Identification and optimization of a potent and highly selective D3 dopamine receptor agonist / 中国药理学与毒理学杂志

OBJECTIVE Dopamine receptors (DRs) are involved in the development and treatment of many neuropsychiatric disorders. Currently available dopaminergic drugs modulate both DRD2 and DRD3, leading to side effects and uncertainty as to the roles each DR subtype plays physiologically. Our lab employed high throughput screening paradigms to discover highly selective modulators for the DRD3. METHODS The NIH Molecular Libraries Program 400,000 + small molecule library was screened using the Discove RxPathHunter? β- arrestin assay for compounds that activate the DRD3 without effects on the DRD2. Confirmation and counter-screens assessed selectivity and mechanisms of action. We identified 62 potential agonists, and chose the most promising to perform a structure-activity relationship (SAR) study to increase potency while maintaining selectivity. The lead compound identified through this process, ML417, was also characterized using bioluminescence resonance energy transfer (BRET)-based β-arrestin recruitment and G-protein activation assays as well as p-ERK assays. Potential neuroprotective properties of this compound were assessed using a SHSY5Y neuronal cell model. RESULTS ML417 displays potent, DRD3-selective agonist activity in multiple functional assays. Binding and functional GPCR screens (>165 receptors) show ML417 has limited cross-reactivity with other GPCRs. ML417 also displays superior (compared to the reference compound pramipexole),dose-dependent protection against a decrease in neurite length induced by 10 μmol·L-1 of the neurotoxin, 6-hydroxydopamine, in the SHSY5Y cell model. CONCLUSION We have discovered and characterized ML417, a potent and highly selective DRD3 agonist. This compound will be useful as a research tool, and may prove useful as a therapeutic drug lead.

Avaliaçäo da contagem diferencial de células sangüíneas por metodologia automatizada e microscopia / Diferential blood cells counting evaluation by automated methodology and optical microscopy

O hemograma é uma importante análise laboratorial de triagem na avaliaçäo dos fatores estimuladores e diferenciadores dos precursores hemopoiéticos medulares. Em condiçöes fisiológicas há equilíbrio entre a produçäo e a destruiçäo das células sangüíneas, realizada através de microscopia óptica e/ou automatizada, pode revelar possíveis variaçöes fisiológicas ou mesmo situaçöes patológicas. O objetivo deste estudo foi comparar os resultados da contagem de células sangüínas, empregando-se metodologia automatizada, com aqueles obtidos através da avaliaçäo diferencial por microscopia óptica. As análises das células sangüíneas de 558 pacientes atendidos no Hospital Universitário foram realizadas no setor de Hematologia do Laboratório de Análises Clínicas. Os resultados deste estudo demonstram que através da metodologia automatizada determinou-se número significamente maior de neutrófilos (p<0,05) e de monócitos (p<0,0001), em relaçäo àqueles determinados por microscopia óptica. Nas determinaçöes de plaquetas, linfócitos, eosinófilos e basófilos, näo foram observadas variaçöes significativas entre os métodos avaliados (p>0,05). Esses dados sugerem que apesar da agilidade dos métodos automatizados, quando o aparelho apresentar alarmes específicos em sua leitura, a análise por microscopia óptica, ainda é indispensável afim de minimizar as limitaçöes na contagem diferencial das células sangüíneas realizadas em aparelhos automatizados, e assim garantir a qualidade do resultado

Estudo piloto de tratamento do TOC: terapia comportamental com crianças / A pilot study in an OCD treatment: behavioral treatment with children

O presente estudo-piloto é apresentado em formato de estudo de caso. Depois de descrever os passos de um tratamento comportamental inovador especialmente desenvolvido para crianças, säo relatados quatro casos em que este programa foi aplicado com sucesso