Résumé
El gC1qR, un receptor para el dominio globular del C1q, es una proteína multicompartamental y multifuncional, cuya intervención en el proceso de fecundación en humanos se ha demostrado recientemente. Los objetivos de esta investigación fueron describir la distribución de gC1qR y valorar su expresión en la membrana plasmática de espermatozoides bovinos antes y después del tratamiento con heparina. La capacitación de espermatozoides provenientes de semen descongelado bovino se indujo con una incubación con heparina y su efectividad se evaluó con la tinción CTC. Posteriormente, se realizaron ensayos de inmunofluorescencia indirecta con el anticuerpo monoclonal 60.11 (anti-gC1qR). El análisis de los datos demostró que el gC1qR es una molécula ubicada en la membrana plasmática de los espermatozoides bovinos que presentauna redistribución tras la capacitación, concentrándose en la región acrosomal: 175 espermatozoides en las alícuotas incubadas con heparina vs. 109 en el control (P<0,05; n=300) presentaron fluorescencia en la región acrosomal; esta distribución es semejante a la documentada en humanos. Igualmente, el nivel de expresión o de accesibilidad de gC1qR en el espermatozoide bovino aumentó tras la capacitación, hecho que se ha observado también en humanos. Estos resultados sugieren que el gC1qR podría participar en la interacción primaria entre el espermatozoide y el ovocito en bovinos.
The complement receptor gC1qR/p33, which recognizes the globular heads of C1q, is a multicompartmental and multifunctional protein and has been shown to play a role in reproduction in humans. The objective of this research was to determine the gC1qR distribution and expression on plasma membrane in bovine sperm before and after heparin treatment. Thus, capacitation of sperm derived from frozen-thawed bovine semen was induced through heparin incubation and its effectiveness was assessed with a CTC stain. Subsequently, indirect immunofluorescence assays were conducted with mAb (60.11, anti-gC1qR) to assess gC1qR distribution and expression. Data analysis demonstrated that gC1qR is expressed on the plasma membrane of bovine sperm. gC1qR showed a capacitation-related redistribution, migrating to the acrosome region: 175 sperm in heparin-incubated aliquots vs. 109 in control (P<0.05, n=300) showed fluorescence over the acrosome region. This distribution is similar to that reported in humans. Similarly, either gC1qR expression or its accessibility to antibodies increased after capacitation. This also correlates with what has been observed in humans. These results suggest that gC1qR could participate in primary sperm-oocyte interaction in bovines.
Sujets)
Bovins , Animaux , Spermatozoïdes , Héparine , Protéines , Médecine vétérinaireRésumé
Las diferencias de la anatomía vascular de los ovarios se han asociado a diferencias significativas en las respuestas fisiológicas de estos órganos durante el ciclo estral. El objetivo de esta investigación fue describir comparativamente el patrón vascular arterial del ovario en oveja y vaca durante el ciclo estral en las diferentes especies. La irrigación arterial del ovario de 18 ovejas y 10 vacas reproductivamente maduras, durante las diferentes fases del ciclo estral, se evaluó a través de disección simple, clarificación de tejidos, moldes de corrosión, microscopía óptica, microscopía electrónica y arteriograma. Los resultados mostraron que las arterias ováricas penetraban en número de dos, en la zona vascular del órgano, formando un complejo ovillo arterial muy tortuoso. En cambio en la vaca, las arterias ováricas penetraban al órgano en número de cinco o seis, sin formar ningún ovillo. Esto sugiere que la oveja tiene un mayor aporte sanguíneo al ovario en comparación con la vaca. Se observó una red arterial con origen en la arteria uterina y ovárica en la superficie de la vena uterina en ambas especies. Durante las fases del ciclo estrual se observaron diferencias en la irrigación del ovario. En ovarios de animales en el día 7 del ciclo estral, con cuerpos lúteos, se evidenció una irrigación bien definida a diferencia de los ovarios con cuerpos lúteos a los 13 días del ciclo estral (oveja) o a los 17 del ciclo estral (vaca), en los cuales las arterias disminuían tanto en número como en diámetro.
Differences in ovarian vascular anatomy have been associated to significant differences in physiologic responses of ovaries during estrous cycle in different species. The objective of this study was to describe on a comparative basis the ovarian arterial vascular pattern from 18 ewes and 10 cows in reproductive age, during the different stages of the estrous cycle. The above mentioned pattern was evaluated through simple dissection, tissue clarification, corrosion templates, optic microscopy, electron microscopy and arteriograms. Results showed that in ewes, two ovarian arteries entered into the ovarian vascular zone, forming a very contorted and complex arterial mesh (glomus). By contrast, in cows five o six, ovarian arteries entered into the ovaries, without forming mesh. This suggests that ewes might have a better blood supply to the ovary than cows. A network was observed originating from uterine and ovarian arteries on the surface of uterine vein in both species. Differences in ovarian blood supply were seen during the different stages of estrous cycle. In animals having corpora lutea at 7 days of the estrous cycle was noticed a well defined ovarian blood supply, whereas in animals at 14 (ewes) or 18 (cows) post-heat, having corpora lutea as well, ovarian arteries diminished in size and number.
Résumé
En los equinos pura sangre de carreras, las lesiones del sistema músculo esquelético representan el mayor porcentaje de lesiones encontradas en esta especie. Un total de 24 caballos con tendonitis clínica en algunos de sus miembros anteriores, fue evaluado mediante un examen físico y posteriormente con ultrasonografía en modo B tiempo real, con el objetivo de determinar el grado de correlación entre los signos clínicos y los hallazgos ultrasonográficos. Las lesiones encontradas se clasificaron de acuerdo al porcentaje de fibras dañadas: Grado I: pérdida difusa de la densidad de las fibras del tendón; Grado II: presencia de un área anecoica que abarca menos del 50 por ciento del área transversal del tendón (ATT); Grado III: presencia de un área anecoica que abarca más del 50 por ciento de ATT; Grado IV: 90 por ciento o más del ATT afectada (ruptura del tendón). También se evaluó la presencia o no de fibrosis en los tendones. Se observó una correlación positiva y significativa, tanto entre los signos clínicos a inflamación de un determinado tendón y los hallazgos ultrasonográficos, como entre esos signos clínicos y la presencia de fibrosis, en todos los tendones y miembros evaluados, lo cual sugiere que a través de la ultrasonografía se puede establecer el estado clínico y el pronóstico de la lesión con mucha más exactitud que con la realización únicamente de la evaluación física