Reversal of the anticoagulant and anti-hemostatic effect of low molecular weight heparin by direct prothrombin activation

Lopap, found in the bristles of Lonomia obliqua caterpillar, is the first exogenous prothrombin activator that shows serine protease-like activity, independent of prothrombinase components and unique lipocalin reported to interfere with hemostasis mechanisms. To assess the action of an exogenous prothrombin activator reversing the anticoagulant and antihemostatic effect induced by low molecular weight heparin (LMWH), male New Zealand rabbits (N = 20, weighing 3.8-4.0 kg) allocated to 4 groups were anticoagulated with 1800 IU/kg LMWH (iv) over 2 min, followed by iv administration of saline (SG) or recombinant Lopap (rLopap) at 1 µg/kg (LG1) or 10 µg/kg (LG10), 10 min after the injection of LMWH, in a blind manner. Control animals (CG) were treated only with saline. The action of rLopap was assessed in terms of activated partial thromboplastin time (aPTT), prothrombin fragment F1+2, fibrinogen, and ear puncture bleeding time (BT) at 5, 10, 15, 17, 20, 30, 40, 60, and 90 min after initiation of LMWH infusion. LG10 animals showed a decrease of aPTT in more than 50% and BT near to normal baseline. The level of prothrombin fragment F1+2 measured by ELISA had a 6-fold increase with rLopap treatment (10 µg/kg) and was inversely proportional to BT in LMWH-treated animals. Thus, Lopap, obtained in recombinant form using E. coli expression system, was useful in antagonizing the effect of LMWH through direct prothrombin activation, which can be a possible strategy for the reversal of bleeding and anticoagulant events.

Solasodine accumulation in regenerated plants of Solanum torvum Sw / Acúmulo de solasodina em plantas micropropagadas de Solanum torvum Sw

A nodal segment culture was developed in order to assess Solanum torvum Sw. regeneration and solasodine levels. The influence of auxins (indoleacetic acid, 1-Naphthaleneacetic acid) and benzyl adenine on S. torvum growth in micropropagation was investigated. A nodal segment culture was initiated with seeds germinated in MS basal medium added of GA3 and grown in different concentrations of IAA, IAA + BAP and NAA + BAP. Sixty-day-old plants from the in vitro culture were collected, frozen and lyophilized; then, the methyl orange method was used to quantify solasodine for the spectrophotometric assay. The best results regarding plant regeneration and solasodine accumulation were obtained by using the MS basal medium without addition of plant growth regulators; however, there was great production of calluses presenting friable bases. Based on these results, cell cultures can be initiated from such calluses with application of other auxins and cytokinins to enhance solasodine production, besides different elicitors, light intensities and sucrose concentrations.

A regeneração de Solanum torvum e a avaliação do conteúdo de solasodina foram os objetivos de cultura de segmentos nodais. A influência de auxinas (ácido 3-indolacético, ácido naftalenoacético) e de 6-benzilaminopurina no crescimento de S. torvum na micropropagação foi investigado. Cultura de segmentos nodais foi iniciada por sementes germinadas em meio básico MS acrescido de GA3 e cultivadas em diferentes concentrações de AIA, AIA + BAP e ANA + BAP. Plantas da cultura in vitro com 60 dias foram coletadas, congeladas e liofilizadas e o método de alaranjado de metila foi utilizado para quantificação de solasodina para o ensaio espectrofotométrico. Os melhores resultados para regeneração vegetal e acúmulo de solasodina foram alcançados no meio MS sem adição de reguladores de crescimento havendo, porém grande produção de calos de base friáveis. Esses resultados mostram que a partir desses calos, cultura de células pode ser iniciada com aplicação de outras auxinas e citocininas para o aumento da produção de solasodina além de diferentes eliciadores, intensidades luminosas e concentrações de sacarose.

Diurnal and seasonal carbon balance of four tropical tree species differing in successional status / Balanço de carbono diurno e sazonal de quatro espécies tropicais arbóreas de diferentes grupos sucessionais

This study addressed some questions about how a suitable leaf carbon balance can be attained for different functional groups of tropical tree species under contrasting forest light environments. The study was carried out in a fragment of semi-deciduous seasonal forest in Narandiba county, São Paulo Estate, Brazil. 10-month-old seedlings of four tropical tree species, Bauhinia forficata Link (Caesalpinioideae) and Guazuma ulmifolia Lam. (Sterculiaceae) as light-demanding pioneer species, and Hymenaea courbaril L. (Caesalpinioideae) and Esenbeckia leiocarpa Engl. (Rutaceae) as late successional species, were grown under gap and understorey conditions. Diurnal courses of net photosynthesis (Pn) and transpiration were recorded with an open system portable infrared gas analyzer in two different seasons. Dark respiration and photorespiration were also evaluated in the same leaves used for Pn measurements after dark adaptation. Our results showed that diurnal-integrated dark respiration (Rdi) of late successional species were similar to pioneer species. On the other hand, photorespiration rates were often higher in pioneer than in late successional species in the gap. However, the relative contribution of these parameters to leaf carbon balance was similar in all species in both environmental conditions. Considering diurnal-integrated values, gross photosynthesis (Pgi) was dramatically higher in gap than in understorey, regardless of species. In both evaluated months, there were no differences among species of different functional groups under shade conditions. The same was observed in May (dry season) under gap conditions. In such light environment, pioneers were distinguished from late successional species in November (wet season), showing that ecophysiological performance can have a straightforward relation to seasonality.

Este estudo considerou algumas questões sobre como um adequado balanço de carbono foliar pode ser obtido por diferentes grupos funcionais de espécies tropicais arbóreas sob contrastantes ambientes luminosos em uma floresta. O estudo foi realizado em um fragmento de floresta estacional semidecidual localizada no município de Narandiba, Estado de São Paulo. Plântulas com dez meses de idade de quatro espécies, Bauhinia forficata Link (Caesalpinioideae) e Guazuma ulmifolia Lam. (Sterculiaceae) como espécies pioneiras, e Hymenaea courbaril L. (Caesalpinioideae) e Esenbeckia leiocarpa Engl. (Rutaceae) como espécies secundárias, cresceram em um ambiente de clareira e um de sub-bosque durante nove meses. Cursos diários da fotossíntese líquida (Pn) e transpiração foram medidos com um medidor portátil de trocas gasosas por infravermelho nas estações seca e chuvosa. A respiração no escuro (Rd) e a fotorrespiração (Pr) foram também avaliadas nas mesmas folhas utilizadas para as medidas de Pn após um período de adaptação ao escuro. Nossos resultados mostraram que a respiração integrada ao longo do dia foi similar entre as espécies dos dois grupos sucessionais. Por outro lado, a fotorrespiração das espécies pioneiras foi freqüentemente maior do que nas espécies secundárias em condições de clareira. Todavia, a contribuição relativa de Pr no balanço de carbono nas folhas foi similar em todas as espécies em ambos os ambientes. Independentemente da espécie, a fotossíntese bruta, considerando os valores integrados ao longo do dia, foi significativamente maior na clareira que no sub-bosque. Nas duas épocas avaliadas, não foram observadas diferenças significativas em nenhum dos parâmetros avaliados entre as espécies crescidas no ambiente de sub-bosque. O mesmo foi observado no mês de maio sob condições de clareira. No mês de novembro, as espécies pioneiras apresentaram uma performance ecofisiológica significativamente distinta das espécies secundárias no ...