Susceptibilidad in vitro a antifúngicos de especies de Cándida / In vitro antifungal susceptibility of Candida spp

Resumen Objetivo. Analizar la susceptibilidad in vitro de aislamientos de Candida spp. provenientes de onicomicosis obtenidos entre 2016 y 2019, para contribuir con el conocimiento sobre la necesidad o no de realizar pruebas de susceptibilidad a los microorganismos aislados antes de prescribir el tratamiento. Métodos. El estudio consistió en identificar 23 aislamientos de Candida spp. utilizando el sistema automatizado Vitek2® (bioMérieux, Francia). Se determinó la susceptibilidad in vitro de estos aislamientos ante dos antifúngicos tópicos (amorolfina y ciclopirox) y dos antifúngicos sistémicos (fluconazol e itraconazol) por el método de microdilución en caldo M27-A3 del Instituto Estándares para el Laboratorio Clínico (CLSI por sus siglas en inglés) de los Estados Unidos de América. Resultados. La mayoría de los aislamientos correspondieron a Candida parapsilosis (34,8 %), seguido por C. albicans (30,3 %), C. guilliermondii (17,4 %), C. tropicalis (8,7 %), C. dubliniensis (4,4 %) y C. krusei (4,4 %). No se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre las CIMs de los diferentes antifúngicos y en promedio hubo susceptibilidad para todos los antifúngicos analizados. Sin embargo, para fluconazol se encontró un aislamiento con CIM alta de C. guilliermondii y un aislamiento resistente de C. parapsilosis. Conclusiones. Las directrices internacionales recomiendan pruebas de susceptibilidad para Candida spp. de hemocultivos o tejidos tras infecciones sistémicas. En todas las demás candidiasis se identifica la especie y se revisan sus patrones de susceptibilidad en la literatura. Por lo tanto, es de importancia conocer que aislamientos de onicomicosis de Candida no-albicans, especialmente de C. guilliermondii y C. parapsilosis, presentan una susceptibilidad disminuida a ciertos antifúngicos que se utilizan como tratamiento, por lo que se recomienda realizar pruebas de susceptibilidad en caso de no tener una buena respuesta al tratamiento en casos de onicomicosis por estas levaduras.

Abstract Aim. The purpose of this investigation was to determine the in vitro susceptibility patterns of Candida spp. isolated from onychomycosis, in order to contribute with strategies for optimal clinical laboratory management of patients with onychomycosis infected with these yeasts. Methods . A total of 23 isolates of Candida spp. were identified with the automatized system Vitek®2 (system bioMérieux, France). In vitro susceptibility patterns were evaluated with two topic antifungals (amorolfine and ciclopirox) and two systemic antifungals (fluconazole and itraconazole) using the Clinical Laboratory and Standards Institute (CLSI) broth microdilution M27-A3 guidelines. Results . Most of the isolates were identified as Candida parapsilosis (34,8 %), followed by C. albicans (30,3 %), C. guilliermondii (17,4 %), C. tropicalis (8,7 %), C. dubliniensis (4,4 %) and C. krusei (4,4 %). There were no statistically significant differences among the MICs of the antifungals tested. However, there was one isolate of C. guilliermondii with high MIC for fluconazole and one fluconazole resistant isolate of C. parapsilosis. Conclusions. Susceptibility tests are only recommended internationally for Candida spp. isolated from blood stream or tissue in systemic infections. In every other candidiasis there is only a species identification, while its susceptibility pattern for treatment is reviewed in literature. Therefore, it is important to report that Candida no-albicans isolates from onychomycosis, especially C. guilliermondii and C. parapsilosis, have a reduced susceptibility to some antifungals commonly used for treatment. According to the obtained in vitro results, we recommend performing antifungal susceptibility testing in those cases of onychomycosis caused by Candida spp. no responsive to treatment.

Aislamiento de Cryptococcus neoformans en excrementos de paloma de Castilla (Columba livia) provenientes de lugares públicos de El Salvador / Isolation of Cryptococcus neoformans from droppings of the Feral Pigeon (Columba livia) found in public places in El Salvador

Resumen Objetivo: El objetivo de este estudio fue aislar levaduras pertenecientes al complejo de especies Cryptococcus neoformans de los excrementos de paloma de Castilla (Columba livia) recolectados de plazas y parques públicos de El Salvador. Métodos: Las muestras se sembraron en medios de cultivos convencionales y a las colonias confirmadas se les efectuó una tipificación mediante la técnica de restricción enzimática del gen URA5. Resultados: De un total de 66 muestras analizadas, tres estaban positivas por levaduras pertenecientes al complejo de especies Cryptococcus neoformans. El estudio molecular agrupó los aislamientos en los tipos moleculares VNI y VNII; ambos corresponden a la especie Cryptococcus neoformans sensu stricto. Conclusión: En los sitios estudiados, la presencia de esta levadura es muy reducida, probablemente debido a factores ambientales. Se presenta el primer reporte de Cryptococcus neoformans sensu stricto, genotipos VNI y VNII en El Salvador, esta especie es de relevancia en salud pública por el ser el responsable de más del 90% de los casos de criptococosis a nivel mundial.

Abstract Aim: The objective of this study was to isolate yeast that belonged to the Cryptococcus neoformans species complex from the feces of the Feral Pigeon (Columba livia), from public places in El Salvador. Methods: Samples were seeded in conventional culture media and confirmed colonies were typed using the enzyme restriction technique of the URA5 gene. Results: Of a total of 66 samples analyzed, three were positive for yeasts that belonged to the Cryptococcus neoformans species complex. The molecular study grouped the isolates in the molecular types VNI and VNII; both belonging to the species Cryptococcus neoformans sensu stricto. Conclusions: In the studied sites the presence of this yeast is very low, probably due to environmental factors. We present the first report of Cryptococcus neoformans sensu stricto genotypes VNI and VNII in El Salvador. This specie is relevant in public health for being responsible for more than 90% of cases of cryptococcosis worldwide.

Actividad combinada de itraconazol y terbinafina sobre aislamientos clínicos de Neoscytalidium dimidiatum / Combined activity of Itraconazole and Terbinafine over clinical isolates of Neoscytalidium dimidiatum

Resumen Objetivo: Analizar la susceptibilidad de N. dimidiatum ante el efecto combinado de itraconazol y terbinafina. Métodos: Se determinó la concentración mínima inhibitoria y la concentración inhibitoria fraccionada in vitro, mediante el método del tablero de ajedrez, a 15 aislamientos clínicos provenientes de onicomicosis de diferentes pacientes, todos positivos por N. dimidiatum. Se prepararon ensayos por duplicado con diluciones combinadas de los antifúngicos y se evaluó el efecto de ambos fármacos. Resultados: La concentración mínima inhibitoria promedio de solo itraconazol aplicado a los aislamientos fue de 30,83 μg/mL y de 4,49 μg/mL combinado con terbinafina. La concentración mínima inhibitoria promedio de solo terbinafina fue de 0,33 μg/mL y de 0,07 μg/mL combinada con itraconazol. Hay diferencias estadísticamente significativas entre las concentraciones mínimas inhibitorias promedio de los antifúngicos analizados en solitario respecto de las concentraciones mínimas inhibitorias combinadas; para itraconazol (t = 2,958; gl = 14; p = 0,01) y (t = 4,721; gl = 14; p < 0,001) para terbinafina. El uso combinado evidenció 40 % de sinergismo. Conclusiones: La combinación itraconazol-terbinafina presentó un efecto sinérgico total para inhibir el crecimiento de N. dimidiatum; esto ofrece una alternativa terapéutica en el tratamiento de las onicomicosis.

Abstract Aim: Study the combined susceptibility patterns of Neoscytalidium dimidiatum to the effect of Itraconazole and Terbinafine. Background: The Minimum Inhibitory Concentration and Fractional Inhibitory Concentration were determined in vitro by the chessboard method for 15 clinical isolates of onychomycosis, from different patients, all positives for N. dimidiatum. Duplicated trials were prepared with combined dilutions of antifungals and the effect of both drugs was evaluated. Results: The average Minimum Inhibitory Concentration of Itraconazole when applied alone for the isolates was 30.83 μg/mL and 4.49 μg/mL when combined with Terbinafine. The average Minimum Inhibitory Concentration of Terbinafine alone was 0.33 μg/mL and 0.07 μg/mL when combined with Itraconazole. Statistically significant differences were found between the average Minimum Inhibitory Concentrations of the antifungals analyzed alone versus the Minimum Inhibitory Concentrations obtained by mixing both compounds. That is for Itraconazole (t = 2,958; gl = 14; p = 0,01) and (t = 4,721; gl = 14; p <0,001) for Terbinafine. Combined use showed 40 % synergism. Conclusions: The Itraconazole-Terbinafine combination had synergistic effect to inhibit the growth of N. dimidiatum, which offers a therapeutic alternative in the treatment of onychomycoses caused by this fungus.

Contaminación fúngica ambiental en tres centros de enseñanza primaria del cantón central de la provincia de Heredia, Costa Rica / Aerial fungal contamination in three primary schools of the province of Heredia, Costa Rica

Justificación y objetivo: las esporas fúngicas aéreas son consideradas agentes etiológicos de la rinitis alérgica y el asma. El objetivo del presente estudio fue analizar la contaminación fúngica ambiental en tres centros de enseñanza primaria del cantón Central de la provincia de Heredia, midiendo la concentración de esporas fúngicas aéreas por metro cúbico. Métodos: se utilizó el equipo para muestreo volumétrico aéreo Burkard Personal Volumetric Air Sampler durante las épocas seca y lluviosa. Los conteos de esporas se relacionaron con los factores meteorológicos y las características estructurales de los centros educativos analizados. Resultados: se encontró un total de 1391,89 ± 119,70 esporas/m3 en marzo, 3194,45 ± 577,03 esporas/m3 en mayo, 3747,12 ± 568,05 esporas/m3 en octubre y 1009,99 ± 81,24 esporas/m3 en diciembre. En marzo, octubre y diciembre, aproximadamente el 91,0% de estas esporas pertenecían a cuatro grupos: Aspergillus/Penicillium, ascosporas, basidiosporas y Cladosporium. Sin embargo, en mayo el 78,46% de las esporas identificadas pertenecían al género Cladosporium. Al correlacionar la concentración de esporas fúngicas se encontró correlación negativa con la velocidad del viento (-0.418, p<0.05), correlación positiva con la precipitación pluvial (0,568, p<0,05), correlación positiva con el porcentaje de humedad relativa (0,504, p<0,05), y no se encontró correlación con los cambios de temperatura. Conclusión: la concentración de esporas fúngicas encontrada en las tres escuelas muestreadas es mayor al límite de 1000 esporas por metro cúbico, considerado saludable.

Background and aim: Fungal spores are considered etiological agents of allergic rhinitis and asthma; therefore, it is advised to monitor fungal levels within the classrooms. The aim of this paper was to study fungal aerial contamination in three public schools of Heredia by measuring the concentration of aerial fungal spores per cubic meter. Methods: We used the Burkard Personal Volumetric Air Sampler to collect and identify fungal spores during the dry and rainy season. The relationship between the fungal spore concentration, the meteorological factors and structural characteristics of the schools was determined. Results: A total of 1391.89 ± 119.70 spores/m3 was found in March, 3194.45 ± 577.03 spores/ m3 in May, 3747.12 ± 568.05 spores/m3 in October and 1009.99 ± 81.24 spores/m3 in December. Except for May, approximately 91.0 % of the spores identified belonged to four groups: Aspergillus/ Penicillium, ascospores, basidiospores and Cladosporium. In May, 78.46 % of the spores identified were Cladosporium. A negative correlation was found between spore concentration and wind velocity (-0.418; p<0.05), and a positive one with rain (0.568; p<0.05) and with humidity (0.504; p<0.05). No correlation was found with temperature changes. Conclusion: The three schools analysed presented fungal spore concentrations which exceeded the limit of 1000 spores per cubic meter which is considered as healthy.

Análisis de las reacciones de hipersensibilidad tipo I a los basidiomicentes en una población alérgica costarricense, durante 2009 / Analysis of the reactions of type I hypersensitivity to the basidiomycetes in a Costa Rica allergic population during 2009

Justificación y objetivos: Costa Rica es un país tropical en donde se ha encontrado una alta concentración de basidiosporas aéreas, las cuales miden alrededor de 4-13 cm de diámetro, y son por definición aerobiológicas, capaces de penetrar al tracto respiratorio inferior, irrespetando la barrera nasal. El presente estudio tiene como objetivos encontrar posibles fuentes de contaminación ambiental por basidiomicetes y determinar si en Costa Rica sería necesario analizar, de forma rutinaria, la reactividad por alergenos a basidiomicetes en la población portadora de enfermedad rinobronquial alérgica. Métodos: se determinó el porcentaje de pacientes alérgicos a los extractos de basidiomicetes, tipo carbón Sporisorium cruentum y Ustilago cynodontis y tipo roya Puccinia graminis subsp. graminis. A la vez, se recolectaron panículas de Panicum maximun para evaluar su contaminación por basidiomicetes. Resultados: se encontró que el 59,23 por ciento de los pacientes eran alérgicos a hongos y que el tipo de hongo al que más pacientes presentaron alergia fueron los basidiomicetes. El 100 por ciento de las panículas recolectadas estaban contaminadas con un hongo del género Ustilago. Conclusión: se recomienda el testeo continuo por basidiomicetes, ya que estos son los hongos a los que la mayoría de los pacientes estudiados presentó alergias...