Providing inoculum for Didymella bryoniae studies: the effect of light spectrum and storing at low temperature

Abstract The in vitro sporulation of Didymella bryoniae is of great importance for studies that require pure inoculum and in large quantities. Thus, the objectives of this study were to identify the best condition for D. bryoniae sporulation combining different light spectra (UV-A or UV-B light, white light, and continuous dark), with distinct culture media (PDA, V8, ML, and PDAB) and, to evaluate fungus survivability stored at -20°C over time. The fungus samples were only able to sporulate when subjected to the UV-B light treatment, regardless of the culture medium. The highest appearance of spores conidium type was observed in the PDAB medium, and the lowest production occurred in the ML medium. Reproductive structures, such as perithecia and pycnidia, were observed in all culture media. However, there was considerable variation in the amount of each structure between the different culture media. The ML and V8 media showed a greater number of perithecia and the PDA and PDAB media presented a greater proportion of pycnidia compared to perithecia. The storage duration at -20°C did not affect mycelial growth or mycelial growth rate. In conclusion, the UV-B light is essential for D. bryoniae in vitro sporulation. Moreover, the culture medium composition influences the type of fungal structure produced, as well as spores size and quantity. Freezing at -20°C is an efficient technique that can be used to store D. bryoniae for at least five months without loss of viability.

Resumo A esporulação de Didymella bryoniae in vitro é de grande importância para estudos que requerem inóculo puro e em grandes quantidades. Assim, os objetivos deste estudo foram identificar a melhor condição para esporulação de D. bryoniae combinando diferentes espectros de luz (luz UV-A ou UV-B, luz branca e escuro contínuo) com distintos meios de cultura (PDA, V8, ML e PDAB) e, avaliar a sobrevivência do fungo armazenado a -20°C ao longo do tempo. As amostras de fungo só esporularam quando submetidas ao tratamento com luz UV-B, independentemente do meio de cultura. Maior aparecimento de esporos do tipo conídio foi observado no meio PDAB, e a menor produção ocorreu no meio ML. Estruturas reprodutivas, como peritécios e picnídeos, foram observadas em todos os meios de cultura. No entanto, houve uma variação considerável na quantidade de cada estrutura entre os diferentes meios de cultura. Os meios ML e V8 apresentaram maior número de peritécios e os meios PDA e PDAB apresentaram maior proporção de picnídeos em relação aos peritécios. A duração do armazenamento a -20°C não afetou o crescimento micelial ou a taxa de crescimento micelial. Em conclusão, a luz UV-B é essencial para a esporulação de D. bryoniae in vitro. Além disso, a composição do meio de cultura influencia o tipo de estrutura fúngica produzida, bem como o tamanho e a quantidade dos esporos. O congelamento a -20°C é uma técnica eficiente que pode ser usada para armazenar D. bryoniae por pelo menos cinco meses sem perda de viabilidade

Providing inoculum for Didymella bryoniae studies: the effect of light spectrum and storing at low temperature / Fornecendo inóculo para estudos de Didymella bryoniae: o efeito do espectro de luz e armazenamento em baixa temperatura

Abstract The in vitro sporulation of Didymella bryoniae is of great importance for studies that require pure inoculum and in large quantities. Thus, the objectives of this study were to identify the best condition for D. bryoniae sporulation combining different light spectra (UV-A or UV-B light, white light, and continuous dark), with distinct culture media (PDA, V8, ML, and PDAB) and, to evaluate fungus' survivability stored at -20°C over time. The fungus samples were only able to sporulate when subjected to the UV-B light treatment, regardless of the culture medium. The highest appearance of spores conidium type was observed in the PDAB medium, and the lowest production occurred in the ML medium. Reproductive structures, such as perithecia and pycnidia, were observed in all culture media. However, there was considerable variation in the amount of each structure between the different culture media. The ML and V8 media showed a greater number of perithecia and the PDA and PDAB media presented a greater proportion of pycnidia compared to perithecia. The storage duration at -20°C did not affect mycelial growth or mycelial growth rate. In conclusion, the UV-B light is essential for D. bryoniae in vitro sporulation. Moreover, the culture medium composition influences the type of fungal structure produced, as well as spores' size and quantity. Freezing at -20°C is an efficient technique that can be used to store D. bryoniae for at least five months without loss of viability.

Resumo A esporulação de Didymella bryoniae in vitro é de grande importância para estudos que requerem inóculo puro e em grandes quantidades. Assim, os objetivos deste estudo foram identificar a melhor condição para esporulação de D. bryoniae combinando diferentes espectros de luz (luz UV-A ou UV-B, luz branca e escuro contínuo) com distintos meios de cultura (PDA, V8, ML e PDAB) e, avaliar a sobrevivência do fungo armazenado a -20°C ao longo do tempo. As amostras de fungo só esporularam quando submetidas ao tratamento com luz UV-B, independentemente do meio de cultura. Maior aparecimento de esporos do tipo conídio foi observado no meio PDAB, e a menor produção ocorreu no meio ML. Estruturas reprodutivas, como peritécios e picnídeos, foram observadas em todos os meios de cultura. No entanto, houve uma variação considerável na quantidade de cada estrutura entre os diferentes meios de cultura. Os meios ML e V8 apresentaram maior número de peritécios e os meios PDA e PDAB apresentaram maior proporção de picnídeos em relação aos peritécios. A duração do armazenamento a -20°C não afetou o crescimento micelial ou a taxa de crescimento micelial. Em conclusão, a luz UV-B é essencial para a esporulação de D. bryoniae in vitro. Além disso, a composição do meio de cultura influencia o tipo de estrutura fúngica produzida, bem como o tamanho e a quantidade dos esporos. O congelamento a -20°C é uma técnica eficiente que pode ser usada para armazenar D. bryoniae por pelo menos cinco meses sem perda de viabilidade

Sugarcane stem nodes based on the maximum value points of the vertical projection function / Identificação de nós de tronco de cana-de-açúcar com base nos pontos de valor extremos da função de projeção vertical

ABSTRACT: In order to solve the problem that the stem nodes are difficult to identify in the process of sugarcane seed automatic cutting, a method of identifying the stem nodes of sugarcane based on the extreme points of vertical projection function is proposed in this paper. Firstly, in order to reduce the influence of light on image processing, the RGB color image is converted to HSI color image, and the S component image of the HSI color space is extracted as a research object. Then, the S component image is binarized by the Otsu method, the hole of the binary image is filled by morphology closing algorithm, and the sugarcane and the background are initially separated by the horizontal projection map of the binary image. Finally, the position of sugarcane stem is preliminarily determined by continuously taking the derivative of the vertical projection function of the binary image, and the sum of the local pixel value of the suspicious pixel column is compared to further determine the sugarcane stem node. The experimental results showed that the recognition rate of single stem node is 100%, and the standard deviation is less than 1.1 mm. The accuracy of simultaneous identification of double stem nodes is 98%, and the standard deviation is less than 1.7 mm. The accuracy of simultaneous identification of the three stem nodes is 95%, and the standard deviation is less than 2.2 mm. Compared with the other methods introduced in this paper, the proposed method has higher recognition and accuracy.

RESUMO: Para resolver o problema que os nós do caule são difíceis de identificar no processo de corte automático de sementes de cana-de-açúcar, é proposto, neste artigo, um método para identificar os nós do colmo da cana-de-açúcar com base nos pontos extremos da função de projeção vertical. Em primeiro lugar, a fim de reduzir a influência da luz no processamento da imagem, a imagem de cor RGB foi convertida em imagem de cor HSI, e a imagem de componente S do espaço de cores HSI é extraída como um objeto de pesquisa. Em seguida, o método Otsu foi usado para binarizar o mapa do componente S, e a operação morfológica fechada foi usada para preencher os espaços da imagem binária, e a projeção horizontal da imagem binária foi usada para separar a cana de açúcar do fundo. Finalmente, a posição do caule de cana-de-açúcar foi preliminarmente determinada através da tomada contínua do derivado da função de projeção vertical da imagem binária, e a soma do valor pixel local da coluna de pixel suspeito foi comparada para determinar ainda mais o nódulo da cana-de-açúcar. Os resultados experimentais mostram que a taxa de reconhecimento do nó de haste única foi de 100%, o desvio padrão foi inferior a 1.1 mm. A precisão da identificação simultânea de nós de haste dupla foi de 98%, o desvio padrão foi menor que 1.7 mm. A precisão da identificação simultânea dos três nós de haste é de 95%, o desvio padrão foi inferior a 2.2 mm. Comparado com os outros métodos introduzidos neste artigo, o método proposto possui maior reconhecimento e precisão.

Mutagenicity and antimutagenicity of Salacia crassifolia (mart. Ex. Schult.) G. Don. evaluated by Ames test / Mutagenicitade e antimutagenicidade de Salacia crassifolia (mart. Ex. Schult.) G. Don. avaliadas pelo teste de Ames

Abstract Salacia crassifolia (Mart. Ex. Schult.) G. Don. is a bush which belongs to Celastraceae family and occurs specially in Brazilian Cerrado. Its leaves, stem, seeds and fruits are popularly used for several medicinal purposes, such as antitumoral, antirheumatic, anti-inflammatory and antimicrobial. In this study, the mutagenic and antimutagenic activities of S. crassifolia stem bark fractions (hexane, ethyl acetate and hydroalcoholic) were evaluated by the Ames mutagenicity assay in Salmonella typhimurium TA98 and TA100 strains. By the obtained results, all S. crassifolia fractions did not significantly increase the number of prototrophic revertants for histidine (His+) in both S. typhimurium strains tested (p > 0.05), suggesting absence of mutagenicity. Regarding antimutagenicity, the fractions ethyl acetate and hydroalcoholic significantly decreased the number of His+ revertants colonies induced by positive control for strain TA98 (p < 0.05), demonstrating protection against mutagenicity induced by 4-nitroquinolile1-oxide, whereas the hexane fraction did not show antimutagenic effect in this strain. In the TA100 strain, all fractions of S. crassifolia protected DNA against the harmful action of sodium azide, and the hexane fraction exhibited the greatest protection in this work. Thus, it's possible conclude that the fractions of S. crassifolia tested in this study could be used in chemoprevention.

Resumo Salacia crassifolia (Mart. Ex. Schult.) G. Don. é uma árvore que pertence à família Celastraceae e ocorre especialmente no Cerrado Brasileiro. Suas folhas, caule, sementes e frutos são popularmente utilizados para vários fins medicinais, tais como antitumoral, antirreumático, anti-inflamatório e antimicrobiano. Neste estudo, nós avaliamos as atividades mutagênica e antimutagênica de frações da casca do caule de S. crassifolia (hexânica, acetato de etila e hidroalcoólica) pelo ensaio de mutagenicidade de Ames em Salmonella typhimurium, cepas TA98 e TA100. Pelos resultados obtidos todas as frações de S. crassifolia não aumentaram significativamente o número de revertentes prototróficas para histidina (His+) em ambas as cepas de S. typhimurium testadas (p > 0.05), sugerindo ausência de mutagenicidade. Em relação à antimutagenicidade, as frações acetate de etila e hidroalcoólica reduziram significativamente o número de colônias revertentes His+ induzidas pelo controle positive para a cepa TA98 (p < 0.05), demonstrando sua ação protetora contra a mutagenicidade induzida por 4-nitroquinolile1-oxide, enquanto a fração hexânica não demonstrou efeito antimutagênico nesta cepa. Na cepa TA100, todas as frações de S. crassifolia protegeram o DNA contra a ação lesiva de azida sódica, e a fração hexânica exibiu a maior proteção desse trabalho. Assim, concluímos que as frações de S. crassifolia testadas neste estudo poderiam ser utilizadas em quimioprevenção.

First record of Ophiocordyceps dipterigena (Ascomycota: Hypocreales: Ophiocordycipitaceae) infecting adults of Melanagromyza sojae (Diptera: Agromyzidae) in Brazil / Primeiro registro de Ophiocordyceps dipterigena (Ascomycota: Hypocreales: Ophiocordycipitaceae) infectando adultos de Melanagromyza sojae (Diptera: Agromyzidae) no Brasil

ABSTRACT: This note is the first report on the infection of adult stage of Melanagromyza sojae Zehntner, 1900 (Diptera: Agromyzidae) by the entomopathogenic fungus Ophiocordyceps dipterigena (Hypocreales: Ophiocordycipitaceae) (Berk. & Broome) G. H. Sung, J.M. Sung, Hywel-Jones & Spatafora, in subtropical Brazil. Entomopathogenic fungi, which attack dipteran insects, are of great scientific and economic importance mainly due to their potential as biological control agents of insect pests. Our findings bring new perspectives on the geographical distribution and host range of Ophiocordyceps dipterigena. We emphasize the need of further studies and research on new biological control agents of agricultural pests such as the soybean stem miner fly.

RESUMO: Esta nota é o primeiro registro da infecção no estágio adulto de Melanagromyza sojae Zehntner, 1900 (Diptera: Agromyzidae) pelo fungo entomopatogênico Ophiocordyceps dipterigena (Hypocreales: Ophiocordycipitaceae) (Berk & Broome) G. H. Sung, J.M. Sung, Hywel-Jones & Spatafora, no Brasil subtropical. Fungos entomopatogênicos, que atacam dípteros, são de importância científica e econômica principalmente devido ao potencial como agentes de controle biológico de pragas de insetos. Este trabalho traz novas perspectivas sobre a distribuição geográfica e variação de hospedeiro de Ophiocordyceps dipterigena. Destacamos a necessidade de ampliar o conhecimento sobre novos agentes de controle biológico de pragas agrícolas como a mosca minadora do caule da soja.

Transcriptome analysis for the restrained stem development of the wheat mutant dms / Desenvolvimento e análise de transcriptoma de uma haste de trigo mutante dms

ABSTRACT: Wheat (Triticum aestivum L.) stem development significantly affects grain yield. The dwarf plants (D) of wheat mutant dms was less than 30cm. Here, we were to explore the molecular basis for the restrained stem development of the dwarf plants. The results were reached by compare the young spikes and stems transcriptomes of the tall (T) and D plants of mutant dms. We identified 663 genes highly expressed in stem tips. We identified 997 differentially expressed genes (DEGs) in stem tips between T and D, 403 DEGs were significantly related with stem development. Most biological processes in stem tips on dwarf plants were significantly suppressed, such as phytohormone signaling etc. The sequencing analysis results were confirmed by quantitatively analysis the expression profiles of fourteen key DEGs via real-time QRT-PCR. We identified a group genes related to wheat stem development, identified a group DEGs related to the restrained stem development of D plants of dms. The suppressed phytohormone signaling, carbohydrate transport and metabolism were the major causal factors leading to dwarf plants of D. Our dataset provides a useful resource for investigating wheat stem development.

RESUMO: O desenvolvimento da haste do trigo (Triticum aestivum L.) afeta significativamente o rendimento dos grãos. A partir disso, empregou-se a base molecular para o desenvolvimento de uma haste de variedade de trigo. Os resultados foram alcançados ao conferir as hastes de um mutante de trigo DMS. Identificou-se 663 genes altamente expressos na haste; 997 genes (DEGs) diferentemente expressos em hastes entre T e D e; 403 DEGs foram significativamente diferentes. A maioria dos processos biológicos de caule tipo não plantas foram significativamente suprimidas, com o fito hormônio de sinalização. Os resultados da análise de sequencia foram confirmados pela expressão quantitativa de perfis de catorze chave DEGs através de qRT-PCR em tempo real. Nota-se um grupo de genes relacionados com a haste de trigo de desenvolvimento. Identificou-se um grupo DEGs relacionados com o desenvolvimento de um tronco D plantas de DMS. O fito hormônio de sinalização, transporte e metabolismo de hidratos de carbono foram os principais fatores suscetíveis das plantas anão de D. Nosso conjunto de dados fornece um recurso útil para investigar o desenvolvimento do caule de trigo.

Physic nut (Jatropha curcas L. ) growth and phytomass accumulation rate / Crescimento e marcha de acúmulo de fitomassa em pinhão-manso (Jatropha curcas L. )

Jatropha plants are known to be a rustic, low-demanding crop for nutrients and water. For that reason, they have been cultivated in restoring degraded areas or as windbreak. Nevertheless, under appropriate soil and climate conditions, this crop may become an alternative for biodiesel production due to high oil content and industrial quality. Studies on the growth and the phytomass accumulation rate of shoots of perennials permit subsidize management practices of culture, such as the definition of the population and the plant arrangement; it also enables the estimation of demand and potential recycling of nutrients, which contributes to establishing the most suitable amount and time for supplying fertilizers in cover. Studies on plant growth and phytomass accumulation have been conducted for a relatively short period of time, sometimes under greenhouse conditions. This trial design was carried out in Cassilândia-MS, for 52 months, with the objective of evaluating Jatropha growth and phytomass accumulation. The experimental design was completely randomized with four replications and 15 treatments, consisting of evaluation times. Jatropha growth, mainly height, stems and crown diameter, is accentuated in the first 12 to 15 months after seedling transplanting. Crown diameter showed a new growth cycle between the 35th and the 52nd month, superior than observed in the initials stages of growth. Stem phytomass accumulation is relatively low until eight months after seedling transplanting, being considerably increased after this period. Intense senescence and leaf abscission is observed in drier and colder periods of the year.

As plantas de pinhão-manso são caracterizadas pela rusticidade, com pouca exigência nutricional e hídrica. Por esta razão, têm sido utilizadas na recuperação de terras degradadas ou como cerca viva. Porém, em condições edafoclimáticas adequadas, pode-se tornar uma cultura alternativa para a produção de óleo diesel, por suas características de teor e qualidade industrial. Estudos sobre o crescimento e a marcha de acúmulo de fitomassa de parte aérea de plantas perenes subsidiam práticas de manejo da cultura, tais como a definição da população e do arranjo de plantas; também possibilita a estimativa da demanda e do potencial de reciclagem de nutrientes, o que contribui para o estabelecimento da quantidade e da época mais adequada para o fornecimento de adubos em cobertura. Trabalhos já publicados sobre avaliações do crescimento e do acúmulo de fitomassa têm abrangido um período de avaliação relativamente curto, algumas vezes em condições de casa de vegetação. Com o objetivo de avaliar a campo o crescimento e a marcha de acúmulo de fitomassa em plantas de pinhão-manso, conduziu-se um experimento em Cassilândia, MS, por um período de 52 meses. Adotou-se o delineamento experimental inteiramente ao acaso com quatro repetições e 15 tratamentos, correspondentes às épocas de avaliação. Verificou-se que o crescimento das plantas de pinhão-manso, principalmente em relação à sua altura e diâmetro de caule e de copa, é mais intenso nos primeiros doze a 15 meses após o transplantio das mudas. Para o diâmetro de copa, houve novo ciclo de crescimento, entre o 35º e o 52º mês, em taxa superior à observada no período inicial. O acúmulo de matéria seca de caule é relativamente pequeno até oito meses após o transplantio das mudas, aumentando consideravelmente a partir deste período. Há intensa senescência e abscisão foliar nas plantas, nos períodos mais secos e frios do ano.

Germination and seedling structure of Ruprechtia laxiflora Meissn. (Polygonaceae) / Germinação dos diásporos e estrutura das plântulas de Ruprechtia laxiflora Meissn. (Polygonaceae)

Germination of diaspores and the seedling structure of Ruprechtia laxiflora Meissn. (Polygonaceae) which is a secondary species frequent in forest remnants are described. Seedlings were embedded in hydroxymethacrylate and sectioned in a rotary microtome according to usual techniques in plant anatomy. For bioassays of germination, the experimental design was completely randomized in a 3x2 bifactorial arrangement, corresponding to three temperatures (20, 25 and 30°C) and two light conditions (photoperiod and continuous darkness) for the diaspores newly harvested and in a 4x2 bifactorial arrangement, corresponding to four temperatures (15, 20, 25 and 30°C) and two light conditions (photoperiod and continuous darkness) for diaspores analyzed after storage. There was no interaction between the factors light condition and temperature for germination parameters analyzed. However, the temperature affected the germination and diaspores maintained at 25°C showed a shorter mean time and higher germination speed index. Seedlings are phanerocotylar and epigeal with tetrarch root, intermediate-low type of root-stem transition and trilacunar cotyledonary node.

Foram descritas a germinação de diásporos e a estrutura de plântulas de Ruprechtia laxiflora Meissn. (Polygonaceae), espécie secundária frequente em remanescentes florestais. As plântulas foram emblocadas em historresina e secionadas em micrótomo de rotação, de acordo com técnicas usuais em anatomia vegetal. Para os bioensaios de germinação, o delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado em um esquema fatorial 3x2, correspondendo a três temperaturas (20, 25 e 30°C) e duas condições de luz (fotoperíodo e escuro contínuo) para os diásporos recém coletados e em esquema fatorial 4x2, correspondendo a quatro temperaturas (15, 20, 25 e 30°C) e duas condições de luz (fotoperíodo e escuro contínuo) para os diásporos analisados após armazenamento. Não houve interação entre os fatores condição de luz e temperatura para os parâmetros de germinação analisados. No entanto, o fator temperatura afetou a germinação e os diásporos mantidos sob 25°C apresentaram menor tempo médio e maior índice de velocidade de germinação. As plântulas são fanerocotiledonares e epigeias, com raiz tetrarca, tipo intermediário-baixo de zona de transição raiz-caule e nó cotiledonar trilacunar.

Biomass allocation in Ziziphus spina-christi and the invasive species Prosopis juliflora / Alocação de biomassa em Ziziphus spina-christi e espécies invasoras Prosopis juliflora

Invasion by the exotic species Prosopis juliflora has become a major threat to native plants in Saudi Arabia as the species continues its spread into different regions of the country. Ziziphus spina-christi is a native tree that is common in Saudi Arabia. The objective of this study was to determine how both species would benefit from the availability of sufficient resources without competition. To gain a better understanding of growth under such conditions, a greenhouse experiment was conducted in which seedlings of both species were grown under favorable conditions for 6 months. During this period, growth performance was evaluated three times at intervals of 30, 90, and 180 days. Growth performance varied between the two species during one or more of the studied periods. Significant differences between the species were observed for root mass fraction, number of root tips, root to shoot ratio, height, stem diameter, stem dry weight, stem mass fraction, leaf area, leaf mass fraction, and chlorophyll a and b contents. The relative growth rate (RGR) and relative height growth rate were higher in P. juliflora at 30­90 days, whereas leaf area ratio and net assimilation rate were higher for Z. spina-christi at 90­180 days. Remarkably, the RGR for diameter in P. juliflora was almost double that in Z. spina-christi at 30­90 days and 90­180 days. The results obtained reflect a strategic difference in the biomass allocation to different plant components by the two species, whereby P. juliflora allocates higher biomass to the stems and Z. spina-christi allocates higher biomass to the roots.

Invasão pela espécie exótica Prosopis juliflora tornou-se uma grande ameaça para plantas nativas na Arábia Saudita à medida que a espécie continua a sua propagação em diferentes regiões do país. A Ziziphus spina-christi é uma árvore nativa que é comum na Arábia Saudita. O objetivo deste estudo foi determinar como ambas as espécies se beneficiariam com a disponibilidade de recursos suficientes sem competição. Para se obter uma melhor compreensão do crescimento nestas condições, foi conduzida uma experiência em estufa em que as plântulas de ambas as espécies foram cultivadas em condições favoráveis durante 6 meses. Durante este período, o desempenho de crescimento foi avaliado três vezes em intervalos de 30, 90 e 180 dias. O desempenho do crescimento variou entre as duas espécies durante um ou mais dos períodos estudados. Diferenças significativas entre as espécies foram observadas para a fração de massa da raiz, número de pontas de raiz, razão entre a raiz e a parte aérea, altura, diâmetro do caule, peso seco do caule, fração de massa do caule, área foliar, fração de massa foliar e teor de clorofila a e b. A taxa de crescimento relativo (RGR, relative growth rate) e a taxa relativa de crescimento em altura foram maiores em P. juliflora no período 30-90 dias, enquanto que a razão foliar e a taxa de assimilação líquida foram maiores para Z. spina-christi no período 90-180 dias. Notavelmente, a RGR para o diâmetro em P. juliflora foi quase o dobro da de Z. spina-christi aos 30-90 dias e 90-180 dias. Os resultados obtidos refletem uma diferença estratégica na alocação de biomassa para diferentes componentes das plantas pelas duas espécies, sendo que P. juliflora aloca uma biomassa mais alta para as hastes e Z. spina-christi aloca uma biomassa mais alta para as raízes.

Mutagenicity and antimutagenicity of Salacia crassifolia (mart. Ex. Schult.) G. Don. evaluated by Ames test

Abstract Salacia crassifolia (Mart. Ex. Schult.) G. Don. is a bush which belongs to Celastraceae family and occurs specially in Brazilian Cerrado. Its leaves, stem, seeds and fruits are popularly used for several medicinal purposes, such as antitumoral, antirheumatic, anti-inflammatory and antimicrobial. In this study, the mutagenic and antimutagenic activities of S. crassifolia stem bark fractions (hexane, ethyl acetate and hydroalcoholic) were evaluated by the Ames mutagenicity assay in Salmonella typhimurium TA98 and TA100 strains. By the obtained results, all S. crassifolia fractions did not significantly increase the number of prototrophic revertants for histidine (His+) in both S. typhimurium strains tested (p > 0.05), suggesting absence of mutagenicity. Regarding antimutagenicity, the fractions ethyl acetate and hydroalcoholic significantly decreased the number of His+ revertants colonies induced by positive control for strain TA98 (p 0.05), demonstrating protection against mutagenicity induced by 4-nitroquinolile1-oxide, whereas the hexane fraction did not show antimutagenic effect in this strain. In the TA100 strain, all fractions of S. crassifolia protected DNA against the harmful action of sodium azide, and the hexane fraction exhibited the greatest protection in this work. Thus, its possible conclude that the fractions of S. crassifolia tested in this study could be used in chemoprevention.

Resumo Salacia crassifolia (Mart. Ex. Schult.) G. Don. é uma árvore que pertence à família Celastraceae e ocorre especialmente no Cerrado Brasileiro. Suas folhas, caule, sementes e frutos são popularmente utilizados para vários fins medicinais, tais como antitumoral, antirreumático, anti-inflamatório e antimicrobiano. Neste estudo, nós avaliamos as atividades mutagênica e antimutagênica de frações da casca do caule de S. crassifolia (hexânica, acetato de etila e hidroalcoólica) pelo ensaio de mutagenicidade de Ames em Salmonella typhimurium, cepas TA98 e TA100. Pelos resultados obtidos todas as frações de S. crassifolia não aumentaram significativamente o número de revertentes prototróficas para histidina (His+) em ambas as cepas de S. typhimurium testadas (p > 0.05), sugerindo ausência de mutagenicidade. Em relação à antimutagenicidade, as frações acetate de etila e hidroalcoólica reduziram significativamente o número de colônias revertentes His+ induzidas pelo controle positive para a cepa TA98 (p 0.05), demonstrando sua ação protetora contra a mutagenicidade induzida por 4-nitroquinolile1-oxide, enquanto a fração hexânica não demonstrou efeito antimutagênico nesta cepa. Na cepa TA100, todas as frações de S. crassifolia protegeram o DNA contra a ação lesiva de azida sódica, e a fração hexânica exibiu a maior proteção desse trabalho. Assim, concluímos que as frações de S. crassifolia testadas neste estudo poderiam ser utilizadas em quimioprevenção.

Syntomopus parisii and Leptomeraporus sp. parasitizing Melanagromyza sojae in Brazil / Syntomopus parisii e Leptomeraporus sp. parasitando Melanagromyza sojae no Brasil

ABSTRACT: This note is the first report of Syntomopus parisii De Santis 1976 and Leptomeraporus sp. (Hymenoptera, Pteromalidae) simultaneously parasitizing Melanagromyza sojae Zehntner, 1900 (Diptera, Agromyzidae) in Brazil. The Pteromalidae parasitoids are natural enemies of stem miner flies, opening perspectives for biological control of soybean stem miner fly.

RESUMO: Esta nota é o primeiro registro de Syntomopus parisii De Santis 1976 e Leptomeraporus sp. (Hymenoptera, Pteromalidae) parasitando simultaneamente Melanagromyza sojae Zehntner, 1900 (Diptera, Agromyzidae) no Brasil. Os parasitoides Pteromalidae são inimigos naturais de moscas minadoras do caule, abrindo perspectivas para o controle biológico da mosca minadora do caule da soja.

Estudo farmacobotânico de partes aéreas vegetativas de aroeira-vermelha (Schinus terebinthifolius Raddi, Anacardiaceae) / Pharmacobotanical study of the aerial parts of Brazilian pepper (Schinus terebinthifolius Raddi)

Schinus terebinthifolius Raddi (Anacardiaceae), conhecida como aroeira-vermelha é uma espécie nativa do Brasil, perenifólia e pioneira, sendo muito utilizada para combater diversas doenças, pois apresenta, entre outras, propriedades anti-inflamatórias e cicatrizantes. O objetivo desta pesquisa foi realizar um estudo morfoanatômico do caule e da folha de S. terebinthifolius, descrevendo a organização dos tecidos e suas possíveis variações. As análises macro e microscópicas foram realizadas com material selecionado de partes vegetativas de um espécime localizado na cidade de Campina Grande - PB. A aroeira-vermelha é um vegetal arbóreo e dióico, que apresenta caule cilíndrico e simpodial, com casca rugosa e estriada. A folha é perene, alterna, coriácea e composta. As análises microscópicas evidenciaram epiderme caulinar e foliar uniestratificadas, exceto na face adaxial da folha, que é bisseriada. No caule e no pecíolo são visualizados muitos tricomas tectores unicelulares, curtos, cônicos e agudos no ápice. Encontram-se canais secretores arredondados e bem desenvolvidos na região do floema em todos os órgãos estudados, bem como cutícula revestindo as células epidérmicas e grande quantidade de drusas de oxalato de cálcio. Os feixes vasculares são circundados por células esclerenquimáticas e apresentam o floema seguido por xilema helicoidal bem desenvolvido. No caule, pecíolo e nervura central da folha, o xilema é interno e o floema, externo. A aroeira-vermelha apresenta alguns aspectos estruturais característicos de plantas xerófilas, como camada múltipla da epiderme da face adaxial foliar, que protegem o mesofilo de excessiva dessecação; presença de cutícula espessa e grande quantidade de pêlos e de estômatos; além de sistema vascular bem desenvolvido, com abundância de esclerênquima, dando sustentação ao feixe.

Schinus terebinthifolius Raddi (Anacardiaceae), popularly known as Brazilian pepper, is an evergreen, pioneer and indigenous plant from Brazil, and it is used to combat various diseases, as it presents anti-inflammatory and wound healing properties. The aim of this research was to study the morpho-anatomical features of the stem and leaf of S. terebinthifolius, describing the organization of the tissues and their variations. The macroscopic and microscopic analyses were performed with material selected from vegetative parts of a specimen collected in the city of Campina Grande - state of Paraíba, Brazil. The Brazilian pepper is a dioecious plant with cylindrical and sympodial stem and rough and striated bark. The leaves are evergreen, alternate, leathery and compound. The microscopic analysis showed uniseriate epidermis in the stem and leaf, except in the adaxial leaf, which is biseriate. In the stem and petiole, many unicellular, short, conical tector trichomes with acute apex are observed. In the phloem of all studied organs, we found rounded and well-developed secretory ducts, as well as cuticle covering the epidermal cells and a large amount of calcium oxalate druses. The vascular bundles are surrounded by sclerenchyma cells and present phloem followed by well-developed spiral xylem. In the stem, petiole and leaf's central vein, the xylem is internal and the phloem is external. The Brazilian pepper has some structural features characteristic of xerophilous plants, such as multiple layers of the epidermis in adaxial leaf, which protects the mesophyll from excessive drying, thick cuticle and a large quantity of hairs and stomata, well-developed vascular system with plenty of sclerenchyma, giving support to the bundle.

Comparação entre parâmetros abióticos e a estrutura florestal de um fragmento de floresta e um reflorestamento abandonado de eucalipto (Eucalyptus saligna Smith) no parque ecológico da Klabin, Telêmaco Borba/PR / Comparison between abiotic parameters and the forest structure of a forest fragment and an eucalyptus (Eucalyptus saligna Smith) abandoned reforestation in the ecological park of Klabin, Telemaco Borba/PR

A estrutura florestal tem impacto direto sobre o microclima, e é importante para a continuidade dos processos sucessionais e para o restabelecimento dos processos do ecossistema. Estudos acerca da estrutura florestal são importantes para auxiliar as ações de restauração ecológica, melhorando a sua aplicação. Visando comparar duas formações florestais, sendo uma delas um fragmento florestal secundário e a outra uma área abandonada de reflorestamento com eucalipto, neste trabalho foram avaliados alguns parâmetros abióticos, bem como a estrutura florestal das áreas. Dentre os fatores abióticos estudados estão: temperatura e umidade relativa do ar, compactação, umidade e pH do solo e espessura da serapilheira. Para analisar a estrutura florestal, foram avaliados: cobertura de herbáceas sobre o solo, índice de cobertura do dossel, diâmetro a altura do peito (DAP), área basal (AB) e altura das árvores de todas as espécies. Entre os parâmetros analisados, comparando-se as áreas, foram observadas que: a compactação do solo é maior na floresta secundária (0,57 MPa) do que no reflorestamento de eucalipto (0,43 MPa); a presença de herbáceas sobre o solo é menor no reflorestamento de eucalipto (17,96%) do que na floresta secundária (59,4%); o índice de cobertura do dossel foi de 45,99% para o reflorestamento de eucalipto, enquanto na floresta secundária este valor foi de 61,02%. No entanto, de acordo com o teste de Kolmogorov-Smirnov, a estrutura florestal não é diferente entre as áreas, já que os valores de DAP e altura não diferiram entre o calculado e o observado. .

The forest structure causes a direct impact on the microclimate, being important for the continuity of the successional processes as well as for the restoration of ecosystem processes. Studies on forest structure are important to help determine ecological restoration actions, improving its implementation. In order to compare two forest formations, being one of them a secondary forest fragment and the other one an abandoned area of eucalyptus reforestation, some abiotic parameters were evaluated in this study, as well as the forest structure of the areas. Amongst the abiotic factors studied, there are: temperature and relative air humidity, soil compaction, moisture and soil pH and thickness of the litter. In order to analyze the forest structure, the following items were evaluated: herbaceous cover on the soil, rate of canopy cover, the diameter at breast height (DBH), basal area (BA) and height of trees of all species. Among the parameters analyzed, comparing the areas, it was observed that: soil compaction was higher in the secondary forest (0.57 MPa) than in the eucalyptus reforestation (0.43 MPa); the presence of herbaceous plants on the soil occurred less in the eucalyptus reforestation (17.96%) than in the secondary forest (59.4%); the canopy cover index was of 45.99% for the eucalyptus reforestation, while in the secondary forest it was of 61.02%, being therefore higher for the latter. Nevertheless, according to Kolmogorov Smirnov test, the forest structure is not different between the areas, since the DBH and height values were not different between what was calculated and what was observed. .

Morpho-anatomical features of underground systems in six Asteraceae species from the Brazilian Cerrado

In the Brazilian Cerrado (neotropical savanna), the development of bud-bearing underground systems as adaptive structures to fire and dry periods can comprise an important source of buds for this ecosystem, as already demonstrated in the Brazilian Campos grasslands and North American prairies. Asteraceae species from both woody and herbaceous strata have subterranean organs that accumulate carbohydrates, reinforcing the adaptive strategy of these plants to different environmental conditions. This study aims to analyse the morpho-anatomy of underground systems of six species of Asteraceae (Mikania cordifolia L.f. Willd., Mikania sessilifolia DC, Trixis nobilis (Vell.) Katinas, Pterocaulon alopecuroides (Lam.) DC., Vernonia elegans Gardner and Vernonia megapotamica Spreng.), to describe these structures and to verify the occurrence and origin of shoot buds, and to analyse the presence of reserve substances. Individuals sampled in Cerrado areas in São Paulo State showed thick underground bud-bearing organs, with adventitious or lateral roots and presence of fructans. Xylopodium was found in all studied species, except for Trixis nobilis, which had stem tuber. The presence of fructans as reserve, and the capacity of structures in the formation of buds indicate the potential of herbaceous species of Asteraceae in forming a viable bud bank for vegetation regeneration in the Brazilian Cerrado.

No Cerrado brasileiro (savana neotropical), o desenvolvimento de sistemas subterrâneos que produzem gemas, como estruturas adaptativas contra o fogo e períodos de seca, pode compreender um importante suprimento de gemas para esse ecossistema, como já demonstrado nos campos brasileiros e nas pradarias norte-americanas. Espécies de Asteraceae tanto do estrato lenhoso, quanto do herbáceo têm órgãos que acumulam carboidratos, reforçando a estratégia adaptativa dessas plantas a diferentes condições ambientais. Este estudo tem o objetivo de analisar a morfo-anatomia de sistemas subterrâneos de seis espécies de Asteraceae (Mikania cordifolia L.f. Willd., Mikania sessilifolia DC, Trixis nobilis (Vell.) Katinas, Pterocaulon alopecuroides (Lam.) DC., Vernonia elegans Gardner e Vernonia megapotamica Spreng.), para descrever essas estruturas e verificar a ocorrência e origem de gemas caulinares, e analisar a presença de substâncias de reserva. Indivíduos amostrados em áreas de Cerrado no Estado de São Paulo apresentaram órgãos subterrâneos espessados produtores de gemas, com raízes adventícias ou laterais e presença de frutanos. Em todas as espécies estudadas foi constatada a presença de xilopódio, com exceção de Trixis nobilis, a qual apresentou caule tuberoso. A presença de frutanos como reserva e a capacidade de estruturas na formação de gemas indicam o potencial de espécies herbáceas de Asteraceae em formar um banco de gemas viável para regeneração da vegetação no Cerrado brasileiro.

Absorção foliar, caulinar e radicular dos inseticidas pymetrozine e flonicamid no controle do pulgão Aphis gossypii Glover, 1877 (Hemiptera: Aphididae) em algodoeiro / Leaf, stem and root absorption of pymetrozine and flonicamid to control the cotton aphid Aphis gossypii Glover, 1877 (Hemiptera: Aphididae)

O pulgão Aphis gossypii Glover, 1877 (Hemiptera: Aphididae) é uma praga da cultura do algodão e quando não controlado pode reduzir a produtividade e a qualidade da fibra. A descoberta de novos grupos químicos de inseticidas para o controle do inseto traz perspectivas novas de manejo, e dentre os aficidas recentemente descobertos destacam-se pymetrozine e flonicamid. Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiência destes dois inseticidas no controle de A. gossypii quando absorvidos pela folha, caule e raiz de algodoeiro. Utilizou o delineamento experimental fatorial (2 x 3) com 5 repetições, em blocos casualizados. Cada parcela foi constituída de um vaso com duas plantas, mantidos sob condições de casa-de-vegetação, no ano de 2005. Avaliou-se a densidade populacional do pulgão nas folhas durante dezesseis dias após a aplicação dos tratamentos. Os resultados permitem concluir: (1) flonicamid apresentou eficiência de controle quando absorvido pelo caule e pelas folhas; (2) pymetrozine apresentou eficiência de controle através da absorção foliar; (3) a rota de absorção radicular não propiciou controle satisfatório para ambos aficidas; e, (4) em aplicação foliar os dois inseticidas não diferiram entre si quanto ao controle do pulgão-do-algodoeiro.

Aphis gossypii Glover, 1877 (Hemiptera: Aphididae) is a cotton pest, and if not controlled can reduce yield and fiber quality. The discovery of new chemical groups of insecticides brings new perspectives to IPM; pymetrozine and flonicamid are examples of new launched pesticides. This study was carried out to evaluate the efficacy of these two insecticides to control A. gossypii when they were absorbed by cotton root, stem and leaves. The statistical design was a randomized factorial (2 x 3) with five replications in blocks. Each plot consisted of a pot with two plants, kept under greenhouse conditions, in 2005. We evaluated the population density of aphids on the leaves during sixteen days after treatment. The results show: (1) flonicamid has efficiency when absorbed by stem and leaves, (2) pymetrozine efficacy is through foliar uptake, (3) the root absorption do not provide satisfactory control for both insecticides, and, (4) both insecticides control the aphid-cotton when is applied on leaves.

In vitro and in vivo antiproliferative activity of Calotropis procera stem extracts

The cytotoxic potential of stem organic extracts from Calotropis procera (Asclepiadaceae) was firstly evaluated against cancer cell lines by MTT assay. Subsequently, samples considered cytotoxic were tested for antimitotic activity on sea urchin egg development and for in vivo antiproliferative activity in mice bearing Sarcoma 180 tumor. Among the five extracts (hexane, dichloromethane, ethyl acetate, acetone and methanol), ethyl acetate and acetone extracts displayed higher cytotoxic potential against tumor cells, with IC50 ranging from 0.8 to 4.4 μg/mL, while methanolic extract was weakly cytotoxic. Cytotoxic extracts also exhibited cell division inhibition capacity by antimitotic assay, revealing IC50 values lower than 5 μg/mL. In the in vivo antitumor assessments, ethyl acetate- and acetone-treated animals showed tumor growth inhibition ratios of 64.3 and 53.1 percent, respectively, with reversible toxic effects on liver and kidneys. Further studies are in progress in order to identify C. procera cytotoxic compound(s) and to understand the mechanism of action responsible for this tumor-decreasing potential.

O potencial citotóxico de extratos orgânicos do caule de Calotropis procera (Asclepiadaceae) foi primeiramente avaliado frente a linhagens de células tumorais através do ensaio de MTT. Aquelas amostras consideradas citotóxicas foram sub-sequentemente testadas para atividade antimitótica sobre o desenvolvimento de ovos de ouriço-do-mar e para atividade antiproliferativa in vivo em camundongos transplantados com tumor Sarcoma 180. Dentre os cinco extratos estudados (hexano, diclorometano, acetato de etila, acetona e metanol), os extratos acetato de etila e acetona mostraram maior potencial citotóxico contra células tumorais, com CI50 variando de 0,8 to 4,4 μg/mL, enquanto o extrato metanólico revelou ser fracamente citotóxico. s extratos citotóxicos também exibiram capacidade de inibição da divisão celular com valores de CI50 menores que 5 μg/mL. Nas avaliações antitumorais in vivo, os animais tratados com os extratos acetato de etila e acetona mostraram taxas de inibição do crescimento tumoral de 64,3 e 53,1 por cento, respectivamente, com efeitos tóxicos reversíveis sobre o fígado e os rins.

Morfoanatomia de folhas e caules de Passiflora edulis Sims, Passifloraceae / Leaf and stem morphoanatomy of Passiflora edulis Sims, Passifloraceae

Passiflora edulis Sims, espécie vegetal empregada na medicina popular e amplamente cultivada no território nacional, tem suas folhas e seus caules, muitas vezes utilizados como adulterante de amostras comerciais da droga vegetal oficializada no país também conhecida como maracujá, Passiflora alata Curtis. Caracteres morfoanatômicos de folhas e de caules de P. edulis, foram descritos e documentados. Dentre os caracteres auxiliares na distinção entre a droga oficial e os órgãos aéreos de P. edulis podem-se destacar o contorno da lâmina foliar, a forma da nervura mediana em secção transversal, o número e a localização de nectários extraflorais e, o indumento

Passiflora edulis Sims, vegetal species employed in the Brazilian traditional medicine and broadly cultivated across its territory, has its leaves and stems often used as an adulterant for commercial samples of the crude drug Passiflora alata Curtis, officially known in Brazil as "maracujá". Morphoanatomic data from leaves and stems in P. edulis were described and documented. Amongst these characteristics, the shape of the foliar blade, the shape of the midrib in transverse section, the number and the location of the extrafloral nectaries and the indumentum are all emphasized.

Caracterização anatômica de órgãos vegetativos do mamoeiro / Anatomical characterization of vegetative organs of papaya plants

O mamoeiro (Carica papaya L.) é uma planta cuja importância econômica cresceu bastante nos últimos anos, bem como os trabalhos científicos relacionados ao seu crescimento e à sua fisiologia. Infelizmente, foram realizados poucos trabalhos em relação à sua anatomia. Assim, o objetivo deste trabalho é caracterizar anatomicamente plantas do mamoeiro em estádios iniciais do crescimento. Esses estudos são importantes porque podem ser utilizados, principalmente, para correlações com o crescimento e a fisiologia dessa planta. Após coletadas, amostras frescas de raiz, caule e folha foram seccionadas transversalmente à mão livre, e os cortes submetidos ao processo de coloração com safranina e azul de astra. Observou-se que a raiz apresenta estrutura hexarca e caracteriza-se como sendo não axial. A estrutura anatômica do caule, nas regiões mais maduras, assemelha-se à estrutura do pecíolo. A lâmina foliar apresenta epiderme uniestratificada com mesofilo dorsiventral, e os estômatos anomocíticos são observados na face abaxial.

Papaya (Carica papaya L.) is a plant whose economic importance and scientific studies related to its growth and its physiology have greatly increased in recent years. Unfortunately, few researches in relation to its anatomy were performed. Thus, it was aimed to characterize the anatomically papaya plants in the early stages of growth. These studies are important because they can be used, mainly, for correlations with the growth and the physiology of this plant. After collected, the anatomical cuts of fresh root, stem and leaf were manually performed and their visualization were made through a coloration process using safranine and astra blue. The root structure is hexarc and is characterized as non-axial. The anatomical structure of the stem is similar to petiole in the mature parts. Leaf blade showed an uniestratified epidermis with dorsiventral mesophyll and anomocytic stomata were observed in the leaf abaxial surface.

Perfil fitoquímico e ensaio microbiológico dos extratos da entrecasca de Maytenus rigida Mart. (Celastraceae) / Phytochemistry and microbiological assay of the bark extracts of Maytenus rigida Mart. (Celastraceae)

Maytenus rigida Mart (Celastraceae), conhecida por "Bom-homem", "Bom-nome", "Cabelo-de-negro", "Casca-grossa" e "Pau-de-colher", é uma arvore de pequeno porte. A entrecasca do caule é empregada popularmente no Nordeste do Brasil no tratamento das dores em geral, infecções e inflamações. O presente trabalho avaliou tanto o perfil fitoquímico de M. rigida por meio de um roteiro analítico, quanto à atividade antibiótica dos extratos pelo método de Kirby-Bauer modificado. Os resultados demonstraram que os extratos etanólico, aquoso, clorofórmico, acetato de etila e hidroalcoólico de M. rigida apresentam atividade antibacteriana contra Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus aureus, enquanto que a fração hexânica não exibe qualquer atividade. Catequinas, quinonas, esteróides, triterpenos, saponinas, flavonóides e compostos fenólicos foram detectados na análise fitoquímica.

Maynetus rigida Mart (Celastraceae), known as "Bom-homem", "Bom-nome", "Cabelo-de-negro", "Casca-grossa" and "Pau-de-colher", is a small tree. The stem bark is used by the population in the northeast of Brazil to treat aches, infections and inflammations in general. The present work evaluated both the phytochemistry of M. rigida Mart by an analytical routine, and the antimicrobial activity of the bark extracts by the Kirby-Bauer modified method. Our results showed the aqueous, methanol, chloroform, ethyl acetate and hydroalcoolic extracts of M. rigida Mart has antimicrobial activity against Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus, while the hexane extract does not have any activity. Catechins, quinones, steroids, triterpenes, saponins, flavonoids and phenolic compounds were detected by the phytochemical analysis.

Avaliação do potencial fungicida de extratos etanólicos de Senna alata contra Monosparacus cannonballus / Evaluation of the fungicide potential of ethanolic extracts of Senna alata against Monosporascus cannonballus

Objetivou-se, neste trabalho, avaliar in vitro a atividade dos extratos alcoólicos de Senna alata (L.) Roxb. sobre Monosporascus cannonballus. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com esquema fatorial 3 x 6 + 1, sendo constituído por três partes da planta (caule, raiz e vagem), por seis concentrações (0,25; 0,50; 50; 75; 250; 500 ppm ) mais a testemunha, com quatro repetições por tratamento. As variáveis avaliadas foram: taxa de crescimento micelial (TCM), inibição do crescimento micelial (ICM) e área abaixo da curva do crescimento micelial (AACCM). A concentração de 500 ppm foi a mais eficiente, nas três partes vegetais avaliadas. O porcentual de inibição na referida concentração foi de 28,60 por cento, 36,70 por cento e 27,99 por cento para caule, raiz e vagem respectivamente. Diante dos resultados, observa-se que os extratos de S. alata indicam um forte potencial de controle para o fungo Monosporascus cannonballus.

The aim of this work was to evaluate the activity in vitro of the ethanolic extracts of Senna alata (L.) Roxb. over Monosporascus cannonballus. The experimental design was entirely randomized with factorial scheme 3 x 7 + 1, being constituted by three parts of the plant (root, stalk and green bean) for six different concentrations (0.25; 0.50, 50, 75, 250,500 ppm) plus the control, with four repeatitons for treatment. The available variables were: rate of micelial growth (TCM), inhibition of the growth micelial (ICM) and area under the curve of the growth micelial (AACCM). The concentration of 500 ppm was the most efficient ,in the three available vegetal parts. The percentual of inhibition in the concentration was of 28.60 percent, 36.70 percent e 27.99 percent for stalk, root and green bean respectively. Before of the results, the extracts of S. alata display high control potential for Monosporascus cannonballus fungi.