Evaluation of techniques for diagnosis of Trypanosoma vivax infections in naturally infected cattle in the Zona da Mata Mineira / Avaliação de técnicas para diagnóstico de infecções por Trypanosoma vivax em bovinos naturalmente infectados na Zona da Mata Mineira

Abstract This study aimed to evaluate diagnostic techniques for trypanosomiasis, caused by Trypanosoma vivax, in naturally infected cattle in Minas Gerais, Zona da Mata. The deaths of six lactating cows with similar clinical conditions—characterized by hyporexia, hypogalactia, and recumbency—had been reported from one property. Initially, two animals were examined and diagnosed with trypanosomiasis through identification of the protozoan in a blood smear. After the initial diagnosis, all lactating cows (n=37) on the property were examined, and blood samples were collected for tests including whole blood smear, buffy coat smear, Woo's technique, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and polymerase chain reaction (PCR). Woo's test, buffy coat smears, and whole blood smears indicated that 4/37 (10.81%) animals were positive for trypanosomiasis, whereas ELISA and PCR indicated that 33/37 (89.19%) and 27/37 (72.97%) animals, respectively, were positive. The agreement obtained between parasitological techniques was classified as high, while between ELISA and PCR, no agreement. In conclusion, parasitological techniques have a low capacity to identify infected animals in the chronic stage of T. vivax infection. Therefore, techniques such as PCR and/or ELISA should be used to minimize the occurrence of false negatives.

Resumo Este estudo objetiva avaliar as técnicas de diagnóstico da tripanossomíase, causada pelo Trypanosoma vivax, em bovinos naturalmente infectados, em Minas Gerais, Zona da Mata. A morte de seis vacas em lactação com condições clínicas semelhantes - caracterizadas por hiporexia, hipogalaxia e decúbito - foi relatada em uma propriedade. Inicialmente, dois animais foram examinados e diagnosticados com tripanossomíase através da identificação do protozoário em esfregaço sanguíneo. Após o diagnóstico inicial, todas as vacas em lactação (n = 37) na propriedade foram examinadas, e amostras de sangue foram coletadas para testes, incluindo esfregaço de sangue total, esfregaço de capa leucocitária, técnica de Woo, ensaio imunoenzimático (ELISA) e reação em cadeia da polimerase (PCR). O teste de Woo, os esfregaços de capa leucocitária e de sangue total indicaram que 4/37 (10,81%) animais foram positivos para tripanossomíase, enquanto ELISA e PCR indicaram que 33/37 (89,19%) e 27/37 (72,97%) animais, respectivamente, foram positivos. A concordância entre técnicas parasitológicas foi classificada como alta, enquanto entre ELISA e PCR, sem concordância. As técnicas parasitológicas apresentam baixa capacidade para identificar animais infectados na fase crônica da infecção por T. vivax. Dessa forma, técnicas como PCR e/ou ELISA devem ser utilizadas para minimizar a ocorrência de falsos negativos.

Comparison of conventional and molecular techniques for Trypanosoma vivax diagnosis in experimentally infected cattle / Comparação de técnicas convencionais e moleculares para diagnóstico em bovinos experimentalmente infectados por Trypanosoma vivax

Abstract Livestock infections by Trypanosoma vivax have been occurring with increasing frequency, mainly due to the presence of animals with subclinical infections and without apparent parasitaemia, making diagnosis challenging. The aim of the present study was to evaluate several techniques used for T. vivax diagnosis in order to assess the best way of using them during the course of the disease. Molecular methods demonstrated higher rates of detection than parasitological methods, detecting 33 of the 54 (61.1%) known positive samples, while the hematocrit centrifugation technique (best parasitological test) detected only 44.4%. The serological methods, IFAT and ELISA, detected seropositivity in 51 of the 54 (94.4%) and 49 of the 54 (90.7%) known positive samples, respectively. Despite being highly sensitive, the latter only demonstrates exposure to the infectious agent and does not indicate whether the infection is active. The present study was the first to use the qPCR for a South American isolate, improving disease detection and quantification. Furthermore, the analyses revealed that the patent phase of the disease may extend up to 42 days, longer than previously reported. The combination of several diagnostic techniques can lower the frequency of false negative results and contributes toward better disease control.

Resumo Infecções por Trypanosoma vivax têm ocorrido com frequência crescente em animais de produção, principalmente pela aquisição de animais com infecções subclínicas e sem aparente parasitemia, o que dificulta o diagnóstico. O objetivo do presente estudo foi avaliar várias técnicas empregadas para o diagnóstico de T. vivax, a fim de verificar a melhor maneira de utilizá-las durante o curso da doença. Os métodos moleculares demonstraram maiores taxas de detecção que os métodos parasitológicos, detectando 33 das 54 (61,1%) amostras sabidamente positivas, enquanto a técnica de hemoconcentração (melhor teste parasitológico) detectou apenas 44,4%. Os métodos sorológicos, RIFI e ELISA, detectaram soropositividade em 51 das 54 (94,4%) e 49 das 54 (90,7%) amostras sabidamente positivas, respectivamente. Apesar de serem altamente sensíveis, estes testes apenas demonstram a exposição ao agente infeccioso, e não indicam se a infecção permanece ativa. O presente estudo foi o primeiro a utilizar a qPCR para um isolado sul-americano, melhorando sua detecção e quantificação. Além disso, as análises revelaram que a fase patente da doença pode se estender por até 42 dias após a infecção, sendo maior que anteriormente relatado. A combinação de várias técnicas de diagnóstico pode evitar a frequência de resultados falso-negativos e contribuir para um melhor controle da doença.

Coxiella burnetii associated with BVDV (Bovine Viral Diarrhea Virus), BoHV (Bovine Herpesvirus), Leptospira spp, Neospora caninum, Toxoplasma gondii and Trypanosoma vivax in reproductive disorders in cattle / Coxiella burnetii associada ao BVDV (Vírus da Diarreia Viral Bovina), BoHV (Vírus do Herpes Bovino), Leptospira spp, Neospora caninum, Toxoplasma gondii e Trypanosoma vivax em distúrbios reprodutivos em bovinos

Abstract This is a cross-sectional study to assess the presence of antibodies in ruminants against selected pathogens associated with reproductive disorders in cattle in four Brazilian states, including the zoonotic agent Coxiella burnetii. The used tests were Virus Neutralization Assay for IBR and BVD, Microscopic Agglutination Test for Leptospira spp., Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) for C. burnetii and Toxoplasma gondii, and Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for Neospora caninum and Trypanosoma vivax. Seropositivity for C. burnetii was 13.7% with titers from 128 to 131,072; 57.8% for BoHV-1, with titers between 2 and 1,024; 47.1% for BVDV-1a, with titers from 10 to 5,120; 89.2% for N. caninum; 50% for T. vivax; and 52.0% for Leptospira spp., with titers between 100 to 800 (the following serovars were found: Tarassovi, Grippotyphosa, Canicola, Copenhageni, Wolffi, Hardjo, Pomona and Icterohaemorrhagiae); 19.6% for T. gondii with titer of 40. This is the first study that has identified C. burnetii in cattle associated with BoHV and BVDV, N. caninum, Leptospira spp., T. gondii and T. vivax. Thus, future studies should be conducted to investigate how widespread this pathogen is in Brazilian cattle herds.

Resumo Este é um estudo transversal para avaliar a presença de anticorpos em ruminantes contra patógenos selecionados e associados a distúrbios reprodutivos em bovinos de quatro estados brasileiros, incluindo o agente zoonótico Coxiella burnetii. Os testes utilizados foram Teste de Vírus-Neutralização para BoHV e BVDV, teste de Aglutinação Microscópica para Leptospira spp., Reação de Imunofluorescência Indireta for C. burnetii e Toxoplasma gondii, e Ensaio de Imunoabsorção Enzimática para Neospora caninum e Trypanosoma vivax. A soropositividade para C. burnetii foi de 13,7% com títulos de 128 a 131.072; 57,8% para BoHV-1, com títulos entre 2 a 1.024; 47,1% para BVDV-1a, com títulos de 10 a 5.120; 89,2% para N. caninum; 50% para T. vivax; e 52,0% para Leptospira spp., com títulos entre 100 a 800 (sorovares encontrados: Tarassovi, Grippotyphosa, Canicola, Copenhageni, Wolffi, Hardjo, Pomona e Icterohaemorrhagiae) 19,6% para T. gondii com título de 40. Este é o primeiro estudo que evidencia a participação de C. burnetii em bovinos associada ao Vírus da Rinotraqueíte bovina infecciosa e da diarreia viral bovina, N. caninum, Leptospira spp., T. gondii e T. vivax em bovinos. Desta forma, futuros estudos devem ser conduzidos a fim de investigar o quão disseminado se encontra este patógeno em rebanhos bovinos brasileiros.

Evaluation des manifestations neurologiques et psychiatiques de la trypanosomiase humaine africaine en deuxieme phase dans le foyer de L'Ouham; Republique Centraficaine

La trypanomiase humaine africaine (THAo) demeure encore un reel probleme de sante publique en Afrique. Le diagnostic de la THA est difficile et la maladie est letale sans traitement specifique .Cette maladie evolue en 2 phases ; hemo-lymphatique et neurologique ; De plus ; le diagnostic de l'atteinte nerveuse est difficile aux stades precoces avec le risque soit d'attribuer les traitements neurotoxiques au stade hemo-lymphatique et /ou d'engendrer des rechutes tardives quand le stade nerveux n' a pas ete identifie. Cependant; la nature; la duree les consequences et la liaison des manifestations neuropsychiatriques avec le traitement n'ont jamais ete etudiee precisement; le plus souvent par absences de procedure standardisee d'evaluation. Les auteurs ont effectue un recueil standardise des manifestations neurologiques et psychiatriques au cours de la THA en utilisant des echelles habituelles en clinique de neurologie et de psychiatrie et proposer un canevas de prise en charge afin de proposer des procedures simples et standardisees aux agents de sante des foyers de trypanosomiase. L'anxiete; la depression ainsi que les signes neurologiques ont pu etre depistes avec l'echelle de Goldberg; Minimental Test et le NeuroPsychiatric Inventory

Situation de la trypanosomiase humaine africaine dans le foyer de Nola-Salo-Bilolo en Republique Centrafricaine; 2005

En novembre-decembre 2005; les equipes techniques de l'Organisation de Coordination pour la lutte contre les Endemies en Afrique Centrale (OCEAC) et du Programme national de lutte contre la trypanosomiase humaine africaine de la Republique Centrafricaine (PNLTHA) ont procede a un depistage de la trypanosomiase humaine africaine dans le foyer historique de Nola-Salo-Bilolo en Republique Centrafricaine. Cette prospection a permis le diagnostic de 31 nouveaux cas de trypanosomiase; soit une prevalence de 0;44. Elle a permis egalement de mieux cerner les limites actuelles de ce vieux foyer et de constater que la circulation du parasite y est toujours importante. La maladie du sommeil y est actuellement contenue; mais il est essentiel que les efforts de lutte ne s'y relachent pas; faute de quoi l'endemie pourrait a nouveau connaitre une recrudescence preoccupante

Perte d'efficacite du depistage actif dans la lutte contre la trypanosomiase africaine en milieu urbain

Kinshasa est un ancien foyer de la trypanosomiase humaine africaine (THA) qui a repris peu a peu ses vieux attributs ces 10 dernieres annees. L'objectif de la presente etude consistait a evaluer l'efficacite des activites de lutte anti-THA dans l'environnement de Kinshasa; afin d'interpreter des resultats obtenus dans des conditions plus difficiles prevalant dans les autres regions endemiques. Pour ce faire; deux indicateurs ont ete utilises : le nombre de nouveaux cas (NC) en depistage actif (DA) et passif (DP) par an et le ratio nombre de cas au stade 2 sur nombre de cas au stade 1.De 2000 a 2005; 2666 NC ont ete depistes. Le nombre de cas enregistres; particulierement en DA; n'a cesse de decroitre de facon significative. Le ratio stade 2/1; pour le DP; etait passe de 5;4en 2000 a 14; 7en 2005 ; pour le DA; il etait passe de 0;3a 0;9. Le taux de couverture (TC) etait passe de 5;2en 2000 a 13m; 3en 2005. En conclusion; un TC aussi bas est suffisant; a lui tout seul; pour expliquer l'echec du DA a Kinshasa tout comme dans les autres regions endemiques de la RDC. En conclusion; il ne s'agit pas seulement d'adapter la strategie de depistage a la situation propre a la ville de Kinshasa; nous pensons au contraire que les observations faites a Kinshasa sont revelatrices d'une strategie globale d'une lutte qui s'enlise et qui doit etre repensee totalement

East African sleeping sickness in Chennai.

A traveler to East Africa developed fever, an eschar on his forearm and thrombocytopenia shortly after returning home to Chennai, India. Trypanosoma brucei rhodesiense infection was diagnosed on examination of his peripheral smear. He made a full recovery after receiving a course of suramin.