Acellular and "low" pertussis vaccines: adverse events and the role of mutations / Vacinas pertussis acelular e pertussis "low": eventos adversos e o papel das mutações

Objective: to discuss the current PAHO recommendation that does not support the substitution of traditional cellular DTP vaccine by acellular DTP, and the role of mutations, in humans, as the main cause of rare adverse events, such as epileptic-like convulsions, triggered by pertussis vaccine. Data review: the main components related to toxic effects of cellular pertussis vaccines are the lipopolysaccharide of bacterial cell wall and pertussis toxin. The removal of part of lipopolysaccharide layer has allowed the creation of a safer cellular pertussis vaccine, with costs comparable to the traditional cellular vaccine, and which may be a substitute for the acellular vaccine. Conclusion: The new methodology introduced by Instituto Butantan allows for the development of a new safer pertussis vaccine with low LPS content (Plow), and the use of the lipopolysaccharide obtained in the process in the production of monophosphoryl lipid A. This component has shown potent adjuvant effect when administered together with influenza inactivated vaccine, making possible to reduce the antigen dose, enhancing the production capacity and lowering costs.

Objetivo: Discutir as recomendações da WHO-OPAS que não consideram indicada a substituição da vacina DTP celular clássica pela DTP acelular e o papel de mutações, em humanos, como principal causa dos raros eventos de convulsões epileptiformes desencadeadas pela vacina pertussis. Revisão dos dados: Os principais componentes relacionados aos efeitos tóxicos da vacina pertussis celular são o lipopolissacarídio da parede celular da bactéria e a toxina pertussis. A remoção de parte da camada lipopolissacarídica permitiu a criação de uma vacina pertussis celular, mais segura e de custo comparável ao da vacina celular tradicional, podendo substituir a vacina pertussis acelular. Conclusão: A nova vacina pertussis, com baixo teor de LPS (Plow) desenvolvida pelo Instituto Butantan, além de oferecer uma vacina mais segura, permite o aproveitamento do lipopolissacarídeo para a produção de monofosforil lipídeo A. Esse componente mostrou-se potente como adjuvante e altamente eficiente quando administrado com a vacina de influenza, levando à possibilidade de se reduzir a dose de antígeno, aumentando a capacidade de produção e redução dos custos.

Auto-suficiência e inovação na produção de vacinas e saúde pública / Self-sufficiency and innovation in the production of vaccines and in public health

O Butantan desenvolve novas tecnologias e processos industriais para a produção de imunobiológicos, tendo como prioridade a saúde pública. Produz 150 milhões de doses de antígenos vacinais por ano, 82 por cento da produção nacional e 65 por cento dos soros, fornecidos a preços acessíveis ao Ministério da Saúde para distribuição universal a crianças e idosos. Novos desenvolvimentos incluem a nova vacina contra coqueluche, por um processo que permite simultaneamente produzir um adjuvante que permitirá reduzir a um quarto a dose da vacina sazonal e pandêmica da influenza, aumentando a produção e reduzindo custos; a vacina de raiva humana com o maior rendimento descrito e a vacina combinada BCG-hepatite B-pertussis da maternidade. Em colaboração comNIH, Path e PDVI, o Butantan está iniciando a produção e o ensaio das vacinas para rotavírus e dengue. O surfactante deve reduzir a mortalidade neonatal que as vacinasnão protegem.

Neisseria meningitidis serogroup C polysaccharide production by varying the bacteria inoculum and the initial glucose concentration

A produção de polissacarídeo para a produção de vacina específica contra N. meningitidis sorogrupo C é o principal produto obtido dos cultivos deste microorganismo. Para uma análise comparativa da produção de polissacarídeo variando as quantidades de inóculo e as concentrações iniciais de glicose, realizaram-se quatro ensaios, empregando planejamento fatorial 22, em duplicata. As amostras foram retiradas a cada duas horas para a determinação da concentração celular, pH, glicose e concentração de polissacarídeo. O critério analítico foi baseado na concentração final de polissacarídeo e no fator de conversão célula/polissacarídeo (YP/X). Os melhores resultados de concentração final de polissacarídeo (0,105 g/L) e YP/X(0,078) ocorreram na condição de cultivo com maior inóculo (densidade óptica de cerca de 0,1 a 540 nm). O polissacarídeo obtido ao final desse cultivo foi eluído em gel-cromatografia para determinação de peso molecular, sendo um antígeno adequado para a produção da vacina.

Analysis of the immunogenicity and stability of a porcine pulmonary surfactant preparation administered in rabbits

OBJETIVO: Estudar a imunogenicidade e a estabilidade do surfactante de origem porcina produzido pelo Instituto Butantan. MÉTODO: Experimento imunogenicidade: 16 coelhos da raça New-Zealand-White (Peso de 1000g) foram divididos em grupos de 4 animais. Cada grupo foi designado para receber: a) Surfactante do Butantan, b) Survanta® (Abbott Laboratories), c) Curosurf (Farmalab Chiesi) e d) nenhum tratamento com surfactante. Os surfactantes foram administrados via intratraqueal e o sangue dos animais foi coletado antes, 60 e 180 dias após a administração do surfactante. O soro obtido foi analisado quanto a presença de anticorpos anti-surfactante pelo método ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). Experimento estabilidade: O surfactante do Butantan usado neste experimento tinha sido armazenado por um ano em refrigerador (4 a 8°C) e sua estabilidade foi analisada em condições distintas de experimentação, usando o modelo de coelho prematuro. RESULTADOS: Experimento imunogenicidade: Nenhum dos surfactantes analisados determinou a produção de anticorpos contra seus constituintes. Experimento estabilidade: Os resultados deste estudo demonstraram que o surfactante do Instituto Butantan mostrou eficácia semelhante a do Curosurf após ter sido submetido à condições adversas ao longo do tempo. A eficácia foi demonstrada através da complacência pulmonar dinâmica, pressão ventilatória e da curva pressão-volume. CONCLUSÃO: Os resultados deste estudo demonstraram que o surfactante do Instituto Butantan pode representar um tratamento alternativo de reposição de surfactante.

Mecanismo de ação da insulina / Mechanisms of the insulin action

Há mais de sessenta anos, von Mering e Minkowsky fizeram suas primeiras experiências em animais pancreactomisados, trabalhos estes que há vinte e cinco anos atrás culminaram com a descoberta ...

Influence of initial L-asparagine and glycerol concentrations on the batch growth kinetics of Mycobacterium bovis BCG

Estudou-se a influência das concentrações iniciais, no meio de Sauton, de asparagina e glicerol sobre as produtividades, expressas em unidades formadoras de colônias e biomassa microbiana, referentes aos cultivos submersos do Mycobacterium bovis, em biorreator de 20 mL. As concentrações iniciais de 2,27 e 25 mL/L de asparagina e glicerol, respectivamente, conduziram à maior produtividade, em unidades formadoras de colônias, a saber 2,7.106 colônias/mg.dia. Por outro lado, as concentrações de 4,54 e 25 mL/L dos mesmos componentes, corresponderam à melhor produtividade em biomassa, a saber: 2,5 g/dia. Através das análises dos consumos relativos de asparagina e glicerol (50 e 26 per center respectivamente), verificou-se também que as concentrações destes componentes podem ser reduzidas na composição original do meio de Sauton, com o objetivo de obter uma produção otimizada de vacina BCG em bioreator.

Polysaccharide production in batch process of Neisseria meningitidis serogroup C comparing Frantz, modified Frantz and Cartlin 6 cultivation media

Polysaccharide of N. meningitidis serogroup C constitutes the antigen for the vaccine against meningitis. The goal of this work was to compare three cultivation media for production of this polysaccharide: Frantz, modified Frantz medium (with replacement of glucose by glycerol), and Catlin 6 (a synthetic medium with glucose). The comparative criteria were based on the final polysaccharide concentrations and the yield coefficient cell/polysaccharide (Y P/X). The kinetic parameters: pH, substrate consumption and cell growth were also determined. For this purpose, 9 cultivation runs were carried out in a 80 L New Brunswick bioreactor, under the following conditions: 42 L of culture medium, temperature 35°C, air flow 5 L/min, agitation frequency 120 rpm and vessel pressure 6 psi, without dissolved oxygen or pH controls. The cultivation runs were divided in three groups, with 3 repetitions each. The cultivation using the Frantz medium presented the best results: average of final polysaccharide concentration = 0.134 g/L and Y P/X=0.121, followed by Catlin 6 medium, with results of 0.095 g/L and 0.067 respectively. Considering the principal advantages in the use of the synthetic medium, i.e. facilitation of a cultivation and purification steps of the polysaccharide production process, there is a possibility that in the near future, Catlin 6 will replace the traditional Frantz medium.

Nitrogen consumption during batch cultivation of Neisseria meningitidis (serogroup c) in Frantz medium

Capsular polysaccharide, extracted from microorganism cultivations, is the principal antigen for elaboration of vaccine against the disease caused by Neisseria meningitidis serogroup C. The final protein content allowed in this vaccine is 1 (per cent). In order to find a relationship between nitrogen consumption and cell growth, including polysaccharide production, and cell nitrogen content, cultivations were carried out in an 80 liters bioreactor (total capacity), under the following conditions: Frantz medium; temperature of 35ºC; air flow of 5L/min (0.125vvm); agitation frequency of 120 rpm and vessel pressure of 6 psi (k(L)a=0.07min(-1).Concentrations of biomass, total polysaccharide, cellular nitrogen, residual organic and inorganic nitrogen in the medium were measured during cultivation. From five cultivations carried out under the same conditions, a mean cell nitrogen percentage of 12.6(per cent)(w/w) in respect to the dry biomass was found. The inorganic nitrogen in the medium did not change significantly along the cultivation time, whereas the organic nitrogen consuption was linearly related to cell growth, with constant yeield factors (average of 8.44). Polysaccharide production kinetics followed the cell growth kinetics until the beginning of the stationary growth phase. A supplemental polysaccharide production was observed until the end of cultivation, but without cell nitrogen absorption. Thus, the results indicate that polysaccharide is produced in two phases, being the first one biomass formation followed by non-associated to growth. /

Tween 20, Brij 35 and Triton X-100 determination exploiting the properties of the oxyethylene groups in the presence of proteins

A determinação espectrofotométrica na região do ultravioleta para quantificação de detergentes foi baseada na formação de complexo não estequiométrico entre o detergente e os reagentes (cloreto de bário e ácido fosfomolíbdico). A quantidade de complexo dissolvido com 2-metoxietanol foi quantitativamente medida em 310 nm. A metodologia foi reprodutível na faixa de 1-50 µg/mL para os três detergentes testados: Tween 20, Brij 35 e Triton X-100. Detectou-se interferência da proteína. Para superar tal interferência, brancos diferentes foram usados para as curvas padrão dos detergentes e para as amostras de proteínas purificadas

Safety and immunogenicity of hepatitis b vaccine butang in adults

Vacina contra hepatite B, produzida no Instituto Butantan em levedura recombinante, foi administrada em dois grupos de voluntarios adultos (I e II) seguindo dois esquemas diferentes de imunizacao. No primeiro ensaio (doses de 10 ug e esquema de vacinacao de 0, 1, 3 meses). 106 individuos completaram p programa de imunizacao proposto...

Preliminary report of the use on adults of a recombinant yeast-derived hepatitis B vaccine manufactured by Instituto Butantan

Tres doses de 10 ug da vacina recombinante contra hepatite B, produzida pelo Instituto Butantan, atrave de tecnologia propria, foram administradas numa populacao de adultos (idade media 30 anos), seguindo o esquema de imunizacao 0,1 e 6 meses apos a primeira dose. A avaliacao clinica da vacina foi considerada satisfatoria em termos de imumogenicidade (titulos dos anticorpos anti-HBs entre 17,5-29500 UI/1, soroconversao 95,3 por cento) e reatividade (sem efeitos colaterais e sintomas clinicos relevantes)

Batch cultivation kinetics of Neisseria meningitidis (Serogroup) in Frantz medium. I. growth and polysaccharide production

Polysaccharide of N. meningitidis serogroup C constitutes the antigen for the production of the specific vaccine against this serogroup. The production kinetics of polysaccharide (serogroup C) was studies in five cultivations carried out in an 80 L fermenter (total capacity), under the following process conditions: Frantz medium; temperature 35§C; air flow 5 L.min-1 (o.125 vvm); agitation frequency 120 rpm and vessel pressure 6 psi. Global yeld factors and ield coefficients were calculated. It was observed two distinguished polysaccharide production phases: growth associated and a growth non-associated. The cell productivity was about 0.11 (g drymass. L -1.h-1) and polysaccharide productivity near 7.0 (mg polysac. L-1. h-1)(AB)

A rapid method to evaluate the bactericidal activity of hiperimmune serum against Vibrio cholerae 01 using oxidase test

Desenvolveu-se ensaio rapido para medir o efeito de soros imunes contra o Vibrio cholerae 01, tendo-se por base a atividade de oxidase de culturas de bacterias em placas de ELISA

Brazilian biotechnology for health: fact or fiction? The case of immunologicals

A discussion is presebted on the models, goals, problems and achievements to implement biotechnology in the areas of health sciences, the impact of the Government through PADCT and the Self-sufficiency Program of the Ministry of Health, as viewed from Instituto Butantan's experience