RESUMEN
The delivery of transgenes to the central nervous system (CNS) can be a valuable tool to treat CNS diseases. Various systems for the delivery to the CNS have been developed; vascular delivery of viral vectors being most recent. Here, we investigated gene transfer to the CNS by intravenous injection of recombinant adenoviral vectors, containing green fluorescence protein (GFP) as a reporter gene. Expression of GFP was first observed 6 days after the gene transfer, peaked at 14 days, and almost diminished after 28 days. The observed expression of GFP in the CNS was highly localized to hippocampal CA regions of cerebral neocortex, inferior colliculus of midbrain, and granular cell and Purkinje cell layers of cerebellum. It is concluded that intravenous delivery of adenoviral vectors can be used for gene delivery to the CNS, and hence the technique could be beneficial to gene therapy.
Asunto(s)
Animales , Femenino , Ratones , Adenovirus Humanos/aislamiento & purificación , Barrera Hematoencefálica , Encéfalo/virología , Cerebelo/citología , Cerebelo/virología , Estudio Comparativo , Genes Reporteros , Vectores Genéticos/administración & dosificación , Vectores Genéticos/aislamiento & purificación , Vectores Genéticos/farmacocinética , Hipocampo/virología , Colículos Inferiores/virología , Inyecciones Intravenosas , Proteínas Luminiscentes/análisis , Proteínas Luminiscentes/biosíntesis , Proteínas Luminiscentes/genética , Ratones Endogámicos BALB C , Neuroglía/virología , Neuronas/virología , Células de Purkinje/virología , Células Piramidales/virología , Proteínas Recombinantes de Fusión/análisis , Proteínas Recombinantes de Fusión/biosíntesis , Proteínas Recombinantes de Fusión/genética , Cola (estructura animal)/irrigación sanguínea , Distribución TisularRESUMEN
Las formas más frecuentes de leishmaniosis en México son la leishmaniosis cutánea localizada (LCL), un padecimiento relativamente benigno, y la leishmaniosis cutánea diseminada (LCD), de evolución generalmente mortal. La caracterización fenotípica de parásitos aislados de pacientes con LCL y LCD ha revelado, que el agente casual de ambos cuadros clínicos de Leishmania mexicana mexicana. Sin embargo la resistencia a medicamentos y la virulencia inesperada en algunos pacientes hacen sospechar una posible introducción de nuevas especies en México o bien mutaciones intraespecie. En este trabajo realizamos un análisis genotípico del kADN de leishmanias aisladas de pacientes con LCL y LCD, mediante endonucleasas de restricción (Hae II.I y Hpa II) y RAPD (amplificacion aleatoria de ADN polimórfico con oligonucleótidos no específicos). Encontramos polimorfismo en las digestiones sugestivas de la introducción de nuevas especies en México, lo cual se tendrá que confirmar con PCR especie-especificos. Mediante el RAPD detectamos una ligera diferencia entre un paciente con LCD y otros con LCL. Esta variación intraespecie pudiera ser una de las posibles causas de diseminación del parásito.