RÉSUMÉ
We report for the first time the expression of multiple protease activities in the first instar larva (L1) of the flesh fly Oxysarcodexia thornax (Walker). Zymographic analysis of homogenates from freshly obtained L1 revealed a complex proteolytic profile ranging from 21.5 to 136 kDa. Although some activities were detected at pH 3.5 and 5.5, the optimum pH for most of the proteolytic activities was between pH 7.5 and 9.5. Seven of 10 proteases were completely inactivated by phenyl-methyl sulfonyl-fluoride, suggesting that main proteases expressed by L1 belong to serine proteases class. Complete inactivation of all enzymatic activities was obtained using N-p-Tosyl-L-phenylalanine chloromethyl ketone (100 µM), a specific inhibitor of chymotrypsin-like serine proteases.
Sujet(s)
Animaux , Diptera/enzymologie , Serine endopeptidases/métabolisme , Diptera/croissance et développement , Électrophorèse sur gel de polyacrylamide , Larve/enzymologie , Serine endopeptidases/isolement et purificationRÉSUMÉ
A dinâmica da infecção de B. bovis no carrapato-vetor B. microplus foi estudada em condições laboratoriais na Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro no Laboratório de Protozoologia. Para tanto, foram examinadas 100 fêmeas ingurgitadas que se desprenderam naturalmente do hospedeiro vertebrado, sendo que 84 fêmeas apresentaram-se infectadas com esporocinetos de B. bovis, com a seguinte distribuição: 39 por cento, 33 por cento, e 12 por cento nos dias 3, 4 e 5 de incubação, respectivamente. Foram obtidas amostras de ovos provenientes das fêmeas positivas para B. bovis, 100 por cento das amostras de ovos estavam infectadas, apresentado a seguinte distribuição: 46,4 por cento, 34,5 por cento, 16,7 por cento e 2,4 por cento nos dias 4, 5, 6 e 7 de incubação, respectivamente. As freqüências acumuladas, tanto de fêmeas infectadas (84 por cento) quanto de ovos infectados (100 por cento) mantiveram-se até o 17° dia de incubação. De acordo com as freqüências acumuladas e o aumento do grau de infecção, conclui-se que amostras coletadas a partir do 5° e 7° dia de incubação, são ideais para o diagnóstico de B. bovis, em hemolinfa e ovos, respectivamente.