Wuchereria bancrofti infection in Haitian immigrants and the risk of re-emergence of lymphatic filariasis in the Brazilian Amazon

Abstract INTRODUCTION: Lymphatic filariasis (LF) is a public health problem in Haiti. Thus, the emigration of Haitians to Brazil is worrisome because of the risk for LF re-emergence. METHODS: Blood samples of Haitian immigrants, aged ≥18 years, who emigrated to Manaus (Brazilian Amazon), were examined using thick blood smears, membrane blood filtration, and immunochromatography. RESULTS: Of the 244 immigrants evaluated, 1 (0.4%) tested positive for W. bancrofti; 11.5% reported as having received LF treatment in Haiti. CONCLUSIONS: The re-emergence of LF in Manaus is unlikely, due to its low prevalence and low density of microfilaremia among the assessed Haitian immigrants.

Evaluation of diagnostic tests for Wuchereria bancrofti infection in Brazilian schoolchildren

Introduction Since the launch of the Global Programme to Eliminate Lymphatic Filariasis, more than 70% of the endemic countries have implemented mass drug administration (MDA) to interrupt disease transmission. The monitoring of filarial infection in sentinel populations, particularly schoolchildren, is recommended to assess the impact of MDA. A key issue is choosing the appropriate tools for these initial assessments (to define the best intervention) and for monitoring transmission. Methods This study compared the pre-MDA performance of five diagnostic methods, namely, thick film test, Knott's technique, filtration, Og4C3-ELISA, and the AD12-ICT card test, in schoolchildren from Brazil. Venous and capillary blood samples were collected between 11 pm and 1 am. The microfilarial loads were analyzed with a negative binomial regression, and the prevalence and associated 95% confidence intervals were estimated for all methods. The accuracies of the AD12-ICT card and Og4C3-ELISA tests were assessed against the combination of parasitological test results. Results A total of 805 schoolchildren were examined. The overall and stratified prevalence by age group and gender detected by Og4C3-ELISA and AD12-ICT were markedly higher than the prevalence estimated by the parasitological methods. The sensitivity of the AD12-ICT card and Og4C3-ELISA tests was approximately 100%, and the positive likelihood ratios were above 6. The specificity of the Og4C3-ELISA was higher than that of the AD12-ICT at different prevalence levels. Conclusions The ICT card test should be the recommended tool for monitoring school-age populations living in areas with ongoing or completed MDA. .

Efeito do tratamento em massa com dietilcarbamazina na microfilaremia, antigenemia e anticorpos antifilariais em uma área endêmica do município de Olinda - PE / The effect of mass drug administration with single doses of diethylcarbamazine in microfilaremia, antigenemia e antifilarial antibodys in a endemic area in Olinda - PE

Este trabalho analisou o efeito do tratamento em massa com doses únicas anuais de Dietilcarbamazina (DEC), no período de 2007 a 2012, em indivíduos infectados por Wuchereria bancrofti, residentes em Olinda - PE. Para essa análise foram utilizadas as técnicas de filtração em membrana, na detecção da microfilaremia, o teste do cartão ICT e o Og4C3-ELISA, na detecção do antígeno circulante filarial, e o teste BM14 na avaliação dos níveis de anticorpos antifilariais. Os resultados obtidos indicam redução nas características avaliadas: após a quarta dose de DEC, a microfilaremia reduziu 100 por cento e a antigenemia pelo cartão ICT atingiu 78,1 por cento de redução após a quinta dose. A mediana do Og4C3 caiu significativamente de 7117 ua, para 1715 ua após a terceira dose, último ano que o teste foi realizado. Observou-se curva de redução também nos níveis de Bm14, com mediana da densidade ótica caindo de 2,1 para 0,1 após a quinta dose. A diminuição nas taxas das características estudadas indica que o tempo preconizado pela Organização Mundial de Saúde para a eliminação da transmissão da FL na área é suficiente para a negativação das microfilárias. Os resultados desse estudo mostram a elevada eficácia do esquema terapêutico utilizado no clareamento da microfilaremia e tratamento dos infectados, e sugerem que a utilização desse esquema na população possivelmente tenha levado a interrupção da transmissão na área. Sugere-se que haja um acompanhamento maior que cinco anos da população submetida ao tratamento para uma melhor avaliação dos níveis de anticorpos e de antigenemia filarial circulante...

Avaliação da acurácia de diferentes testes laboratoriais no diagnóstico da filariose em crianças e adolescentes / Evaluation of the accuracy of different laboratory tests for the diagnosis of filariasis in children and adolescents

Apesar de a filariose linfática (FL) ser considerada uma doença de adultos, estima-se que 22 milhões de crianças 15 anos de idade estejam infectadas no mundo. A Organização Mundial da Saúde tem recomendado o monitoramento da infecção nessa população. Este estudo teve como objetivo comparar a acurácia dos métodos parasitológicos e imunológicos no diagnóstico da filariose bancroftiana em escolares. O estudo foi desenvolvido em escolares, com idade entre 4 e 15 anos, residentes em três bairros do município de Olinda - Pernambuco, Brasil. As amostras de sangue capilar e venoso foram coletadas entre 23:00 e 1:00 hora da manhã. Em seguida, as amostras de sangue venoso foram guardadas para posterior realização das técnicas de filtração, concentração de Knott, Og4C3 - ELISA. Amostras de sangue capilar foram obtidas para confecção das lâminas de gota espessa e realização do teste rápido de imunocromatografia (ICT). As médias de densidade de microfilaremia foram calculadas em escala logarítmica. A acurácia dos testes foi avaliada em relação ao padrão-ouro (filtração). A especificidade do Og4C3 e ICT foi estimada utilizando a equação de Staquet et al. (1981). Um total de 805 escolares foi examinado. As médias de antigenemia filarial foram mais elevadas entre as crianças residentes nos bairros de alto da conquista e alto da bondade. As cargas parasitárias e os níveis de antigenemia não variaram com idade e sexo. A prevalência de microfilaremia pela técnica de filtração, de 5,2 por cento, foi a mais elevada em relação às demais técnicas parasitológicas. A prevalência de antigenemia filarial pelo teste Og4C3 foi de 17,4 por cento. Na comparação da acurácia dos testes em relação ao padrão-ouro, as técnicas de gota espessa e Knott apresentaram valores de sensibilidade de 85,2 por cento, inferiores aos testes ICT e Og4C3, que foi de 100 por cento. Conclui-se que as técnicas de filtração e Og4C3 são as mais apropriadas para a avaliação de transmissão em áreas com programas de eliminação em andamento.

Lymph scrotum: an unusual urological presentation of lymphatic filariasis: a case series study / Linfoescroto: apresentação rara de filaríase linfática: estudo retrospectivo

Lymphatic filariasis (LF) causes a wide range of clinical signs and symptoms, including urogenital manifestations. Transmission control and disability/morbidity management/control are the two pillars of the overall elimination strategy for LF. Lymph scrotum is an unusual urological clinical presentation of LF with important medical, psychological, social and economic repercussions. A retrospective case series study was conducted on outpatients attended at the National Reference Service for Filariasis, in an endemic area for filariasis (Recife, Brazil), between 2000 and 2007. Over this period, 6,361 patients were attended and seven cases with lymph scrotum were identified. Mean patient age was 45 years (range, 26 to 64 years). Mean disease duration was 8.5 years (range, two to 15 years). All patients had evidence of filarial infection from at least one laboratory test (parasitological, antigen investigation or "filarial dance sign" on ultrasound). Six patients presented histories of urological surgery. The authors highlight the importance of the association between filarial infection and the inadequate surgical and clinical management of hydrocele in an endemic area, as risk factors for lymph scrotum. Thus, filarial infection should be routinely investigated in all individuals presenting urological morbidity within endemic areas, in order to identify likely links in the transmission chain.

A filariose linfática (FL) é responsável por uma grande variedade de sinais e sintomas clínicos incluindo manifestações urogenitais. O controle da transmissão e da incapacitação bem como o manuseio da morbidade são os dois pilares da estratégia global de eliminação da FL. O linfoescroto é uma rara apresentação da FL, tendo importantes repercussões do ponto de vista clínico, psicológico e socioeconômico. Realizou-se um estudo retrospectivo de uma série de casos com diagnóstico de linfoescroto, identificados entre os 6.361 pacientes ambulatoriais atendidos no período de 2000 a 2007 no Serviço de Referência Nacional em Filarioses (Recife, Brasil) área endêmica de filariose. Foram identificados sete casos, com a idade média de 45 anos (com variação de 26 a 64 anos). O tempo médio de evolução da doença foi de 8,5 anos (com variação de 2 a 15 anos). Todos apresentavam evidência de infecção filarial por algum dos exames realizados (parasitológico, pesquisa antigênica ou "sinal da dança da filaria" na ultrasonografia). Seis pacientes relatavam historia prévia de cirurgia urológica. Os autores destacam a importância da associação da infecção filarial e de inadequado manuseio cirúrgico e de acompanhamento de pacientes com hidrocele de uma área endêmica, como fatores de risco para o surgimento de linfoescroto. Assim, a infecção filarial deve ser rotineiramente investigada em todos os indivíduos procedentes de áreas endêmicas apresentando morbidade urológica, para identificar melhor os elementos da cadeia de transmissão.

Comparison of tests for the detection of circulating filarial antigen (Og4C3-ELISA and AD12-ICT) and ultrasound in diagnosis of lymphatic filariasis in individuals with microfilariae

Significant advances were made in the diagnosis of filariasis in the 1990s with the emergence of three new alternative tools: ultrasound and tests to detect circulating antigen using two monoclonal antibodies, Og4C3 and AD12-ICT-card. This study aimed to identify which of these methods is the most sensitive for diagnosis of infection. A total of 256 individuals, all male and carrying microfilariae (1-15,679 MF/mL), diagnosed by nocturnal venous blood samples, were tested by all three techniques. The tests for circulating filarial antigen concurred 100 percent and correctly identified 246/256 (96.69 percent) of the positive individuals, while ultrasound detected only 186/256 (73.44 percent). Of the circulating antigen tests, ICT-card was the most convenient method for identification of Wuchereria bancrofti carriers. It was easy to perform, practical and quick.

Preliminary observations on fluids incubated with Wuchereria bancrofti using the immunochromatographic test / Observações preliminares de fluidos incubados com Wuchereria bancrofti usando o teste imunocromatográfico

To assess the performance of the immunochromatographic test for filariasis, adult Wuchereria bancrofti worms were incubated under different conditions. The tests were strongly positive with incubation fluids from both living and mechanically damaged females. Negative results were observed with incubation fluids from all male worms and from intact dead females.

Para a valiar o desempenho do teste imunocromatográfico para filariose, vermes adultos de Wuchereria bancrofti foram incubados em diferentes condições. Os testes foram fortemente positivos com fluidos de incubação de fêmeas vivas e danificadas mecanicamente. Resultados negativos foram obtidos com fluidos de todos os machos e de fêmeas mortas intactas.

Kinetics of microfilaraemia & antigenaemia status by Og(4)C(3) ELISA in bancroftian filariasis.

BACKGROUND & OBJECTIVE: Bancroftian filariasis caused by Wuchereria bancrofti is endemic in many parts of India. In recent years diagnosis of W. bancrofti infection has been revolutionized with the availability of filarial antigen tests, which is important in monitoring success of chemotherapy. We carried out this study to measure microfilariaemia and antigenemia levels in bancroftian microfilariae (mf) carriers at 1 yr follow up after chemotherapy, in lymphoedema patients and in endemic controls from a filariasis endemic area in Tamil Nadu State using Og(4)C(3) ELISA to identify the best marker to assess success of chemotherapy. METHODS: Serum samples were collected from 30 bancroftian microfilaremic (Mf) carriers pre-treatment and at sequential intervals (7,30,60,90,180 and 365 days) following treatment with diethylcarbamazine (DEC:6mg/kg body weight, single dose), 30 lymphoedema patients (without treatment) at periodic intervals, and 68 control subjects (24 endemic normal subjects in filariasis endemic area in Tamil Nadu State, 24 non-endemic normal subjects residing in Chandigarh, India; 5 brugian filariasis, 5 endemic control subject in brugian filariasis endemic area and 10 other disease controls). The circulating antigen of W. bancrofti was measured quantitatively using Og(4)C(3) ELISA kit. RESULTS: In Mf carriers, there was no significant difference in microfilariae count in pre- and post-treatment (PT) samples till day 30 while significant differences were observed in pre- and sequentially collected post-treatment (PT) samples day 60 to 180 (P<0.001), day 365 (P<0.005). However, there was no significant difference in antigenaemia levels between pre-treatment (day 0) and PT samples collected on day 7 onwards till day 365. Though of the 19 patients who could be followed up till 365 days PT, 4 (21%) were amicrofilaraemic, none became antigen negative. No significant difference was found in antigenaemia levels in sequentially collected samples from lymphoedema patients. Significant differences were observed in antigenaemia levels in samples collected at the start of study in mf carriers as compared to lymphoedema patients and endemic normal subjects (P<0.001). Subjects (non-endemic control) residing in filariasis free area (24), brugian endemic area (5), B.malayi infected patients (5) and patients with other parasitic diseases (10) were found antigen negative. INTERPRETATION & CONCLUSION: Annual single dose of DEC therapy alone may not result in complete clearance of infection and detection of antigenaemia rather than microfilaraemia may be taken into consideration as an indicator of successful chemotherapy. The study supports the earlier view that filarial antigenaemia is relatively common in amicrofilaraemic and asymptomatic subjects in endemic areas and further studies are needed to determine the clinical significance, prognosis and effective management of such infections in endemic areas.

Circulating filarial antigen in serum and hydrocele fluid from individuals living in an endemic area for bancroftian filariasis.

This study examined circulating filarial antigen by monoclonal antibody Og4C3-enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) from 114 men with hydrocele, living in an endemic area. Nocturnal blood and hydrocele fluid were collected and examined for microfilaria. ELISA was performed on serum and hydrocele fluid for detection of antigen. Amongst 114 cases, 5(4.4%) showed microfilaria in blood but none in fluid. ELISA was positive in 13(11.40%) serum and 5 (4.4%) fluid samples. All five fluid antigen positive cases were positive for antibodies and showed microfilaria in blood. These findings emphasize the use of circulating filarial antigen detection and alternative usage of hydrocele fluid for diagnosis of filariasis.

Evaluation of Og4C3 antigen ELISA as a tool for detection of bancroftian filariasis under lymphatic filariasis elimination programme.

Diagnosis of Lymphatic Filariasis by microscopic examination of thick blood films (TBF) collected between 8.30 pm to 12 midnight, though highly specific is operationally problematic. We evaluated the TropBio Og4C3 serum ELISA as a tool for detection of W. bancrofti microfilaria carriers using Dried Blood Spots (DBS). The study was carried out in two parts (i) to test the sensitivity and specificity of the ELISA test for detection of circulating filarial antigen (CFA) in microfilaria (Mf) carriers vis-à-vis the conventional thick blood film (TBF) microscopy and its persistence in different categories of individuals during the course of disease viz., Endemic normals (n=51), microfilaria (Mf) carriers (n=27), acute cases (n=27), chronic cases (n=50) and a control group of non-endemic normals (n=48) using sera samples and ii) to study the utility of finger prick Dried Blood Spots (DBS) collected on filter paper for detection of Mf carriers and its comparison with another antigen detection assay, the Immunochromatographic test (ICT).Considering the non-endemic normals and microfilaria carriers, the ELISA test was found to have 100% sensitivity and 94.12% specificity for detection of Mf carriers in sera samples. The CFA was absent in majority of the subjects tested under other categories with a positivity of 7.8% among endemic normals, 11.12% among acute cases, 7.84% among chronic cases and 6.25% among nonendemic normals. Comparison of finger prick DBS and sera samples by ELISA vis-à-vis the ICT, carried out on Mf carriers (n=91) and endemic normals (n=97), showed a positivity of 88 (96.7%) in DBS as against 86 (94.5%) in sera samples and 88 (96.7%) by ICT, amongst Mf carriers, with a statistically significant correlation in antigen units between sera and DBS samples (r = 0.959, p = 0.000) amongst the microfilaria carriers. Out of 97 endemic normals, 19 (19.6%) sera and 17 (17.5%) DBS samples tested positive by ELISA while as 12(12.4%) tested positive by ICT, again with a statistically significant correlation between the antigen units in sera and DBS samples (r = 0.942, p = 0.000). DBS prepared from 25 microl of blood were found to be as sensitive as 50 microl for antigen detection. Antigen positivity detected from DBS collected during day and night from known microfilaria carriers (n=27) showed a statistically insignificant difference (p = 0.125) and a significant correlation in antigen units (r = 0.820 and p = 0.013).In view of the comparable results of ELISA, ICT and TBF microscopy, it is concluded that the TropBio Og4C3 ELISA using finger prick DBS can be used as an alternate to TBF microscopy for detection of bancroftian Filariasis under the LFE programme.

Estudo da resposta imune humoral (IgG específica) para antígenos de larvas infectantes (L3) de Wuchereria bancrofti, entre portadores e não portadores de filariose bancroftiana no Município de Olinda-PE / Study of the immune humoral response (IgG specific) for antigens of infective larvae (L3) of Wuchereria bancrofti, between bearers and not bearers of elephantiasis filarial in the city of Olinda-PE

A filariose linfática bancroftiana é uma doença parasitária humana de grande complexidade em sua dinâmica de infecção, necessitando ainda de maiores esclarecimentos, principalmente, em aspectos relacionados à tolerância e imunopatologia. A existência daimunidade protetora em comunidades endêmicas de filariose permanece como objeto de intenso debate e o grupo denominado “endêmicos normais”, tem sido alvo de interesse para elucidar muitas questões referentes à imunologia da doença. O presente trabalho tem como objetivo verificar através de um estudo do tipo caso-controle, as diferenças entre portadorese não portadores de filariose linfática bancroftiana pelo reconhecimento humoral de bandas protéicas de extrato secretório-excretório de larvas infectantes de Wuchereria bancrofti. Osquatro setores censitários de Olinda-PE, com maior prevalência de filariose, foram escolhidos como área de estudo. Consideramos “grupo controle” portadores da filariose bancroftiana e “grupo de casos” os de endêmicos normais. O extrato antigênico foi obtidopor incubação de larvas infectantes em meio Hanks por 72h em 5% de CO2. As bandas protéicas foram separadas por eletroforese (SDS-PAGE) e por western-blot, transferidas e incubadas com os soros humanos. Foram considerados portadores da doença os positivospela técnica da gota espessa ou filtração e endêmicos normais os residentes de área endêmica negativos pelo teste de detecção parasitária e captura de antígenos (Og4C3). Participaram do estudo 325 indivíduos, 130 considerados endêmicos normais e 195portadores de filariose bancroftiana. As bandas protéicas da composição do extrato de L3 foram as de 200, 175, 138, 105, 100, 76, 55, 49, 42, 39, 38, 32, 28, 14 kDa. Na comparaçãodo reconhecimento das proteínas entre os grupos estudados, apenas as proteínas 175 e 105 kDa não diferiram significativamente, os portadores de filariose bancroftiana não reconheceram a proteína 175 e no grupo...

Bancroftian filariasis in an endemic area of Brazil: differences between genders during puberty

Diferenças entre os sexos quanto à susceptibilidade às doenças infecciosas têm sido observadas em vários estudos. Um inquérito de prevalência foi realizado em uma área endêmica de filariose bancroftiana na cidade de Olinda, Brasil. Todos os residentes com idade > 5 anos foram examinados pela gota espessa. Moradores com idade entre 9 e 16 anos foram entrevistados e testados para a presença de antigenemia filarial. Os dados foram analisados utilizando tabelas de contingência e modelos de regressão. O risco de microfilaraemia nos homens foi significativamente mais elevado. Meninos com idade entre 15 e 16 anos tiveram maior risco de infecção filarial do que as meninas. Os dados sugerem que variações entre os sexos na filariose podem resultar de um aumento na susceptibilidade dos homens a partir da puberdade tardia. Essa característica epidemiológica deve ser considerada ao se formularem os planos de eliminação da endemia.

Perfil protéico e reconhecimento antigênico de extratos de larvas infectantes (L3) de Wuchereria bancrofti / Proteic profile and antigenic recognition of extracts from Wuchereria bancrofti L3 infective larvae

A caracterização protéica dos extratos de larvas infectantes (L3) de Wuchereria bancrofti foi realizada por eletroforese em gel de poliacrilamida, em presença de dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) e o reconhecimento antigênico das proteínas por Western-blot. O maior número de bandas protéicas reconhecidas foi evidenciado nos extratos AgSE (105, 100, 76, 55, 49, 39 e 32 kDa) e AgS (100, 76, 55, e 49 kDa) na presença de soros de indivíduos endêmicos normais. As bandas de 49 e 55 kDa foram reconhecidas pelos soros dos microfilarêmicos, endêmicos normais (residentes de área endêmica livres de infecção filarial) e portadores da forma crônica da doença. As larvas infectantes foram obtidas pela dissecção de mosquitos Culex quinquefasciatus infectados com sangue microfilarêmico de voluntários portadores de microfilaremia, residentes do Município de Olinda-PE. Nos 792 indivíduos investigados pela técnica da gota espessa mensurada (60æl de sangue) 87 foram positivos (11 por cento). A diferenca da positividade entre homens e mulheres não foi significativa e a faixa etária de 11 a 19 anos foi a de maior prevalência.

Comparison of an immunochromatographic card test with night blood smear examination for detection of Wuchereria bancrofti microfilaria carriers.

BACKGROUND: At present, two diagnostic tests--Og4C3 ELISA and an immunochromatographic card test (ICT)--are available to detect circulating filarial antigens of Wuchereria bancrofti in serum/whole blood samples collected during the day. We aimed to assess the sensitivity of the new format card test 'NOW ICT Filariasis' in detecting microfilaria carriers of W. bancrofti in comparison with conventional microscopic techniques and Og4C3 ELISA. METHODS: A total of 200 persons were selected from two villages following a quota sampling design (100 in each village). The required number of houses was selected using a systematic sampling procedure with a random start of the first household. Blood samples were taken from all the available persons in each selected house until the quota of 100 was reached. The new format ICT test, Og4C3 ELISA and night blood smear examination for microfilaria were carried out following standard procedures. RESULTS: The sensitivity of the new format ICT test was 100% among microfilaria carriers (detected by both early and late readings). The kappa statistic measure of agreement between the two readings of all the samples (n =200) tested was 0.811 (p<0.05). The new format test also reported 25% of microfilaria-negative individuals as being positive for circulating filarial antigens. However, the diagnostic lines were not stable beyond 10 minutes (particularly in the case of amicrofilaraemic persons). Though there was an overall agreement between the results of ICT and Og4C3 tests (kappa =0.612; p< 0.05), the sensitivity of the Og4C3 test was lower than that of ICT. CONCLUSION: The new format ICT test is highly sensitive in detecting microfilaria carriers in endemic communities. Improvement in the format to provide stable diagnostic lines, specificity of the format and cost of the test kit are to be considered before its large-scale use.

Evaluation of a single oral dose of diethylcarbamazine 300 mg as provocative test and simultaneous treatment in Myanmar migrant workers with Wuchereria bancrofti infection in Thailand.

We assessed the efficiency of oral diethylcarbamazine (DEC) 300 mg as a provocative test on blood examination 30 minutes after administration, while gauging the overall infection rate in Myanmar migrant workers with Wuchereria bancrofti infection who enrolled for work permits in Thailand in 2002, using circulating filarial antigens (CFA) assays, the NOW ICT Filariasis card test and the Og4C3 ELISA as reference. Overall infection rates of 0.3% (95% CI=0-0.7%), 4.2% (95% CI=1.8-6.5%) and 5.9% (95% CI=3.2-8.7%) by three diagnostic tests, respectively, were observed. Among three different location groups of Myanmar population sample tested, there were no statistically significant differences in the overall infection detection rates. When either the ICT card test or the Og4C3 ELISA was used as a reference, the specificity and positive predictive value of the DEC-provocative day test was the same, 100%. The sensitivities were 25.0% (95% CI = 0.5-49.5%) and 17.6% (95% CI = 0-35.8%) on the ICT and ELISA tests, respectively. The negative predictive values were 96.8% (95% CI = 94.8-98.9%) and 95.1% (95% CI = 92.6-97.6%), respectively. In three microfilaremic persons followed-up monitored at 8-weeks DEC post-provocation, there were 6 x 10(-1) and 7 x 10(-1) decreases in microfilaremia and antigenemia. These findings suggested that, unlike the CFA assays, the DEC-provocative day test is unsuitable for the diagnosis of active W. bancrofti infection in the population tested, and for gauging current infection prevalence. The treatment would likely be beneficial to reduce microfilaremia and antigenemia.

Evaluation of crude antigen of Dirofilaria immitis third-stage larva for detection of antibody against Wuchereria bancrofti infection by indirect ELISA.

Dirofilaria immitis is an important heart worm in dogs. An immunodiagnostic test is frequently applied to use an alternative antigen from other parasites. A crude antigen from infective third stage larva (L3) of D. immitis was employed in detecting the antibody to Bancroftian filariasis in humans by indirect ELISA. It was shown that 25 cases of Bancroftian filariasis (76%) at a cut-off value of 0.230, were positive. Cross-reactivity was tested using available sera of other helminthic infections. These sera were 47% (23/49) positive. They comprised a major intestinal helminthic infection, 7 from 15 (46%) strongyloidiasis sera, none from 5 (0%) hookworm infection sera, 6 from 10 (60%) trichinosis sera, 2 from 10 (20%) cysticercosis sera and 8 from 9 (88%) gnathostomiasis sera. The mean OD of sera from Bancroftian filariasis patients was not significantly different from that of the other helminthic infections (p>0.05). In this study, crude antigen may be valuable for the serodiagnosis of Wuchereria bancrofti when subjects do not have tissue helminth infections. However, the crude antigen should be purified to obtain a better sensitivity and specificity of the test.

Prevalence of bancroftian filariasis on the Thai-Myanmar border.

To achieve the goal of eliminating lymphatic filariasis by the year 2020, close monitoring systems and effective control strategies need to be implemented and the real disease burden needs to be assessed. Bancroftian filariasis is endemic at the Thai-Myanmar border. However, there are only limited data on the prevalence of this disease in Thailand available. We employed microscopic examination, together with ELISA kits to detect W. bancrofti-specific Og4C3 circulating antigen and specific anti-filarial IgG4 antibodies to determine the burden of bancroftian filariasis in an endemic area at the Thai-Myanmar border in Umphang District, Tak province, Thailand. A total of 433 Thai-Karen blood samples were analyzed. The microfilarial rate determined by microscope was 6% and the W. bancrofti-specific Og4C3 antigenemia rate was 22%, while the specific anti-filarial IgG4 antibody rate was 54%. There were statistically significant higher levels of W. bancrofti-specific Og4C3 antigen in the microfilaremic-antigenemic group than in the amicrofilaremic-antigenemic group (unpaired Student's t-test; p < 0.001), similar to the specific anti-filarial IgG4 antibody results (unpaired Student's t-test; p < 0.001). A statistically significant correlation of moderate degree between the presence of W. bancrofti-specific Og4C3 antigen and of specific anti-filarial IgG4 antibody was found in the amicrofilaremic group (r = 0.474, p < 0.001), but not in the microfilaremic group (r = 0.291, p > 0.05). Our study revealed a very high prevalence of bancroftian filariasis in this endemic area and thus emphasized the importance of using highly sensitive and specific diagnostic tools to evaluate the true prevalence of the disease.

A morfologia do intestino médio de Culex quinquefasciatus Say, 1823 e sua interação experimental com microfilárias de Litomosoides chagasfilhoi Moraes Neto, Lanfredi e De Souza, 1997 e Wuchereria bancrofti (Cobbold, 1877) Seurat, 1921

Analisamos a morfologia do intestino médio do mosquito Culex quiquefasciatus de região endêmica e a sua interação com as microfilárias de Wuchereria bancrofti (agente da filariose humana) e de Litomosoides chagasfilhoi (agente de filariose de roedores). O intestino médio está dividido em regiões torácica e abdominal como visto em outras espécies de mosquitos. Porém, o intestino médio torácico é formado por dois tipos celulares: células principais e basais; e o intestino médio abdominal por três tipos: células principais clara e basais. Existe uma rede muscular organizar revestindo externamente o órgão, a qual sofre mudanças irreversíveis no intestino médio abdominal após o repasto sangüíneo. A estrutura da matriz peritrófica e a sua formação induzida pela alimentação sangüínea são distintas das demais espécies de mosquitos. O L. chagasfilhoi invade o intestino médio entre 1h e 3h após o repasto infectivo, enquanto que a W. bancrofti entre 30 minutos e 5 horas com o maior número de invasão nas primeiras 2 horas. O L. chagasfilhoi preferencialmente invade o intestino médio abdominal enquanto que a W. bancrofti invade o intestino médio torácico, principalmente perto da região abdominal. Ambas espécies de microfilárias cruzam o intestino médio através do espaço intercelular, causando hipertrofia e extrusão de uma a duas células epiteliais. A perda da bainha pelas microfilárias de ambas espécies não é um pré-requisito para a evasão do intestino. Etapas subseqüentes do ciclo da W. bancrofti, tais como, a melanização na hemocele e a invasão precoce da musculatura de vôo foram também observadas. Não foi possível observar tais etapas nos mosquitos infectados com L. chagasfilhoi porque eles morreram poucas horas após a invasão do intestino médio. Estas diferenças no processo de interação das espécies de microfilárias provavelmente estão relacionados com a capacidade vetorial do mosquito

A morfologia do intestino médio de Culex quinquefasciatus Say, 1823 e sua interação experimental com microfilárias de Litomosoides chagasfilhoi Moraes Neto, Lanfredi e De Souza, 1997 e Wuchereria bancrofti (Cobbold, 1877) Seurat, 1921 / The morphology of the midgut of Culex quinquefasciatus Say, 1823 and its interaction with experimental microfilariae of Litomosoides chagasfilhoi Moraes Neto, Lanfredi and De Souza, 1997 and Wuchereria bancrofti (Cobbold, 1877) Seurat, 1921

Analisamos a morfologia do intestino médio do mosquito Culex quiquefasciatus de região endêmica e a sua interação com as microfilárias de Wuchereria bancrofti (agente da filariose humana) e de Litomosoides chagasfilhoi (agente de filariose de roedores). O intestino médio está dividido em regiões torácica e abdominal como visto em outras espécies de mosquitos. Porém, o intestino médio torácico é formado por dois tipos celulares: células principais e basais; e o intestino médio abdominal por três tipos: células principais clara e basais. Existe uma rede muscular organizada revestindo externamente o órgão, a qual sofre mudanças irreversíveis no intestino médio abdominal após o repasto sangüíneo. A estrutura da matriz peritrófica e a sua formação induzida pela alimentação sangüínea são distintas das demais espécies de mosquitos. O L. chagasfilhoi invade o intestino médio entre 1h e 3h após o repasto infectivo, enquanto que a W. bancrofti entre 30 minutos e 5 horas com o maior número de invasão nas primeiras 2 horas. O L. chagasfilhoi preferencialmente invade o intestino médio abdominal enquanto que a W. bancrofti invade o intestino médio torácico, principalmente perto da região abdominal. Ambas espécies de microfilárias cruzam o intestino médio através do espaço intercelular, causando hipertrofia e extrusão de uma a duas células epiteliais. A perda da bainha pelas microfilárias de ambas espécies não é um pré-requisito para a evasão do intestino. Etapas subseqüentes do ciclo da W. bancrofti, tais como, a melanização na hemocele e a invasão precoce da musculatura de vôo foram também observadas. Não foi possível observar tais etapas nos mosquitos infectados com L. chagasfilhoi porque eles morreram poucas horas após a invasão do intestino médio. Estas diferenças no processo de interação das espécies de microfilárias provavelmente estão relacionados com a capacidade vetorial do mosquito.