Résumé
In this study we investigated the prevalence of the oppA gene, encoding the oligopeptide binding protein (OppA) of the major bacterial oligopeptide uptake system (Opp), in different species of the genus Xanthomonas. The oppA gene was detected in two Xanthomonas axonopodis strains among eight tested Xanthomonas species. The generation of an isogenic oppA-knockout derivative of the Xac 306 strain, showed that the OppA protein neither plays a relevant role in oligopeptide uptake nor contributes to the infectivity and multiplication of the bacterial strain in leaves of sweet orange (Citrus sinensis) and Rangpur lime (Citrus limonia). Taken together these results suggest that the oppA gene has a recent evolutionary history in the genus and does not contribute in the physiology or pathogenesis of X. axonopodis.
Résumé
Bacillus subtilis e alguns de seus parentes mais próximos possuem uma longa história de aplicações industriais e biotecnológicas. A busca de sistemas de expressão de antígenos baseados em linhagens recombinants de B. subtilis mostra-se atrativa em função do conhecimento genético disponível e ausência de uma membrana externa, o que simplifica a secreção e a purificação de proteínas heterólogas. Mais recentemente, esporos geneticamente modificados de B. subtilis foram descritos com veículos indestrutíveis para o transporte de antígenos vacinais. Todavia a produção e o transporte de antígenos por linhagens de B. subtilis encontra obstáculos, como a expressão gênica instável e imunogenicidade reduzida, que podem ser superados com o auxílio de tecnologias genéticas atualmente disponíveis. Apresentamos nesta revisão o estado atual da pesquisa em vacinas baseadas em B. subtilis, empregado tanto como fábrica de proteínas ou veículos, e discute algumas alternativas para o uso mais adequado de linhagens geneticamente modificadas.
Sujets)
Humains , Antigènes bactériens , Bacillus subtilis , Vaccins antibactériens , Vecteurs de médicaments , Conception de médicament , Antigènes hétérophiles , Protéines recombinantesRésumé
The electrophoretic profiles binding of penicillin binding proteins (PBPs) and outer membrane proteins (OMPs) of Yersinia pestis EV 76 were determined following in vivo growth in diffusion chambers implanted in the peritoneal cavity of mice. In contrast to Y. pestis grown under in vitro conditions which activate the low calcium response (LCR) regulon there was no significant qualitative or quantitative change of the PBP profile of Y. pestis cells during growth in diffusion chambers for up to 72 h following implatation in mice. Three OMPs, with molecular weight of 100, 60 and 58 kDa, were expressed in Y. pestis cells grown for 24 h, but not at 48 h or at 72 h, in diffusion chambers. These results indicate that growth of Y. pestis in intraperitoneal diffusion chambers activates genes which might be relevant to the growth in the mammal host.
Sujets)
Animaux , Souris , Pénicillines , Yersinia pestis/cytologie , Protéines membranaires , Protéines de transport , Chambres de culture à diffusion , Division cellulaireRésumé
As PBPs de Yersinia pestis, Y. enterocolitica e Y. pseudotuberculosis crescidas a 28ºC ou a 37ºC foram detectadas após marcaçäo com [3H]-benzilpenicilina e fluorografia dos géis de poliacrilamida. Cada amostra apresentou um perfil único de PBPs composto por 3 a 6 proteínas com peso molecular variando entre 120.000 e 43.000. Incubaçäo a 37ºC resultou em mudanças significativas nos perfis de PBPs das 3 espécies estudadas. As possíveis implicaçöes destes resultados na açäo dos antibióticos ß-lactâmicos e na fisiologia destas bactérias