Acción de las hormonas tiroideas sobre la modulación de la expresión genética de la enzima málica citosólica hepática, en ratas intoxicadas con hexaclorobenceno / Action of the thyroid hormone on modulation of the gene expression of the liver cytosolic malic enzyme, in intoxicated rats with hexachlorobenzene

El hexaclorobenceno (HCB) es un tóxico ampliamente distribuído en la biosfera. La exposición crónica de animales de laboratorio al HCB provoca disfunciones tiroideas. Previamente hemos demostrado que el HCB incrementa la actividad de enzimas hepáticas reguladas por hormonas tiroideas (HT) tales como: enzima málica (EM) y glucosa-6fosfato de dehidrogenasa (G6PD) sin alterar la actividad de la alpha-glicerol fosfato deshidrogenasa mitocondrial (alpha-GPD). En éste estudio hemos investigado si el HCB afectaba: a) la concentración del receptor de hormonas tiroideas (RT3) y su afinidad por el ligando, b) la expresión del gen de EM y de otras enzimas HT-dependientes, c) los complejos proteína/DNA formados sobre el elemento de respuesta a hormonas tiroideas (TRE). Se utilizaron hígados de ratas hembras Wistar intoxicadas con HCB (100 mg/100 g P.C.), por 9 y 15 días. El análisis de Scatchard mostró que ni la afinidad ni el número de sitios RT3 estaban alterados luego de 9 y 15 días de tratamiento con HCB (Control, Ka: 1,9 nM, Bmáx:3.9 fmol/100mug DNA; HCB9díasKa2.1nM, Bmáx4.5 fmol/100mug DNA; HCB15 días Ka 1.9nM, Bmáx5.1 fmol/100mug DNA). Tampoco los niveles de RNAm de TRbeta1 medidos por ensayos de protección a RNasa fueron afectados por HCB. Ensayos de Northern Blot han demostrado que los niveles de RNAm de EM se incrementaban 4 veces y 2 veces con respecto al control después de 9 y 15 días de intoxicación respectivamente, sin observarse alteraciones en los niveles de RNAm de otras enzimas cuya expresión es regulada por HT como gliceraldehído - 3 - fosfato deshidrogenasa (GAPDH) y fosfoenolpiruvatocarboxiquinasa (PEPCK) ni tampoco en la alpha-GPD mitocondrial. Ensayos de retardo en gel mostraron que el HCB no modificó la afinidad de las proteínas presentes en extractos nucleares por el TRE presente en el promotor de EM. Nuestros resultados sugieren que el RT3 no está involucrado en forma directa en la inducción de la expresión del gen de EM por HCB, sin embargo podría interaccionar con otros factores de transcripción en la sobreexpresión del gen de EM.

Studies on the regulation of RNA labeling and on the biochemical constituents of normal and abnormal human thyroid.

Los estudios realizados tuvieron como objetivo analizar la incorporacion de 3H-uridina al ARN y su regulacion hormonal, asi como el contenido total de yodo, T3,T4 ARN, ADN y proteina en tiroides humanas normales y anormales, obtenidas por cirurgia. El contenido de proteina, ARN y ADN no se encontro significativamente alterado en el adenoma folicular y en el bocio adenomatoso. La incorporacion de 3H-uridina al ARN de cortes tiroideos fue similar en glandulas normales y anormales. TSH y AMP ciclico estimularon la marcacion del ARN en tejido normal, pero no ejercieron efectos en adenoma folicular y bocio adenomatoso. Una disminucion significativa en la concentracion total de yodo, T3 y T4 fue observada en las muestras patologicas comparadas con las normales. Los resultados obtenidos sugeririan que las alteraciones bioquimicas de los pacientes estudiados estarian localizadas en un paso distal al receptor de la TSH y la adenilciclasa