First complete Genome Sequence of Zika Virus (Flaviviridae, Flavivirus) from an Autochthonous Transmission in Brazil

We report here the genome sequence of Zika virus, strain ZikaSPH2015, containing all structural and nonstructural proteins flanked by the 5' and 3' untranslated region. It was isolated in São Paulo state, Brazil, in 2015, from a patient who received a blood transfusion from an asymptomatic donor at the time of donation.

Yellow fever epizootics in non-human primates, São Paulo state, Brazil, 2008-2009 / Epizootias de febre amarela em primatas não humanos no estado de São Paulo, Brasil, 2008-2009

Since 2000, the expansion of Sylvatic Yellow Fever (YF) has been observed in the southeast of Brazil, being detected in areas considered silent for decades. Epizootics in non-human primates (NHPs) are considered sentinel events for the detection of human cases. It is important to report epizootic events that could have impact on the conservation status of susceptible species. We describe the epizootics in NHPs, notified in state of São Paulo, Brazil, between September 2008 to August 2009. Ninety-one epizootic events, involving 147 animals, were reported in 36 counties. Samples were obtained from 65 animals (44.2%). Most of the epizootics (46.6%) were reported between March and April, the same period during which human cases of YF occurred in the state. Biological samples were collected from animals found dead and were sent to Instituto Adolfo Lutz, in São Paulo. Two samples, collected in two counties without an indication for YF vaccination, were positive for the virus. Another 48 animals were associated with YF by clinical-epidemiological linkage with laboratory confirmed cases. Because the disease in human and NHPs occurred in the same period, the detection of the virus in NHPs did not work as sentinel, but aided in the delineation of new areas of risk.

Desde 2000, vem sendo observada a expansão da febre amarela (FA) no Sudeste do Brasil, sendo detectados casos em áreas consideradas silenciosas por décadas. Epizootias em primatas não humanos (NHPs) são considerados eventos sentinela para a detecção de casos humanos. É importante relatar eventos epizoóticos que podem ter impacto sobre o estado de conservação de espécies sensíveis. Descrevemos as epizootias, notificadas em NHPs no estado de São Paulo, Brasil, entre setembro de 2008 a agosto de 2009. Noventa e um eventos epizoóticos, envolvendo 147 animais, foram notificados em 36 municípios. As amostras foram obtidas a partir de 65 animais (44,2%). A maioria das epizootias (46,6%) foram registradas entre março e abril, no mesmo período no qual YF em que casos humanos ocorreram no estado. As amostras biológicas foram coletadas de animais encontrados mortos e enviadas ao Instituto Adolfo Lutz, em São Paulo. Duas amostras, coletadas em dois municípios, sem indicação para a vacinação de febre amarela, foram positivos para o vírus. Outros 48 animais foram associados com FA por vínculo clínico-epidemiológico com casos confirmados laboratorialmente. Devido a doença em humanos e NHPs terem ocorrido no mesmo período, a detecção do vírus em NHPs não funcionou como sentinela, mas ajudou no processo de delimitação de novas áreas de risco.

First isolation of dengue 4 in the state of São Paulo, Brazil, 2011 / Primeiro isolamento de Dengue 4 no Estado de São Paulo, Brasil, 2011

We report the first isolation of Dengue virus 4 (DENV-4) in the state of São Paulo, from two patients - one living in São José do Rio Preto and the other one in Paulo de Faria, both cities located in the Northwest region of the state. The virus isolations were accomplished in the clone C6/36 Aedes albopictus cell line, followed by indirect immunofluorescence assays, performed with type-specific monoclonal antibodies that showed positive reactions for DENV-4. The results were confirmed by Nested RT-PCR and Real-Time RT-PCR assays. The introduction of DENV-4 in a country that already has to deal with the transmission of three other serotypes increases the possibility of the occurrence of more severe cases of the disease. The importance of early detection of dengue cases, before the virus spreads and major outbreaks occur, should be emphasized.

Relatamos o primeiro isolamento do vírus Dengue 4 (DENV-4) no Estado de São Paulo, de dois pacientes residentes em São José do Rio Preto e Paulo de Faria, ambos municípios localizados na região Noroeste do Estado. O isolamento do vírus foi realizado em clone C6/36, linhagem de células de Aedes albopictus seguido por imunofluorescência indireta, realizada com anticorpos monoclonais tipo específicos, que apresentou reação positiva para DENV-4. Os resultados foram confirmados por testes de Nested RT-PCR e RT-PCR em Tempo Real. A introdução do DENV-4 no país, com uma população suscetível a esse vírus e que já convive com a transmissão de outros três sorotipos, aumenta a possibilidade da ocorrência de casos mais graves da doença. Deve ser enfatizada a importância da detecção precoce de casos de dengue, antes que ocorra a propagação do vírus e que surtos importantes aconteçam.

Evaluation of dengue NS1 antigen detection for diagnosis in public health laboratories, São Paulo State, 2009 / Avaliação da detecção do antígeno NS1 para diagnóstico de dengue nos Laboratórios de Saúde Pública, Estado de São Paulo, 2009

The present work evaluated the diagnostic accuracy of detection of Dengue NS1 antigen employing two NS1 assays, an immunochromatographic assay and ELISA, in the diagnostic routine of Public Health laboratories. The results obtained with NS1 assay were compared with virus isolation and, in a subpopulation of cases, they were compared with the IgM-ELISA results obtained with convalescent samples. A total of 2,321 sera samples were analyzed by one of two NS1 techniques from March to October 2009. The samples were divided into five groups: groups I, II and III included samples tested by NS1 and virus isolation, and groups IV and V included patients with a first sample tested by NS1 and a second sample tested by IgM-ELISA. Sensitivity, specificity, positive and negative predictive values, Kappa Index and Kappa Concordance were calculated. The results showed that NS1 testing in groups I, II and III had high sensitivity (98.0 percent, 99.5 percent and 99.3 percent), and predictive values and Kappa index between 0.9 - 1.0. Groups IV and V only had Kappa Concordance calculated, since the samples were analyzed according to the presence of NS1 antigen or IgM antibody. Concordance of 92.1 percent was observed when comparing the results of NS1-negative samples with IgM-ELISA. Based on the findings, it is possible to suggest that the tests for NS1 detection may be important tools for monitoring the introduction and spread of Dengue serotypes.

Esse estudo avaliou a acurácia do diagnóstico por detecção do antígeno NS1 do vírus Dengue empregando-se ensaios em dois formatos, imunocromatográfico e ELISA, na rotina diagnóstica dos laboratórios de Saúde Pública. Compararam-se os resultados de NS1 com os resultados de isolamento viral e, em parte dos casos, foi feita a comparação com os resultados de IgM-ELISA, obtidos nas segundas amostras. Um total de 2.321 amostras de soros, obtidas no período de março a outubro de 2009, foram analisadas por uma das duas técnicas NS1. As amostras foram divididas em cinco grupos: I, II e III, que incluíram amostras analisadas por testes NS1 e por isolamento de vírus. Os grupos IV e V incluíram pacientes com a primeira amostra processada por NS1 e segunda por IgM-ELISA. Foram analisadas sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo e negativo, concordância e índice Kappa. Os resultados mostraram que os grupos I, II e III apresentaram alta sensibilidade (98,0 por cento, 99,5 por cento e 99,3 por cento), valores preditivos e índice Kappa entre 0,9 - 1,0. Nos grupos IV e V, apenas concordância foi calculada, dado que as amostras foram analisadas quanto à presença de antígeno NS1 ou de anticorpos IgM. Comparando-se os resultados negativos de NS1 com IgM-ELISA houve 92,1 por cento de concordância. Com base nas constatações feitas, é possível sugerir que a detecção de NS1 pode ser importante ferramenta para monitorar a introdução e disseminação dos sorotipos de Dengue.

Isolation of yellow fever virus (YFV) from naturally infectied Haemagogus (Conopostegus) leucocelaenus (diptera, cukicudae) in São Paulo State, Brazil, 2009 / Isolamento do vírus da Febre Amarela de mosquitos naturalmente infectados Haemagogus (Conopostegus) leucocelaenus (Diptera, Culicidae), São Paulo, Brasil, 2009

After detecting the death of Howlers monkeys (genus Alouatta) and isolation of yellow fever virus (YFV) in Buri county, São Paulo, Brazil, an entomological research study in the field was started. A YFV strain was isolated from newborn Swiss mice and cultured cells of Aedes albopictus - C6/36, from a pool of six Haemagogus (Conopostegus) leucocelaenus (Hg. leucocelaenus) mosquitoes (Dyar & Shannon) collected at the study site. Virus RNA fragment was amplified by RT-PCR and sequenced. The MCC Tree generated showed that the isolated strain is related to the South American I genotype, in a monophyletic clade containing isolates from recent 2008-2010 epidemics and epizootics in Brazil. Statistical analysis commonly used were calculated to characterize the sample in relation to diversity and dominance and indicated a pattern of dominance of one or a few species. Hg. leucocelaenus was found infected in Rio Grande do Sul State as well. In São Paulo State, this is the first detection of YFV in Hg. leucocelaenus.

Após a detecção de morte de macacos Bugios (gênero Alouatta) e isolamento do vírus da Febre Amarela (YFV) no município de Buri, Estado de São Paulo, Brasil, foi iniciada uma investigação entomológica em campo. Uma cepa de YFV foi isolada em camundongos recém-nascidos e cultura de células de Aedes albopictus - C6/36, a partir de um lote de seis mosquitos Haemagogus (Conopostegus) leucocelaenus (Hg leucocelaenus) Dyar & Shannon coletados no local de estudo. RNA do vírus foi amplificado por RT-PCR e seqüenciado. A topologia gerada indica que a cepa isolada está relacionada ao genótipo South American I, em clado monofilético englobando isolados recentes de epidemias e epizootias entre 2008 e 2009. Análises estatísticas geralmente usadas caracterizaram a amostra em relação à diversidade e dominância, indicando dominância relativa de uma ou poucas espécies. Hg. leucocelaenus foi detectado infectado também no Rio Grande do Sul. No Estado de São Paulo trata-se da primeira detecção do YFV em Hg leucocelaenus.

Reemergence of yellow fever: detection of transmission in the State of São Paulo, Brazil, 2008 / Reemergência de febre amarela: detecção de transmissão no Estado de São Paulo, Brasil, 2008

INTRODUCTION: Following yellow fever virus (YFV) isolation in monkeys from the São José do Rio Preto region and two fatal human autochthonous cases from the Ribeirão Preto region, State of São Paulo, Brazil, two expeditions for entomological research and eco-epidemiological evaluation were conducted. METHODS: A total of 577 samples from humans, 108 from monkeys and 3,049 mosquitoes were analyzed by one or more methods: virus isolation, ELISA-IgM, RT-PCR, histopathology and immunohistochemical. RESULTS: Of the 577 human samples, 531 were tested by ELISA-IgM, with 3 positives, and 235 were inoculated into mice and 199 in cell culture, resulting in one virus isolation. One sample was positive by histopathology and immunohistochemical. Using RT-PCR, 25 samples were processed with 4 positive reactions. A total of 108 specimens of monkeys were examined, 108 were inoculated into mice and 45 in cell culture. Four virus strains were isolated from Alouattacaraya. A total of 931 mosquitoes were captured in Sao Jose do Rio Preto and 2,118 in Ribeirão Preto and separated into batches. A single isolation of YFV was derived from a batch of 9 mosquitoes Psorophoraferox, collected in Urupês, Ribeirão Preto region. A serological survey was conducted with 128 samples from the municipalities of São Carlos, Rincão and Ribeirão Preto and 10 samples from contacts of patients from Ribeirão Preto. All samples were negative by ELISA-IgM for YFV. CONCLUSIONS: The results confirm the circulation of yellow fever, even though sporadic, in the Sao Paulo State and reinforce the importance of vaccination against yellow fever in areas considered at risk.

INTRODUÇÃO: A partir do isolamento do vírus febre amarela (VFA), de macacos, da região de São José do Rio Preto e de dois casos humanos autóctones fatais, da região de Ribeirão Preto, Estado de São Paulo, foram realizadas duas expedições para pesquisa entomológica e avaliação ecoepidemiológica. MÉTODOS: Um total de 577 amostras de humanos, 108 de macacos e 3.049 mosquitos foram analisados por um ou mais métodos: isolamento viral, ELISA-IgM, RT-PCR, histopatologia e imunohistoquímica. RESULTADOS: De 577 amostras humanas, 531 foram testadas por ELISA-IgM, sendo 3 positivas, 235 foram inoculadas em camundongos, 199 em cultura de células, obtendo-se 1 isolamento viral. Uma amostra foi positiva por histopatologia e imunohistoquímica. Por RT-PCR foram processadas 25 amostras com 4 reações positivas. Os 108 espécimes de macacos foram inoculados em camundongos, 45 em cultura de células, obtendo-se 4 isolamentos de VFA, de Alouatta caraya. Um total de 931 mosquitos foram capturados em São José do Rio Preto e 2.118 em Ribeirão Preto e separados em lotes. Um único isolamento de VFA foi derivado de um lote de 9 mosquitos Psorophora ferox, coletados em Urupês, região de Ribeirão Preto. Um inquérito sorológico foi realizado com 128 amostras dos municípios de São Carlos, Rincão e Ribeirão Preto e mais 10 amostras de contactantes de pacientes de Ribeirão Preto. Todas as amostras foram negativas por ELISA-IgM para VFA. CONCLUSÕES: Os resultados confirmam a circulação, mesmo que esporádica, do VFA no Estado de São Paulo e reforça a importância da vacinação antiamarílica nas áreas consideradas de risco.

Genetic characterization of St. Louis encephalitis virus isolated from human in São Paulo, Brazil

The molecular characterization of SPH253157, a new strain of St. Louis encephalitis virus (SLEV), isolated in 2004 from the first case of human infection recognized in the state of São Paulo, Brazil, is reported. The patient, presenting a febrile illness without neurological involvement, was hospitalized as a probable case of dengue fever. Genomic RNA was isolated from the supernatant of C6/36 cells infected with acute phase-serum specimen of the patient and the envelope gene was amplified by reverse-transcription-polymerase chain reaction. The complete nucleotide sequence of the envelope gene of this isolate was directly sequenced from the amplified products and compared with other Brazilian and American SLEV strains. Phylogenetic analyses were carried out under maximum likelihood criterion with outgroups both included and excluded. Outgroups comprised four flavivirus of the Japanese encephalitis group. Phylogeny also included Bayesian analysis. The results indicated that the new SLEV isolate belongs to lineage III, being closely related to an Argentinean strain recovered from Culex sp. in 1979. It is concluded that there are at least 3 lineages of SLEV in Brazil.

Infecção simultânea por Dengue 1 e 3 em Itapevi, SP, Brasil / Concurrent infection by Dengue 1 and 3 in Itapevi, SP, Brazil

Casos de infecções simultâneas por vírus dengue em um mesmo paciente podem ocorrer em epidemia em que circulam múltiplos sorotipos do vírus. No Brasil esse fato foi relatado pela primeira vez em Miranda, MS em 1996 e em Barretos, SP em 2001. Em ambos foram isolados dengue 1 e 2. Em 2003 foi observado mais um caso, em Itapevi, município de São Paulo. O isolamento dos vírus foi obtido em cultura de células C6/36 e a identificação foi feita por imunofluorescência indireta com anticorpos monoclonais para os quatro sorotipos. Foram isolados vírus dengue tipo 1 e tipo 3, resultado confirmado pela reação de RT/PCR, usando RNA extraído do sobrenadante da cultura de células infectada. Este caso demonstra mais uma vez a importância do isolamento viral na vigilância epidemiológica do dengue, pois ele pode ajudar a determinar a freqüencia das infecções com dois ou mais sorotipos, assim como verificar se essas infecções podem estar associadas a formas mais severas da doença

Molecular analysis of the dengue virus type 1 and 2 in Brazil based on sequences of the genomic envelope-nonstructural protein 1 junction region

Foram determinadas as seqüências nucleotídicas da junção dos genes do envelope e da proteína não estrutural 1 (E/NS1) de 84 cepas de DEN-1 e 22 cepas de DEN-2 do Brasil. A maioria dessas cepas foi isolada no período de 1995-2001, em regiões endêmicas e de transmissão recente no Estado de São Paulo. Seqüências da junção E/NS1 de DEN-1 e DEN-2 de outras regiões geográficas brasileiras e mundiais, obtidas do GenBank, foram também utilizadas neste estudo. As análises foram efetuadas utilizando-se as técnicas de Verossimilhança Máxima e Bayesiana de inferência filogenética. Os resultados das análises das seqüências de DEN-1 e DEN-2 são ambíguos e o suporte para a maioria dos grupos é baixo, sugerindo que a região E/NS1 não é filogeneticamente informativa. O gráfico gerado na análise de decomposição dos grupos de DEN-1 não mostrou evidências de agrupamento das seqüências de acordo com os países, as regiões ou clados. No entanto, para DEN-2 evidenciou a existência de ambigüidades entre as seqüências, sugerindo que as brasileiras pertencem a subtipos distintos do genotipo III.

Molecular characterization of Dengue viruses type 1 and 2 isolated from a concurrent human infection

In 2001, an autochthonous case of dual viremia, resulting from naturally acquired dengue virus DEN-1 and DEN-2 infections was detected during the dengue outbreak that occurred in Barretos, a city with about 105,000 inhabitants in the North region of São Paulo State. Serotype identification was based on virus isolation to C6/36 mosquito cells culture and immunofluorescence assays using type-specific monoclonal antibodies. The double infection was also confirmed by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). Comparative analysis of the 240-nucleotide sequences of E/NS1 gene junction region between the genome of DEN-1 and DEN-2 isolates of the corresponding reference Nauru and PR 159S1 strains, respectively, showed some nucleotide differences, mainly silent mutations in the third codon position. Results of maximum likelihood phylogenetic analysis of E/NS1 gene sequences indicated that both genotypes of DEN-1 and DEN-2 viruses recovered from double infection in Barretos belonged to genotypes I and III, respectively

Epidemiologia da infecçäo pela dengue em Ribeiräo Preto, SP, Brasil / Epidemiology of dengue infection in Ribeiräo Preto, SP, Brazil

OBJETIVO: Avaliar a transmissäo de dengue em uma instituiçäo correcional de adolescentes localizada em Ribeiräo Preto, SP, Brasil. MÉTODOS: Foi realizado um inquérito sorológico e virológico da populaçäo de internos e funcionários de uma instituiçäo correcional de adolescentes infratores localizada em Ribeiräo Preto, SP, Brasil. A populaçäo de estudo consistiu em 105 menores e 91 funcionários que representavam 89por cento do total de pessoas expostas. O sangue coletado da populaçäo estudada foi armazenado e processado para avaliaçäo pelas técnicas de MAC-Elisa e de isolamento viral. Cada participante respondeu a um questionário aplicado na ocasiäo da coleta de sangue. RESULTADOS: Do total de amostras de sangue coletadas (n=196), 42 (21,4por cento) foram positivas para anticorpos da classe IgM, e 43 (21,9por cento), para anticorpo IgG; destes, 15 com IgM e IgG positivas e 28 (14,3por cento) com apenas IgG positiva. Em cinco amostras, foram isolados vírus da dengue, sorotipo 1. Dos 42 casos com IgM positiva, 14 (33,4por cento) näo relataram sintomas característico de dengue. A incidência entre os internos foi de 23,8por cento e, entre funcionários, de 18,6por cento. Os primeiros casos foram notificados em fevereiro de 1997, e os últimos, em março do mesmo ano, embora os resultados mostrem a possibilidade de a transmissäo ter se iniciado bem antes de ser detectada. CONCLUSOES: A alta incidência observada pode ser explicada pela grande densidade populacional na instituiçäo, alta infestaçäo do vetor Aedes aegypti, alta taxa de assintomáticos e transmissäo favorecida pelo fato de a comunidade ser fechada

First isolation of dengue 3 in Brazil from an imported case

The authors report the isolation of dengue 3 virus for the first time in Brazil. The patient, resident in Limeira-SP, traveled to Nicaragua on May 16th, 1998, where he stayed for two months. Starting on August 14th he had fever, headache, myalgia, arthralgia, retro-orbital pain and diarrhea. He returned to Brazil on August 16th and was hospitalized in the next day. The patient had full recovery and was discharged on August 20th. The virus was isolated in C6/36 cell culture inoculated with serum collected on the 6th day after the onset of the symptoms. The serotype 3 was identified by indirect immunofluorescence assays performed with type-specific monoclonal antibodies. This serotype was further confirmed by polymerase chain reaction analysis. The introduction of a new dengue serotype in a susceptible population is a real threat for the occurrence of severe forms of the disease. The isolation and identification of dengue virus are important in order to monitoring the serotypes circulating in Brazil and to take the measures necessary to prevent and control an epidemic

Presença de Bunyavirus (Sorogrupo Bunyamwera) no Estado de Säo Paulo, Brasil / Presence of Bunyaviruses (Bunyamwera Serogroup) in Säo Paulo State, Brazil

Sete vírus foram isolados de camundongos sentinela, expostos em área de floresta, na Regiäo da Mata Atântica, Estado de Säo Paulo, Brasil, de 1974 a 1981. Estäo incluidas cinco amostras de Maguari, uma Kairi e uma de Tucunduba. Foi a primeira vez que esses vírus foram detectados no Estado de Säo Paulo. Os isolados foram identificados por testes sorológicos de Hemaglutinaçäo, Inibiçäo de Hemaglutinaçäo, Fixaçäo de Complemento e Neutralizaçäo em camundongos lactentes. Os resultados mostram que esses vírus pertencem os sorogrupo Bunyamwera. Como existem relatos de doença humana causada por vírus pertencente a esse grupo, conclue-se que é necessário estudar os aspectos ecológicos envolvendo os ciclos de manutençäo desses vírus, assim como a possibilidade de sua transmissäo em seres humanos no Estado de Säo Paulo, Brasil

Presença de vírus endogéno na linhagem celular Aedes albopictus Clone C6/36 näo infectadas / Presence of an endogenous virus in uninfected Aedes albopictus Cell, Clone C6/36

As linhagens celulares obtidas a partir de larvas do mosquito Aedes albopictus apresentam-se naturalmente infectadas por vírus. O clone C6/36 dessas células, obtido por Igarashi em 1978, mostrou estar livre de vírus e tem sido usado para isolamento do vírus Dengue na maioria dos laboratórios especializados. Em nossos estudos com esse clone, após diferentes períodos de incubaçäo, detectamos a presença de um vírus endogéno. Sobrenadante de cultura de células C6/36, após o 12§ dia de repique, analisado por coloraçäo negativa em microscopia eletrônica, revelou a presença de partículas virais sem envoltório, medindo cerca de 20nm. Esse mesmo teste, quando realizado com células após o 2§, 6§ e 10§ dias de incubaçäo, resultou negativo. As células também foram submetidas à imunofluorescência indireta utilizando anti soros para vários grupos de arbovírus. Os resultados foram negativos, descartando a possibilidade de contaminaçäo laboratorial. A presença de vírus endógeno em células C6/36 pode ocorrer em diferentes laboratórios, sem detectada. Nossos resultados mostram que esse vírus endógeno näo influencia o isolamento do vírus Dengue e a replicaçäo das células. Em razäo da ausência de dados, o emprego dessas células para isolamento de outros vírus deve ser cuidadosamente avaliado

Simultaneous infection with dengue 1 and 2 in a brazilian patient

Epidemias de dengue vem ocorrendo em varios estados brasileiros desde 1986 envolvendo os sorotipos 1 (DEN-1) e 2 (DEN-2). Em vista dos poucos casos de dupla infeccao documentados na literatura, relatamos aqui um caso de infeccao simultanea com DEN-1 e DEN-2 em uma paciente residente no municipio de Miranda, Estado de Mato Grosso do Sul, Regiao Centro-Oeste do Brasil. O DEN-1 foi introduzido nesse Estado em 1989 e o DEN-2 em 1996, com a circulacao de ambos em alguns municipios. Esta dupla infeccao foi identificada por isolamento de virus e imunofluorescencia indireta usando anticorpos monoclonais e confirmada pela reacao em cadeia da polimerase (PCR). Este e o primeiro caso de infeccao simultanea com os sorotipos 1 e 2 documentados no Brasil

Ocorrência de Dengue no Estado de Säo Paulo, Brasil, de 1986 a 1996 / Occurence of dengue in Säo Paulo State, Brazil from 1986 to 1996

Desde 1986 casos de dengue vêm sendo detectados no Estado de Säo Paulo. De abril de 1986 a agosto de 1996, foram testadas 61.816 amostras de casos suspeitos, dos quais 21.891 foram confirmados, sendo 20.70 autóctones. A confirmaçäo foi feita por sorologia específica e/ou isolamento de vírus, critérios adotados pela Secretaria de Saúde do Estado de Säo Paulo. A incidência de dengue no período de 1987 a 1996 variou de 0,14 a 20,20 por 100.000 habitantes. As maiores incidências ocorreram nos veröes de 1990/1991, 1995 e 1996. Nestes anos a transmissäo ocorreu em 59, 101 e 114 municípios do Estado, o que representa 18,0(por cento), 24,3(por cento) e 27,3(por cento) dos municípios com infestaçäo domiciliar por Aedes aegypti. O sorotipo 1 foi o único identificado em casos autóctones até 1996, quando ocorreram dois isolamentos de Dengue tipo 2. Os dados apresentados analisam as atividades do sistema de vigilância epidemiológica relacionadas com a detecçäo de casos e diagnóstico laboratorial

Growth and maintenance of Aedes Albopictus cell line, clone C6/36, in different media

The sensitivity of Aedes albopicts cell line, clone C6/36, to arbovirus isolation and growth has been being shown by several authors. The present work has verified which, among several media under the same conditions, would be the most efficient one for C6/36 cultivation and viral isolation. The L-15 medium has proved to be the best among others (MEM,DMEM and 199) with the quickest viral isolation(DEN-1). Also, in this medium, the samples could be observed until the 14th day, without significative cellular death. The results reccommend L-15 medium as the most efficient and economic one for the purposes