Histological analysis of elastic cartilages treated with alkaline solution / Análise histológica de cartilagens elásticas tratadas com solução alcalina

The elastic cartilage is composed by chondroblasts and chondrocytes, extracellular matrix and surrounded by perichondrium. It has a low regeneration capacity and is a challenge in surgical repair. One of obstacles in engineering a structurally sound and long-lasting tissue is selecting the most appropriate scaffold material. One of the techniques for obtaining biomaterials from animal tissues is the decellularization that decreases antigenicity. In this work, alkaline solution was used in bovine ear elastic cartilages to evaluate the decellularization and the architecture of the extracellular matrix. The cartilages were treated in alkaline solution (pH13) for 72 hours and lyophilized to be compared with untreated cartilages by histological analysis (hematoxylin-eosin, Masson's trichrome and Verhoeff slides). Areas of interest for cell counting and elastic fiber quantification were delineated, and the distribution of collagen and elastic fibers and the presence of non-fibrous proteins were observed. The results demonstrated that the alkaline solution caused 90% decellularization in the middle and 13% in the peripheral region, and maintenance of the histological characteristics of the collagen and elastic fibers and non-fibrous protein removal. It was concluded that the alkaline solution was efficient in the decellularization and removal of non-fibrous proteins from the elastic cartilages of the bovine ear.(AU)

A cartilagem elástica é composta por condroblastos e condrócitos, matriz extracelular e envolta por pericôndrio. Possui uma baixa capacidade de regeneração e é um desafio em reparos cirúrgicos. Um dos obstáculos na engenharia de tecido estruturalmente sólido e de longa duração é a seleção do material de arcabouço mais adequado. Uma das técnicas para obtenção de biomateriais oriundos de tecidos animais é a descelularização, que diminui a antigenicidade. Neste trabalho, foi utilizada solução alcalina em cartilagem elástica auricular bovina para avaliar a descelularização e a arquitetura da matriz extracelular. As cartilagens foram tratadas em solução alcalina (pH13) durante 72 horas e liofilizadas, e comparadas com cartilagens não tratadas por análise histológica (hematoxilina-eosina, tricrômio de Masson e Verhoeff). Foram determinadas as áreas de interesse para contagem celular e quantificação de fibras elásticas, observada a distribuição de colágeno e fibras elásticas e a presença de proteínas não fibrosas. Os resultados demonstraram que a solução alcalina causou 90% de descelularização na região central e 13% na região periférica, manutenção das características histológicas do colágeno e fibras elásticas e remoção das proteínas não fibrosas. Concluiu-se que a solução alcalina foi eficiente na descelularização e retirada de proteínas não fibrosas de cartilagens elásticas da orelha de bovinos.(AU)

Additive effect of pulp pequi oil (Caryocar brasiliense Camb. ) on the biocompatibility of collagen and gelatin membranes in subcutaneous implants / Efeito aditivo do óleo de polpa de pequi (Caryocar brasiliense Camb. ) sobre a biocompatibilidade de membranas de colágeno e gelatina implantadas no subcutâneo

Trauma or disease inflicted by tissue injuries may cause tissue degeneration. The use of biomaterials for direct or indirect repair has emerged as a promising alternative, and has become an important research topic. The pequi fruit (Caryocar brasiliense Camb.) has shown antifungal, antibacterial, anti-inflammatory, healing, antitumor, and antioxidant properties. The objective of this study was to develop a new biomaterial using a combination of collagen, gelatin, and pulp pequi oil, and to evaluate its biocompatibility in comparison with that of biomaterials produced without pulp pequi oil. Membranes were prepared from a mixture of bovine tendon collagen, commercial gelatin, and pulp pequi oil. The inflammatory and cicatricial processes were assessed via histopathology of the tissue interface/implants in the subcutaneous tissues and quantitative evaluation of leukocyte and collagen production in Wistar rats. It was observed that the presence of pequi oil reduced the amount of foreign-body giant cells and favored the recruitment of fibroblasts (P< 0.01), thereby promoting greater production of collagen membrane than that in the membranes of control samples. Therefore, it can be concluded that the addition of pequi oil improved the biocompatibility of collagen and accelerated the healing process.(AU)

Trauma ou lesões causadas por doenças podem enfraquecer e degenerar os tecidos humanos e animais. O uso de biomateriais para reparação direta ou indireta surgiu como uma alternativa promissora e tornou-se um importante tema de pesquisa. O óleo de pequi (Caryocar brasiliense Camb.) mostrou propriedades antifúngicas, antibacterianas, anti-inflamatórias, curativas, antitumorais e antioxidantes. O objetivo deste estudo foi obter um novo biomaterial, produzido pela combinação de óleo de pequi, colágeno e gelatina, para avaliar sua biocompatibilidade em comparação às membranas produzidas sem o óleo. As membranas foram preparadas por meio da mistura de colágeno de tendão bovino, gelatina comercial e óleo de pequi. Os processos inflamatórios e cicatriciais foram avaliados por histopatologia da interface / implantes de tecido subcutâneo de ratos Wistar para avaliação quantitativa da produção de leucócitos e colágeno. Observou-se que a presença de óleo de pequi reduziu a quantidade de células gigantes de corpo estranho e favoreceu o recrutamento de fibroblastos (P<0,01), promovendo, assim, maior produção da membrana de colágeno em comparação com a membrana de controle. Portanto, pode-se concluir que a adição de óleo de pequi melhorou a biocompatibilidade do colágeno e acelerou o processo de cicatrização.(AU)

Novas perspectivas no diagnóstico e tratamento da acropostite-fimose em touros / New perspectives in the diagnosis and treatment of acropostitis-phimosis of bulls

A acropostite-fimose é um processo inflamatório da extremidade do prepúcio, diagnosticada com frequência em touros. O presente estudo objetivou avaliar o exame ultrassonográfico na definição da viabilidade do folheto prepucial interno (FPI) e na evolução clínica do pós-operatório, após o emprego de fios de categute ou poliglactina na hemostasia e de algodão ou poliglactina na confecção de sutura padrão Donatti empregada para fixar o FPI à pele prepucial no transoperatório da acropostite-fimose em touros. A sutura utilizada foi captonada ou não captonada, e os animais submetidos ao procedimento cirúrgico apresentavam no mínimo dois terços do FPI viável. Os touros foram alocados, aleatoriamente, em quatro grupos contendo nove animais cada, de acordo com o fio empregado na hemostasia e na confecção da sutura padrão Donatti. O exame ultrassonográfico mostrou-se importante na indicação ou não do tratamento cirúrgico da acropostite-fimose e possibilitou localizar lesões, mensurar a área de reação tecidual e identificar lesões profundas e pontos de estreitamento do FPI. Os animais de GII apresentaram edema mais discreto, observando-se diferença significativa (P<0,05) entre GII e os grupos GI, GIII e GIV. A ocorrência de hiperemia no sétimo dia de pós-operatório também foi menor nos touros do grupo GII, ocorrendo diferença significativa (P<0,05) entre GII e os grupos GI e GIII. A sutura empregando o dispositivo de látex (cápton) e o emprego do fio de poliglactina apresentaram-se como medidas benéficas, resultando em menor número de complicações pós-operatórias.(AU)

Acropostitis-Phimosis is an inflammatory process of the extremity of the prepuce, frequently diagnosed in bulls. The present study aimed to evaluate ultrassound exams in the definition of viability of the internal layer of prepuce and the postoperative clinical evolution. This evaluation is after the employment of catgut or poliglactin threads in homeostasis, and cloth or polyglactin threads in confection of the standard suture, Donatti, used to fix the internal layer of prepuce to the preputial in the postoperative of acropostitis-phimosis in bulls. The suture was captonated and non-captonated and the animals conducted to the surgical procedure showed at least 2/3 of viability of the internal layer of prepuce. The bulls were randomly allocated in four groups, each one containing nine animals, according to the thread used in homeostasis and confection of the Donatti standard suture. Ultrassound was shown to be important in the indication or not of the surgical treatment of acropostitis-phimosis and allowed the identification of lesions, measurement of areas of tissue reaction and locate deep lesions and narrowing points of internal layer of prepuce. The employment of latex device (capton) in suture and the employment of polyglactin thread 910 were shown as beneficial measures, resulting in a lower number of postoperative complications.(AU)

Biochemical composition of the hoof capsule of buffaloes and its influence on hoof quality / Composição bioquímica do estojo córneo de bubalinos e sua influência na qualidade do casco

The purpose of this study was to establish the biochemical parameters of the abaxial wall, dorsal wall and sole of the hoof of the medial thoracic, lateral, and medial pelvic digits of buffalos. The hoof samples were subjected to destructive biochemical analyses to identify the dry material (DM), mineral matter (MM), organic matter (OM), crude protein (CP) and ether extract (EE) contents. Sulfur (S), calcium (Ca), potassium (K), phosphorus (P), zinc (Zn) and copper (Cu) levels were determined based on nondestructive biochemical analyses. The parameters of dry material, mineral matter, organic matter, crude protein and ether extract of hoof capsule of the digits of buffalos can be determined by means of both destructive and nondestructive biochemical analysis. In addition, this study revealed that the highest concentrations of DM, CP and minerals such as, K, Zn and Cu are concentrated in the digits that bear the greatest body mass weight, suggesting that there is a positive correlation between the aforementioned parameters and the strength and growth of the hoof capsule in the digits. As for the element S, this study demonstrated that its highest concentration is located in the lateral digits of the pelvic members.(AU)

O presente estudo objetivou estabelecer os parâmetros bioquímicos da muralha abaxial, muralha dorsal e sola do casco dos dígitos torácico medial e pélvico lateral dos bubalinos. Foram realizadas analises bioquímicas destrutivas das amostras dos cascos para se obterem os teores de matéria seca (MS), matéria mineral (MM), matéria orgânica (MO), proteína bruta (PB) e extrato etéreo (EE). As análises bioquímicas não destrutivas foram empregadas para se avaliarem os níveis de enxofre (S), cálcio (Ca), potássio (K), fósforo (P), zinco (Zn) e cobre (Cu). Concluiu-se que os parâmetros matéria seca, matéria mineral, matéria orgânica, proteína bruta e extrato etéreo do estojo córneo dos dígitos de bubalinos podem ser definidos por análises bioquímicas destrutivas e não destrutivas. Os maiores valores dos elementos minerais estão concentrados nos dígitos que suportam o maior peso do animal, sugerindo que existe uma relação positiva entre esses parâmetros. Além disso, este estudo revelou que as maiores concentrações de MS, PB e minerais como, K, Zn e Cu estão nos dígitos que carregam o maior peso de massa corporal, o que indica que há uma correlação positiva entre os parâmetros acima referidos, resistência e crescimento do estojo córneo dos dígitos. Em relação ao elemento de S, este estudo demonstrou que a sua maior concentração situa-se nos dígitos laterais dos membros pélvicos.(AU)

Development and evaluation of accessories to improve the posture of veterinary surgeons in surgical procedures conducted in the field / Desenvolvimento e avaliação de acessórios para melhorar a postura de cirurgiões veterinários em procedimentos cirúrgicos realizados a campo

The study was conducted based on the information collected on rural properties in the state of Goiás, during practical classes of Surgical Clinic in Large Animals at the Veterinary Hospital of the Escola de Veterinária e Zootecnia of the Universidade Federal de Goiás and during the implementation of outreach projects developed by the institution. An acropostite-phimosis surgical procedure in the bulls in the field was selected, lasting over 30 minutes and requiring movements, posture and strength on the part of the surgeon. Devices were proposed and developed to provide improved comfort and safety to surgeons. The first device was a stool to be used by the professional during the execution of the surgical intervention. The use enabled the surgeon to sit down and rest their feet on the ground, reducing knee bending and distributing the support forces in various muscle groups. For the movement restriction of the surgeon, another accessory was developed to support the foreskin of the animal. Made of wood, this other device serves as a support for keeping the foreskin away from the ground and close to the surgeon. Its length, width and thickness established a good relation with the stool height, providing minimal discomfort to the professional. The third device was designed to assist in the immobilization of the animal and increase safety for the patient and surgical team. A fourth accessory was designed to protect the scapular region and avoid the occurrence of injuries in the radial nerve, myopathies and traumas during the rollover or prolonged stay of the animal in lateral decubitus. The choice of the shape, dimensions and softness of the device was mainly based on the weight of the animal. Such devices have proven to be effective, reducing the time of surgery, making cervical and lumbar movement easier, in addition to providing better support to the surgeon, reducing risks of musculoskeletal diseases.(AU)

O estudo foi realizado com base nas informações coletadas em propriedades rurais do estado de Goiás, durante aulas práticas de Clínica Cirúrgica de Grandes Animais no Hospital Veterinário da Escola de Veterinária e Zootecnia da Universidade Federal de Goiás e durante a execução de projetos de extensão desenvolvidos pela instituição. Foi selecionado um procedimento cirúrgico de acropostite-fimose em touros a campo, com duração acima de 30 minutos e com exigência de movimentos, postura e força por parte do cirurgião. Foram propostos e desenvolvidos dispositivos para proporcionar melhor conforto e segurança aos cirurgiões. O primeiro consistiu de um assento para ser usado pelo profissional durante a execução da intervenção cirúrgica. A utilização permitiu que o cirurgião sentasse e apoiasse os pés no chão, reduzindo a flexão dos joelhos e distribuindo as forças de apoio por diversos grupos musculares. Para a restrição de movimentação do cirurgião, outro acessório foi desenvolvido para apoiar o prepúcio do animal. Confeccionado em madeira, serve de suporte para mantê-lo distante do solo e próximo ao cirurgião. Seu comprimento, largura e espessura estabeleceram boa relação com a altura do assento, proporcionando o mínimo de desconforto ao profissional. O terceiro dispositivo foi confeccionado para auxiliar na imobilização do animal e aumentar a segurança para o paciente e para a equipe de cirurgia. Um quarto acessório foi desenvolvido para proteger a região escapular e evitar a ocorrência de lesões de nervo radial, miopatias e traumas durante o derrubamento ou a permanência prolongada do animal em decúbito lateral. A escolha do formato, das dimensões e da maciez do dispositivo fundamentou-se principalmente no peso do animal. Tais dispositivos mostraram-se efetivos, pois reduziram o tempo de cirurgia, facilitaram a movimentação cervical e a lombar, além de proporcionarem um melhor apoio do cirurgião e, assim, reduzirem riscos de doenças osteomusculares.(AU)

Insertion of the LINE-1 element in the C-MYC gene and immunoreactivity of C-MYC, p53, p21 and p27 proteins in different morphological patterns of the canine TVT / Inserção do elemento LINE - 1 no gene C-MYC e imunorreatividade das proteinas C-MYC, p53, p21 e p27 nos diferentes padrões morfológicos do tumor TVT

The canine transmissible venereal tumor (TVT) affects the external genitalia of dogs by the natural transplant of viable tumor cells. Thus, this research aimed to diagnose and characterize TVT morphological patterns, identify the insertion of the LINE-1 element in C-MYC gene, by means of the polymerase chain reaction (PCR), and evaluate the immunohistochemical expression of C-MYC, p53, p21 and p27 proteins. The relationship between C-MYC and p53 proteins and their interference on the expression of p21 and p27 were also studied. For that, 20 samples of naturally occurring TVT were used, subjected to cytopathological, histopathological and immunohistochemical analysis, and to molecular diagnosis of neoplasia. The increased tissue expression and the correlation among C-MYC, p53, p21 and p27 proteins indicate reduction and/or loss of their functionality in the TVT microenvironment, with consequent apoptotic suppression, maintenance of cell growth and progression of neoplasia.(AU)

O tumor venéreo transmissível canino (TVT) afeta a genitália externa de cães pelo transplante natural de células tumorais viáveis. Assim, esta pesquisa teve como objetivo diagnosticar e caracterizar TVT em padrões morfológicos, identificar a inserção do elemento LINE-1 em gene C-MYC, por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR), e avaliar a expressão imuno-histoquímica do C-MYC, p53, p21 e p27. A relação entre C-MYC e as proteínas p53 e a sua interferência na expressão de p21 e p27 foram também estudadas. Para isso, foram utilizadas 20 amostras de ocorrência natural de TVT, submetido a exame citopatológico, histopatológica e imuno-histoquímica e ao diagnóstico molecular de neoplasia. A expressão aumentada do tecido e a correlação entre a C-MYC e as proteínas p53, p21 e p27 indicam redução e/ou perda de funcionalidade na TVT em seu microambiente, com consequente supressão apoptótica, manutenção do crescimento celular e progressão da neoplasia.(AU)

Microstructure of Holstein and Gir breed adult bovine hooves: histomorphometry, three-dimensional microtomography and microhardness test evaluation / Microestrutura de cascos de bovinos adultos das raças Holandesa e Gir: avaliação por histomorfometria, microtomografia tridimensional e teste de microdureza

This study aimed to characterize and compare the aspects involved in the microstructural formation of the Holstein and Gir breed hoof wall by histomorphometry, three-dimensional microtomography and microhardness test techniques. Seventy-two (18H/18G thoracic and 18H/18G pelvic) Holstein (H) and Gir (G) breed hooves were collected in slaughterhouses. The hooves were divided into six groups according to breed and age group: 24 to 36 months (C1H/C1G), 36 to 60 months (C2H/C2G) and over 60 months (C3H/C3G). The normality and homogeneity analysis of morphometric variables by the Kolmogrov-Sminov and Bartlett tests was conducted as a statistical model. Once the assumptions were met, the Sigmastat 3.5 software was used and the means were compared by T test. The 5% probability level is considered. When the assumptions were not met, the means were compared by the Mann-Whitney nonparametric test, considering the 5% probability level. When comparing the Holstein and Gir breeds, no differences were noticed between them as to the length of the dermal papillae; young animals showed thicker papillae than adult animals; the Holstein breed hooves showed higher amount of 7pores on the wall and on the sole compared to the Gir breed; Holstein cattle hooves showed greater microhardness than Gir cattle; there was no microhardness difference between pigmented and non-pigmented hooves of Holstein and Gir cattle.

O presente estudo objetivou caracterizar e comparar os aspectos envolvidos na formação microestrutural do estojo córneo de bovinos das raças Holandesa e Gir pelas técnicas de histomorfometria, microtomografia tridimensional e teste de microdureza. Foram coletados em frigoríficos, de forma igualitária entre as raças Holandesa (H) e Gir (G), 72 cascos (18H/18G torácicos e 18H/18G pélvicos). Os cascos foram divididos em seis grupos de acordo com a raça e a faixa etária: 24 a 36 meses, (C1H/C1G), 36 a 60 meses (C2H/C2G) e acima de 60 meses (C3H/C3G). Como modelo estatístico, realizou-se análise de normalidade e homogeneidade das variáveis morfométricas empregando testes Kolmogrov-Sminov e Bartlett. Atendidas as pressuposições, empregou-se o programa Sigmastat 3.5 e compararam-se as médias pelo teste T. Considerou-se o nível de 5% de probabilidade. Ao comparar as raças Holandesa e Gir, observou-se que não houve diferença entre elas quanto ao comprimento das papilas dérmicas. Os animais jovens apresentaram papilas mais espessas que os adultos. Os cascos da raça Holandesa apresentaram maior quantidade de poros na muralha e na sola em relação à raça Gir. Os cascos de bovinos Holandeses possuem microdureza maior que os de bovinos Gir. No estudo não se evidenciou diferença de microdureza entre cascos pigmentados e despigmentados de bovinos Holandeses e Gir.

In vivo biocompatibility of nanostructured Chitosan/Peo membranes / Biocompatibilidade in vivo de membranas nanoestruturadas de Quitosana/Peo

Electrospinning is a technique that allows the preparation of nanofibers from various materials. Chitosan is a natural and abundant easily obtained polymer, which, in addition to those features, proved to be biocompatible. This work used nanostructured chitosan and polyoxyethylene membranes as subcutaneous implants in Wistar rats to evaluate the biocompatibility of the material. Samples of the material and tissues adjacent to the implant were collected 7, 15, 30, 45 and 60 days post-implantation. Macroscopic integration of the material to the tissues was observed in the samples and slides for histopathological examination that were prepared. It was noticed that the material does not stimulate the formation of adherences to the surrounding tissues and that there is initial predominance of neutrophilia and lymphocytosis, with a declining trend according to the increase of time, featuring a non-persistent acute inflammatory process. However, the material showed fast degradation, impairing the macroscopic observation after fifteen days of implantation. It was concluded that the material is biocompatible and that new studies should be conducted, modifying the time of degradation by changes in obtaining methods and verifying the biocompatibility in specific tissues for biomedical applications.

A eletrofiação é uma técnica que permite a preparação de nanofibras mediante o uso de diversos materiais. A quitosana é um polímero natural, abundante e de fácil obtenção, que, além dessas características, demonstrou ser biocompatível. Este trabalho utilizou membranas nanoestruturadas de quitosana e polióxido de etileno como implantes subcutâneos em ratos Wistar para avaliar a biocompatibilidade do biomaterial. As amostras do material e de tecidos adjacentes ao implante foram retiradas sete, 15, 30, 45 e 60 dias pós-implantação para a observação da integração macroscópica do material aos tecidos e para a preparação de lâminas para exame histopatológico. Verificou-se que o material não estimula a formação de aderências com os tecidos circunvizinhos e que há predominância inicial de neutrofilia e linfocitose, que tendem a decrescer em razão do aumento do tempo, caracterizando um processo inflamatório agudo não persistente. No entanto, o material apresentou degradação rápida, não sendo possível observá-lo macroscopicamente após 15 dias de implantação. Concluiu-se que o material é biocompatível, o que indica que novos estudos devem ser conduzidos, com modificação do tempo de degradação por alterações nos métodos de obtenção e verificação da biocompatibilidade em tecidos específicos para aplicações biomédicas.

Histomorphological evaluation of the digital coronary region at different fetal development stages of Holstein cattle / Avaliação histomorfológica da região coronária digital em diferentes fases de desenvolvimento fetal de bovinos da raça Holandesa

The scientific literature lacks detailed morphological descriptions of the histological development and cell differentiation of fetal bovine hoof. In this study, 40 extremity members of Holstein bovine fetuses were collected and divided into four groups (G1 to G4) based on the estimated age. Fragments were removed from wall and sole, processed and stained with hematoxylin - eosin (HE) for light microscopy observation. In G1, it was found that the epidermis was very thin, including keratinocyte layers and clusters of mesenchymal cells. In group G2 it was observed that the thickness of the epidermis covering the limbs remained variable and laminar corium developed in the germinal layer. In group G3 it was noted that in the germinal epithelium there were papillae in little advanced development and cells of the stratum corneum in the initial process of keratinization. In G4, the epidermis was well developed with layers distributed homogeneously, containing symmetrical and long papillae and intense production of keratin. In this work, the most important cellular events for the formation of the fetal hoof in Holstein cattle were first described in different stages of their formation.

A literatura científica carece de descrições morfológicas detalhadas sobre o desenvolvimento histológico e diferenciação celular do casco fetal bovino. Neste estudo, 40 extremidades de membros de fetos bovinos da raça Holandesa foram coletados e divididos em quatro grupos (G1 a G4) com base na estimativa da idade. Desses membros, foram retirados fragmentos da parede e sola, processados e corados por hematoxilina-eosina (HE) para observação em microscopia óptica. No grupo G1, observou-se que a epiderme era bastante delgada, incluindo camadas de queratinócitos e conjuntos de células mesenquimais. No grupo G2, foi observado que a espessura da epiderme, cobrindo as extremidades dos membros, permaneceu variável, e o cório laminar desenvolveu-se na camada germinativa. No grupo G3, notou-se, no epitélio germinal, papilas em desenvolvimento pouco avançado e células da camada córnea no processo inicial de queratinização. No grupo G4, a epiderme apresentava-se bem desenvolvida, com camadas distribuídas de forma homogênea, contendo papilas simétricas e longas e com intensa produção de queratina. Neste trabalho, os eventos celulares mais importantes para a formação do casco fetal em bovinos da raça Holandesa foram descritos pela primeira vez, em diferentes etapas da sua formação.