Vacina gênica (DNAhsp65) para tuberculose em camundongos neonatos / DNA vacine (DNA hsp65) to tuberculoses in newborn mice

O presente estudo foi proposto para investigar as características e a eficácia da resposta imune induzida pela vacina gênica para tuberculose em camundongos neonatos. A construção genética empregada continha o gene da hsp65 de M.Leprae inserida no vetor pVax. Foram objetivos específicos deste trabalho: avaliar a imunização no período neonatal induz tolerância; determinar a presença de mensagem para hsp65, através de PCR, nos vários tecidos; caracterizar a resposta imune induzida por vacinação integral com DNAhsp65 no período neonatal avaliar as características da resposta imune induzida pela estratégia BCG no período neonatal seguida de boosters com a vacina gênica no período adulto e avaliar a eficácia protetora desta estratégia. Os protocolos experimentais incluíram imunização integral (3 doses) no período neonatal (5, 12 e 19 dias de idade) com 50miug de DNA/ dose por via IM; 1 dose de DNA no quinto dia seguida de 1 ou 2 doses no período adulto (100miug/ via IM) ou 1 dose de BCG no quinto dia seguida de 2 doses de DNA no período adulto. As avaliações foram feitas com células dos camundongos normais, injetados com PBS ou previamente imunizados e estimuladas ex vivo com S. aureus, LPS ou ConA. Os sobrenadantes das culturas foram coletados após 48 h de incubação e as concentrações de IFN-gama, IL-4, IL-5 e IL-10 foram determinadas por ELlSA. A produção de anticorpos (lgG1 e IgG2a anti-hsp65) foi avaliada no soro dos animais também pelo método de ELlSA. A detecção de mensagem para hsp65 nos diferentes tecidos foi feita por RT -PCR. Trinta dias após a infecção por via intratraqueal, os pulmões dos animais previamente imunizados com o protocolo BCG/DNA, foram analisados quanto ao número de unidades formadoras de colônias (UFC), quantidade de IFN-gama e aspectos histopatológicos...

É possível uma vacina gênica auxiliar no controle da tuberculose? / Could a DNA vaccine be useful in the control of tuberculosis?

Vacinas de DNA, ainda em fase de experimentação e testes clínicos, podem se tornar uma importante ferramenta de combate a doenças infecciosas para as quais, até hoje, não existe prevenção segura e eficaz, como a tuberculose. Nos últimos anos vários estudos têm sido dedicados ao desenvolvimento de vacinas de DNA que codificam proteínas de micobactérias, entre as quais destacam-se as que codificam o antígeno 85 (Ag 85) e a proteína de choque térmico de 65 kDa (hsp65). Estes dois antígenos foram os mais estudados apresentando resultados bastante satisfatórios em ensaios pré-clínicos e com grande volume de dados registrados na literatura. Além de proteger contra infecção experimental por Mycobacterium tuberculosis virulenta, a vacina DNA-hsp65 também apresenta atividade terapêutica, ou seja, é capaz de curar os animais previamente infectados, inclusive aqueles com bacilos resistentes a múltiplas drogas. Esta vacina, hoje em avaliação clínica no Brasil também para o tratamento de câncer, é capaz de induzir a produção de citocinas de padrão Th1 tal como IFN- interferon-gama, associadas ao controle da doença. Além disso, a vacina de DNA-hsp65 é capaz de estimular clones de células CD8 citotóxicos e CD4 que podem ser caracterizados como células de memória sendo responsáveis por conferir imunidade duradoura contra a infecção. Quando utilizada na terapia da infecção, a vacina de DNA-hsp65 faz com que haja uma mudança no padrão de resposta imune, induzindo a secreção de citocinas de padrão Th1 criando um ambiente favorável à erradicação do bacilo. Os resultados demonstram ainda que a via de administração e a formulação na qual a vacina é administrada exerce fundamental influência no padrão e duração da resposta imune desencadeada. O conjunto de resultados hoje disponíveis mostra que uma vacina de DNA contra a tuberculose contribuirá de maneira significativa no controle desta doença.