Comparison of resazurin microtiter assay performance and BACTEC MGIT 960 in the susceptibility testing of Brazilian clinical isolates of Mycobacterium tuberculosis to four first-line drugs

We assessed the performance of REMA in comparison with BACTEC MGIT 960 in the susceptibility testing of 80 Mycobacterium tuberculosis clinical isolates from Clemente Ferreira Institute against four drugs. REMA proved to be a rapid and accurate method, providing excellent correlation with BACTEC MGIT 960, with the exception of results for the ethambutol drug.

Phenotypic and genotypic characterization of Rhodococcus equi isolated from sputum

INTRODUCTION: Rhodococcus equi is an opportunistic pathogen, causing rhodococcosis, a condition that can be confused with tuberculosis. Often, without identifying M. tuberculosis, physicians initiate empiric treatment for tuberculosis. R. equi and M. tuberculosis have different susceptibility to drugs. Identification of R. equi is based on a variety of phenotypic, chromatographic, and genotypic characteristics. OBJECTIVE: This study aimed to characterize bacterial isolates from sputum samples suggestive of R. equi. METHODS: The phenotypic identification included biochemical assays; thin-layer chromatography (TLC) and polymerase chain reaction (PCR) were used for genotypic identification. RESULTS: Among 78 Gram-positive and partially acid-fast bacilli isolated from the sputum of tuberculosis-suspected patients, 51 were phenotypically and genotypically characterized as R. equi based on literature data. Mycolic acid analysis showed that all suspected R. equi had compounds with a retention factor (Rf) between 0.4-0.5. Genotypic characterization indicated the presence of the choE gene 959 bp fragments in 51 isolates CAMP test positive. Twenty-two CAMP test negative isolates were negative for the choE gene. Five isolates presumptively identified as R. equi, CAMP test positive, were choE gene negative, and probably belonged to other bacterial species. CONCLUSIONS: The phenotypic and molecular techniques used constitute a good methodological tool to identify R. equi.

Rhodococcus equi isolation from sputum of patients with suspected tuberculosis

Rhodococcus equi has emerged as an opportunistic pathogen associated with pulmonary, invasive or systemic infections in immunocompromised patients. We report the identification of 51 R. equi isolates found in sputum samples of 546 individuals suspected to have pulmonary tuberculosis in two Public Health Hospital Units in Brazil. The epidemiology of R. equi infection as well as the phenotypic identification and drug susceptibility profile of isolates are described in this paper.

Characterization of ndh gene of isoniazid resistant and susceptible Mycobacterium tuberculosis isolates from Brazil

Resistance in Mycobacterium tuberculosis to isoniazid (INH) is caused by mutations in the catalase-peroxidase gene (katG) , and within the inhA promoter and/or in structural gene. A small percentage (~ 10 percent) of INH-resistant strains do not present mutations in both of these loci. Other genes have been associated with INH resistance including the gene encoding for NADH dehydrogenase (ndh) . Here we report the detection of two ndh locus mutations (CGT to TGT change in codon 13 and GTG to GCG change in codon 18) by analyzing 23 INH-resistant and in none of 13 susceptible isolates from Brazilian tuberculosis patients. We also detected two isolates without a mutation in ndh, or any of the other INH resistance-associated loci examined, suggesting the existence of additional, as yet to be described, INH resistance mechanisms.

Determinaçäo da concentraçäo inibitória mínima e concentraçäo bactericida mínima de compostos derivados do ácido isonicotínico frente ao Mycobacterium Tuberculosis / Minimal inhibitory concentration and minimal bactericida concentration determination of isonicotinic acid derivatives against Mycobacterium tuberculosis

O aumento significativo dos casos de tuberculose multidroga resistentes tem incentivado as pesquisas na busca de novas drogas e esquemas terapêutiocs alternativos, que possam minimizar estes problemas. Compostos sintéticoss derivados do ácido isonicotínico foram avaliados em relaçäo a sua atividade in vitro frente a cepa padräo de Mycobacterium tuberculosis H37Ra - ATCC25177, através da determinaçäo da Concentraçäo Inibitória Mínima (CIM) e Concentraçäo Bactericida Mínima (CBM) pela metodologia da macrodiluiçäo em tubos. Todos os compostos estudados apresentam atividade antibacteriana in vitro, com valores de CIMs que variaram de 0,062 a 0,250ug/mL. Os valores de CBM foram, em geral, duas diluições mais altos do que os valores de CIM correspondentes. Os valores de CIMs e CBMs obtidos neste estudo estäo próximos daqueles apresentados para a isoniazida, que consideramos como droga padräo

Atividade da violaceína in vitro sobre o Mycobacterium tuberculosis H37Ra / In vitro activity of violacein against Mycobacterium tuberculosis H37Ra

Este estudo relata a atividade antimicrobiana da violaceína, 3-[1,2-Dihidro-5 -(5-hidroxi-1H-indol-3-il)-2-oxo-3H-pirrol-3 ilideno] 1,3-dihidro-2H-indol-2-ona sobre a cepa padräo de M. tuberculosis H37Ra. A violaceína apresentou açäo antimicobacteriana in vitro com concentraçäo inibitória mínima (CIM) de 64 ug/mL e concentraçäo bactericida mínima (CBM) de 128 ug/mL. Estes valores säo comparáveis aos descritos na literatura para a pirazinamida

Bacterial agents isolated from cerebrospinal fluid of patients with acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) and neurological complications

Amostras de liquido cefalorraquidiano (LCR) de 2083 pacientes com Sindrome de Imunodeficiencia Adquirida (SIDA) e complicacoes neurologicas foram examinados durante um periodo de 7 anos (1984-1990). A porcentagem de pacientes que tiveram pelo menos um agente bacteriano cultivado do LCR foi de 6,2 por cento Mycobacterium tuberculosis foi o mais frequentemente isolado (4,3 por cento), seguido do complexo Mycobacterium avium ou MAC (0,7 por cento), de Pseudomas spp (0,5 por cento), Enterobacter spp (0,4 por cento), e Staphilococcus aureus (0,3 por cento). Entre 130 pacientes com cultura positiva, de 89 (68,5 por cento) foi isolado o M. tuberculosis e de 15 (11,6 por cento) MAC. A frequencia de isolamentos bacterianos foram mais frequentemente isolados de pacientes na faixa etaria de 21-30 anos e de mulheres (p<0.050).

Açäo in vitro de diferentes drogas, sobre o mycobacterium Kansasii / Mycobacterium Kansasii, drug susceptibility tests

A infecçäo causada pelo M.kansasii pode ser täo facilmente tratada como a tuberculose. Desde que a rifampicina foi introduzida nos esquemas terapêuticos a conversäo do escarro verifica-se em 100 por cento dos casos. O objetivo deste estudo foi contribuir no tratamento da micobacteriose causada pelo M.Kansasii. Através da determinaçäo da CIM, CBM e testes de sensibilidade pelo método das proporçöes, os autores comparam os resultados obtidos com os relatos da literatura internacional. Foram estudadas 30 cepas de M.Kansasii isoladas de pacientes com problemas pulmonares. Um perfil de sensibilidade das cepas frente à isoniazida, rifampicina, estreptomicina, etambutol, etionamida, kanamicina e ciprofloxacin foi realizado. A metodologia foi utilizada de acordo com as normas preconizadas para a bacteriologia das micobactérias. Os resultados obtidos mostraram sensibilidade do M.Kansasii à rifampicina, etionamida, kanamicina e ciprofloxacin, enquanto que para as demais drogas houve algumas variaçöes. Nossos dados mostram a importância da rifampicina nos esquemas terapêuticos, no tratamento inicial, e a utilidade dos testes de sensibilidade no retratamento

Perfil de resistência de Mycobacterium Tuberculosis no Estado de Säo Paulo, 1986 a 1990 / Resistence pattern of Mycobacterium tuberculosis from Säo Paulo State, Brazil, 1986 to 1990

Com o objetivo de determinar o perfil da resistência do Mycobacterium tuberculosis às drogas empregadas no tratamento da tuberculose no Estado de Säo Paulo, foram estudadas 1.668 cepas obtidas de amostra de escarro, sendo 254 doentes sem tratamento prévio e 1.414 na vigência de tratamento. A taxa de resistência inicial foi de 16,54//e a adquirida de 47,45//. A isoniazida apresentou resistência global de 10,62//e a rifampicina de 6,69//mostrando que as drogas mais importantes empregadas no tratamento da tuberculose estäo apresentando altas taxas de resistência. Este fato causa preocupaçäo pois pode implicar na falência do tratamento, acarretando sérias consequências para o controle da doença

A bacteriologia da tuberculose: atividades do Instituto Adolfo Lutz - Sorocaba - SP / Tuberculosis bacteriology: activities of Instituto Adolfo Lutz, Sorocaba, Säo Paulo, Brazil

Com o objetivo de avaliar os métodos bacteriológicos para diagnóstico e controle de tratamento da tuberculose pulmonar, os autores analisaram os dados obtidos no período de 1980-1990, no Instituto Adolfo Lutz de Sorocaba. A baciloscopia foi realizada em 26.803 amostras de escarro de 11.295 sintomáticos respiratórios, sendo examinada uma média de 2,34 amostras por pacientes. Pela baciloscopia 1.147 casos novos foram encontrados. No controle de tratamento 28.405 amostras foram examinadas com uma positividade de 41,12//. Neste período foram realizadas 21.134 culturas e obteve-se 3.634 culturas positivas no controle de tratamento e 1.902 no diagnóstico; 274 casos novos de tuberculose foram diagnosticados pela cultura. Das 5.536 culturas positivas, 5.431 cepas pertenciam ao complexo Mycobacterium tuberculosis, pertencentes ao complexo Mycobacteriu avium - intracellulare e uma cepa identificada com Mycobacterium szulgai; 1.668 cepas de Mycobacterium tuberculosis foram submetidas ao teste de sensibilidade às drogas e o resultado foi de 16,53//de resistência entre os pacientes sem tratamento prévio e 47,45//entre os pacientes em tratamento. Os autores concluem pela necessidade de uma metodologia organizada e coerente com as condiçöes de cada regiäo, para que a bacteriologia seja importante suporte ao Programa de Controle da Tuberculose

Microscopia de fluorescência como procedimento para a realizaçäo do exame baciloscópico em hanseníase / Fluorescent microscopy how procedure for the realization of the baciloscopic examination in leprosy

Visando comparar os métodos de microscopia fluorescente e de Ziehl-Neelsen para evidenciaçäo de bacilos álcool-ácido resistentes em material proveniente de derme de pacientes hansenianos, foram examinados 355 esfregaços. Obteve-se 98,81 por cento de concordância ajustada (KAPPA) entre os métodos. Verificou-se no entanto aproximadamente 55 por cento de resultados discordantes em relaçäo ao índice baciloscópico (Ridley), decorrentes de conatagens de bacilos por campo mais levadas pelo método fluorescente

Aspectos citológicos de amostras de escarro de pacientes com tuberculose pulmonar / Cytologic findings in sputum of patients with pulmonary tuberculosis

A tuberculose pulmonar é uma moléstia de ainda alta incidência em nosso país. Outras patologias podem estar associada a ela, como processos alérgicos pulmonares e parasitoses com estágio pulmonar em seu ciclo. a presença de eosinófilos no escarro de tuberculosos pode ser indicativa de uma dessas associaçöes. Este trabalho apresenta o estudo citológico de 74 esfregaços de escarro de pacientes sem tratamento, com diagnóstico inicial de tuberculose por baciloscopia e cultura. Células epitelióides e gigantes foram observadas em alguns esfregaços. A maioria deles mostrava fundo necrótico e substrato inflamatório intenso, com predomínio de linfócitos e/ou neutrófilos. Trinta e dois casos (43%) apresentavam quantidade significativa de eosinófilos, em contraste com a porcentagem de 20% de casos com eosinófilos no grupo controle (baciloscopia e cultura negativas). Esse achado sugere que os pacientes, além da tuberculose, podem apresentar outro processo patológico, que deve ser pesquisado