Résumé
This study compared the cytotoxicity and the release of nitric oxide induced by collagen membranes in human mononuclear cells. Peripheral blood was collected from each patient and the separation of mononuclear cells was performed by Ficoll. Then, 2x10(5) cells were plated in 48-well culture plates under the membranes in triplicate. The polystyrene surface was used as negative control. Cell viability was assessed by measuring mitochondrial activity (MTT) at 4, 12 and 24 h, with dosage levels of nitrite by the Griess method for the same periods. Data had non-normal distribution and were analyzed by the Kruskal-Wallis test (p<0.05). Statistically significant differences (p<0.05) were observed between the membranes and the control in the experimental period, although there was a significant reduction in viability over time (p<0.01). At 4 and 12 h, the porcine membrane induced a higher release of nitrite compared with the control and bovine membrane, respectively (p<0.01), and this difference was maintained at 24 h (p<0.05). This in vitro study showed that the porcine collagen membrane induces an increased production of proinflammatory mediators by mononuclear cells in the first hours of contact, decreasing with time.
Neste estudo foi comparada a citoxicidade e a liberação de nitrito induzidos por membranas de colágeno bovino e suíno em células mononucleares humanas. Foram coletados sangue periférico de cada paciente, e realizada separação de mononucleares por gradiente de Ficoll. Um total de 2x10(5) células foram plaqueadas em placas de cultura de 48 poços sob as membranas, em triplicata. O poço sem membrana serviu como controle negativo. A viabilidade celular foi avaliada medindo a atividade mitocondrial (MTT) em 4,12 e 24 h, com dosagens dos níveis de nitrito pelo método de Griess nos mesmos períodos. As amostras não apresentaram distribuição normal, sendo realizado o teste de Kruskal-Wallis (p<0,05). Foram observadas diferenças estatisticamente significantes entre as membranas e o controle nos período analisados (p<0,05), embora tenha ocorrido redução da viabilidade em função do tempo (p<0,01). Em 4 e 12 h a membrana suína induziu maior liberação de nitrito comparado ao controle e à membrana bovina, respectivamente (p<0,01). Tal diferença foi mantida em 24 h (p<0,05). Este estudo in vitro demonstrou que a membrana colágena suína induz uma maior produção de mediador pró-inflamatório pelas células mononucleares nas primeiras horas de contato, diminuindo com o tempo.