Collagenous matrix as a predictor for bone formation: a digital technique for collagen quantification

The collagenous matrix plays a fundamental role in the process of bone regeneration, so it is essential to study how it is primarily formed in situations in which critical bone defects are created. Objective: this study seeks to quantify the collagenous matrix formed in critical bone defects in the calvaria of mice over the process of bone regeneration promoted by the association of poly(lactide-co-glycolide) (PLGA) porous scaffolds and stem cells from deciduous teeth (SCDT). In addition, this study attempted to establish a precise protocol for the digital quantification of collagen through a histological method. Materials and method: Nine Wistar rats were used, in which critical defects of 8.0 mm of diameter were made in their calvarium. The animals were divided into three groups (n = 9): I ­ PLGA scaffolds; II ­ PLGA scaffolds/SCDT; III ­ PLGA scaffolds/SCDT maintained in osteogenic medium for 13 days. Within sixty postoperative days, calvaria were removed for histometric analysis following a digital protocol. A specific digital analysis method was designed for this study, in which a more precise quantification and differentiation between collagen fibers and non-collagenous tissue was possible, excluding factors that would normally alter the results. Results: it was noted that the association of PLGA scaffolds and SCDT maintained in osteogenic medium resulted in collagen matrix formation statistically higher than the other groups (p<0.05). Conclusion: the protocol designed for collagen quantification was precise and efficient, producing methodologically standardized results.

Resilon and Gutta-percha cones: an evaluation of biocompatibility in the connective tissue of rats / Avaliação da biocompatibilidade de cones de Resilon e de gutapercha em tecido conjuntivo de ratos

Objective: This study tested tissue response to gutta-percha or Resilon cones at 7, 14, 30, 60 and 90 days. Methods: Thirty Wistar rats each received three subcutaneous implants of polyethylene tubes containing: GP (gutta-percha); R (Resilon); CG (control group ? empty tube). After histological processing, sections were analyzed by a calibrated examiner, using a light microscope to identify the presence of neutrophils, lymphocytes and plasma cells, eosinophils, macrophages and giant cells, fibrous capsule and abscesses, by an examiner using a light microscope. Kruskal-Wallis and multiple comparison tests were used for the statistical analysis. Results: There were no differences for the macrophages and giant cells, lymphocyte and plasma cell infiltrate, eosinophils, fibrosis or abscesses. Higher neutrophil infiltrate scores were observed at 7 days for groups R and CG (p? 0.05). In group R, the number of neutrophils decreased with time (p= 0.017). Conclusion: The results of the present study demonstrate that Resilon cones are well tolerated by tissues and have acceptable biocompatibility, in the same way as gutta-percha cones.

Objetivo: Avaliar a biocompatibilidade de cones de guta-percha e Resilon em tecido conjuntivo de ratos nos períodos de 7, 14, 30, 60 e 90 dias.Métodos: Trinta ratos Wistar receberam três implantes de tubos de polietileno contendo: GP (guta-percha), R (Resilon), CG (grupo controle - tubo vazio). Após cada período experimental, foi realizado o processamento histológico e os cortes foram analisados por um examinador calibrado, com auxílio de microscópio de luz para identificar a presença de neutrófilos; linfócitos e células plasmáticas; eosinófilos, macrófagos e células gigantes; cápsula fibrosa e abscessos. Para a análise estatística foram utilizados os testes de Kruskal-Wallis e de comparações múltiplas. Resultados: Não houve diferença para os macrófagos e células gigantes, linfócitos e células plasmáticas; eosinófilos, fibrose ou abscesso. Foram observadas altas taxas de infiltrado neutrofílico aos sete dias nos grupos R e GC (p ? 0,05). No grupo R, o número de neutrófilos diminuiu com o tempo (p = 0,017).Conclusão: Os resultados do estudo demonstram que os cones de Resilon são bem tolerados pelos tecidos e possuem biocompatibilidade aceitável, como cones de guta-percha.

Biocompatibility of RealSeal, its primer and AH Plus implanted in subcutaneous connective tissue of rats

OBJECTIVE: This study tested rat connective tissue response to RealSeal, RealSeal primer or AH Plus after 7, 15, 30, 60 and 90 days of implantation. MATERIAL AND METHODS: Thirty Wistar rats had subcutaneous sockets created on their back and received four implants each of polyethylene tubes containing one of the materials tested according to the groups: AH (AH Plus Sealer); RS (RealSeal Sealer); RP (RealSeal Primer); CG (control group - empty tube). After histological processing, sections were analyzed to identify the presence of neutrophils, lymphocytes and plasma cells, eosinophils, macrophages and giant cells, as well as fibrous capsule and abscesses, by an examiner using light microscope. Kruskal-Wallis and multiple-comparisons test were used for statistical analysis. Significance level was set at 5 percent. RESULTS: Lymphoplasmacytic infiltrate scores significantly higher than those of the control group were observed at 14 and 60 days in AH group, and at 90 days in RS group (p<0.05). There were no differences in terms of presence of macrophages, giant cells, eosinophils, neutrophils or fibrosis. AH Plus group scored higher for abscesses at 7 days than after any other period (p=0.031). RP group scored higher for lymphoplasmacytic infiltrate at 14 days than at 90 days (p=0.04). CONCLUSION: The main contribution of this study was to demonstrate that issues involved with tissue tolerance of a Resilon-containing sealer, RealSeal Sealer, cannot be attributed to its primer content.

Comparative analysis of two fixating and two decalcifying solutions for processing of human primary teeth with inactive dentin carious lesion

O objetivo deste estudo foi analisar qualitativamente a preservação das características teciduais pulpares de dentes decíduos ântero-superiores humanos com lesão cariosa de natureza inativa em dentina, comparando-se duas soluções fixadoras (paraformaldeído a 4% e formalina a 10%, ambos com tampão fosfato 0,1 M) e descalcificadoras [ácido fórmico/citrato de sódio – solução de Ana Morse e EDTA (ácido etileno diamino tetracético) a 10%]. Oito dentes foram subdivididos em 4 grupos (n = 2), variando-se o agente fixador e descalcificador. Grupo 1: paraformaldeído a 4% e solução de Ana Morse; Grupo 2: formalina a 10% e solução de Ana Morse; Grupo 3: paraformaldeído a 4% e EDTA a 10%; Grupo 4: formalina a 10% e EDTA a 10%. Os dentes foram fixados e posteriormente descalcificados até que uma consistência borrachóide fosse obtida. Cortes histológicos de 6μm de espessura foram corados com hematoxilina e eosina (H&E). A fixação com ambas as soluções demonstrou boa conservação tecidual, enquanto que a descalcificação com a solução de Ana Morse pareceu mais adequada, por requerer um menor tempo de processamento das amostras e promover uma melhor preservação dos componentes celulares e da matriz extracelular do tecido pulpar. O EDTA, além de exigir um tempo mais longo de processamento das peças, alterou as características morfológicas da polpa. A combinação formol a 10% – solução de Ana Morse pareceu ser favorável para a metodologia deste estudo.

Estudo comparativo da morfologia da polpa dentária de dentes humanos submetidos à técnica de clivagem e a técnicas de descalcificação química / Comparative study of dental pulp morphology from human teeth submitted to cutting technique or chemistry decalcification technique

Os rápidos avanços do conhecimento acerca do reparo e regeneração tecidual, têm despertado o interesse pela biologia pulpar. Entretanto, para avaliar microscopicamente a dinâmica do tecido pulpar, é necessário, inicialmente, que o dente seja submetido aos processamentos histológicos de fixação e descalcificação. A descalcificação pode afetar o grau de coloração e pode causar desnaturação de proteínas. Além disso, é um processo demorado, visto que o dente requer um longo período de desmineralização. Assim, a proposta deste trabalho foi de avaliar qualitativamente a matriz extracelular e as células da polpa dentária, comparando três grupos: dois em que o tecido dentário foi descalcificado e um em que a polpa foi removida dos tecidos duros, não necessitando do processo de descalcificação. Dez pré-molares foram fixados em formalina tamponada a 10% por 24 horas. Após, estes dentes foram divididos em três grupos: 4 dentes foram submetidos a processo de descalcificação por meio de solução de Morse, 3 por meio de solução de EDTA a 10% e; os 3 dentes restantes tiveram sua polpa separada dos tecidos duros dentários por meio da técnica de clivagem. Na seqüência, os três grupos foram processados por meio da técnica histológica de rotina e foram corados com H/E. Os resultados desta análise demonstraram que houve uma melhor conservação tanto da matriz extracelular, quanto das estruturas celulares no grupo da clivagem, seguido do grupo Morse e por fim, com a menor conservação das estruturas pelo grupo EDTA.

The rapid advances of the knowledge of repair and regeneration tissues had proved to be an exciting time for pulp biology. However, to study the dynamic of pulp tissue, it is necessary, initially, that the tooth be submitted to histological fixation and decalcification processing. Decalcification may affect the degree of staining and it may cause denaturation of proteins. Furthermore, it is a slow process, demanding long demineralization times for a tooth. Thus, the purpose of the present study was to compare, qualitatively, the pulp extracellular matrix and the pulp cells, submitted to different techniques: EDTA solution decalcification, Anna Morse solution decalcification and a last group which pulp was removed from tooth without decalcification. Ten premolar teeth were fixed in 10% buffered formalin for 24 hours. After this, the teeth were divided in three groups: 4 teeth underwent decalcification with Morse solution; 3, decalcification with 10% EDTA solution and; 3, were sectioned and their pulps were gently removed. Subsequently, the groups followed the routine histological technique and staining with H/E. The results demonstrated that both conservation of pulp cells and extracellular matrix were better in the group without decalcification, followed by the Morse group and, the last, with the worst structures conservation for the EDTA group.

Influência do consumo de etanol nas glândulas salivares / Influence of ethanol consumption in salivary glands

Objetivos: Realizar uma revisão da literatura sobre efeitos do consumo de etanol nas glândulas salivares. Fontes de Dados: Foi realizada uma busca no banco de dados Medline, utilizando as palavras alcohol/ethanol, salivary glands. Fonte de Dados: Tem sido observada na população uma elevação no consumo de bebidas alcoólicas pela população, ocasionando alterações em diversos sistemas. Aumento do volume das glândulas salivares e redução do fluxo salivar são frequentes em indivíduos alcoolistas. Como a saliva tem propriedades protetoras, a redução do fluxo torna a boca mais suscetível a injúrias, como as relacionadas à carie e à periodontite. Podem ser observadas alterações morfológicas, como acúmulo de tecido adiposo, hiperplasia dos ductos e redução da proporção de células acinares. O consumo de etanol é responsável ainda pela redução dos níveis de imunoglobulinas presentes na saliva. A degradação do etanol para metabólitos tóxicos, como o aceltaldeído, que podem modificar a função das glândulas salivares. Existe possibilidade de a saliva redistribuir o acetaldeído na boca, potencializando o dano produzido pelo consumo de etanol. além disso, podem estar presentes, como redução das prosta-glandinas, desnutrição, alterações do sistema imune e estresse oxidativo, este último envolvido na patogênese de uma série de doenças crônico-degenerativas, entre elas o câncer. Conclusões: Os pacientes alcoolistas devem receber uma atenção especial em relação aos cuidados bucais, pois suas condições locais e sistêmicas os tornam mais suscetíveis a doenças da boca, como cárie, periodontite e câncer.

A estrutura da dentina do dente decíduo e sua importâcia clínica / The dentin structure of the teeth deciduous and its clinical importance

Os autores fazem rápida revisäo bibliográfica a respeito da formaçäo e estrutura de dentina em geral. Ressaltam o fato de pouco existir na literatura consultada sobre a arquitetura e gênese da dentina decídua, sendo que os poucos trabalhos existentes estabelecem uma analogia entre a polpa e a dentina decídua dos dentes permanentes. Frente aos achados na literatura, analisaram o comportamento da dentina e polpa do dente decíduo no processo dinâmico de desmineralizaçäo/remineralizaçäo, seu comportamento diante dos fenômenos de erosäo/abrasäo e, finalmente junto aos materiais adesivos täo largamente usados atualmente