A comparison of molecular markers to detect Lutzomyia longipalpis naturally infected with Leishmania (Leishmania) infantum

The aim of the present study was to detect natural infection by Leishmania (Leishmania) infantum in Lutzomyia longipalpis captured in Barcarena, state of Pará, Brazil, through the use of three primer sets. With this approach, it is unnecessary to previously dissect the sandfly specimens. DNA of 280 Lu. longipalpis female specimens were extracted from the whole insects. PCR primers for kinetoplast minicircle DNA (kDNA), the mini-exon gene and the small subunit ribosomal RNA (SSU-rRNA) gene of Leishmania were used, generating fragments of 400 bp, 780 bp and 603 bp, respectively. Infection by the parasite was found with the kDNA primer in 8.6% of the cases, with the mini-exon gene primer in 7.1% of the cases and with the SSU-rRNA gene primer in 5.3% of the cases. These data show the importance of polymerase chain reaction as a tool for investigating the molecular epidemiology of visceral leishmaniasis by estimating the risk of disease transmission in endemic areas, with the kDNA primer representing the most reliable marker for the parasite.

Variabilidade genética dos componentes C3 e BF do sistema complemento em lúpus eritematoso sistêmico / Genetic variability of complement components C3 and BF in systemic lupus erythematosus

Objetivos - Analisar a variabilidade genética dos componentes C3 e BF do sistema complemento em pacientes brasileiros portadores de lúpus eritematoso sistêmico (LES) e as possíveis associações entre suas formas alotípicas e determinadas manifestações clínicas e laboratoriais da doença. Pacientes e métodos - O estudo foi realizado em 95 pacientes portadores de LES (88 mulheres e 7 homens, com variação etária de 14 a 57 anos, média de 30,18 anos), segundo os critérios de classificação do Colégio Americano de Reumatologia, e em 89 controles sadios. Os alótipos de C3 e de BF foram detectados no soro dos pacientes e controles através de eletroforese de alta voltagem em gel agarose, seguido de imunofixação com anticorpo específico. Resultados - Os alótipos de C3 e BF observados no presente estudo foram: C3S, C3F, C3SF, C3SS05 e BFS, BFF, BFSSF, BFSF1, BFSF075, BFSS07, BFF1. Os resultados obtidos demonstrarem aumento do alótipo BFF nos pacientes, quando comparados com os controles normais (p= 0,055; RR = 2,87); para os demais alótipos, não houve diferença signifiante quanto à sua distribuição. Menor frequência do alótipo BFS foi observada nos pacientes que apresentaram manifestações neurológicas, em relação aos que não as tiveram (p=0,059); RR = 0,28). Também nos pacientes que apresentaram serosites, observou-se frequência diminuída dos alótipos C3S e BFS, quando comparados com os que naõ apresentaram esta manifestação durante o curso da doença (p=0,036 para C3 e p=0,021 para BF; RR = 0,38 para ambos). Conclusões - A frequência diminuída de BFS nos pacientes com manifestações neurológicas e de C3S e BFS nos que apresentaram serosites no curso da doença sugere associação negativa e possível papel protetor desses alótipos no desenvolvimento dessas manifestações clínicas no LES. Os achados aqui descritos sugerem que a variabilidade genetica das proteínas C3 e BF do sistema complemento pode estar relacionada com o mecanismo etiopatogênico e com a expressão clínica do LES em pacientes brasileiros