A Bordetella pertussis acellular vaccine candidate: antigenic characterization and antibody induction

A single-step chromatography on Matrex-Gel Blue A has been employed to obtain soluble extracts containing some of the most important antigens of Bordetella pertussis, pertussis toxin (PT), filamentous hemagglutinin (FHA), pertactin (69-kDa outer membrane protein), fimbriae (FIM2 and FIM3) and adenylate cyclase (AC). Two supernatants, P19 (48.8 mg PT, 6.8 mg FHA, 17.3 mg AC, 13 mg FIM2 and 4.9 mg FIM33 per liter) and P21 (0.1 mg PT, 0.07 mg FHA, 0.46 mg FIM2 and 0.94 mg FIM3 per liter), resulting from bacteria grown in Stainer-Scholte medium, were submitted to chromatography. Fractions with the antigens were obtained after stepwise elution with 60 mM sodium phosphate buffer, pH 6.0; 50 mM Tris-HC1, pH 7.4; 50 mM Tris-HC1, pH 7.4/0.75 M MgCl2; 50mM Tris-HCl, pH 7.4/4 M MgCl2 and 4 M urea. Preparations from P19 (containing 4.05 µg PT, 8.14 µg FHA, 6.3 µg AC, 3.37 µg 69-kDA, 9.54 µg FIM2 and 2.23 µg FIM3) and P21 (with 0.175 µg PT, 0.28 µg PT, 0.28 µg FHA, 0.002 µg69-kDa, 0.005 µg FIM2 and 0.122 µg FIM3) were detoxified with glutaraldehyde and tested as an acellular pertussis vaccine. These products were non-toxic for mice and induced high levels of antibodies against purified pertussis antigens, as judged by ELISA

Pesquisa de fatores de virulencia em Yersinia enterocolitica. / Research on virulence factors in Yersinia enterocolitica

Cinquenta amostras de Y. enterocolitica (32 provenientes da colecao do Instituto Pasteur, Paris, pertencentes a diferentes sorotipos, e 18 isoladas no Brasil, pertencentes aos sorotipos 0:3 e 0:5) foram estudadas quanto a invasibilidade, pesquisada pelo teste de Sereny e em celulas HeLa, e quanto a producao de enterotoxinas termolabil (LT) e termoestavel (ST). Tambem foi pesquisada, atraves de provas de hemaglutinacao manose-resistente, a presenca dos antigenos de aderencia CFA/I, CFA/II,K88 e K99. Nenhuma amostra produziu enterotoxina LT ou apresentou hemaglutinacao manose-resistente. Em celulas HeLa o teste foi positivo para 94,4% das amostras isoladas no Brasil e para 68,7% das amostras da colecao do Instituto Pasteur. No teste de Sereny, 77,7% das amostras isoladas no Brasil e 40,6% das amostras do Instituto Pasteur provocaram intensa conjuntivite em cobaios sem, entretanto, provocar a classica ceratoconjuntivite, produzida por amostras virulentas de Shigella.Producao de enterotoxina ST foi observada em 18,0% das amostras. Tanto a invasibilidade como a producao de ST foram observadas em diferentes sorotipos