Açöes do 17B-estradiol sobre a secreçäo de calcitonina "in vitro" / Action of 17B-estradiol on calcitonin secretion \"in vitro\"

Em doses farmacológicas a Calcitonina (CT) é tida como um hormônio poupador de cálcio (Ca) e protetor da massa óssea. Devido a isto, tem sido utilizada como alternativa terapêutica das osteoporose pós-menopáusica, doença de grande prevalência entre as mulheres. O papel da CT no desenvolvimento desta forma de osteoporose, entretanto, apesar do grande número de trabalhos respeito, ainda permanece controverso na literatura, assim como a existência de um efeito direto dos estrógenos sobre a secreçao e síntese de CT. Nossa proposta foi avaliar a açao do 17B-estradiol (E2) sobre a secreçao basal e estimulada de CT "in-vitro". Para isso utilizamos uma linhagem de células de carcinoma medular de tireóide humano (TT), na qual já havia sido descrita a presença de receptores estrogênicos. Estudamos o efeito de diferentes concentraçoes de E2 (1 e 100nM) sobre a secreçao basal de CT após períodos de incubaçao que variaram de 6 horas a 6 dias, além do efeito sobre a estimulaçao das células com TPA+Forskolina após 6 dias de pré-incubaçao com E2. A incubaçao das células TT com E2 nao resultou em nenhum incremento na secreçao basal ou estimulada de CT em comparaçao aos grupos controles, em nenhum dos períodos de tempo estudados. O efeito observado, ao contrário, foi de inibiçao transitória da secreçao de CT, de forma dose-dependente (80,5 porcento e 59,1 porcento do controle para 1 a 100 nM respectivamente), cujo nadir apresentou-se após 24h de incubaçao, retornando aos níveis dos grupos controles após 72h. Somado a isto, E2 levou a um efeito estimulatório dose-dependente sonre o conteúdo celular protéico, mas sem qualquer efeito sobre a incorporaçao de timidina triciada, indicando induzir a uma hipertrofia ao invés de uma hiperplasia das células TT. Os dados obtidos demonstraram ausência de qualquer efeito estimulatório direto do E2 sobre a secreçao basal ou estimulada de CT, revelando adicionalmente em efeito de inibiçao transitória na secreçao de CT. (Arq Bras Endocrinol Metab 1994; 38/1:23-28).

Down-regulation of different post-receptor signal transduction pathways by chronic insulin stimulation / 中华内分泌代谢杂志

Objective To study the effect of chronic insulin stimulation on different signal transduction pathways of insulin post-receptor in a human hepatoma cells line (HepG2). Methods HepG2 cells were incubated in serum-free media in either presence or absence of various concentrations of insulin (0-100 nmol/L) for 16 h before the cells were stimulated with 100 nmol/L insulin for 1 min. Protein levels of insulin receptor ?-subunit (IR?), insulin receptor substrate (IRS)-1, IRS-2, P85 subunit of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K), mitogen activated protein kinase (MAPK) and phosphorylated proteins of MAPK were determined in total cell lysates by Western-immunoblot, and determination of phosphorylated proteins IR?, IRS-1, IRS-2 and interaction of PI3K with IRS-1/-2 were performed by immunoprecipitation. Results Insulin stimulation for 1 min rapidly induced tyrosine phosphorylation of IR?, IRS-1 and IRS-2 and phosphorylation of MAPK, which in turn, resulted in binding of P85 with IRS-1/-2 and activation of MAPK. After 100 nmol/L insulin treatment for 16 h, there was a more marked reduction in the phosphorylations of IR?,IRS1andIRS2inHepG2 cells, reaching 22.2% (P