La transmisión madre-hijo del Trypanosoma cruzi en la Argentina / Maternal fetal-transmission of Trypanosoma cruzi in Argentina

El diagnóstico de la transmisión congénita del T. cruzi en hijos de mujeres infectadas se realiza por detección de la parasitemia y/o de anticuerpos específicos no transferidos por la madre, en ausencia de transfusión sanguínea y transmisión vectorial. En la etapa temprana, aproximadamente hasta el 7° mes de vida, cuando es posible la presencia de inmunoglobulinas maternas, el diagnóstico depende de la detección del parásito. Luego, en la etapa tardía, a partir del 8° mes de vida, la detección de anticuerpos específicos con por lo menos 2 de 3 pruebas serológicas permiten el diagnóstico del niño. En el INP hemos realizado el seguimiento de los niños de un grupo de mujeres embarazadas sero-reactivas que concurrieron para el diagnóstico de la infección. El 11% de ellas (29 de 267) transmitieron la infección a sus niños. Los hijos de 20 de estas mujeres fueron diagnosticados en la etapa temprana, con 1 o 2 controles parasitológicos, en 14 y 6 casos respectivamente. En las 9 madres restantes los niños fueron diagnosticados principalmente por la serología en la etapa tardía de la infección. Nuestro análisis de los datos publicados anteriormente enfatizan que el porcentaje de la transmisión madre-hijo depende principalmente del tiempo de seguimiento diagnóstico del niño. En estos trabajos, cuando el diagnóstico del niño se realizó sólo en la etapa temprana se notificó aproximadamente un 2% de transmisión materno-fetal, mientras que cuando también se estudiaron a los niños en la etapa tardía se encontró un promedio de 9% de casos de transmisión congénita.

In the neonates born to T. cruzi infected mothers, the diagnosis of the congenital transmission relays on the detection of the parasites and/or the specific antibodies non-transferred by their mothers, in the absence of blood transfusion and vectorial transmission. In the early stage, approximately until the 7th month of life, when maternal immunoglobulins could be present, the diagnosis depends on the detection of the parasite. Then, in the late stage, from the 8th month, the detection of specific antibodies by at least 2 of 3 serological tests confirms the infection in the neonates. The diagnostic follow up of the children born to a group of sero-reactive pregnant women was carried out in the INP. The 11% of the mothers (29 out of 267) transmitted the infection to their children. The neonates of 20 of these mothers were diagnosed in the early stage, 14 and 6 in one or two controls, respectively. In the 9 remaining mothers the children were diagnosed in the late stage of the infection, mainly serologicaly. Our analisis of previously published reports stressed that the maternal-fetal transmission rate depends on the time of diagnostic follow up of the child. In this reports, mean values of mother to child transmission reported was 2% and 9% when the diagnosis of the neonates born to sero-reactive mothers was carried out only in the early stage or in the early and also the late stage, respectively.

Respuesta TH1 en la infeccion experimental con Trypanosoma cruzi / TH1 response in the experimental infection with Trypanosoma cruzi

En el huésped infectado con Trypanosoma cruzi, la respuesta inmune protectora involucra principalmente la producción de anticuerpos específicos y la activación de células fagocíticas por interferon-gamma (IFN-gamma). El efecto central del IFN-gamma in vivo sería la activación de la sintetasa inducible de óxido nítrico de macrófagos (iNOS) y la generación de óxido nítrico (NO§) que participa en la destrucción intracelular de los parásitos. En la infección aguda, la inducción de la respuesta TH1 sería llevada a cabo por la interleuquemia 12 (IL-12), que estimula la producción de IFN-gamma en células NK. En la liberación de IFN-gamma también intervienen otros tipos de células, como los linfocitos Thy-1 +CD4-CD4-CD8-, CD4+ y CD8+. El control de la respuesta TH1, podría ser, en parte, el resultado de la menor activación de macrófagos, por la disminución de la carga parasitaria, y de la producción de IL-10 y del factor de trasnformación del crecimiento beta (TGF-beta). La respuesta protectora TH1 también estaría implicada en el daño tisular y en las alteraciones de la respuesta inmune observadas durante la infección. Nosotros estudiamos la cinética de la actividad NK y de la producción de IL-12 e IFN-gamma por células de bazo, así como los niveles séricos de estas citoquinas centrales de la respuesta TH1, en ratones BALB/c y C3H infectados con T. cruzi, cepa Tulahuén. Inmediatamente después de la infección encontramos que, en las células de bazo, incrementó tanto la producción de IL-12 como la actividad NK, y este efecto fue mayor en ratones C3H que en BALB/c. En los C3H, el IFN-gamma aumentó simultáneamente, a diferencia de los BALB/c en los que la citoquina incrementó más tardíamente en la fase aguda. Em ambas cepas, la infección indujo muy rápidamente altos niveles séricos de IL-12 que se mantuvieron elevados durante toda la fase aguda. Por otro lado, el IFN-gamma sérico incrementó unos días antes del pico de parasitemia y alcanzó mayor concentración, y más tempranamente, en los ratones BALB/c que en los C3H. Para nuestra sorpresa, en la fase crónica de la infección, la producción de IL-12 seguía alta en ambas cepas, a pesar de ello, el IFN-gamma sólo continuó elevado en los ratones BALB/c. Aunque en la fase aguda la respuesta global fue predominantemente TH1 en las dos cepas de ratones, los BALB/c tienen una mayor susceptibilidad que los C3H...

La respuesta inflamatoria en la infección aguda con Trypanosoma cruzi / Inflammatory response to acute Trypanosoma cruzi infection

La etapa aguda de las infecciones con Trypanosoma cruzi asociadas a altas parasitemias, se caracteriza por la presencia de infiltrados inflamatorios en varios tejidos, incluyendo el corazón y músculo esquelético, así como por el incremento de la produción de mediadores inflamatorios. Al mismo tiempo ocurre una activación generalizada de células fagocíticas que estaría relacionada tanto con los procesos inflamatorios como con la resistencia a la infección. Esta es una breve revisión sobre los mediadores inflamatorios que se producen in vivo y su relación con el daño tisular y con la respuesta inmune TH1.

Superantigenos: una particular interaccion entre microorganismos y el sistema inmune / Superantigens: a particular interaction between microorganisms and the immune system

El descubrimiento de los superatígenos (SAgs) aportó nuevos conceptos en el estudio de las interacciones entre los microorganismos y el sistema inmune. Se trata de moléculas que, asociadas a las de Clase II del Complejo Mayor de Histocompatibilidad (CMH), se unen al dominio variable de la cadena Beta Vbeta) del receptor de antígenos Ags) de los linfocitos T alphaBeta (TCRalphaBeta) que les confiere la especialidad de familia. Así, los SAgs son capaces de activar a un alto número de linfocitos T y de células portadoras de las moléculas de Classe II del CMH, generando una masiva liberación de linfoquinas y mediadores inflamatorios que ha sido relaciona con sus efectos tóxicos. Los SAgs endógenos están codificados por los provirus de tumores murinos (Mtv) que se hallan integrados al genoma de los ratones. Los exógenos son producidos por bacterias y virus, siendo los mejor caracterizados los relacionados con las intoxicaciones alimentarias. Aun no se han hallado datos concluyentes en cuanto a la existencia de SAgs de parásitos y se requieren estudos más detallados para establecer su presencia y posible efecto en las infecciones parasitarias.

Bases moleculares e inmunológicas para el desarrollo de una vacuna contra la enfermedad de Chagas / Molecular and immunological bases for the development of a vaccine against Chagas'disease

Diferentes fracciones subcelulares de epimastigotes de T.cruzi fueron ensayadas en su capacidad de inducir protección o agresión en animales experimentales. La fracción flagelar (F) tuvo las mejores propiedades protectoras, sin efectos agresivos sobre los tejidos. Se prepararon varios anticuerpos monoclonales contra esta fracción. Dos de ellos, FCH-F8-1 y 4, mostraron capacidad de neutralizar la infectividad de tripomastigotes sanguíneos, de producir la lisis mediada por complemento de tripomastigotes de cultivo y de reconocer antígenos de la superfície de ambas formas epi y tripomastigotes. El anticuerpo FCH-F8-1, reconoce por inmunoprecipitación, una proteína de 85 kDa en tripomastigotes, mientras que en "blotting" reaccionó con una molécula de 43 kDa, en ambas formas del parásito. El otro anticuerpo, FCH-F8-4 reaccionó por esta última técnica, con varias proteínas de peso molecular entre 50 y 150 kDa, en epimastigotes y sólo con dos (15 y 48 kDa) en tripomastigotes. Ratones inmunizados con antígenos purificados por cromatografia de afinidad usando FCH-F8-4, fueron protegidos contra el desafio de formas infectantes. En una biblioteca de ADNc de epimastigotes de T. cruzi construída en el vector I gt11 se detectaron varios clones, tres con FCH-F8-4 y dos con FCH-F8-1. Dos clones, uno de cada grupo fueron estudiados, y (FCH-F8-1) 1 y (FCH-F8-4) 1. El tamaño de los insertos para ambos fue de 150 pares de bases y utilizados como sondas detectaron ARNm de epimastigotes de 3,5 y 5,0...

Heart damage comparing three strains of mice chronically infected with Trypanosoma cruzi

Las alteraciones miocárdicas en ratones endocriados BALB/c y C3H, y en Swiss exocriados, de 3 meses de vida, inoculados intraperitonealmente con 50 tripomastigotes de Trypanosoma cruzi de la cepa Tulahuén fueron evaluadas por electrocardiografía convencional y estudios morfológicos. Tanto a los animales control como a los infectados se les realizaron electrocardiogramas al primero, quinto y décimo mes pi. Electrocardiográficamente no se hallaron diferencias entre los ratones infectados de las tres cepas; el 7% presentaron alteraciones electrocardiográficas un mes después de la infección (control 2%), el 23% a los 5 meses pi (control 5%) y el 32% a los 10 meses pi (control 10%). Las alteraciones electrocardiográficas, observadas en 13 de 43 animales infectados, fueron: bradicardia (8/13), bloqueo I-V (4/13) y bloqueo A-V de primer grado (7/13). Los resultados basados en la mortalidad demonstraron que los ratones BALB/c fueron altamente susceptibles a la infección y los C3H en grado moderado: el tiempo en que sobrevivieron el 50% de los animales fue de 23 y 88 días, respectivamente; los ratones Swiss, en cambio, sobrevivieron durante todo el estudio. Se detectaron anticuerpos específicos IgC contra los parásitos en todos los animales infectados. Fueron estudiados histopatológicamente 64 de 114 ratones, caracterizándose las lesiones miocárdicas de la siguiente manera: sin lesión (0); infiltrados mononucleares leves y focales (+); infiltrados mononucleares moderados, de distribución focal (++); infiltrados mononucleares extensos con compromiso de miocitos o neuronas (+++). Los hallazgos histopatológicos resultaron similares a la miocardiopatía chagásica crónica del humano, siendo característicos los infiltrados mononucleares ++ y +++. Estas alteraciones se observaron tanto en estadios tempranos de la enfermedad (antes de los 6 meses pi) como en los estadios tardíos entre los (9 y 17 meses pi)...

Humoral antibody response in mice infected with Trypanosoma cruzi

Ratones Swiss y BALB/c inoculados con 50 formas sanguíneas de Trypanosoma cruzi, cepa Tulahuén, fueron utilizados para estudiar la susceptibilidad a la infección y la cinética de la respuesta inmune humoral. De acuerdo a los datos de mortalidad, los ratones BALB/c fueron altamente susceptibles y los ratones Swiss fueron resistentes a la infección. Los anticuerpos dirigidos contra el parásito se detectaron por el método de inmunofluorescencia indirecta (Ab-IIF) mientras que aquellos involucrados en la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpo (ADCC) se evaluaron utilizando como célula efectora esplenocitos de ratón normal (Ab-ADCC). Aunque todos los animales desarrollan Ab-IIF in Ab-ADCC, en los ratones Swiss se detectaron antes, y los títulos de Ab-ADCC fueron mayores que en los ratones BALB/c. Los esplenocitos de ratones Swiss normal tienen mayor capacidad para mediar ADCC in vitro que los de BALB/c. Estos resultados indican una correlación directa entre la respuesta inmune humoral y la resistencia al Trypanosoma cruzi en los ratones experimentalmente infectados

Actividad citotoxica de leucocitos de pacientes chagasicos cronicos contra Trypanosoma cruzi. / Leukocyte cytotoxic activity of chronic Chagas' disease patients against Trypanosoma cruzi

Se estudio la actividad citotoxica de los leucocitos mononucleares (LM) y polimorfonucleares (PMN) de pacientes chagasicos cronicos contra epimastigotes de Trypanosoma cruzi en presencia de anticuerpos (suero autologo o de conejo inmune). Ambas clases de leucocitos fueron capaces de lisar los epimastigotes pero no se observo actividad citotoxica directa de los LM o PMN contra T. cruzi. La actividad promotora de la citotoxicidad y la fagocitosis de PMN del suero de los pacientes chagasicos se encontro en las fracciones de constante de sedimentacion 7S, asociada a la actividad aglutinante resistente a 2-ME indicando que se trata de IgG inmune. Este mecanismo podria ser activo en los pacientes chagasicos como barrera en la diseminacion de los parasitos

Fagocitosis de las formas epi y tripomastigote de Trypanosoma cruzi por leucocitos humanos perifericos. / Phagocytosis of the epi and trypomastigote forms of Trypanosoma cruzi by peripheral human leukocytes

Las formas de cultivo (epimastigotes) y sanguineas (tripomastigotes) de Trypanosoma cruzi son fagocitadas por leucocitos humanos perifericos normales (monocitos y neutrofilos) en presencia de antisuero de conejo anti-epimistigote y de suero de conejo o de pacientes cronicamente infectados con T. cruzi. Los neutrofilos mostraron niveles bajos de fagocitosis en ausencia de antisuero. El porcentaje de fagocitosis se determino morfologicamente en base al numero de celulas con parasitas intracelulares. Tanto en el caso de los monocitos como los neutrofilos, la fagocitosis de los epimastigotes es considerablemente mayor que la de los tripomastigotes.El pretratamiento de tripomastigotes con tripsina aumenta su fagocitosis por monocitos y neutrofilos tanto en presencia como en ausencia de antisuero. La presencia de epi o tripomastigotes sensibilizados incrementa el consumo de O2 de los leucocitos polimorfonucleares