidemiológico foi aplicado nas propriedades para obtenção de informações sobre dados reprodutivos (abortamentos, natimortalidade e nascimentos de filhotes fracos e prematuros) e de manejo zoossanitário. As ocorrências de anticorpos foram de 37,81% para CAEV, de 23,62% para T. gondii e de 17,23% para N. caninum. Não houve associação significativa entre a presença de anticorpos anti-CAEV e co-infecção com T. gondii ou N. caninum, sugerindo que o CAEV não predispõe os caprinos à infecção por estes agentes. Entretanto, quando havia, nas fazendas, animais com co-infecção pelo CAEV e T. gondii (p<0,01) ou CAEV e N. caninum (p<0,001) as ocorrências de falhas reprodutivas foram significativamente maiores, sugerindo que a imunossupressão causada pelo CAEV pode predispor os caprinos ao desenvolvimento de sintomas clínicos da toxoplasmose e neosporose, potencializando os riscos da ocorrência de problemas reprodutivos causados por estas enfermidades.

Fatores associados a soroprevalência de neospora caninum e toxoplasma gondii em rebanhos caprinos na região sul de Minas Gerais / Factors associated to seroprevalence of neospora caninum and toxoplasma gondii in caprine herds in southern Minas Gerais state, Brazil

Este estudo estabelece a soroprevalência de Neospora caninum e Toxoplasma gondii em rebanhos caprinos no Sul de Minas Gerais e verifica a sua associação com o desempenho reprodutivo dos rebanhos analisados, uma vez que não há dados sobre neosporose em caprinos neste Estado. Amostras de soro de 401 caprinos provenientes de 11 propriedades foram submetidas à reação de imunofluorescência indireta anti-N. caninum e T. gondii. A prevalência média de animais positivos foi de 10,7% e 21,4%, respectivamente. Houve diferença significativa entre as faixas etárias. Neste quesito os maiores índices de positividade, para ambos os parasitas, foram observados nos caprinos acima de três anos de idade. Estes apresentaram uma probabilidade 2,6 e 4,8 maior, em relação aos animais de até um ano de idade, para N. caninum e T. gondii, respectivamente. No teste T não houve associação positiva entre as médias de prevalência de N. caninum (p=0,553) e T. gondii (p=0,098) com a ocorrência de problema reprodutivo nos rebanhos. Porém, propriedades com histórico de problemas reprodutivos apresentaram uma média de reagentes para N. caninum de 18,64%, se comparadas a 13,97% de criatórios que não relataram essas alterações. Quando os problemas reprodutivos foram separados em categorias a relação entre a ocorrência de aborto e a soroprevalência de N. caninum e de T. gondii foi significativa (p<0,05) por meio dos testes Exato de Fisher e Qui-quadrado. Não houve diferença (p>0,05) entre as médias de prevalência de T. gondii e o acesso de gatos ao rebanho no teste T. Entretanto, a média de prevalência nas propriedades em que os gatos tinham acesso foi de 31,01%, se comparada a 17,34% em criatórios onde não existiam gatos. Foi constatado o acesso de cães em 100% das propriedades. Os resultados obtidos neste estudo demonstram que N. caninum e T. gondii infectam caprinos no Sul de Minas Gerais e que estes parasitas podem estar associados à ocorrência de abortos nessa espécie animal.

This study determines the seroprevalences of Neospora caninum and Toxoplasma gondii in caprine herds in southern Minas Gerais state and investigates their association with the reproductive performance of the herds analyzed since no data concerning neosporosis in goats in this state are available. Serum samples from 401 goats from 11 farms were subjected to indirect immunofluorescence reaction for the detection of N. caninum and T. gondii. The mean prevalence rates of animals that tested positive were 10.7% and 21.4%, respectively. Significant differences between different age groups were observed. The highest frequencies of positive cases for both parasites were observed in goats over three years of age; in this group, the probability of seropositivity for N. caninum and T. gondii was 2.6 and 4.8 times higher, respectively, when compared to animals up to one year of age. No positive correlation was found between the mean prevalence rate of N. caninum (p-0,553) and T. gondii (p=0.098) and the occurrence of reproductive problems in the herds using T-test. However, farms with a history of reproductive problems exhibited an average of 18.64% animals reactive to N. caninum, compared to 13.97% from farms where those problems were not reported. When reproductive problems were separated in category, the relationship between occurrence of abortion and seroprevalence of N. caninum and T. gondii was significant (p<0.05) using Fisher’s exact test and chi-square test. No difference was seen (p>0.05) between the mean prevalence rate of T. gondii of herds to which cats had access as compared to herds that had no contact with cats using a Ttest. However, the mean prevalence rate in farms where cats had access to the herd was 31.01% as compared to 17.34% in farms where there were no cats. Access of dogs was observed in 100% of the farms...

Effects of aqueous leaf extracts of Azadirachta indica A. Juss. (neem) and Melia azedarach L. (Santa Barbara or cinnamon) on the intracellular development of Toxoplasma gondii / Efeito de extrato aquoso de folhas de Azadirachta indica A. Juss. (nim) e Melia azedarach L. (canela ou Santa Bárbara) sobre o desenvolvimento intracelular de Toxoplasma gondii

Melia azedarach (cinnamon) and Azadirachta indica (neem) have a variety of biologically active ingredients against virus, bacteria and protozoan parasites; however, little is known about their action on Toxoplasma gondii intracellular development. Toxoplasma gondii infects all eukaryotic cells, where it establishes and multiplies inside a modified vacuole called the parasitophorous vacuole until the cell ruptures, re-infecting other cells and establishing the infection. There are no efficient chemotherapies for the elimination of T. gondii, minimizing side effects. In this study, we performed in vitro assays with neem and cinnamon aqueous extracts against the intracellular development of T. gondii tachyzoites. After treatment with neem and cinnamon for 24 h, the percentage of infected cells and the number of intracellular parasites drastically decreased. This effect was concentration-dependent. During the incubation of the extracts, progressive morphological and ultrastructure alterations led to intense vesiculation and complete elimination of the parasite from the intracellular medium. However, during the treatment with extracts, no morphological effects were observed in the structure of the host cell. These results suggest that the aqueous extracts of neem and cinnamon were capable of interfering with and eliminating the intracellular development of Toxoplasma gondii.

Melia azedarach (canela) e Azadirachta indica (nim) apresenta grande variedade de ingredientes biologicamente ativos contra vírus, bactérias e protozoários, mas nenhum efeito sobre o desenvolvimento intracelular do Toxoplasma gondii é conhecido. Toxoplasma gondii infecta todos os tipos de células Eucarióticas, onde se estabelece no meio intracelular em vacúolo modificado conhecido como vacúolo parasitóforo. Neste vacúolo ocorre a replicação levando a ruptura da célula hospedeira e reinfecção de novas células, perpetuando a infecção. A quimioterapia utilizada não é capaz de eliminar o parasita além de induzir fortes efeitos colaterais. Neste estudo, nós demonstramos o efeito in vitro de extratos aquosos da canela e nim sobre o desenvolvimento intracelular do taquizoíto do Toxoplasma gondii. Após tratamento de nim e canela por 24 h, a porcentagem de infecção e o número de taquizoítos intracelulares decaiu drasticamente. Este efeito foi concentração-dependente. Durante incubação dos extratos, uma progressiva desorganização morfológica e ultraestrutural levaram a formação de intensa vesiculação e completa destruição do parasita, que passou a uma estrutura amorfa, antes da completa eliminação do meio intracelular. No entanto durante o tratamento com os extratos, efeitos morfológicos não foram observados nas estruturas da célula hospedeira. Estes resultados sugerem que os extratos aquosos de nim e canela foram capazes de interferir e eliminar o desenvolvimento intracelular do Toxoplasma gondii.

Situación epidemiológica de la toxoplasmosis en Honduras / Epidemiology of toxoplasmosis in Honduras

La Toxoplasmosis es una infección producida por el protozoario coccidio Toxoplasma gondii,transmitida al hombre a través de ooquistes en las deposiciones de los gatos, quistes en carne crudao semicocida, trasplantes de órganos, transfusiones de sangre y transplacentaria. Es una de lasinfecciones más diseminadas en todo el mundo y creemos que Honduras no escapa a esa realidad, al reunir las condiciones epidemiológicas, climáticas y de saneamiento ambiental apropiadas al ciclo biológico del parásito. Se estudiaron 4.588 muestras de sangre tomadas en papel filtro, en los18 departamentos de Honduras. Se emplearon las técnicas ELISA e inmunofluorescencia indirecta(RIFI) IgG. Se encontró una seroprevalencia general de 48por cento por ELISA y 43por cento por RIFI. Entreambas hubo discordancia de 7,4por cento, a favor de la RIFI, que corresponden en el 90por cento de los casos a títulos bajos y probablemente a razones técnicas al procesar el papel filtro ya que no se puedenrealizar diluciones menores en el caso de la RIFI. No se observó diferencia por sexo. Todas las edades se ven afectadas, desde 32por cento en los menores de 4 años a 58por cento en los mayores de 65 años. Lasmayores prevalencias por Departamentos, se observaron en Colón (74por cento) e Islas de la Bahía (71por cento). Las de menor prevalencia en Santa Bárbara (7por cento) y Olancho (15por cento). Las de mayor prevalencia corresponden a poblaciones cerradas, mientras que las otras son poblaciones dispersas...

Anticorpos IgG anti-neospora caninum e toxoplasma gondii em búfalas (Bubalus bubalis) criadas no estado do Pará / Occurrence of IgG antibodies anti-neospora caninum and toxoplasma gondii in female water buffaloes (Bubalus bubalis) raised in the Brazilian state of Pará

Para determinar a ocorrência de anticorpos IgG anti-Neospora caninum e Toxoplasma gondii em 14 unidades produtivas de búfalos, situadas em 13 municípios no estado do Pará, foram coletadas amostras de soro sanguíneo de 374 fêmeas adultas. Os soros foram submetidos à reação de imunofluorescência indireta (RIFI), utilizando-se os títulos 200 e 64, respectivamente como ponto de corte para N. caninum e T. gondii. Obteve-se 153 (40,9 por cento) de animais soropositivos para N. caninum com 100 por cento das propriedades com focos da infecção, enquanto que quatro búfalas (1,1 por cento) foram soropositivas em quatro fazendas para T. gondii e uma búfala (0,27 por cento) foi soropositiva para ambos parasitos. A presença de anticorpos é um indicativo da circulação desses protozoários em búfalos das propriedades estudadas, representando uma fonte de infecção para outros animais, assim como o possível envolvimento em distúrbios reprodutivos nessa espécie.

To investigate the occurrence of antibodies IgG anti-Neospora caninum and Toxoplasma gondii, blood samples were collected from 374 adult female water buffaloes originated from 14 production units located in 13 counties of the state of Pará. The sera were subjected to indirect fluorescent antibody (IFA), using titers of 200 and 64 as IFA cut off points for N. caninum and T. gondii, respectively. Hundred and fifty three (40.9 percent) buffaloes were sero-positive for N. caninum, with 100 percent of the properties being sources of infection. Four buffaloes (1.1 percent) in four farms were seropositive for T. gondii, and one buffalo cow (0.27 percent) was seropositive for the two parasites. The presence of antibodies indicates that these protozoan parasites are circulating among buffaloes from the properties studied, representing a source of infection to other animals, as well as a possible cause of reproductive disorders in this species.

Occurrence of antibodies to Neospora caninum and Toxoplasma gondii in dairy cattle from the northern region of the Paraná State, Brazil

Foram analisadas, por meio da imunofluorescência indireta, 385 amostras de soros de vacas, pertencentes a 90 propriedades leiteiras de 12 municípios da região Norte do estado do Paraná. Foram observados 45 (12%) sororeagentes ao Neospora caninum e 102 (26%) ao Toxoplasma gondii. Apenas quatro animais apresentaram títulos de anticorpos para ambos os coccídios. Não foi observada diferença significativa na associação entre a sorologia do N. caninum e as variáveis relacionadas ao manejo, produção de leite, problemas reprodutivos, alimentação, presença de cães, gatos e roedores. Os resultados sugerem que neosporose e toxoplasmose estão disseminadas nos rebanhos leiteiros da região Norte do estado do Paraná, e a freqüência simultânea de anticorpos anti-N. caninum e anti-T. gondii, demonstra sua ocorrência independente em vacas leiteiras.

Soroprevalência do Toxoplasma gondii em galinhas (Gallus gallus domesticus) de criaçöes domésticas, oriundas de propriedades rurais do norte do Paraná, Brasil / Seroprevalence of Toxoplasma gondii in back yard chicken (Gallus gallus domesticus) from rural properties in north region of Paraná state, Brazil

O Toxoplasma gondii é um protozoário que pode infectar todos os animais homeotérmicos. No presente trabalho, verificou-se a ocorrência de anticorpos anti-T. gondii em galinhas de criaçöes domésticas (fundo de quintal), oriundas de propriedades rurais localizadas no município de Jaguapitä, Estado do Paraná, Brasil. Estudos prévios demonstraram que o parasita está amplamente disseminado nas diferentes espécies de animais domésticos, de companhia e no homem nessas mesmas propriedades. Os soros foram submetidos à reaçäo de Imunofluorescência Indireta, sendo a positividade considerada para àqueles títulos maiores ou iguais a l6. Foram estudados 155 soros, sendo que 16 (l0,3 por cento) foram reagentes à toxoplasmose, e 139 (89,7 por cento) näo reagentes. Os títulos mais frequentes foram de 64 (5/31,2 por cento), l6 e 1024 (ambos com 4/25 por cento) e o maior título encontrado foi de 1024 (4/25 por cento). A soroprevalência do T. gondii näo foi influenciada pelo sexo da ave (Exato de Fisher p = 0,12), pela finalidade da criaçäo (corte ou postura, Exato de Fisher p = 0,39), pela percentagem de felinos sororeagentes na propriedade (r = -0,19 p = 0,27), nem pelo número de felinos sororeagentes (r = -0,09 p = 0,60). Através do presente trabalho, demonstrou-se uma ocorrência elevada da resposta sorológica ao T. gondii em aves domésticas oriundas de propriedades rurais neste município, conseqüentemente esses animais podem representar risco de infecçäo para o homem e para outros animais quando consumidos crus ou mal cozidos.

Presence of anti-Toxoplasma antibodies in humans and their cats in the urban zone of Guadalajara

Los felinos son huéspedes definitivos de Toxoplasma gondii. Los gatos infectados excretan ooquistes en sus heces infectando a humanos y a otros animales. El propósito de este estudio fue determinar anficuerpos anti-Toxoplasma en dueños de gatos y sus mascotas y conocer si existía relación entre la infección por Toxoplasma en humanos que conviven con gatos infectados. Se determinaron anticuerpos anti-Toxoplasma IgG en 59 sueros de dueños de gatos por el método de ELISA (Sigma), y en 24 sueros de sus gatos anticuerpos IgG, IgM e IgA por ELISA de Burney. Los dueños de gatos fueron positivos a IgG anti-Toxoplasma 38/59 64 por cento. La seropositividad de gatos fue de 70.8 por cento IgG, 8.3 por cento a IgM y 62.5 por cento IgA. Cohabitar con gatos infectados por T. gondii dentro del hogar, alimentarlos con desechos de mesa o vísceras crudas y la falta de control de sus heces son factores de riesgo para adquirir infección por T. gondii en el humano

Acquired and congenital ocular toxoplasmosis experimentally induced in Calomys callosus (Rodentia, Cricetidae)

An experimental model for acquired and congenital ocular toxoplasmosis as well as a model to induce experimental autoimunne uveitis (EAU) was investigated in Calomys callosus. Toxoplasma gondii, ME-49 strain, was used to infect males and pregnant and not pregnant-females while S-antigen, a major glycoprotein of the retinal photoreceptor cell, was used to induce EAU. The ocular lesions elicited by T. gondii were characterized by the presence of cysts, free tachyzoites and inflammatory cells in the retina or related tissues. In the congenital form, 40 per cent of the fetus presented ocular lesions, i.e., presence of cysts in the retina, vitreous, and extra-retinal tissues. In the acquired form, 75 per cent of the females and 50 per cent of the males presented unilateral ocular cysts both at 21 and 47 days post-infection. It was also demonstrated that S-antigen was not uveitogenic in the C. callosus model. No lesion was observed in the animals exclusively immunized with this retinal component, even when jacalin was used as addicional adjuvant for polyclonal response to the retinal antigen. It can be concluded that C. callosus may constitue in a promising model for study both acquired and congenital ocular toxoplasmosis, particularly when it is important to make sure that a non autoimmune process is involved in the genesis of the ocular infection.

Atividade parasiticida e/ou parasitostática de fibroblastos e macrofagos humanos ativados por rIFN-y e/ou rTNF-x / Parasiticides activity and/or parasitostática of fibroblasts and macrophages activated by human rIFN-y and / or rTNF-x

Estudamos o papel da degradação do triptofano pela indoleamina 2,3-dioxigenase (INDO) no controle da replicação do T. cruzzi ou T. gondii em fibroblastos e macrófagos humanos estimulados com rIFN-gama e/ou rTNF-alfa. O T. gondii foi utlizado como controle, por ser sensível à degradação do triptofano induzida pelo rIFN-gama. A estimulação de fibroblastos humanos com rIFN-gama e o rTNF-alfa inibiu consideravelmente o desenvolvimento do T. gondii, mas não influenciou o desenvolvimento do T. cruzi. O desenvolvimento do T. gondii foi triptofano dependente, enquanto que o do T. cruzi foi triptofano independente. Ao contrário dos fibroblastos parentais, os fibroblastos defectivos na via de transdução de sinal do IFN-gama (JAKI, JAK2 e STAT1alfa) não modularam o desenvolvimento intracelular de T. gondii e nem expressaram mRNA da INDO quando estimulados pelo rIFN-gama. Houve uma pequena indução de mRNA da INDO em fibroblastos parentais e mutantes (JAK2) estimulados com rTNF-alfa, que provavelmente foi estimulado através da indução da síntese de IFN-es em fibroblastos humanos. O rIFN-gama e/ou rTNF-alfa induziram expressiva atividade tripanosomicida em macrófagos humanos. A estimulação de macrófagos humanos com rIFN-gama ou rIFN-gama + rTNF-alfa, produziu uma considerável expressão do mRNA da INDO, e pouca expressão foi detectada quando as células foram estimuladas apenas com rTNF-alfa. A adição de triptofano, ou do inibidor da INDO, norharmane, à cultura de macrófagos humanos ativados com rIFN-gama e/ou rTNF-alfa, não reverteu a inibição do crescimento do parasita, mostrando que a degradação do triptofano não é um mecanismo responsável pelo efeito tripanosomicida de macrófagos humanos ativados com rIFN-gama e/ou rTNF-alfa. Os catabólitos do triptofano (ácido quinolínico, ácido quinurênico e L-quinurenina) inibiram parcialmente o desenvolvimento do T. cruzi em macrófagos humanos. A amplificação por PCR do DNA T. cLsintese de Escherichia coli ou Neurospora crassa e Saccharomyces cerevisae e a hibridização cruzada via dot blot utilizando como sondas os produtos de PCR, sugerem a possibilidade da existência da enzima triptofano sintetase em T. cruzi, o que explicaria a insensibilidade do parasita à depleção do triptofano. Alternativamente reconhecemos que mais estudos devam ser feitos para a comprovação da existência da enzima em T. cruzi.

Atividade parasiticida e/ou parasitostática de fibroblastos e macrofagos humanos ativados por rIFN-y e/ou rTNF-x

Estudamos o papel da degradação do triptofano pela indoleamina 2,3-dioxigenase (INDO) no controle da replicação do T. cruzzi ou T. gondii em fibroblastos e macrófagos humanos estimulados com rIFN-gama e/ou rTNF-alfa. O T. gondii foi utlizado como controle, por ser sensível à degradação do triptofano induzida pelo rIFN-gama. A estimulação de fibroblastos humanos com rIFN-gama e o rTNF-alfa inibiu consideravelmente o desenvolvimento do T. gondii, mas não influenciou o desenvolvimento do T. cruzi. O desenvolvimento do T. gondii foi triptofano dependente, enquanto que o do T. cruzi foi triptofano independente. Ao contrário dos fibroblastos parentais, os fibroblastos defectivos na via de transdução de sinal do IFN-gama (JAKI, JAK2 e STAT1alfa)não modularam o desenvolvimento intracelular de T. gondii e nem expressaram mRNA da INDO quando estimulados pelo rIFN-gama. Houve uma pequena indução de mRNA da INDO em fibroblastos parentais e mutantes (JAK2) estimulados com rTNF-alfa, que provavelmente foi estimulado através da indução da síntese de IFN-es em fibroblastos humanos. O rIFN-gama e/ou rTNF-alfa induziram expressiva atividade tripanosomicida em macrófagos humanos.

A estimulação de macrófagos humanos com rIFN-gama ou rIFN-gama + rTNF-alfa, produziu uma considerável expressão do mRNA da INDO, e pouca expressão foi detectada quando as células foram estimuladas apenas com rTNF-alfa. A adição de triptofano, ou do inibidor da INDO, norharmane, à cultura de macrófagos humanos ativados com rIFN-gama e/ou rTNF-alfa, não reverteu a inibição do crescimento do parasita , mostrando que a degradação do triptofano não é um mecanismo responsável pelo efeito tripanosomicida de macrófagos humanos ativados com rIFN-gama e/ou rTNF-alfa. Os catabólitos do triptofano (ácido quinolínico, ácido quinurênico e L-quinurenina)inibiram parcialmente o desenvolvimento do T. cruzi em macrófagos humanos. A amplificação por PCR do DNA T. cLsintese de Escherichia coli ou Neurospora crassa e Saccharomyces cerevisae e a hibridização cruzada via dot blot utilizando como sondas os produtos de PCR, sugerem a possibilidade da existência da enzima triptofano sintetase em T. cruzi, o que explicaria a insensibilidade do parasita à depleção do triptofano. Alternativamente reconhecemos que mais estudos devam ser feitos para a comprovação da existência da enzima em T. cruzi

Experimental infection of Calomys callosus (Rodentia, Cricetidae) by Toxoplasma gondii

Calomys callosus, Renagger 1830 (Rodentia, Cricetidae), a wild rodent found in Central Brazil, was studied to investigate its susceptibility to Toxoplasma gondii experimental infection and its humoral immune response against this protozoa. The electrophoretic profile of the serum proteins of C. callosus showed that IgG, which shows no affinity to Protein A, has higher cross reactivity with rat IgG than with IgG from other rodents. The susceptibility assay was performed by inoculation groups of animals with various suspensions of T. gondii tachyzoites from 10² to 10 6 parasites. All animals died between 3 and 9 days after infection and the kinetics of andibody synthesis was determined. Basically, they recognized predominantly the immunodominant antigen SAG-1 (P30). The immunohistochemistry assays revealed that the liver was the most heavily infected organ, followed by the spleen, lungs, intestine, brain and kidneys. It can be concluded that C. callosus is an excellent experiment model for acute phase of Toxoplasma infection.

Toxoplasma gondii antigenuria in patients with acquired immune deficiency syndrome

A longitudinal study was performed with sera and urine of patients with acquired immune deficiency syndrome (AIDS), taken before, during and after clinically Toxoplasma infection. The tested patients were followed for an average of two years. The titres of the specific IgG and IgM antibodies were measured by an indirect fluorescent antibody test (IFAT), and the appearance of circulating antigens of T. gondii was determined in 36 urine samples of 13 patients with neurotoxoplasmosis by means of the coagglutination test. The presence of T. gondii antigens in the urine of AIDS patients by this test was correlated with the immunoblot technique, with clinical symptoms and also with pathological findings. Our results indicate that the detection of T. gondii antigens in the urine of AIDS patients can be regarded as a rapid and efficient method for the diagnosis of acute toxoplasmosis.