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Gamme d'année
1.
Arq. bras. med. vet. zootec ; 63(3): 544-551, June 2011. ilus, tab
Article Dans Anglais | LILACS | ID: lil-595567

Résumé

The objective of the present study was to determine the sperm enrichment with X-bearing spermatozoa, after one centrifugation in a Percoll or OptiPrep continuous density gradient, using quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) of sperm DNA and resultant in vitro-produced bovine embryos by PCR. Frozen/thawed sperm was layered on density gradients and the tubes were centrifuged. Supernatants were gently aspirated and the sperm recovered from the bottom of the tubes. Cleavage and blastocyst rates were determined through in vitro production of embryos and PCR was performed to identify the embryos' genetic sex. A difference in blastocyst rate was found in the Percoll treatment compared to OptiPrep (P<0.05). The percentage of female embryos in the Percoll and OptiPrep groups was 62.0 percent and 47.1 percent, respectively. These results were confirmed by qPCR of spermatozoa DNA and underestimation was seen only in the Percoll group. It was possible to sexing sperm using simple approach.


O objetivo do presente estudo foi determinar o enriquecimento de espermatozoides portadores do cromossomo X após a centrifugação em gradiente de densidade contínuo de Percoll ou OptiPrep, utilizando reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qPCR) do DNA do espermatozoide e dos embriões bovinos produzidos in vitro resultantes pela PCR convencional. Espermatozoides descongelado foram depositados em gradientes de densidade e os tubos foram centrifugados. Os sobrenadantes foram gentilmente aspirados e os espermatozoides recuperados do fundo dos tubos. As taxas de clivagem e de blastocisto foram determinadas pela produção in vitro de embriões e a PCR foi realizada para a identificação genética do sexo dos embriões. Verificou-se diferença na taxa de blastocistos entre os grupos Percoll e OptiPrep (P<0,05). A porcentagem de embriões de fêmeas nos grupos Percoll e OptiPrep foi de 62,0 por cento e 47,1 por cento, respectivamente. Estes resultados foram confirmados pela qPCR do DNA de espermatozoides e uma subestimação foi observada no grupo do gradiente de densidade de Percoll. Foi possível a sexagem de espermatozoides utilizando uma metodologia simples.


Sujets)
Animaux , Bovins , Centrifugation en gradient de densité/médecine vétérinaire , Spermatozoïdes , Chromosome X , ADN , Recherche sur l'embryon , Réaction de polymérisation en chaîne/médecine vétérinaire
2.
Arq. bras. med. vet. zootec ; 60(3): 594-599, jun. 2008. ilus, tab
Article Dans Portugais | LILACS | ID: lil-487903

Résumé

Embriões bovinos produzidos in vitro, em estádio de mórula, foram cultivados em meio contendo anticorpos anti H-Y de alto título proveniente de ratos por 24h e, após este tempo, classificados em dois grupos: 1) embriões inibidos em estádio de mórula (classificados como machos) e 2) embriões que se desenvolveram e formaram a blastocele (classificados como fêmeas). O sexo de 311 embriões, distribuídos em três grupos de concentração dos anticorpos, 3 por cento, 5 por cento ou 7 por cento, foi identificado pela reação em cadeia da polimerase. Não houve desvio da proporção entre machos e fêmeas (P>0,05) nos grupos em que se utilizaram os anticorpos anti H-Y, quando comparadas ao grupo-controle, sem adição de anticorpos anti H-Y. Diferentemente dos resultados obtidos utilizando-se embriões bovinos produzidos in vivo, a sexagem com anticorpos anti H-Y de alto título em embriões produzidos in vitro não propiciou sucesso.


In vitro produced bovine embryos at morula stage were cultured in medium containing high titer of rat H-Y antisera for 24h. The embryos were classified in two groups: 1) embryos arrested at morula stage (classified as males); and 2) embryos that developed and formed a blastocoele (classified as female). The sex of 311 embryos, divided in three groups of concentration of H-Y antisera, 3 percent, 5 percent or 7 percent, was identified by polimerase chain reaction. The results showed no difference (P>0.05) on sexual deviation in groups in which the H-Y antisera was added, in relation to control group, in which no H-Y antisera was added. In contrast with results obtained with in vivo produced bovine embryos, the sexing of in vitro produced bovine embryos with high H-Y antisera titer did not succed.


Sujets)
Animaux , Antigène HY/analyse , Bovins , Détermination du sexe , Techniques de culture d'embryons/méthodes
3.
Braz. j. med. biol. res ; 29(11): 1485-90, Nov. 1996. ilus, tab
Article Dans Anglais | LILACS | ID: lil-187210

Résumé

The purpose of the present study was to generate monoclonal antibodies (mAbs) against conserved epitopes of B meningococcus which could be applicable to the immunoscreening of bacterial meningitis. Three mAbs reactive to a 46-kDa protein conserved in eight serogroups and several sero(sub)types of Neisseria meningitidis were selected for the present study. No reaction was detected wlth wholecell lysates of Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae type b or Escherichia coli. Two of these mAbs recognized 46-kDa epitopes in four other Neisseria spp, and the third, MC3.13, cross-reacted only with N. lactamica. All mAbs reacted with whole-cell lysates from a N. meningitidis mutant strain lacking the class 1 outer membrane protein (43 -47 kDa). Immunoelectron microscopy revealed a cytoplasmic location for the 46-kDa protein. The MC3.13 monoclonal antibody is potentially applicable to a rapid screening of bacterial meningitis.


Sujets)
Animaux , Souris , Anticorps monoclonaux/immunologie , ADN recombiné/immunologie , Épitopes/immunologie , Neisseria meningitidis/immunologie , Test ELISA , Hybridomes/immunologie , Immunotransfert , Souris de lignée BALB C
4.
Braz. j. med. biol. res ; 22(8): 983-6, 1989. tab
Article Dans Anglais | LILACS | ID: lil-77738

Résumé

Monoclonal antibodies (Mabs) were produced aginst (C57B1/6 "nude" lymphoblast cells. They are IgG2a and do not react with mouse serum proteins. Five Mabs were characterixed functional by immunohistochemistry and immunofluorescence in spleen, lymph nodes and Peyer's patches from nude and normal mice, an anormal mouse thymus. Two Mabs reacted with containing B-cells as indicared by immunoperoxidase staining, another recognized T- and B-cell sites and two specifically stained T lymphocyte-containing areas. Immunofluorescence studies confirmed the sites identified above by immunohistochemistry


Sujets)
Souris , Rats , Animaux , Anticorps monoclonaux/biosynthèse , Lymphocytes B/immunologie , Lymphocytes T/immunologie , Clonage moléculaire , Technique d'immunofluorescence , Activation des lymphocytes
5.
Ciênc. cult. (Säo Paulo) ; 35(1): 6-8, 1983.
Article Dans Portugais | LILACS | ID: lil-14997

Résumé

Informacoes recentes sobre a expressao do antigeno H-Y em transexuais tem demonstrado que a maioria desses pacientes possui a expressao do antigeno H-Y compativel com a do sexo ao qual eles desejam pertencer. E portanto provavel que o antigeno H-Y desempenhe um papel na determinacao da identidade sexual, em adicao a sua reconhecida acao na determinacao do sexo gonadal.Neste artigo nos propomos um modelo para a acao do antigeno H-Y na diferenciacao sexual do cerebro


Sujets)
Humains , Cerveau , Antigène HY , Différenciation sexuelle , Testostérone
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