Correlation of discocyte frequency and ATP concentration in preserved blood: a morphological indicator of red cell viability

Red blood cells (RBC) are viable if kept in an adequate preservative solution, although gradual changes in morphology and metabolism may occur. There is a gradual decrease in adenosine-5'-triphosphate (ATP) cocentration, pH, glucose consumption, and enzyme activity during preservation. The normal discocyte shapes are initially replaced by echimocytes and stomatocytes and, at final stages, by spherocytes, the last before eplenic sequestration. Post-transfusional survival has been correlated with the ATP concentration. RBC preserved in ADSOL, a solution containing adenine, dextrose, sodium chloride, and mannitol, are viable for transfusion for up to 6 weeks. Erythrocytes from 10 blood units taken from healthy adult donors were preserved for 12 weeks in ADSOL at 4 graus Celsius. We now report a significant correlation (r2 = 0.98) between the percentage of discocytes (89 to 7 percent) and ATP (100 to 10 percent) concentration in ADSOL-preserved RBC. The results suggest that the percent of discocyte shapes used as an indicator OF ATP concentration may be a useful indicator for quality control of RBC viability in centers which have limited assay facilites.

Padronizaçao para a dosagem de hemoglobina extracelular pelo metodo da cianometemoglobina / Cianomethemoglobin method padronization for supernatant hemoglobin determination

A concentraçao de hemoglobina (Hb) extracelular e um indice adequado para a avaliaçao da hemolise intravascular em estados hemoliticos diversos,bem como para a monitoraçao da integridade celular durante a preservaçao de eritrocitos in vitro. O metodo da cianometemoglobina e reconhecido como excelente quanto a exatidao e reprodutibilidade, e esta perfeitamente padronizado para determinar as concentraçoes de hemoglobina presentes no sague total. Entretanto, a dosagem de microquantidades de hemoglobina no meio extracelular, por este metodo, depende de uma padronizaçao no que diz respeito a diluiçoes a serem empregadas e a faixa de sensibilidade. Neste trabalho, demonstrou-se a linearidade do metodo na faixa de sensibilidade de 1 a 60 mg/dl de hemoglobina, nas condiçoes de ensaio, e indicou-se diluiçoes adequadas para a medida de hemoglobina extracelular em funçao (i) do grau dehemolise observado visualmente, (ii) da obtençaode observancias na faixa de sensibilidade do metodo. Na aplicaçao do metodo, determinou-se a hemoglobina extracelular em amostras de eritrocitos preservados a 4C em ADSOL, uma soluçao aditiva empregada rotineiramente em Banco de Sangue. De acordo com o esperado, a hemolise aumentou gradativamente durante 12 semanas de preservaçao e os valores obtidos variavam entre 0,008g/dl e 1,625g/dl de hemoglobina extracelular,neste periodo.

Alteraçoes bioquimicas durante a preservaçao de eritrocitos in vitro em meio CE com vitamina E / Biochemical changes during red blood cells preservation in CE medium plus vitamin E in vitro

Ja foi demonstrado que o meio CE com vitamina E mantem estaveis durante 100 dias os valçores hematimetricos de eritrocitos parcialmente fixados em glutaraldeido (Leonart,M.S.S. et al. Rev. Bras. Anal. Clin., 21:111, 1989). Neste trabalho, partiu-se de 20 unidades de sangue nenoso de individuos saudaveis e estudou-se o comportamento bioquimico dos eritrocitos durante 12 semanas de preservaçao a 4 C em meio CE com vitamina E (CE), em meio CE com vitamina E apos fixaçao parcial em glutaraldeido (GACE), e em ADSOL (Heaton, A et al. Transfusion, 21:600, 1981). Os valores de adenosina trifosfato (ATP), que se mantiveram acima de 80% dos iniciais durante 2 semanas de estoque, decairam rapidamente, e se exauriram em cerca de 4 semanas, sem diferenças significativas entre a s tres formas de preservaçao. As concentraçoes de 2,3-difosfoglicerato (2,3-DPG) permaneceram acima de 90% das iniciais na 1 semana. Nas amostras em ADSOL, os valores de 2,3-DPG foram significativamente mais baixos entre 14 e 28 dias (p< 0,05) e se exauriram ao final da 3 semana; nas CE e GACE, ao final da 5 semana. Observou-se decaimento na concentraçao extracelular de ions sodio e aumento na de ions potassio em 12 semanas de preservaçao. A entrada de sodio e a saida de potassio ocorreram mais lentamente nos eritrocitos preservados em ADSOL que em meio CE (p<0.05). A percentagem de hemolise observada durante o periodo de preservaçao foi significativamente diferente entre os tres grupos (p<0,05). Ao final de 12 semanas, ocorreu menos de 1% de hemolise em GACE, cerca de 2% em CE, e cerca de 7% em ADSOL. Concluiu-se que eritrocitos humanos conservados em meio CE mais vitaminas E, com ou sem fixaçao parcial em glutaraldeido, mantem o sistema de transporte de sodio e potassio e o metabolismo ativo de consumo de ATP e 2,3-DPG, e baixo grau de hemolise durante 12 semanas; portanto, adequados ao uso em laboratorio

Controle de qualidade externo do eritrograma: uma experiência em laboratórios de análises clínicas do Estado do Paraná / Quality control in hematology: an experience in clinical laboratories of Paraná State

Em experiência piloto de controle de qualidade externo para os valores do eritrograma, foi distribuída amostra constituída de eritrócitos humanos suspensos em meio de conservação (LEONART et all, Rev. Bras. Anál. Clín., 21:111-3, 1989) a 10 laboratórios de análises clínicas da Secretaria de Saúde do Estado do Paraná e a 4 outros laboratórios conceituados, incluindo os do Curso de Farmácia e do Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná. Os profissionais dos laboratórios participantes empregaram diferentes metodologias para a determinação de eritrócitos, hemoglobina, volume globular, volume corpuscular médio, hemoglobina corpuscular média e concentração de hemoglobina corpuscular média, seguindo instruções preconizadas para o manuseio da amostra. Os laboratórios demonstraram bom desempenho e os dados obtidos tiveram boa reprodutibilidade intra e interlaboratoriais. Estes resultados sugerem a viabilidade da amostra e do sistema empregado para implantação em Programas de Controle de Qualidade Interlaboratoriais.