Résumé
Molecular characterization of Cryptosporidium spp.oocysts in clinical samples is useful for public health since it allows the study of sources of contamination as well as the transmission in different geographical regions. Although widely used in developed countries, in Brazil it is restricted to academic studies, mostly using commercial kits for the extraction of genomic DNA, or in collaboration with external reference centers, rendering the method expensive and limited. The study proposes the application of the modifications recently introduced in the method improving feasibility with lower cost. This method was efficient for clinical samples preserved at -20 °C for up to six years and the low number of oocysts may be overcomed by repetitions of extraction.
A caracterização molecular de oocistos de Cryptosporidium spp. em amostras clínicas é útil à saúde pública, pois permite estudo das fontes de contaminação e a transmissão em determinadas regiões geográficas. Apesar de largamente utilizada em países desenvolvidos, no Brasil está restrita aos estudos acadêmicos, na maioria utilizando kits comerciais para extração do DNA genômico, ou em colaborações com centros de referência externos, o que torna o método caro e limitado. Este estudo propõe a introdução de modificações nos métodos existentes para melhorar a viabilidade e baixar custos. O método proposto foi eficiente em amostras clínicas preservadas a -20 °C por até seis anos e o baixo número de oocistos pode ser contornado por replicadas extrações de DNA.
Sujets)
Animaux , Humains , Cryptosporidiose/diagnostic , Cryptosporidium/génétique , ADN des protozoaires/isolement et purification , Fèces/parasitologie , Oocystes , Protocoles cliniques , Cryptosporidium/isolement et purification , Réaction de polymérisation en chaîne , Reproductibilité des résultats , Sensibilité et spécificitéRésumé
This is the report on a patient with chronic diarrhea caused by microsporidia. He is married, infected with HIV and has low CD4 cell count. The diagnosis was established through stool parasite search using concentration methods and Gram - chromotrope staining technique. Ileum biopsy was also performed in this case. The etiological diagnosis may be established in a clinical laboratory, by chromotrope staining technique in routine microscopic examination of stool specimens.
Este é o relato de caso de doente com diarréia crônica causada por Microsporidia. O doente era homem, casado, infectado com HIV e tinha baixa taxa de linfócitos CD4+. O diagnóstico foi feito em exame de fezes utilizando métodos de concentração e técnica de coloração de Gram-Chromotrope. Biópsia de íleo também foi realizada neste caso. O diagnóstico etiológico pode ser feito em laboratório clínico, por técnicas de coloração baseada em cromotrope na rotina da observação microscópica direta.