Avaliação da expressão imunoistoquímica da proteína p16INK4a no adenocarcinoma de esôfago / Protein p16INK4a immunohistochemical expression in adenocarcinoma of the esophagus

INTRODUÇÃO: O adenocarcinoma de esôfago apresenta aumento de frequência nas últimas décadas, particularmente em países desenvolvidos. O esôfago de Barrett é reconhecido como a principal lesão precursora e o estudo da sequência metaplasia-displasia-adenocarcinoma mostra a ocorrência de alterações genéticas desde suas fases mais incipientes. As alterações no p16INK4a são relatadas como frequentes no esôfago de Barrett e no carcinoma de esôfago. OBJETIVO: Verificar a prevalência da expressão imunoistoquímica da proteína p16INK4a em exames anatomopatológicos de pacientes com adenocarcinoma de esôfago. MÉTODO: A população do estudo foi constituída de 37 pacientes com adenocarcinoma de esôfago. A expressão da proteína p16 foi detectada por meio de análise imunoistoquímica, com anticorpo primário p16INK4aAb-7, clone 16P07, NeoMarkers e avaliada de acordo com o Sistema de Escore de Imunorreatividade (Immunoreactive scoring system - IRS) modificado. RESULTADOS: No grupo houve predominância de pacientes do sexo masculino (86,5 por cento) e a maioria dos casos correspondia a estádios avançados (III e IV = 67,5 por cento). Em 12 casos (32,4 por cento) foi identificada expressão imunoistoquímica da proteína p16INK4a. Não foi observada relação significativa entre a perda da expressão da proteína p16INK4a e o grau de diferenciação histológica (p=0,81) nem com o estadiamento da doença (p=0,485). CONCLUSÃO: Ocorre perda da expressão imunoistoquímica da proteína p16INK4a, corroborando as informações de que a inativação do gene p16 é um evento frequente e que pode exercer papel importante na carcinogênese do adenocarcinoma de esôfago.

BACKGROUND: The esophageal adenocarcinoma shows an increasing frequence in the last decades, specially in the developed countries. The Barrett´s esophagus is accepted as the major premalignant lesion and the metaplasia-dysplasia-adenocarcinoma sequence presents a lot of genetic changes since its early events. The alterations in p16INK4a are frequent in Barrett´s esophagus and esophageal carcinoma. AIM: To verify the prevalence of the immunohistochemical expression of the p16INK4a protein in patients with esophageal adenocarcinoma. METHODS: The study population consisted of 37 patients with resected esophageal adenocarcinoma. The p16INK4a protein expression was determined by immunohistochemistry using primary antibody p16INK4aAb-7, clone 16P07 NeoMarkers and assessed according to the Immunoreactive scoring system (IRS). RESULTS: Of 37 analyzed patients, the most were male (86,5 percent) and the advanced disease was predominant (stages III and IV = 67,5 percent). In 12 (32,4 percent) the immunohistochemistry was positive for p16INK4a.There was no significative relation between the protein expression and the degrees of histological differentiation of the biopsies and surgical especimens (p=0,81) neither with the staging (p=0,485). CONCLUSION: The lost of the immunohistochemical expression of the p16INK4a protein in this study suggests that p16 is enroled in the carcinogenesis of the adenocarcinoma of esophagus.

Clinical and pathological correlations of C4d immunostaining and its infl uence on the outcome of kidney transplant recipients / Correlações clinico-patológicas da marcação de C4d e sua influência na evolução de receptores de transplante renal

INTRODUCTION: C4d is a marker of antibody-mediated rejection (ABMR) in kidney allografts, although cellular rejection also have C4d deposits. OBJECTIVE: To correlate C4d expression with clinico-pathological parameters and graft outcomes at three years. METHODS: One hundred forty six renal transplantation recipients with graft biopsies by indication were included. C4d staining was performed by paraffin-immunohistochemistry. Graft function and survival were measured, and predictive variables of the outcome were determined by multivariate Cox regression. RESULTS: C4d staining was detected in 48 (31 percent) biopsies, of which 23 (14.7 percent) had diffuse and 25 (16 percent) focal distribution. Pre-transplantation panel reactive antibodies ( percentPRA) class I and II were significantly higher in C4d positive patients as compared to those C4d negative. Both glomerulitis and pericapillaritis were associated to C4d (p = 0.002 and p < 0.001, respectively). The presence of C4d in biopsies diagnosed as no rejection (NR), acute cellular rejection (ACR) or interstitial fibrosis/ tubular atrophy (IF/TA) did not impact graft function or survival. Compared to NR, ACR and IF/TA C4d-, patients with ABMR C4d+ had the worst graft survival over 3 years (p = 0.034), but there was no difference between ABMR versus NR, ACR and IF/TA that were C4d positive (p = 0.10). In Cox regression, graft function at biopsy and high percentPRA levels were predictors of graft loss. CONCLUSIONS: This study confirmed that C4d staining in kidney graft biopsies is a clinically useful marker of ABMR, with well defined clinical and pathological correlations. The impact of C4d deposition in other histologic diagnoses deserves further investigation.

INTRODUÇÃO: A fração do complemento C4d é um marcador de rejeição mediada por anticorpos (RMA) em aloenxertos renais, embora na rejeição celular também se observem depósitos de C4d. OBJETIVOS: Correlacionar a expressão de C4d com parâmetros clínicopatológicos e a evolução do enxerto renal em três anos. MÉTODOS: Foram incluídos 146 receptores de transplante renal com biópsias por indicação. A marcação de C4d foi feita por imuno-histoquímica em parafina. Foram medidas a função e a sobrevida do enxerto e determinadas as variáveis preditivas de sua evolução por meio de modelo de regressão de Cox. RESULTADOS: A marcação positiva para C4d foi detectada em 48 (31 por cento) biópsias, das quais 23 (14,7 por cento) tinham marcação difusa e 25 (16 por cento), focal. A reatividade contra painel ( por centoPRA) de classe I e II pré-transplante foi significativamente maior nos pacientes C4d+ quando comparada aos C4d-. Tanto glomerulite quanto pericapilarite foram associadas com C4d (p = 0,002 e p < 0,001, respectivamente). A presença de C4d em biópsias sem rejeição (SR), rejeição celular aguda (RCA) ou fibrose intersticial/atrofia tubular (FI/AT) não teve impacto na função ou na sobrevida do enxerto. Comparados a indivíduos com SR, RCA e FI/AT C4d-, pacientes com RMA C4d+ tiveram pior sobrevida do enxerto em 3 anos (p = 0,034), mas não houve diferença entre RMA versus SR, RCA e FI/AT C4d+ (p = 0,10). Na regressão de Cox, função do enxerto no momento da biópsia e por centoPRA alto foram preditores de perda do enxerto. CONCLUSÕES: A pesquisa de C4d em biópsias do enxerto renal é útil para identificar RMA, com correlações clínicopatológicas bem definidas. O impacto do C4d em outros diagnósticos histológicos necessita de investigação adicional.

Chlamydia trachomatis and human papillomavirus coinfection: association with p16INK4a and Ki67 expression in biopsies of patients with pre-neoplastic and neoplastic lesions

The objective of this study was to identify the frequency of coinfection by human papillomavirus (HPV) and Chlamydia trachomatis (CT) in cervical lesions and relate it with immunohistochemical expression of p16INK4a and Ki67, both oncogenicity markers. A cross-sectional study with 86 women from primary care units in southern Brazil was conducted. Cervical swabs were collected for HPV-DNA and CT-DNA detection, through the polymerase chain reaction technique (PCR). The immunohistochemical analysis was performed on biopsy cervical tissue material to identify the expression of p16INK4a and Ki67 cell cycle markers. About 83 percent were positive for HPV-DNA and 19 percent had coinfection with CT-DNA. Among coinfected women, 56 percent expressed p16INK4a. There was a statistically significant association between the histological grade of the lesion and Ki67 expression. All high-grade lesions, 50 percent of low-grade lesions and 31 percent of negative biopsies expressed Ki67 (p = 0.004). A total of 37 percent of coinfected women expressed both markers. In conclusion, although more than half of the coinfected patients have expressed p16INK4a and more than one third have expressed both markers, these results suggest no association between those variables. However, other studies involving larger samples are necessary to corroborate such findings.

Adipocyte morphometric evaluation and angiogenesis in the omentum transposed to the breast: a preliminary study

OBJECTIVE: The purpose of this study was to describe the probable mechanism of the volume increase of laparoscopically harvested omentum flaps used to treat breast deformities. METHODS: A histological analysis of omentum samples was performed to study the volume increase of laparoscopically harvested omentum flaps. Samples were harvested immediately after the transposition of the omentum from the abdominal cavity to the breast region and during the second surgical procedure for breast symmetrization of eight patients submitted to the transposition of the omentum flap. Changes in the morphometric measurements of the adipocytes (perimeter, diameter, and area), microvascular density (as measured by the CD31 endothelial marker), and immunohistochemical expression of VEGF were documented. RESULTS: The increases in adipocyte size and microvascular density were statistically significant (P < 0.012). The expression levels of VEGF were lower in the second set of samples when compared to the first set, but the differences were not statistically significant (P < 0.093). CONCLUSION: These results demonstrate an increase in cellular volume as measured by adipocyte perimeter, diameter, and area. Moreover, the increase in the number of vessels in the second set of samples suggests that neoangiogenesis was stimulated by the initial increase in VEGF expression levels observed in the first set of samples. The increase in VEGF expression in the flap may have been caused by adipocyte hypertrophy resulting from neoangiogenesis.

Efeitos do cloreto de gadolínio na pancreatite induzida por tauracolato de sódio em ratos / Effects of gadolinium chloride on sodium taurocholate-induced pancreatitis in rats

OBJETIVO: Avaliar os efeitos do uso de cloreto de gadolínio como pré-tratamento e tratamento em um modelo experimental de pancreatite em ratos induzida por tauracolato de sódio a 3 por cento. MÉTODOS: Ratos Wistar foram divididos em cinco grupos: grupo SF - controle com solução fisiológica intra-ductal e IV; grupo TS - controle com PA induzida por tauracolato de sódio a 3 por cento e solução fisiológica a 0,9 por cento IV; grupo GD - controle com SF intra-ductal e cloreto de gadolínio IV; grupo GDTS - pré-tratamento com GD (24h antes da indução da PA) e grupo TSGD - tratamento com GD (1h após a indução da PA). Foi realizado dosagem sérica de amilase, transaminases e TNF-á; determinação da atividade da MPO no tecido pulmonar; histologia pancreática e pulmonar. RESULTADOS: O número de animais mortos antes do término previsto do experimento foi significativamente maior no grupo TSGD (p=0,046). Os escores de pancreatite e de dano pulmonar foram mais elevados nos grupos que utilizaram tauracolato em comparação aos grupos com infusão intra-ductal de solução salina. Não houve diferenças nas demais variáveis estudadas na comparação entre os grupos TS; GDTS e TSGD. CONCLUSÃO: Não foram demonstrados benefícios com o uso de cloreto de gadolínio de forma profilática e terapêutica.

OBJECTIVE: To evaluate the effects of the use of gadolinium chloride before and after induction of acute pancreatitis with sodium taurocholate 3 percent in rats. METHODS: Wistar rats were divided into five groups: SF - control with saline intra-ductal and IV; GD control with saline intra-ductal and gadolinium chloride IV; TS - with AP control induced by sodium taurocholate 3 percent and saline IV; GDTS - pre-treatment with GD (24 hours before the induction of AP) and TSGD - treatment with GD (1 hour after the induction of AP). Analysis was made in serum amylase, transaminases and TNF-á; determination of the MPO activity in lung tissue, lung and pancreatic histology. RESULTS: The number of dead animals before the end of the experiment was significantly higher in TSGD (P = 0.046). The scores of pancreatitis and lung damage were higher in the groups that used sodium taurocholate compared to groups with intra-ductal infusion of saline solution. There were no differences in other variables studied when comparing TS, GDTS and TSGD groups. CONCLUSION: The benefits with the use of gadolinium chloride as a prophylactic and therapeutic drug were not demonstrated.

A proteína p16 e o melanoma cutâneo / P16 protein and cutaneous malignant melanoma

Nas últimas décadas, é intensa a procura de uma explicação genética sobre a origem, o crescimento e a progressão do melanoma cutâneo. A tentativa de encontrar uma ligação direta entre as mutações gênicas e a origem da doença tem sido o objetivo dos pesquisadores dedicados ao estudo dessa neoplasia. Diversos métodos são utilizados na busca de uma avaliação prognóstica para a progressão do melanoma, citando-se, entre eles, a pesquisa do linfonodo sentinela, a imuno-histoquímica, as técnicas moleculares e a técnica de microarray. A necessidade de estabelecer um método, com excelente sensibilidade e especificidade, tem levado os pesquisadores a buscarem melhores evidências. É importante para esses estudos a obtenção de dados confiáveis sobre as técnicas, progressão e sobrevida livre de doença. Por meio da imuno-histoquímica, técnica relativamente simples e de baixo custo, a expressão da proteína p16 pode ser analisada e correlacionada com o prognóstico da doença. No melanoma cutâneo, a expressão da proteína diminui, à medida que aumenta sua agressividade, ou seja, é forte nos nevos e melanomas in situ e fraca ou ausente nos melanomas metastáticos. Em alguns estudos, a comparação com outros marcadores é analisada. A finalidade deste estudo é fazer uma revisão da literatura internacional sobre o uso da proteína p16 como fator prognóstico para o melanoma, bem como avaliar a importância das alterações do gene p16INK4a, corresponsáveis pela gênese e evolução do melanoma

In the last decades there has been an intense search for a genetic explanation of the origin, growth and progression of cutaneous melanoma. The attempt to find a direct link between gene mutations and the root of the disorder has been the aim of researchers devoted to the study of this neoplasia. Many are the methods used in the search of a prognostic evaluation for the progression of melanoma, e.g. research on the sentinel lymph node, immunohistochemistry, molecular techniques and the microarray technique. The need for a method with optimal sensitivity and specificity has led researchers to search for better evidence. For these studies it is important to obtain reliable data on the techniques, progression and survival free of disease. By means of immunohistochemistry, which is a relatively simple, low cost technique, the p16 protein expression can be assessed and correlated with disease prognosis. In cutaneous melanoma, p16 expression decreases as its aggressiveness increases, i.e. it is strong in the nevi and melanomas in situ and weak or absent in the metastatic melanomas. Other studies have analyzed how it compares with other markers. The purpose of this study is to make a review of the international literature on the use of p16 protein as a prognostic factor for melanoma, as well as to evaluate the importance of alterations in the p16INK4a gene, co-responsible for the genesis and progress of melanoma

Laparoscopic treatment of Poland's syndrome using the omentum flap technique

OBJECTIVE: For patients with Poland's syndrome, a transverse skin fold in the anterior axillary pillar, infra-clavicular depression and an anomalous breast contour are the most uncomfortable disfigurements. This study aims to demonstrate that superior aesthetic results can be achieved by using a laparoscopically harvested omentum flap to treat this condition. METHODS: From a prospectively maintained clinical database of patients undergoing a laparoscopic omentum flap procedure for breast reconstruction, all of the patients with Poland's syndrome were identified and their outcomes were studied. RESULTS: Thirteen consecutive patients with Poland's syndrome were treated and evaluated regarding breast contour, reconstruction of the anterior axillary pillar and filling of the infra-clavicular depression. Implants were employed beneath the flap in 76 percent of cases to improve symmetry. In 23 percent of cases, a contra-lateral mastopexy was performed, and in 15 percent of cases, a breast implant was used. The consistency of the flap is similar to natural breast tissue and only a small incision in the breast fold is needed. The majority of patients (85 percent) were female, with a mean age of 26 (18-53). The flap is extremely malleable, adapts to irregular surfaces, and has a long vascular pedicle. Additionally, its removal does not leave a scar at the donor site as the removal of muscular flaps does. For example, the removal of the latissimus dorsi flap causes a deformity in the dorsal contour. The mean operative time was 201 minutes (80-350) and the mean hospital stay was 2.3 days (1-5). CONCLUSIONS: The outcomes of these patients revealed that the omentum flap technique provided superior amelioration of the deformities caused by Poland's syndrome when compared with other reconstructive options.

Immunohistochemical evaluation for P53 and VEGF (Vascular Endothelial Growth Factor) is not prognostic for long term survival in end stage esophageal adenocarcinoma / Avaliação imunoistoquímica do P53 e VEGF (Fator de Crescimetno Endotelial Vascular) não representa fator prognóstico para sobrevida a longo prazo na fase terminal do adenocarcinoma do esôfago

OBJECTIVES: To correlate the expression of p53 protein and VEGF with the prognosis of patients submitted to curative resection to treat esophageal adenocarcinoma. METHODS: Forty-six patients with esophageal adenocarcinoma, submitted to curative resection, were studied. The expressions of p53 protein and VEGF were assessed by immunohistochemistry in 52.2 percent and 47.8 percent of tumors, respectively. RESULTS: P53 protein and VEGF expressions coincided in 26 percent of the cases, and no correlation between these expressions was observed. None of the clinicopathological factors showed a significant correlation with p53 protein or VEGF expressions. There was no significant association between p53 protein and VEGF expressions and long-term survival. CONCLUSION: The expression of p53 protein and VEGF did not correlate with prognosis in esophageal adenocarcinoma patients submitted to curative resection.

OBJETIVO: Correlacionar a expressão do p53 e VEGF com o prognóstico de pacientes submetidos à operação curativa para tratar adenocarcinoma do esôfago. MÉTODO: Foram estudados 46 pacientes com adenocarcinoma de esôfago, submetidos à ressecções curativas. As expressões do p53 e VEGF foram assessadas por imunoistoquímica em 52.2 por cento e 47.8 por cento dos tumors, respectivamente . RESULTADOS: As expressões de ambos coincidiram em 26 por cento dos casos sem correlação entre elas. Os fatores clinicopatológicos estudados não mostraram correlação significante. Não houve associação significante entre as expresses do p53 e VEGF na sobrevida a longo prazo. CONCLUSÃO: As expressões do p53 e VEGF não se correlacionaram com o prognóstico do adenocarcinoma do esôfago nos pacientes operados com ressecções curativas.

Patologia do transplante renal: achados morfológicos principais e como laudar as biópsias / Renal transplant pathology: main morphological findings and how to sign out biopsies

O transplante renal alcançou expressivos e crescentes índices de sucesso desde sua implantação, constituindo atualmente uma terapia substitutiva de larga escala. É cada vez mais freqüente o encontro de biópsias de enxerto renal na rotina dos laboratórios de patologia, cujos achados são os mais variados. Este artigo resulta da experiência dos membros do Clube do Rim (da Sociedade Brasileira de Patologia) e apresenta um panorama geral da patologia do transplante renal, enfatizando a atual classificação de Banff, com suas principais categorias e entidades de diagnóstico problemático.

Renal transplant has reached remarkable and growing rates of success since its introduction; nowadays it is a widely used replacement therapy. Renal allograft biopsies are increasingly more frequent in the routine of pathology laboratories, whose histological findings are varied. This paper results from the expertise of the members of the Kidney Club of Sociedade Brasileira de Patologia, and presents a general overview of renal allograft pathology, focusing on the current Banff classification, its main categories and cases of difficult diagnosis.

Pesquisa do linfonodo sentinela em câncer gástrico com o corante azul patente / Sentinel lymph node mapping in gastric cancer using patent blue dye

OBJETIVO: Avaliar a factibilidade e os resultados de uma técnica pouco invasiva para a pesquisa do linfonodo sentinela (LFNsn) com o uso do corante vital azul patente. MÉTODO: A pesquisa do LFNsn foi realizada em 12 pacientes portadores de adenocarcinoma gástrico que não apresentavam linfonodos suspeitos de metastases durante o estadiamento clínico pré-operatório. Injetou-se nos quatro quadrantes do tumor, 0,5 ml de corante vital azul patente. Os linfonodos que se coraram de azul foram classificados como LFNsn e foram obtidos após a gastrectomia com linfadenectomia D2. Utilizou-se a coloração HE para avaliação anatomopatológica dos LFNsn, e nos casos com LFNsn negativo para HE, foi realizada imuno-histoquímica com pan-citoqueratinas AE1/AE3. RESULTADOS: Dos 12 pacientes, oito eram mulheres, com média de idade de 64,5 (48-87) anos. Identificaram-se em média 3,25 (2-6) LFNsn por paciente. A factibilidade da técnica foi de 100 por cento. A acurácia do método foi de 91,6 por cento . Em 11 de 12 casos foi possível predizer as características linfonodais regionais pela concordância da análise anatomopatológica entre os LFNsn e não sentinelas(LFNñsn). CONCLUSÃO: A pesquisa do linfonodo sentinela em câncer gástrico é factível com o uso da técnica do corante azul patente. O método mostrou ser promissor como técnica minimamente invasiva para estadiar tumores gástricos, nesta casuística inicial.

BACKGROUND: The objective was to determine the feasibility of using vital blue dye to map sentinel lymph nodes (SLN) in gastric cancer using a minimally invasive technique. METHODS: Sentinel lymph node biopsy was performed on 12 patients with gastric adenocarcinoma that did not have metastatic lymph nodes during clinical staging. Vital blue dye was injected around four quadrants of the tumor, 0.5 ml in each quadrant. The lymph nodes that stained blue 5 minutes after dye injection were classified as SLN. Histopathological analysis of the sentinel lymph nodes was done according to routine evaluation of other lymph nodes, with hematoxylin and eosin (HE) staining. If the SLN was negative for malignancy by means of HE, it was further examined by immunohistochemistry. RESULTS: Sentinel lymph node biopsies in gastric cancer patients were performed from July 2002 to December 2004. Twelve patients were enrolled at the study, being 8 women, with a mean age of 64.5 years (range, 48 to 87). A mean of 3.25 SLNs (range, 2 to 6) were identified in each patient. The feasibility of the procedure was 100 percent, and its accuracy was 91.6 percent. In 11 of 12 patients, it was possible to predict the regional lymph nodes status by concordance of the histopathological analysis of SLN and non-sentinel lymph nodes (nSLN). CONCLUSION: The sentinel lymph node biopsy in gastric cancer technique has demonstrated to be feasible, with the use of vital blue dye. The procedure is promising as a minimally invasive technique of gastric tumors staging, in our series.

Pancreatic intraepithelial neoplasia and ductal adenocarcinoma induced by DMBA in mice: effects of alcohol and caffeine

PURPOSE: To evaluate the effects of alcohol and caffeine in a pancreatic carcinogenesis mouse model induced by 7,12-dimethylbenzantracene (DMBA), according to the PanIN classification system. METHODS: 120 male, Mus musculus, CF-1 mice were divided into four groups. Animals received either water or caffeine or alcohol or alcohol + caffeine in their drinking water. In all animals, 1 mg of DMBA was implanted into the head of the pancreas. After 30 days, euthanasia was performed; excised pancreata were then fixed in formalin, stained with hematoxylin-eosin and categorized as follows: normal ducts, reactive hyperplasia, PanIN-1A, PanIN-1B, PanIN-2, PanIN-3 or adenocarcinoma. RESULTS: PanIN lesions were verified in all groups. Adenocarcinoma was detected in 15 percent of animals in the caffeine group, 16.6 percent in the water group, 23.8 percent in the alcohol + caffeine group and 52.9 percent in the alcohol group (P<0.05). CONCLUSIONS: The experimental pancreatic carcinogenesis mouse model using DMBA effectively induces PanIN lesions and pancreatic adenocarcinoma. This study verified the association between alcohol use and pancreatic adenocarcinoma; caffeine did not present the same effect.

OBJETIVO: Avaliar os efeitos do álcool e da cafeína na carcinogênese pancreática induzida pelo 7,12-dimetilbenzantraceno (DMBA) em camundongos, descrevendo as lesões de acordo com a classificação das neoplasias pacreáticas intraepiteliais (PanIN). MÉTODOS: 120 camundogos machos, Mus musculus, CF-1 foram divididos em quatro grupos. Animais receberam água ou cafeína ou álcool ou álcool + cafeína para beber. Em todos animais, 1 mg de DMBA foi implantado na cabeça do pâncreas. Após 30 dias, eutanásia foi realizada, o pâncreas foi removido, fixado em formalina e corado com hematoxilina e eosina sendo classificado em: ductos normais, hiperplasia reativa, PanIN-1A, PanIN-1B, PanIN-2, PanIN-3 ou adenocarcinoma. RESULTADOS: Neoplasias pancreáticas intraepiteliais foram encontradas em todos grupos. Adenocarcinoma foi detectado em 15 por cento dos animais do grupo cafeína, 16,6 por cento do grupo água, 23,8 por cento do grupo álcool + cafeína e 52,9 por cento do grupo álcool (P<0,05). CONCLUSÕES: O modelo experimental de carcinogênese pancreática em camundongos utilizando DMBA induz neoplasias pancreáticas intraepiteliais (PanIN) e adenocarcinoma pancreático. Este estudoverificou associação entre álcool e adenocarcinoma pancreático, enquanto a cafeína não demonstrou este efeito.

Análise da expressão de TGFalfa(Transforming Growth Factor Alpha) nas células germinativas e a frequência de células de sertoli em touros de raças sintéticas com alteração na qualidade seminal / Analysis of the TGFalpha(transforming growth factor alpha) expression in germinative cells and the frequency of Sertoli cells in bulls of synthetic breed with deficient seminal quality

O fator de crescimento transformante alfa (TGFα) é uma molécula da família dos fatores de crescimento transformantes, que tem sido apontado como provável regulador do desenvolvimento testicular. A hipótese do presente estudo foi de que touros de raças sintéticas com deficiente qualidade seminal apresentam um padrão de expressão de TGFα e uma freqüência média de células de Sertoli, diferentes quando comparados aos touros com adequada qualidade seminal. Foram utilizados para o estudo, testículos de seis touros Braford e oito touros Brangus-Ibagé com e sem problemas na qualidade seminal. A técnica de imuno-histoquímica foi empregada para determinar a expressão de TGFα no epitélio seminífero e também para marcar o núcleo das células de Sertoli, com o uso do anticorpo monoclonal TGFα (Ab-2; Calbiochem) e anticorpo policlonal antiproteína S100 (DAKO). A média geral de espermatogônias marcadas pelo anticorpo foi diferente para raça: 9.2±0.4 para Braford e 11.0±0.3 para Brangus-Ibagé (P<0.05), porém não houve diferença estatisticamente significativa entre as fases analisadas. A média de células de Sertoli foi similar entre as raças de touros. Porém houve uma interação significativa (P<0.05) entre raça e condição reprodutiva, representada por uma menor freqüência de células Sertoli nos touros Brangus-Ibagé considerados aptos à reprodução. Este achado que pode ser um indicador de que a origem da menor qualidade de sêmen nestes animais de raças sintéticas deve estar desvinculada da fase embrionária ou neonatal, já que é nesta fase que o número de células de Sertoli é estabelecido para o indivíduo adulto. O entendimento das interações celulares do epitélio seminífero, envolvendo os fatores de crescimento no controle parácrino da espermatogênese, requer não somente a identificação do local de expressão destes fatores, como também o seu significado in vivo.

The transforming growth factor alpha (TGFα) is a molecule from the family of the transforming growth factors and has been pointed out as a probable regulator of testicular development. The hypotheses in the present study was that bulls from synthetic breeds with deficient seminal quality presented different TGFα expression and average number of Sertoli cells when compared to normal bulls. Testicles from six Braford and eight Brangus-Ibagé bulls with and without problems in semen quality were used. The immunohistochemical technique was employed to determine the TGFα expression in seminiferous epithelium and to mark the nucleus of the Sertoli cells with the use of respectively of monoclonal antibody anti-TGFα (Ab-2; Calbiochem) and anti-S100 protein polyclonal antibody (DAKO). The general average of spermatogonia marked by the antibody was different for each breed: 9.2±0.4 for Braford and 11.0±0.3 for Brangus-Ibagé. No difference regarding the expression of TGFα was found between sound and unsound bulls. The average number of Sertoli cells was similar between bull breeds. A smaller Sertoli cell population was found in the sound Brangus-Ibagé bulls, which may be an indication that the origin of the low seminal quality in synthetic bulls should be detached from the embryonic or the early newborn phase when the total number of such cells in adults is established. The understanding of cell interaction in the seminiferous epithelium, involving growth related factors, requires not only the identification of the expression site but also the in vivo meaning to spermiogenesis. The study of the growth factors in the testicle in adult bulls is worth further research in order to understand the regulation of spermiogenesis at the paracrine level in adult animals.

Anatomy of the caudal cerebral artery on the surface of capybara (Hydrochoerus hydrochaeris) brain

In this study, we examined the distribution of the caudal cerebral artery on the surface of the capybara brain and determined the territory irrigated by this vessel. A total of 68 brain hemispheres from female and male capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) were injected with Latex 603 or Latex Frasca, stained with red and blue pigments and fixed in twenty per cent formalin. The caudal cerebral artery arose from the terminal branch of the basilar artery rostrally to the rrot of the oculomotor nerve. Immediately after its emergence, the caudal cerebral artery gave off the rostral tectal artery in 27,9 per cent of the specimens and then crossed the cerebral peduncles dorsally to the geneculate bodies and to the pulvinar to give off small perforating branches towards these structures. During its course ober the surface of the hippocampal gyrus, the caudal cerebral artery gave off small hippocampal branches dorsally, the caudal choroidal artery rostrally, and a variable number of cortical braches caudally. The terminal branches of the caudal cerebral artery crossed the splenium of the corpus callosum and were distributed on the caudo-medial surface of the brain hemisphere. The territorial limits of the caudal cerebral artery included the thalamus, the rostral colliculum, part of the caudal colliculum, the caudal face of the pyriform lobe, the tentorial surface, the retrosplenic portion of the medial surface, and a narrow area of the dorso-lateral face of the brain hemisphere, along the margins of the dorso longitudinal and transverse fissures of the brain.

Quantificação dos estádios do ciclo espermatogênico em touros de raças sintéticas com e sem alteração na qualidade seminal / Staging spermatogenic cycle in synthetic bulls with normal and altered semen quality

O objetivo deste estudo foi avaliar qual a freqüência dos túbulos seminíferos nos diferentes estádios do ciclo espermatogênico em touros de duas raças sintéticas, sendo 12 Braford e 8 Brangus-Ibagé, classificados em aptos (grupo A) e inaptos (grupo B) à reproduçäo, de acordo com o exame andrológico. Os estádios avaliados foram representativos das fases proliferativa (estádio I), meiótica (estádio II) e de maturaçäo (estádio III) da espermatogênese. Os touros Braford apresentaram freqüências diferentes entre os grupos A e B nos estádios II e III. Os touros Brangus-Ibagé apresentaram diferenças entre os grupos apenas para o estádio II. Os resultados indicam que nas fases iniciais do ciclo espermatogênico (estádio I), os touros de raças sintéticas, classificados quanto à qualidade seminal, apresentam gametogênese semelhante. Nas fases em que ocorrem as divisöes meióticas (estádio II) e a maturaçäo das espermátides (estádio III), manifestam-se as alteraçöes na espermatogênese que respondem pela classificaçäo diferencial dos touros. O uso do presente agrupamento de estádios do ciclo espermatogênico proporciona uma prática maneira de avaliar a cinética do epitélio germinativo em touros aptos e inaptos à reproduçäo

Identificaçäo imuno-histoquímica de Listeria monocytogenes em placentas fixadas em formol e embebidas em parafina / Immunohistochemical identification of Listeria monocytogenes in formalin-fixed and paraffin-embedded placentas

OBJETIVOS: identificar Listeria monocytogenes (Lm) em placentas humanas pela técnica de imuno-histoquímica (IHQ) e relacionar sua presença com as alteraçöes histológicas encontradas com as alteraçöes histológicas encontradas no exame convencional, com o trimestre gestacional, a idade das gestantes, casos de aborto e parto prematuro e a ocorrência de aborto habitual. MÉTODOS: um estudo retrospectivo foi realizado no setor de patologia de um hospital-escola de Porto Alegre no ano 2000. O material dos blocos de parafina de 254 placentas (exames anatomopatológicos), provenientes de aborto, de parto prematuro e de nascimento a termo, foi analisado pela técnica histológica convencional com a coloraçäo de hematoxilina e eosina (HE). A técnica de IHQ foi realizada no material de 148 exames anatomopatológicos, que apresentaram alteraçöes inflamatórias, hemorragia, necrose e trombose, utilizando anticorpo policlonal Rabbit A "Listeria monocytogenes" B65420R (Biodesign®) na diluiçäo 1:1000 e complexo avidina-biotina-estreptavidina. O teste c² foi aplicado para a análise estatística. RESULTADOS: a presença de Lm foi identificada em 33,7 por cento das placentas analisadas pela técnica IHQ. Corioamnionite e vilite foram as alteraçöes inflamatórias que estiverem associadas a diferença significativa nas placentas positivas. Lm esteve presente nas placentas de 1º, 2º e 3º trimestre gestacional. Näo houve associaçäo entre idade das gestantes, casos de aborto e/ou parto prematuro e a presença ou ausência de Lm nas placentas. Abortos habituais ocorreram em pacientes com ou sem Lm no tecido placentário. CONCLUSÄO: a técnica de IHQ pode ser utilizada para confirmar o diagnóstico histopatológico de listeriose em todos os trimestres gestacionais

Identificação de Listeria monocytogenes em placentas humanas e espécimes de aborto pela técnica de imunoistoquímica / Identification of Listeria monocytogenes in human placentas and abortion species through immunohistochemical technique

A listeriose é causada por um microrganismo que se encontra amplamente disseminado na natureza e tem sido isolado do solo, de fezes humanas e de animais e pode, eventualmente, contaminar os alimentos. A Listeria monocytogenes é patogênica para o homem e tornou-se o principal patógeno nas doenças transmitidas pelos alimentos. Tendo-se em vista que a incidência de listeriose humana näo é bem conhecida e as placentites possuem aspecto morfológico inespecífico e näo säo, muitas vezes, investigadas para este fator etiológico, surgiu a motivaçäo para desenvolver a técnica de imunoistoquímica para o diagnóstico de Listeria monocytogenes em placentas ou produtos de aborto, utilizando um anticorpo policlonal anti-Listeria (Biodesign). Um projeto-piloto foi realizado a partir do material encontrado em dez placentas provenientes de abortos ou partos prematuros ocorridos no ano de 2000 no Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA). As lâminas foram analisadas através do exame microscópico convencional (HE) e de imunoistoquímica (IHQ). Os resultados deste projeto revelaram a presença de Listeria monocytogenes em cinco dos dez (50%) casos estudados. Todos os casos apresentaram alterações sugestivas de processo inflamatório agudo supurativo. Frente a estes achados torna-se importante considerar a infecçäo por Listeria monocytogenes detectável por IHQ como um elemento no diagnóstico da patogenia do aborto ou das infecções perinatais, podendo este achado contribuir para o tratamento dos recém-nascidos ou das parturientes. As características microscópicas de listeriose na placenta, embora näo-patognomônicas, permitem ao patologista um diagnóstico presuntivo, e a confirmaçäo pode ser realizada pelo método de imunoistoquímica

Diagnosis of the human fetal age based on the development of the normal kidney / Diagnóstico da idade fetal humana baseado no desenvolvimento normal do rim

Introduçäo e objetivos: O diagnóstico da idade fetal humana é usualmente estimado com base em medidas de tamanho e peso do feto. No entanto, esta estimativa näo é totalmente acurada, e muitas vezes é necessário combinar outros dados para determinar a idade fetal. A análise do desenvolvimento embriológico normal do rim pode auxiliar nesta determinaçäo. A histologia deste processo, apesar de bem descrita, apresenta uma documentaçäo fotográfica escassa. Pretendeðse preencher esta lacuna fornecendo a histologistas e patologistas, especialmente aos inexperientes, informações sobre o desenvolvimento renal no período préðnatal através de microfotografias. O objetivo do presente estudo foi conceder maior acurácia ao diagnóstico da idade fetal humana através da classificaçäo proposta e da documentaçäo apresentada. Material e métodos: Necropsias de fetos humanos de 6 a 40 semanas de gestaçäo foram estudadas através de microscopia óptica. O tecido renal foi analisado segundoa ocorrência de glomérulos e túbulos rudimentares, em diferenciaçäo e maduros; distribuiçäo espacial dos glomérulos no parênquina; presença de tecido nefrogênico; e diferenciaçäo corticomedular. Foram analisados no mínimo cinco exames diferentes para cada semana de desenvolvimento, perfazendo um total de 204 exames. As características foram quantificadas e o processo documentado através de microfotografias. Resultados e considerações finais: O desenvolvimento fetal do rim humano foi dividido em oito estágios com base nas características histológicas e a quantificaçäo realizada. Os estágios foram documentados através de microfotografias. A neoformaçäo de néfrons ocorreu até a 34ª semana. A partir da 35ª semana, os túbulos e glomérulos continuam a amadurecer, näo ocorrendo, no entanto, a formaçäo de novos néfrons. A classificaçäo proposta pretende conceder maior acurácia ao diagnóstico da idade fetal humana

Contribuição dos depósitos hepáticos de imunoglobulina A no diagnóstico da hepatopatia alcoólica / Contribution of hepatic immunoglobulin A deposits to the diagnosis of alcoholic hepatopathy

BACKGROUND: Alcoholic hepatic disease is a severe and frequent disease and its diagnosis is not always an easy task. AIM: To assess the contribution of immunoglobulin A (IgA) in the hepatic sinusoids for diagnosis of alcoholic hepatopathy. PATIENTS AND METHODS: The presence of IgA was studied through direct immunofluorescence in 59 patients submitted to hepatic needle biopsy, indicated by clinical or in vitro changes suggestive of chronic hepatopathy. RESULTS: A significant deposition of IgA was found in alcoholic patients as compared to non-alcoholic patients, with 76% sensitivity (95% CI: 54.5-89.8) and 73.5% specificity (95% CI: 55.3-86.5). In individuals who present only alcohol as the etiological agent of hepatopathy, compared with the subgroup of B or C virus carriers, the results were even more significant, with 85.7% sensitivity (95% CI: 56.2-97.5) and 89.5% specificity (95% CI: 65.5-98.2). CONCLUSION: The deposition of IgA in the hepatic sinusoids present sensitivity and specificity for the diagnosis of an alcohol-induced hepatic lesion. This resource can be particularly useful when conventional histology can not be define a specific cause for the change found

Effects of octreotide in experimental acute pancreatitis

O octreotide, um analogo sintetico de longa duracao da somatostatina, foi avaliado na prevencao e tratamento da pancreatite aguda experimental induzida pela tecnica da alca duodenal fechada. Quarenta ratos machos da raca Wistar (peso medio de 361 g) foram alocados em quatro grupos. Nos grupos nao-tratado (2), tratado (3) e profilatico (4), induziu-se a pancreatite aguda atraves da tecnica da alca duodenal fechada, enquanto que no grupo controle (1), o procedimento cirurgico foi...

Importância do sistema do complemento em nefrologia / The importance of the complement system in nephrology

Neste artigo de revisäo, os autores ressaltam a importância do sistema do complemento na patogênese de certas formas de glomerulonefrites humanas pela ocorrência de hipocomplementemia, a possível correlaçäo entre hipocomplementemia e atividade de doença e a lesäo tecidual mediada por complemento em certos modelos experimentais comparáveis as doenças humanas. A atividade do sistema do complemento é comentada com relaçäo à sua dosagem sérica, urinária e pesquisa de imuno-complexos depositados no rim por imunofluorescência direta.