Compounds used to produce cloned animals are genotoxic and mutagenic in mammalian assays in vitro and in vivo

The compounds 6-dimethylaminopurine and cycloheximide promote the successful production of cloned mammals and have been used in the development of embryos produced by somatic cell nuclear transfer. This study investigated the effects of 6-dimethylaminopurine and cycloheximide in vitro, using the thiazolyl blue tetrazolium bromide colorimetric assay to assess cytotoxicity, the trypan blue exclusion assay to assess cell viability, the comet assay to assess genotoxicity, and the micronucleus test with cytokinesis block to test mutagenicity. In addition, the comet assay and the micronucleus test were also performed on peripheral blood cells of 54 male Swiss mice, 35 g each, to assess the effects of the compounds in vivo. The results indicated that both 6-dimethylaminopurine and cycloheximide, at the concentrations and doses tested, were cytotoxic in vitro and genotoxic and mutagenic in vitro and in vivo, altered the nuclear division index in vitro, but did not diminish cell viability in vitro. Considering that alterations in DNA play important roles in mutagenesis, carcinogenesis, and morphofunctional teratogenesis and reduce embryonic viability, this study indicated that 6-dimethylaminopurine and cycloheximide utilized in the process of mammalian cloning may be responsible for the low embryo viability commonly seen in nuclear transfer after implantation in utero.

Atividade clastogênica e genotóxica de altas concentrações do extratoaquoso de Agaricus brasiliensis e diferentes respostas quando associadoaos inibidores de reparo de DNA, ARA-C e 3DEOT, in vitro / Clastogenic and genotoxic activity of high concentrations of Agaricus

O Agaricus brasiliensis Wasser & Didukh – Ab (=Agaricus blazei Murrill ss. Heinemann) é um basidiomiceto que vem sendo consumido em diversas partes do mundo no combate e tratamento de muitas doenças. Neste estudo, foram testados, em células de ovário de hamster chinês (CHO-k1), os efeitos clastogênicos e genotóxicos de altas concentrações de Ab e seu potencial protetor, por meio dos ensaios de aberração cromossômica (AC) e cometa (SCGE), associados a dois bloqueadores de reparodo DNA (citosina arabinoside trifosfato - Ara-C - inibidor de DNA polimerase α e 3’deoxitimidina5’trifosfato - 3DeoT - inibidor de DNA polimerase β), na presença ou não de um agente alquilante(metilmetanosulfonato). No teste de clastogenicidade, verificou-se que as concentrações 0,2 e 0,4 não se mostraram indutoras de dano, ao contrário da maior concentração (0,6). Nos tratamentos de genotoxicidade no SCGE, a concentração de 0,2 do extrato não mostrou atividade genotóxica, ao contrário das concentrações de 0,4 e 0,6, as quais foram efetivas indutoras de danos no DNA. Os resultados de anticlastogenicidade indicaram que, na maioria dos tratamentos realizados, o extrato aquoso de Ab não apresentou atividade protetora contra danos no DNA, induzidos pela Ara-C e Ara-C + MMS. Pelo SCGE, Ab, nas três concentrações testadas, não mostrou atividade antigenotóxica. Os dados sugerem cuidado no consumo e ingestão de Ab por seres humanos, principalmente em altas concentrações.