Frequency of 8 CFTR gene mutations in cystic fibrosis patients in Minas Gerais, Brazil, diagnosed by neonatal screening

The nature and frequency of cystic fibrosis mutations in Brazil is not uniform due to the highly varied ethnic composition of the population. The average frequency of the F508del mutation has been reported to be 48.6 percent. Other common mutations in Brazil are G542X, R1162X, and N1303K. The aim of this study was to analyze the frequency of 8 mutations (F508del, G542X, R1162X, N1303K, W1282X, G85E, 3120+1G>A, and 711+1G>T) in a sample of 111 newborn patients with cystic fibrosis diagnosed by the Cystic Fibrosis Neonatal Screening Program of Minas Gerais State. The mutations were tested by allele-specific oligonucleotide PCR with specially designed primers. An allele frequency of 48.2 percent was observed for the F508del mutation, and allele frequencies of 5.41, 4.50, 4.05, and 3.60 percent were found for the R1162X, G542X, 3120+1G>A, and G85E mutations, respectively. The genotypes obtained were in Hardy-Weinberg equilibrium. These data demonstrate that the 8-mutation panel studied here has extensive coverage (68 percent) for the cystic fibrosis mutations in Minas Gerais. These data improve our knowledge of cystic fibrosis in Brazil, particularly in this region. In addition, this investigation contributed to the establishment of a sensitive and population-specific mutation panel, which can be helpful for molecular diagnosis of cystic fibrosis.

Diagnóstico da hepatite C em pacientes com doença renal crônica em hemodiálise: qual a melhor estratégia? / Diagnosis of hepatitis C in hemodialysis patients with end-stage renal disease (ESRD): what is the best strategy?

hepatite (HCV), comparados à população em geral, face à exposição frequente ao sangue e à contaminação nosocomial. Entretanto, o diagnóstico da hepatite C nesses pacientes é dificultado por sintomas inespecíficos, valores normais de alanina aminotransferase (ALT), na maioria dos casos, sorologia falso-negativa e baixa viremia. Objetivo: definir e avaliar a acurácia dos métodos diagnósticos da hepatite C em pacientes em HD. Métodos: foram avaliados 500 pacientes com DRC em HD, com anti HCV negativo, histórico e prospectivo de três meses, e avaliação de uma amostra de HCV RNA qualitativo e ALT mensal durante o seguimento. Foram excluídos pacientes com diagnóstico prévio de hepatite B e C, HIV, transplantados, em diálise peritoneal e com acesso venoso por cateter duplo-lúmen. Resultados: o tempo médio de HD foi de 48,8 ± 41,2 meses; ALT revelou-se normal em 92%; anti-HCV e HCV RNA negativos em 99,8% dos pacientes; apenas um paciente (0,2%) apresentou viremia positiva, ALT normal e anti HCV falso-negativo durante o período de seguimento. Conclusões: o teste anti-HCV e a ALT não detectaram precocemente a hepatite C em paciente renal crônico com viremia positiva, o que pode ser explicado pelo comprometimento da resposta imune associada à uremia, ou devido ao período prolongado de janela imunológica antes da soroconversão. Entretanto, o valor preditivo negativo do anti-HCV foi alto, sugerindo que uma redução no intervalo de seis meses da dosagem do anti-HCV pode ser uma estratégia para o monitoramento e a detecção precoce da hepatite C nesses pacientes

Introduction: Patients with end-stage renal disease (ESRD) on hemodialysis (HD) are at a higher risk of infection with hepatitis C virus (HCV), when compared to the general population, due to frequent blood exposure and nosocomial infections. However, the diagnosis of hepatitis C in those patients is very difficult due to non-specific symptoms, normal alanine aminotransferase (ALT) levels, in most cases, false-negative serology, and low viral load. Objective: To define and evaluate the accuracy of hepatitis C diagnostic methods on HD patients. Methods: Five hundred HD patients with ESRD, negative anti-HCV in the past, and, for the next three months, underwent monthly qualitative HCV RNA and ALT testing during follow-up. Patients with a diagnosis of hepatitis B and C, HIV, with kidney grafts, in peritoneal dialysis, and with venous access with double-lumen catheter were excluded. Results: Mean time of HD was 48.8 ± 41.2 months; it was detected normal ALT in 92% of patients; negative anti-HCV and HCV RNA in 99.8% of patients; only one patient (0.2%) showed positive viremia, normal ALT, and false-negative anti-HCV during the follow-up period. Conclusions: Anti-HCV and ALT did not allow early detection of hepatitis C in a patient with ESRD and positive viremia, which can be explained by the disruption of the immune response associated with uremia or due to the prolonged immunologic window before seroconversion. However, anti-HCV showed a high negative predictive value, suggesting that a reduction in the six-month interval of the anti-HCV test could be a strategy for monitoring and early detection of hepatitis C in those patients

Efeito do líquido folicular bovino tratado com carväo ativado na secreçäo de FSH em novilhas pré-púberes intatas e ovariectomizadas / Effect of charcoal-treated bovine follicular fluid on the secretion of FSH in ovariectomized and intact prepubertal heifers

O presente trabalho objetivou determinar o efeito do líquido folicular bovino tratado com carväo ativado (LFb) na secreçäo do hormônio folículo estimulante (FSH) de novilhas pré-púberes ovariectomizadas ou intatas. A aplicaçäo de LFb (quatro injeçöes de 10 ml com intervalo de 8 horas) provocou uma queda de aproximadamente 44 por cento na concentraçäo plasmática de FSH nas novilhas ovariectomizadas, mas näo teve efeito nas novilhas intatas. Näo foi observada hipersecreçäo de FSH após o término da aplicaçäo do LFb. Esses resultados sugerem que proteínas presentes no LFb atuam ao nível hipofisiário para inibir a secreçäo de FSH e, diferentemente das intatas, as novilhas ovariectomizadas constituem um modelo adequado para evidenciar esse efeito, particularmente quando o LFb possui reduzida atividade supressora do FSH

Perfis endócrinos e taxa de ovulaçäo de vacas superovuladas com FSH após imunizaçäo passiva contra líquido folicular bovino livre de esteróides / Endocrine profiles and ovulation rate of cow superovulated with FSH following passive immunization against steroid free-bovine follicular fluid

Dez vacas multíparas, secas, foram distribuídas aleatoriamente em dois grupos de cinco animais cada. Nos dias 8 a 12 do diestro, o primeiro grupo recebeu 100 ml de anti-soro contra líquido folicular livre de esteróides (anti-LFb) produzido em ovelhas ovariectomizadas. O segundo grupo (controle) recebeu 100 ml de soro de ovelhas näo-imunizadas. Seis horas após a aplicaçäo, os dois grupos foram superovulados com FSH (18 NIH-FSH-S1 unidades) e LH (0,29 NIH-LH-S1 unidades) administrados em quantidades decrescentes durante quatro dias. Na manhä do terceiro dia, foi administrada uma dose luteolítica de cloprostenol. Duas inseminaçöes foram realizadas 48 e 60 horas após. Os embriöes foram recuperados pelo método cervical 7 dias após a primeira inseminaçäo. Amostras de sangue foram coletadas durante todo o período experimental para determinar, por radioimunoensaio, as concentraçöes plasmáticas de FSH, LH e progesterona. Todas as vacas do grupo imunizado e 3 do grupo controle apresentaram mais de 2 CL. Näo existiu diferença significativa (p>0,05) na taxa de ovulaçäo entre os grupos imunizado e controle (14,4 e 9,9, respectivamente). O número de embriöes recuperado näo foi significativamente diferente (p>0,05) entre os grupos, embora o grupo imunizado tenha apresentado maior número de embriöes transferíveis (3,4 ñ 1,0 versus 0,8 ñ 0,4, p<0,05). As concentraçöes de gonadotrofinas plasmáticas näo foram correlacionadas com a taxa de ovulaçäo ou com o número de embriöes recuperados. As concentraçöes de progesterona plasmática foram positivamente correlacionadas (r = 0,88, p<0,01) com a taxa de ovulaçäo. Os resultados sugerem que o anti-LFb, aplicado antes da superovulaçäo, näo reduz a variabilidade da resposta ovariana