Efeito leishmanicida in vitro do látex de Croton lechleri (Euphorbiaceae) / In vitro leishmanicidal effect of Croton lechleri latex

A Leishmaniose Tegumentar Americana é uma infecção causada por uma variedade de espécies de Leishmania, é transmitida ao homem por flebotomíneos. Os antimoniais pentavalentes são utilizados na quimioterapia dessa doença; no entanto, esses fármacos provocam uma série de efeitos colaterais, além de apresentar altos índices de toxicidade. Na busca por novos agentes leishmanicidas, avaliamos in vitro o extrato do látex de Croton lechleri (Sangue de dragão) frente a formas promastigotas de Leishmania amazonensis e Leishmania guyanensis. O extrato foi obtido através da desidratação do látex de C. lechleri e diluído em solução 10% de etanol em salina tamponada com fosfato. As promastigotas de Leishmania foram cultivadas juntamente com o extrato nas concentrações de 6,25; 12,5 e 25µg/ mL por 72 horas. O extrato apresentou eficácia em todas as concentrações testadas apresentando um IC50 (concentração inibitória) de 5,04µg/mL para L. amazonensis e IC50 de 9,05µg/mL para L. guyanensis. Foi realizada a avaliação citotóxica em células J774 nas mesmas concentrações usadas no ensaio leishmanicida, porém a concentração de 25µg/mL apresentou índice de toxicidade de aproximadamente 50% para a célula hospedeira. Os testes realizados mostraram-se promissores, pois o extrato testado também foi capaz de inibir o crescimento de promastigotas de L. amazonensis após ensaio de infecção com células J774.

Cutaneous Leishmaniasis is an infection caused by a several species of Leishmania, is transmitted to humans by phlebotomine sandflies. Pentavalent antimonial compounds are used in the chemotherapy of this disease; however, these drugs cause several collateral effects, besides presenting high levels of toxicity. The search for new antiLeishmanial agents, we assessed in vitro the extract of Croton lechleri latex (Blood Dragon) against the promastigote forms of Leishmania amazonensis and Leishmania guyanensis. The extract was obtained by dehydration C. lechleri latex mass and the solution was diluted with 10% ethanol in phosphate buffered saline solution. The Leishmania promastigotes were grown with the extract following concentrations 6.25; 12.5 and 25µg/mL for 72 hours. The extract showed efficacy in all concentrations tested showing an IC50 (inhibitory concentration) of 5.04 µg/mL for L. amazonensis and IC50 of 9.05 µg/mL for L. guyanensis. Cytotoxic evaluation was performed in J774 cells at the same concentrations used in the leishmanicidal assay, but the concentration of 25µg/mL showed toxicity index of approximately 50% for the host cell. Tests carried out proved promising, since the extracts tested was also able to inhibit the L. amazonensis promastigotes growth after infection assay with J774 cells.

Estudo fitoquímico e atividades leishmanicida, anticolinestarásica e antioxidante de extratos de Annona glabra L. (araticum panã) / Phytochemical study and leishmanicidal, anticholinesterase and antioxidant activities of Annona glabra L. (araticum panã) extracts

O objetivo deste estudo foi investigar as principais classes de compostos químicos presentes em Annona grabra L. (Araticum panã), e avaliar o seu potencial biológico analisando suas atividades antioxidante, antiacetilcolinesterase e leishmanicida. Para tanto, a entrecasca e sementes foram submetidas à extração em aparelho de soxhlet com os solventes orgânicos hexano, clorofórmio, acetato de etila e metanol, obtendo-se os respectivos extratos. Com os extratos foram realizados testes de prospecção fitoquímica, determinação da atividade antioxidante pelo método de inibição do radical livre DPPH e inibição da acetilcolinesterase em ensaio de cromatografia em camada delgada. Os testes de atividade leishmanicida in vitro em formas promastigotas de Leishmania infantum chagasi foram realizados em placa de 96 poços em aparelho ELISA. Os extratos foram testados a 100 ?g/ mL. Os testes fitoquímicos revelaram a presença de esteroides, triterpenos, alcaloides, compostos fenólicos e saponinas. Todos os extratos apresentaram inibição da acetilcolinesterase e os extratos hexânicos de ambas partes mostraram maior percentual de inibição de L. infantum chagasi. Nestes extratos, compostos apolares como esteroides e triterpenos podem contribuir para a atividade leishmanicida. Os extratos de melhor atividade antioxidante foram o acetato de etila e metanólico da entrecasca e metanólico das sementes que correspondem aos que contem compostos fenólicos. Conclui-se que A. glabra constitui uma fonte potencial de agentes leishmanicida com possível mecanismo de ação pela inibição da enzima acetilcolinesterase das membranas da L. infantum chagasi, causador da leishmaniose visceral.(AU)

The aim of this study was to investigate the main types of chemical constituents present in Annona grabra L. (araticum panã) and evaluate its biological potential by analyzing the antioxidant, antiacetylcholinesterase and antiLeishmanial activities. For this, the sapwood and seeds were subjected to extraction in soxhlet apparatus using the following organic solvents: hexane, chloroform, ethyl acetate and methanol for obtaining the respective extracts. These extracts were submitted to phytochemical prospection, antioxidant tests by scavenging the free radical DPPH, acetylcholinesterase inhibition assay on TLC plates. The in vitro antiLeishmanial assay in Leishmania infantum chagasi promastigotes were performed in a 96 well plate in an ELISA instrument. The extracts were tested at 100 ?g/ mL. Phytochemical investigation revealed the presence of sterols, triterpenes, alkaloids, phenolic compounds and saponins. All extracts showed inhibition of acetylcholinesterase, and hexane extracts of both parts presented more action in L. infantum chagasi. The extracts with better antioxidant action were ethyl acetate and methanol extracts of the sapwood and methanol extract of seeds, which correspond to those, which contains phenolic compounds. In conclusion, A. glabra constitutes a potential source of antiLeishmanial agents with possible mechanism of action by inhibiting the acetylcholinesterase in the membranes of L. infantum chagasi responsible for visceral Leishmaniasis.(AU)

Avaliação da atividade citotóxica e potencial antiparasitário in vitro do a-pineno e carvacrol / Cytotoxic and antiparasitic in vitro activities of a-pinene and carvacrol

A leishmaniose e a doença de Chagas tem sido um grande desafio, no que diz respeito à sua terapêutica. Devido à grande dificuldade de encontrar fármacos que garantam uma ação terapêutica eficiente e menos agressora à espécie humana, diferentes produtos naturais vêm sendo testados. Muitas espécies vegetais foram investigadas quanto à sua ação leishmanicida e tripanocida na expectativa de que seus compostos metabólicos possuam atividade antiparasitária e ausência ou baixa citotoxicidade. Neste estudo sobre bioatividade do a-pineno e carvacrol, avaliaram-se os potenciais leishmanicida e tripanocida. O carvacrol apresentou um percentual de inibição de 38,34% e 74,12% para as formas promastigotas e epimastigotas respectivamente, na concentração de 100µg/mL, apresentando uma citotoxicidade de 21,62%. O a-pineno apresentou 100% e 5,30% de inibição para as formas epimastigota e promastigota na concentração de 100 µg/mL, com citotoxicidade de 87,88%.

Leishmaniasis and Chagas Disease represent a great challenge against the modern therapeutics. Due the high difficult to find new drugs with therapeutic efficacy and low toxicity, several natural products had been screened. Many species of plants were investigated about their leishmanicidal and trypanocidal activities. Some phytocompounds are the a-pinene and carvacrol. In this work, we evaluated the bioactivities of a-pinene and carvacrol against Trypanosoma cruzi and Leishmania braziliensis cell lines. The carvacrol inhibited 38,34% and 74,12% of the promatigote and epimastigote forms, respectively at 100 µg/mL, showing a low cytotoxic activity (21,62%). The O a-pinene inhibited 100% and 5,30% against the epimastigote and promastigote forms respectively, at 100 µg/mL, showing a higher cytotoxic activity (87,88%).

Citotocixidade e atividade antiparasitária de Lygodium venustum SW / Cytotoxic and antiparasitic activity of Lygodium venustum SW

. Doenças parasitárias infecciosas como leishmaniose e doença de Chagas tem se difundido nas últimas décadas a locais onde antes não se observava sua ocorrência. São consideradas negligenciadas por assolarem países pobres e serem marginalizadas farmacologicamente. O tratamento não apresenta muitas opções de fármacos e estes demonstram relevante toxicidade contribuindo para o aparecimento de diversos efeitos colaterais. A pesquisa com produtos naturais tem se mostrado uma interessante alternativa para a procura por novos fármacos. Lygodium venustum é uma samambaia cosmopolita de hábito lianescente encontrada na encosta na Chapada do Araripe, considerada por algumas populações americanas como planta medicinal para o tratamento de dermatoses, infecções, micoses e tricomoníases. Neste estudo foi avaliada sua atividade anti-parasitária contra Leishmania brasiliensis e Trypanosoma cruzi, bem como sua citotoxicidade através de ensaios n vitro. Foram testadas a fração hexânica e o extrato etanólico obtido das folhas de Lygodium venustum em diferentes concentrações. Para os testes in vitro de T. cruzi, foi utilizado o clone CL-B5 e para Leishmania brasiliensis foram utilizadas formas promastigotas. O ensaio de citotoxicidade foi realizado com linhagens de fbroblastos. L. venustum não apresentou atividade antiparasitária clinicamente relevante na forma de extrato etanólico bruto nem como fração hexânica contra Leishmania. A fração hexânica apresentou uma atividade intermediária contra T. cruzi, porém a concentração de efeito moderado possui citotoxicidade máxima tornando-se inviável para aplicação clínica. Entretanto, a citoxicicidade apresentada poderá ser útil em pesquisas sobre atividade antineoplásica em células tumorais.

Infectious and parasitic diseases like leishmaniasis and Chagas disease have spreading recent decades to places not observed before. They are considered neglected by desolating poor countries and marginalized pharmacologically. There are not many options for the treatment and these drugs have shown signifcant toxicity contributing to the appearance of several side effects. Research on natural products has been shown to be an interesting alternative to the search for new drugs. Lygodium venustum is a cosmopolitan fern with latescence habit found on the Chapada do Araripe, considered by some American popula-tions as a medicinal plant for the treatment of skin diseases, infections, fungal infections and trichomoniasis. This study evaluated its antiparasitic activity against Trypanosoma cruzi and Leishmania brasiliensis, as well as its cytotoxicity through trials in vitro. We tested the ethanolic extract and hexane fraction obtained from the leaves of L. venustum at different concentrations. For in vitro tests of T. cruzi, we used the clone CL-B5 and for L. brasiliensis we used promastigotes. The cytotoxicity assay was performed with strains of fbroblasts. L.venustum showed no antiparasitic activity clinically relevant in the form of crude ethanolic extractor as the hexane fraction against Leishmania. The hexane fraction showed an intermediate activity against T.cruzi, but the concentration of moderate effect has maximum cytotoxicity becoming unfeasible for clinical application. However, the cytotoxicity presented may be useful in research on antineoplastic activity in tumor cells.

Antileishmanial activity of 3-(3,4,5-trimethoxyphenyl) propanoic acid purified from Amazonian Piper tuberculatum Jacq., Piperaceae, fruits / Atividade antileishmania do 3,4,5-trimetoxi-dihidrocinâmico purificado das frutas de Piper tuberculatum Jacq., Piperaceae, amazônica

Leishmanicidal activity of the 3-(3,4,5-trimethoxyphenyl) propanoic acid (TMPP) isolated from EtOH extracts of the Amazonian Piper turbeculatum Jacq. fruits was evaluated in vitro using Leishmania amazonensis promastigotes. The TMPP was assayed at concentrations of 1600 to 6.25 µg/mL for 24, 48, 72 and 96 h. Promastigotes viability was analyzed and the IC50 of TMPP was 145 µg/mL.

A atividade leishmanicida do ácido 3,4,5-trimetoxi-dihidrocinâmico (TMPP) isolado do extrato hidroalcoólico de frutos de Piper turbeculatum Jacq. amazônica foi testado em ensaios in vitro utilizando formas promastigotas de Leishmania amazonensis. O TMPP foi utilizado em culturas de L. amazonensis nas concentrações de 1600 a 6,25 µg/mL. A viabilidade celular das formas promastigotas foi observada em 24, 48, 72 e 96 h para cálculo da CI50. O TMPP apresentou efeito leishmanicida dose dependente para as formas promastigotas de L. amazonensis apresentando CI50 de 145 µg/mL.

Leishmanicidal, antibacterial, and antioxidant activities of Caryocar brasiliense Cambess leaves hydroethanolic extract / Atividades leishmanicida, bactericida e antioxidante do extrato hidroetanólico das folhas de Caryocar brasiliense Cambess

The antimicrobial and antioxidant activities of the hydroethanolic extract from Caryocar brasiliense leaves were evaluated. The extract showed leishmanicidal effect against Leishmania amazonensis promastigote forms and bactericidal activity against some pathogenic bacteria. The extract also showed relevant antioxidant activity, similar to that of vitamin C and rutin.

As atividades antimicrobiana e antioxidante do extrato hidroetanólico das folhas de Caryocar brasiliense foram estudadas. O extrato demonstrou efeito leishmanicida sobre formas promastigotas de Leishmania amazonensis e atividade bactericida sobre estirpes de bactérias patogênicas para o homem. Além disso, o extrato demonstrou relevante capacidade antioxidante, similar às atividades da vitamina C e da rutina.

Avaliação da atividade leishmanicida in vitro de plantas medicinais / Evaluation of the in vitro leishmanicidal activity of medicinal plants

Na busca de novos agentes leishmanicidas, avaliamos em culturas de promastigotas de Leishmania amazonensis o efeito dos extratos hidroalcoólicos das folhas de Tephrosia cinerea (L.) Pers. (Fabaceae), Dichorisandra sp (Commelinaceae), Syzygium jambolanum DC. (Myrtaceae), Julocroton triqueter (Lam.) Didr. var. triqueter (Euphorbiaceae), Passiflora edulis Sims(Passifloraceae), Cecropia sp (Cecropiaceae), Chenopodium ambrosioides L.(Chenopodiaceae), Pedilanhus tithymaloides (L.) Poit (Euphorbiaceae), Peristrophe angustifolia Nees(Acanthaceae) e o extrato aquoso do mesocarpo de Orbignya phalerata Mart. (Arecaceae). As promastigotas de Leishmania amazonensis foram cultivadas em presença de 31,3; 63,5; 125,0; 250,0 e 500,0 µg/mL dos extratos por 24 horas. Ao final desse período foi calculada a concentração inibitória do crescimento (CI50) em relação às culturas não tratadas com os extratos. Os extratos das espécies J. triqueter, Dichorisandra sp e T. cinerea apresentaram maior eficácia em induzir a morte das promastigotas, com CI50 de 29,5; 32,9 e 43,6 µg/mL, respectivamente. P. edulis, C. ambrosioides e S. jambolanum apresentaram eficácia moderada com CI50 de 150,1; 151,9 e 166,6 µg/mL, respectivamente. P. tithymaloides e O. phalerata apresentaram baixo efeito leishmanicida com CI50 >500 µg/mL, enquanto Peristrophe angustifolia e Cecropia spnão apresentaram efeito. Dessa forma, dos dez extratos testados, três apresentaram uma expressiva atividade leishmanicida in vitro.

Searching for new leishmanicidal agents, promastigotes forms of L. amazonensis were cultured with the hydroalcoholic extracts obtained from the Tephrosia cinerea (L.) Pers. (Fabaceae), Dichorisandra sp (Commelinaceae), Syzygium jambolanum DC. (Myrtaceae), Julocroton triqueter (Lam.) Didr. var. triqueter (Euphorbiaceae), Passiflora edulis Sims(Passifloraceae), Cecropia sp (Cecropiaceae), Chenopodium ambrosioides L.(Chenopodiaceae), Pedilanhus tithymaloides (L.) Poit (Euphorbiaceae), Peristrophe angustifolia Nees(Acanthaceae) leaves and the aqueous extract obtained from the Orbignya phalerata Mart. (Arecaceae) mesocarp flour. The in vitro assay was performed with promastigotes incubated during 24 hours with 31.3, 62.5, 125.0, 250.0 and 500.0 µg/mL of each extract. Then the inhibitory concentration of the parasite growth (IC50) was determined. The effectiveness of J. triqueter, Dichorisandra sp and T. cinerea hydroalcoholic extracts to induce promastigotes death was intense since the IC50 were 29.5; 32.9 and 43.6 µg/mL, respectively. P. edulis, C. ambrosioides and S. jambolanum extracts had moderated effectiveness since the IC50 were 150.1; 151.9 and 166.6 µg/mL, respectively. P. tithymaloides and O. phalerata extracts showed a low efficacy in comparison with IC50 >500 µg/mL. Peristrophe angustifolia and Cecropia sp extracts had no leishmanicidal effect. Thus, three of the ten extracts that were tested showed a significant in vitro leishmanicidal activity.