Co-administration of plasmid-encoded granulocyte-macrophage colony-stimulating factor increases human immunodeficiency virus-1 DNA vaccine-induced polyfunctional CD4+ T-cell responses

T-cell based vaccines against human immunodeficiency virus (HIV) generate specific responses that may limit both transmission and disease progression by controlling viral load. Broad, polyfunctional, and cytotoxic CD4+T-cell responses have been associated with control of simian immunodeficiency virus/HIV-1 replication, supporting the inclusion of CD4+ T-cell epitopes in vaccine formulations. Plasmid-encoded granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (pGM-CSF) co-administration has been shown to induce potent CD4+ T-cell responses and to promote accelerated priming and increased migration of antigen-specific CD4+ T-cells. However, no study has shown whether co-immunisation with pGM-CSF enhances the number of vaccine-induced polyfunctional CD4+ T-cells. Our group has previously developed a DNA vaccine encoding conserved, multiple human leukocyte antigen (HLA)-DR binding HIV-1 subtype B peptides, which elicited broad, polyfunctional and long-lived CD4+ T-cell responses. Here, we show that pGM-CSF co-immunisation improved both magnitude and quality of vaccine-induced T-cell responses, particularly by increasing proliferating CD4+ T-cells that produce simultaneously interferon-γ, tumour necrosis factor-α and interleukin-2. Thus, we believe that the use of pGM-CSF may be helpful for vaccine strategies focused on the activation of anti-HIV CD4+ T-cell immunity.

Imunogenicidade de proteínas recombinantes da superfície do merozoíta de Plasmodium vivax candidatas à vacina contra malária / Immunogenicity of Plasmodium vivax recombinant merozoite surface proteins: vaccine candidates against malaria

O potencial imuno-protetor de proteínas recombinantes baseadas na região C-terminal da Proteína 1 da superfície de Merozoítas (MSP119) foi demonstrado em vários modelos experimentais e tornaram esta região um dos principais alvos para o desenvolvimento de uma vacina contra a malária. O objetivo geral desta tese foi o de estudar a imunogenicidade de proteínas recombinantes bacterianas representando a região MSP119 de Plasmodium vivax quando administradas em animais experimentais (camundongos e primatas) na presença de diferentes adjuvantes. Inicialmente, avaliamos no modelo murino, a capacidade de o epítopo helper PADRE (Pan Allelic DR epitope) potencializar as imunizações com a MSP119 feita na presença de diferentes formulações de adjuvantes. Observamos que a imunização de camundongos C57BU6 com a proteína recombinante His6MSP119-PADRE na presença de distintas formulações de adjuvantes foi capaz de induzir uma resposta imune humoral tão potente quanto a gerada pela imunização na presença do adjuvante completo/incompleto de Freund (ACF/AIF) em termos de magnitude, afinidade, subclasses de IgG e longevidade. Entretanto, imunizações com a proteína recombinante His6MSP119 só foram capazes de gerar forte resposta de anticorpos na presença de ACF/AIF, mas não com outros adjuvantes como o CpG ODN 1826 ou MPUTDM. Nossos resultados demonstraram que quando adjuvantes menos potentes que ACF/AIF são utilizados, a presença do epítopo helper PADRE pode aumentar consideravelmente a resposta imune humoral induzida por um antígeno recombinante de malária. No trabalho subsequente, caracterizamos as propriedades imunogênicas de uma nova proteína recombinante contendo a MSP119 de P. vivax. Esta nova proteína contém além da MSP119 dois epítopos "helper" reconhecidos por linfócitos T (o epítopo sintético universal PADRE e um novo epítopo interno da MSP1 de P. vivax - DYDVVYLKPLAGMYK). A proteína recombinante His6MSP119-DYDVVYLKPLAGMYK-PADRE foi altamente imunogênica em macacos (Callithrix jaccus jaccus) quando administrada na presença de adjuvante incompleto de Freund (AIF). Entretanto, quando administrada na presença de outros adjuvantes como Quil A, CpG ODN 2006 ou MPLITDM, os...