Proteomic Analysis of Toxoplasma gondii KI-1 Tachyzoites

We studied on the proteomic characteristics of Toxoplasma gondii KI-1 tachyzoites which were originally isolated from a Korean patient, and compared with those of the well-known virulent RH strain using 2-dimensional electrophoresis (2-DE), mass spectrometry, and quantitative real-time PCR. Two-dimensional separation of the total proteins isolated from KI-1 tachyzoites revealed up to 150 spots, of which 121 were consistent with those of RH tachyzoites. Of the remaining 29 spots, 14 showed greater than 5-fold difference in density between the KI-1 and RH tachyzoites at a pH of 5.0-8.0. Among the 14 spots, 5 from the KI-1 isolate and 7 from the RH strain were identified using MALDI-TOF mass spectrometry and database searches. The spots from the KI-1 tachyzoites were dense granule proteins (GRA 2, 3, 6, and 7), hypoxanthine-guanine-xanthine phosphoribosyltransferase (HGRPTase), and uracil phosphoribosyltransferase (UPRTase). The spots from the RH strain were surface antigen 1 (SAG 1), L-lactate dehydrogenase (LDH), actin, chorismate synthase, peroximal catalase, hexokinase, bifunctional dihydrofolate reductase-thymidylate synthase (DHTR-TS), and nucleoside-triphosphatases (NTPases). Quantitative real-time PCR supported our mass spectrometric results by showing the elevated expression of the genes encoding GRA 2, 3, and 6 and UPRTase in the KI-1 tachyzoites and those encoding GRA 7, SAG 1, NTPase, and chorismate synthase in the RH tachyzoites. These observations demonstrate that the protein compositions of KI-1 and RH tachyzoites are similar but differential protein expression is involved in virulence.

Effects of Toxoplasma gondii and Toxocara canis Antigens on WEHI-164 Fibrosarcoma Growth in a Mouse Model

Cancer is the main cause of death in developed countries. However, in underdeveloped countries infections and parasitic diseases are the main causes of death. There are raising scientific evidences indicating that parasitic infections induce antitumor activity against certain types of cancers. In this study, the effects of Toxoplasma gondii and Toxocara canis egg antigens in comparison with Bacillus Calmette Guerin (BCG) (known to have anticancer distinctive) on WEHI-164 fibosarcoma transplanted to BALB/c mice was investigated. Groups of 6 male BALB/c mice injected with T. gondii antigen, BCG, or T. canis egg antigen as case groups and alum alone as control groups. All mice were then challenged with WEHI-164 fibrosarcoma cells. The mice were examined for growth of the solid tumor and the tumor sizes were measured every other day up to 4 wk. The mean tumor area in T. gondii, BCG, or alum alone injected mice in 4 different days of measurements was 25 mm2, 23 mm2, and 186 mm2 respectively. Also the mean tumor area in T. canis injected mice in 4 different days was 25.5 mm2 compared to the control group (alum treated) which was 155 mm2. T. gondii parasites and T. canis egg antigens induced inhibition of the tumor growth in the fibrosarcoma mouse model. We need further study to clarify the mechanisms of anti-cancer effects.

Detection and characterization of excretory/secretory proteins from Toxoplasma gondii by monoclonal antibodies

Excretory/secretory proteins (ESP) from Toxoplasma gondii were analyzed to define the function in the penetration process into host cells. Whole ESP obtained at 37 degrees C were composed of 15 bands with molecular mass of 110, 97, 86, 80, 70, 60, 54, 42, 40, 36, 30, 28, 26, 22, and 19 kDa. Five ESP of 86, 80, 42, 36, and 28 kDa were reacted with monoclonal antibodies (mAb), named as Tg386 (microneme), Tg485 (surface membrane), Tg786 (rhoptry), Tg378, and Tg556 (both dense granules), respectively. The ESP was released by a temperature-dependent/-independent manner and all at once whenever ready to pour out except Tg786. Each ESP was not exhausted within the parasite but the amount was limited. Tg786 was released continuously with increment, whereas Tg378 and Tg556 were ceased to release after 3 and 4 hr. Dense granular Tg378 and Tg556 were released spontaneously and constitutively before the entry into host cells also. The entry of T. gondii was inhibited by all the mAbs differentially. And the parasite deprived of ESP was inhibited to enter exponentially up to 90.1%. It is suggested that ESP play an essential function to provide appropriate environment for the entry of the parasite into host cells.

Estudio serològico neonatal de infecciòn por Toxoplasma Gondii / Serologic neonatal study situdy of Toxoplasma Gondii infection / Annual reports 1995

Este es un estudio descriptivo de cohorte para determinar cual era la transmisiòn congènita de toxoplasmosis en recièn nacidos de madres seropositivas por medio de la detecciòn de anticuerpos IgG e IgM anti T. gondii al nacer, y por seguimiento durante el primer año de vida a 50 niños de madres que dieron a luz en tres maternidades del Paraguay. El motivo que nos llevò a realizar este estudio es que nuestro paìs algunos gineco-obstetras apoyan la teorìa de que la transmisiòn puede efectivizarse por reactivaciòn de una infecciòn crònica. La serologìa basal fue realizada en sangre de cordòn de 632 niños del Instituto de Previsiòn Social (IPS), en suero de 500 madres de la Maternidad del Hospital de Clìnicas y en suero de 346 madres de puestos de salud del Dpto. de San Pedro. Las seroprevalencias de infecciòn a T. gondii detectadas en estas poblaciones fueron de 70 por ciento y 72 por ciento y 89 por ciento respectivamente. La prueba serològica empleada en el tamizaje basal fue el mètodo de ELISA indirecto, y en el seguimiento el ELISA doble sandwich para la detecciòn de IgM anti T. gondii. Se detectò un solo caso positivo con probable infecciòn congènita en la poblaciòn basal de 632 niños estudiados en la Maternidad del Instituto de Previsiòn Social. En los resultados serològicos obtenidos en los 50 niños, todos dieron resultados negativos por la prueba para detecciòn de anticuerpos IgM anti T. gondii al nacer y durante el primer año de vida. Presentando uno de ellos, seroconversiòn a los 15 meses, probablemente por infecciòn adquirida. La ausencia de transmisiòn congènita de toxoplasmosis en los niños del estudio, cuyas madres tenian serologìa de infecciòn crònica apoya la teorìa mundialmente reconocida que el riesgo de transmisiòn es en aquellas madres con primoinfecciòn durante el embarazo. Por esta razòn en paìses como el nuestro donde el diagnòstico de infecciòn congènita es muy costoso, serìa conveniente realizar un estudio serològico previo al llegar la mujer a la edad fèrtil.

Estudio serològico neonatal de infecciòn por Toxoplasma Gondii / Serologic neonatal study situdy of Toxoplasma Gondii infection / Annual reports 1995

Este es un estudio descriptivo de cohorte para determinar cual era la transmisiòn congènita de toxoplasmosis en recièn nacidos de madres seropositivas por medio de la detecciòn de anticuerpos IgG e IgM anti T. gondii al nacer, y por seguimiento durante el primer año de vida a 50 niños de madres que dieron a luz en tres maternidades del Paraguay. El motivo que nos llevò a realizar este estudio es que nuestro paìs algunos gineco-obstetras apoyan la teorìa de que la transmisiòn puede efectivizarse por reactivaciòn de una infecciòn crònica. La serologìa basal fue realizada en sangre de cordòn de 632 niños del Instituto de Previsiòn Social (IPS), en suero de 500 madres de la Maternidad del Hospital de Clìnicas y en suero de 346 madres de puestos de salud del Dpto. de San Pedro. Las seroprevalencias de infecciòn a T. gondii detectadas en estas poblaciones fueron de 70 por ciento y 72 por ciento y 89 por ciento respectivamente. La prueba serològica empleada en el tamizaje basal fue el mètodo de ELISA indirecto, y en el seguimiento el ELISA doble sandwich para la detecciòn de IgM anti T. gondii. Se detectò un solo caso positivo con probable infecciòn congènita en la poblaciòn basal de 632 niños estudiados en la Maternidad del Instituto de Previsiòn Social. En los resultados serològicos obtenidos en los 50 niños, todos dieron resultados negativos por la prueba para detecciòn de anticuerpos IgM anti T. gondii al nacer y durante el primer año de vida. Presentando uno de ellos, seroconversiòn a los 15 meses, probablemente por infecciòn adquirida. La ausencia de transmisiòn congènita de toxoplasmosis en los niños del estudio, cuyas madres tenian serologìa de infecciòn crònica apoya la teorìa mundialmente reconocida que el riesgo de transmisiòn es en aquellas madres con primoinfecciòn durante el embarazo. Por esta razòn en paìses como el nuestro donde el diagnòstico de infecciòn congènita es muy costoso, serìa conveniente realizar un estudio serològico previo al llegar la mujer a la edad fèrtil