Human Tissue Kallikrein Activity in Angiographically Documented Chronic Stable Coronary Artery Disease / Atividade da Calicreína Tecidual Humana na Doença Coronariana Crônica Estável Angiograficamente Documentada

AbstractBackground:Human tissue kallikrein (hK1) is a key enzyme in the kallikrein–kinin system (KKS). hK1-specific amidase activity is reduced in urine samples from hypertensive and heart failure (HF) patients. The pathophysiologic role of hK1 in coronary artery disease (CAD) remains unclear.Objective:To evaluate hK1-specific amidase activity in the urine of CAD patientsMethods:Sixty-five individuals (18–75 years) who underwent cardiac catheterism (CATH) were included. Random midstream urine samples were collected immediately before CATH. Patients were classified in two groups according to the presence of coronary lesions: CAD (43 patients) and non-CAD (22 patients). hK1 amidase activity was estimated using the chromogenic substrate D-Val-Leu-Arg-Nan. Creatinine was determined using Jaffé’s method. Urinary hK1-specific amidase activity was expressed as µM/(min · mg creatinine) to correct for differences in urine flow rates.Results:Urinary hK1-specific amidase activity levels were similar between CAD [0.146 µM/(min ·mg creatinine)] and non-CAD [0.189 µM/(min . mg creatinine)] patients (p = 0.803) and remained similar to values previously reported for hypertensive patients [0.210 µM/(min . mg creatinine)] and HF patients [0.104 µM/(min . mg creatinine)]. CAD severity and hypertension were not observed to significantly affect urinary hK1-specific amidase activity.Conclusion:CAD patients had low levels of urinary hK1-specific amidase activity, suggesting that renal KKS activity may be reduced in patients with this disease.

ResumoFundamento:A calicreína tecidual humana (hK1) é enzima-chave do sistema calicreína-cinina (SCC). A atividade amidásica da hK1 está reduzida na urina de pacientes com hipertensão e insuficiência cardíaca (IC); seu papel na doença arterial (DAC) coronariana ainda não está esclarecido.Objetivo:Avaliar a atividade amidásica da hK1 na urina de pacientes com DAC.Métodos:Sessenta e cinco indivíduos (18 a 75 anos) que se submeteram ao cateterismo cardíaco (CAT) coletaram amostra do jato médio de urina imediatamente antes do CAT. Baseando-se na presença de lesões coronarianas, os pacientes eram classificados em dois grupos: DAC (43 pacientes) e sem DAC (22 indivíduos). A atividade amidásica da hK1 foi estimada com o substrato cromogênico D-Val-Leu-Arg-Nan. Creatinina foi determinada pelo método de Jaffé. A atividade amidásica específica da hK1 urinária foi expressa em µM/(min . mg de creatinina) para corrigir diferenças no fluxo urinário.Resultados:A atividade amidásica da hK1 urinária foi semelhante entre os pacientes com DAC [0,146 µM/(min . mg de creatinina)] e aqueles sem DAC [0,189 µM/(min . mg de creatinina)] (p = 0,803), e permaneceu entre os baixos valores previamente publicados para pacientes com hipertensão primária [0,210 µM/(min . mg de creatinina)] e para aqueles com IC [0,104 µM/(min . mg de creatinina)], respectivamente. Nenhum efeito estatisticamente significativo da gravidade da DAC e da hipertensão sobre a atividade amidásica da hK1 urinária foi observado.Conclusão:A atividade amidásica da hK1 na urina estava reduzida nos pacientes com DAC, o que pode sugerir que a atividade do SCC renal esteja reduzida nessa doença.

Inhibition of carrageenan-induced expression of tissue and plasma prekallikreins mRNA by low level laser therapy in a rat paw edema model / Inibição da expressão de RNA mensageiro de pré-calicreínas tecidual e plasmática pela laserterapia em modelo de edema de pata induzido pela carragenina em ratos

BACKGROND: Low level laser therapy (LLLT) has been used clinically in order to treat inflammation, where tissue and plasma prekallikrein have crucial importance. Plasma prekallikrein (PPK) is synthesized by the hepatocytes and secreted into the bloodstream, where it participates in the surface-dependent activation of blood coagulation, fibrinolysis, kinin generation and inflammation. Tissue prekallikrein is associated with important disease states (including cancer, inflammation, and neurodegeneration) and has been utilized or proposed as clinically important biomarker or therapeutic target of interest. OBJECTIVE: To evaluate if LLLT modulates tissue and plasma prekallikreins mRNA expression in the carrageenan-induced rat paw edema. METHODS: Experimental groups were assigned as followed: A1 (Control-saline), A2 (Carrageenan-only), A3 (laser 660nm only) and A4 (Carrageenan + laser 660nm). Edema was measured by a plethysmometer. Subplantar tissue was collected for the quantification of prekallikreins mRNA by Real time-Polymerase Chain Reaction. RESULTS: A significantly decrease in the edema was observed after laser irradiation. Expression of prekallikreins increased after carrageenan injection. Tissue and plasma prekallikrein mRNA expression significantly decreased after LLLT's 660nm wavelength. CONCLUSION: These results suggest that expression of tissue and plasma prekallikreins is modulated by LLLT, which can be used in clinical practice due to its anti-inflammatory effects.

CONTEXTUALIZAÇÃO: A laserterapia de baixa potência tem sido usada para o tratamento de processos inflamatórios diversos em que a calicreína tecidual e a plasmática possuem participação ativa. A pré-calicreína plasmática (PPK) é sintetizada pelos hepatócitos e secretada na corrente sanguínea, onde participa da ativação da coagulação, fibrinólise, geração de cininas e inflamação. A pré-calicreína tecidual está associada com importantes doenças (incluindo câncer, inflamação e neurodegeneração) e tem sido utilizada ou sugerida clinicamente como importante biomarcador ou alvo terapêutico. OBJETIVO: Avaliar se a laserterapia altera a expressão gênica da pré-calicreína tecidual e da plasmática no modelo de inflamação aguda induzida pela carragenina. MÉTODOS: Quarenta ratos foram separados em quatro grupos experimentais: A1 (controle), A2 (carragenina, apenas), A3 (laser 660nm, apenas) e A4 (Carragenina + laser 660nm). O edema foi medido por um pletismômetro. Tecido subplantar foi coletado para a quantificação de RNA mensageiro (RNAm) de pré-calicreínas tecidual e plasmática por PCR em tempo real. RESULTADOS: Observou-se uma diminuição significativa no volume de edema após irradiação com laser 660nm. A expressão de RNAm de pré-calicreínas tecidual e plasmática aumentou após a inoculação de carragenina, entretanto a expressão gênica das pré-calicreínas diminuiu significantemente após laserterapia de baixa potência de 660nm. CONCLUSÃO: Os resultados sugerem que a expressão de RNAm das pré-calicreínas tecidual e plasmática é modulada pela laserterapia de baixa potência, podendo ser alvo terapêutico para tratamento de processos inflamatórios.