Antibacterial activity of different types of snake venom from the Viperidae family against Staphylococcus aureus / Atividade antibacteriana de diferentes tipos de veneno de serpentes da família Viperidae contra Staphylococcus aureus

Toxins and venoms produced by living organisms have exhibited a variety of biological activities against microorganisms. In this study, we tested seven snake venoms from the family Viperidae for antibacterial activity and the activities of reversal of antibiotic resistance and inhibition of biofilm formation against 22 clinical isolates of Staphylococcus aureus. Bothrops moojeni venom exhibited anti staphylococcal activity with the lowest mean value of minimum inhibitory concentration (MIC). Moreover, reversal of antibiotic resistance was observed for combinations of B. moojeni venom (½ x MIC) and norfloxacin or ampicillin (both ½ x MIC) for 86.4% and 50% of the isolates, respectively. B. moojeni venom alone at ½ MIC inhibited 90% of biofilm formation, whereas in combination with ciprofloxacin, both at ½ MIC, a reduction on the NorA efflux pump activity was observed. The detection of in vitro mutants colonies of S. aureus resistant to B. moojeni venom was low and they did not survive. A phospholipase A2 was purified from the venom of B. moojeni and displayed anti-staphylococcal activity when tested alone or in combination with ciprofloxacin. The results presented here will contribute to the search for new antimicrobial agents against resistant S. aureus.

Toxinas e venenos exibem uma variedade de atividades biológicas contra micro-organismos. Neste estudo, investigou-se a atividade de sete venenos de serpentes, da família Viperidae, sobre o crescimento de Staphylococcus aureus, na reversão fenotípica da resistência a antibióticos e inibição de formação de biofilme contra 22 isolados clínicos de S. aureus. O veneno de Bothrops moojeni apresentou a menor média de concentração inibitória mínima (CIM). Além disso, observou-se reversão da resistência a antibióticos para combinações do veneno de B. moojeni (½ x CIM) e norfloxacina ou ampicilina (ambos ½ x CIM) para 86,4% e 50% dos isolados, respectivamente. O veneno de B. moojeni na concentração de ½ CIM inibiu 90% de formação de biofilme, enquanto ele em combinação com ciprofloxacina, ambos na concentração de ½ CIM, diminuiu a atividade da bomba de efluxo NorA. A detecção in vitro de colônias mutantes de S. aureus resistente ao veneno de B. moojeni foi baixa e eles não sobreviveram. Uma fosfolipase A2 purificada a partir do veneno de B. moojeni exibiu atividade antibacteriana quando testada sozinha ou em combinação com ciprofloxacina. Os dados obtidos poderão contribuir para a pesquisa de novos agentes antimicrobianos contra S. aureus.

The first report of the qnrB19, qnrS1 and aac(6´)-Ib-cr genes in urinary isolates of ciprofloxacin-resistant Escherichia coli in Brazil

In this study, we investigated the presence of plasmid-mediated quinolone resistance (PMQR) genes among 101 ciprofloxacin-resistant urinary Escherichia coli isolates and searched for mutations in the quinolone-resistance-determining regions (QRDRs) of the DNA gyrase and topoisomerase IV genes in PMQR-carrying isolates. Eight isolates harboured the qnr and aac(6')-Ib-cr genes (3 qnrS1, 1 qnrB19 and 4 aac(6')-Ib-cr). A mutational analysis of the QRDRs in qnr and aac(6')-Ib-cr-positive isolates revealed mutations in gyrA, parC and parE that might be associated with high levels of resistance to quinolones. No mutation was detected in gyrB. Rare gyrA, parC and parE mutations were detected outside of the QRDRs. This is the first report of qnrB19, qnrS1 and aac(6')-Ib-cr -carrying E. coli isolates in Brazil.

Synergic interaction between ascorbic acid and antibiotics against Pseudomonas aeruginosa

Investigou-se in vitro o efeito da combinação do ácido ascórbico (AA) com seis antibióticos frente a 12 isolados multirresistentes de Pseudomonas aeruginosa. As concentrações inibitórias mínimas (CIM) foram determinadas pelo método de diluição em caldo. Foi estudado o efeito do AA nas CIM pelo cálculo das concentrações inibitórias fracionais (CIF). Para quase todas as combinações AA-antibiótico foi detectado efeito sinérgico, exceto para ampicilina e tobramicina. Indiferença foi observada na interação com todos os antibióticos, porém antagonismo foi somente observado para cloranfenicol. Os resultados deste estudo indicam que o sinergismo contra P. aeruginosa resistentes pode ocorrer entre AA e cloranfenicol, canamicina, estreptomicina e tetraciclina, ainda que as linhagens sejam resistentes aos antibióticos individualmente. Além disso, estes resultados encorajam futuros trabalhos in vivo a respeito da interação AA-antimicrobianos na incessante busca de novas alternativas para o controle de linhagens multirresistentes de P.aeruginosa.

Clonagem do operon de resistência ao íon mercúrio do plasmidio pBH100 em escherichia coli 5K, usando o vetor pAT 153 / Cloning of the mercuric ion-resistance operon of pBH100 into escherichia coli 5K using pAT153 as vector

Resumo: Inicialmente, o plasmidio pBH100 (95 Kb) que codifica resistência, canamicina, cloranfenicol, estreptomicina e mercúrio inorgânico, foi transferido, por conjugaçäo, da linhagem selvagem Escherichia coli BH100 para a receptora. E. coli 5K. Para clonar o operon Hg plasmideos recombinantes foram construidos in vitro a partira ligaçäo (ligase) de fragmentos de pBH100, contendo os marcadores de resistência ao mercúrio, com o veiculo de clonagem pAT153, ambos digeridos coma endonuclease BamH I. Após transformaçäo de Escherihia coli 5K análises genéticas e eletroforética permitiram a detecçäo dos plasmídios recombinantes pATHg 1, pATHg2, pATHg3. Análise de restriçäo do plasmídio pATHg1, digerido com BamHI e Hind III, evidenciou três bandas de 24, 4 e 1 Kb e duas bandas de 21 e 8 Kb, respectivamente. O pATHg3 apresentou menor tamanho (12 Kb) e menor estabilidade 37 (por cento)(au)