Résumé
Abstract Trypanosoma (Megatrypanum) theileri is a flagellated protozoan that infects ruminants and it displays high genetic diversity. In this study, we investigated the prevalence rates of this protozoan based on hemoculture and molecular diagnosis. The isolates of T. theileri thus obtained were characterized by molecular markers SSU rDNA and gGAPDH and molecular diagnosis based on Cathepsin L-like gene (PCR-TthCATL). The PCR-TthCATL and hemoculture indicated an overall prevalence rate of 8.13%, and the CATL derived sequence named IB was identified for the first time in cattle in the western Amazon region, as well as IF in Brazil. We also describe a possible new PCR-TthCATL derived sequence in cattle, designated IL.
Resumo Trypanosoma (Megatrypanum) theileri é um protozoário flagelado que infecta ruminantes e apresenta alta diversidade genética. Neste estudo, investigamos as taxas de prevalência deste protozoário com base na hemocultura e no diagnóstico molecular. Os isolados de T . theileri obtidos foram caracterizados pelos marcadores moleculares SSU rDNA e gGAPDH e o diagnóstico molecular foi baseado no gene do tipo Catepsina L (PCR-TthCATL). O PCR-TthCATL e a hemocultura indicaram uma taxa de prevalência total de 8,13% e a sequência derivada do gene Catepsina L denominada IB de T. theileri foi identificada pela primeira vez em bovinos da Amazônia Ocidental, bem como a IF no Brasil. Também descrevemos uma possível nova sequência derivada da PCR-TthCATL em bovinos, designada IL.
Résumé
Abstract We evaluated the distribution of piroplasmids in equids from the Mato Grosso state in Midwestern Brazil using molecular methods and the interspecific genetic diversity. For this, 1,624 blood samples of equids from 973 farms were examined by PCR, using primer pairs that amplify a fragment of the genes rap-1 and ema-1 of Babesia caballi and Theileria equi, respectively. For molecular characterization and phylogenetic studies, 13 and 60 sequences of the rap-1 and ema-1 genes, respectively, were used to build a dendogram using maximum parsimony. B. caballi and T. equi were detected in 4.11% and 28.16% of the farms, respectively, and molecular prevalence was 2.74% for B. caballi and 25.91% for T. equi. The location of the farms and animals raised in the Pantanal ecoregion influence the probability of equids testing positive for B. caballi and T. equi . Moreover, age and herd purpose were variables significantly associated with T . equi infection. The sequences of B. caballi presented 1.95% intraspecific variability, contrasting with 2.99% in T. equi. Dendrograms for both species demonstrated the presence of subgroups with high values of support of branches. However, it is not possible to associate these groups with geographic origin and/or ecoregion.
Resumo Foi avaliada a distribuição de piroplasmídeos em equídeos do Estado de Mato Grosso, no Centro-Oeste do Brasil, utilizando-se métodos moleculares e a diversidade genética interespecífica. Para isso, 1.624 amostras de sangue de equídeos de 973 fazendas foram examinadas pela PCR, usando pares de oligonucleotídeos que amplificam um fragmento dos genes rap-1and ema-1 de Babesia caballi e Theileria equi, respectivamente. Para caracterização molecular e estudos filogenéticos, foram utilizadas 13 e 60 sequências dos genes rap-1 e ema-1, respectivamente, para construção de um dendograma utilizando máxima parcimônia. B. caballi e T . equi foram detectados em 4,11% e 28,16% das fazendas, respectivamente, e a prevalência molecular foi de 2,74% para B. caballi e 25,91% para T. equi. A localização das fazendas e animais criados na ecorregião do Pantanal influenciam a probabilidade de equídeos serem positivos para B. caballi e T. equi. Além disso, idade e propósito do rebanho foram variáveis, significativamente, associadas à infecção por T. equi. As sequências de B . caballi apresentaram variabilidade intraespecífica de 1,95%, contrastando com 2,99% em T. equi. Dendrogramas para ambas as espécies demonstraram a presença de subgrupos com altos valores de sustentação dos ramos. No entanto, não é possível associar esses grupos com origem geográfica e/ou ecorregião.
Résumé
Abstract Neosporosis is caused by an obligate intracellular protozoan, Neospora caninum . It is considered one of the most widespread and frequent causes of abortion in cattle worldwide. To evaluate the prevalence of anti-N. caninum antibodies and associated risk factors, serum samples were collected from 2,452 bovines at 262 farms in the northern Pantanal, state of Mato Grosso, Brazil. Each farmer was asked to fill out a questionnaire for subsequent epidemiological data analysis. Anti-N. caninum antibodies were detected by means of the indirect immunofluorescent assay (IFA), using a cut-off dilution of 1:100. The overall anti-N. caninum antibodies prevalence was 25.44% (Confidence Interval - CI 95%; 20.10%; 30.78%), and the anti-N. caninum antibodies prevalence per herd was 76.72% (CI 95%; 71.60%; 81.84%). The presence of dogs, occurrence of abortion in cows, and sale of cattle for breeding were statistically associated with seropositivity in herds, while the risk of females being seropositive for N. caninum was higher in animals 6-years-old and in the presence of dogs. A spatial analysis indicated that the relative risk of the disease is spatially constant and that the farms with the highest prevalence of anti-N. caninum antibodies are located south of the region under study.
Resumo Neosporose é causada por um protozoário intracelular obrigatório, Neospora caninum. É considerada uma das causas mais comuns e frequentes de aborto em bovinos em todo o mundo. Para avaliar a prevalência de anticorpos anti- N. caninum e fatores de risco associados, amostras de soro foram coletadas de 2.452 bovinos em 262 fazendas no Pantanal norte, estado de Mato Grosso, Brasil. Cada fazendeiro preencheu um questionário para posterior análise dos dados epidemiológicos. Anticorpos anti-N. caninum foram detectados por meio da reação de imunofluorescência indireta (RIFI), utilizando um ponto de corte de 1:100. A prevalência total de anticorpos anti-N. caninum foi de 25,44% (Intervalo de Confiança - IC 95%; 20,10%; 30,78%) e a prevalência por rebanho foi de 76,72% (IC 95%; 71,60%; 81,84%). A presença de cães, a ocorrência de abortamento em vacas e a venda de bovinos para reprodução estiveram estatisticamente associadas à soropositividade em rebanhos, enquanto, o risco de fêmeas serem soropositivas para N. caninum foi maior em animais com idade 6 anos e na presença de cães. A análise espacial indicou que o risco relativo da doença é espacialmente constante e que as fazendas com maior prevalência de anticorpos anti-N. caninum estão localizados ao sul da região em estudo.