Desenvolvimento e otimização de sistemas conservantes empregando os conceitos de Qualidade por Design (QbD) e Tecnologia Analítica de Processos (PAT) / Development and optimization of preservative systems using Quality by Design (QbD) and Process Analytical Technology (PAT) concepts

Recentemente, produtos farmacêuticos e cosméticos com concentrações mínimas de parabenos e outros conservantes ganharam e apelo comercial e de segurança, devido à controvérsia sobre a segurança dos conservantes. No entanto, o uso de conservantes é essencial para garantir a conservação microbiana de produtos cosméticos e farmacêuticos durante o seu uso. Neste trabalho, desenvolveu-se um método quimiométrico de espectroscopia no infravermelho com Fourier transform near-infrared (FTIR) para prever a eficácia de sistemas conservantes em produtos farmacêuticos e cosméticos tópicos usando os conceitos de Quality by design (QbD) e Process Analytical Technology (PAT). A abordagem de QbD foi usada para determinar a eficácia antimicrobiana frente aos microrganismos: Candida albicans (ATCC 10231), Escherichia coli (ATCC 8739) e Staphylococcus aureus (ATCC 6538), em funções das concentrações de parabenos, e determinar a região de Design Space, empregando o delineamento de compóstio central (CCD) Todas as 15 formulações preparadas foram analisadas utilizando um espectrofotômetro (FTIR) equipado com aparato de Attenuated Total Reflectance (ATR). Os modelos de regressão por Partial Least Squares (PLS) para predição dos "slopes" das curvas de morte microbiana em função dos espectros ATR/FTIR foram bem ajustados, com R2 e R2-predição de 0,9937 e 0,8921, 0,9947 e 0,8783, e 0,9957 e 0,9222 para Candida albicans (ATCC 10231), Escherichia coli (ATCC 8739) e Staphylococcus aureus (ATCC 6538), respectivamente. O método FTIR proposto aplicado em uma abordagem de PAT foi capaz de prever a eficácia do sistema conservante em tempo reduzido. Este método de predição de silício permitirá um controle lote-a-lote da eficácia do sistema conservante de produtos farmacêuticos e cosméticos

Recently, pharmaceuticals and cosmetics with minimal concentrations of parabens and other preservatives have gained and commercial and safety appeal due to controversy over the safety of preservatives. However, the use of preservatives is essential to ensure the microbial conservation of cosmetic and pharmaceutical products during use. In this work, a chemometric method of infrared spectroscopy with Fourier transform (FTIR) was developed to predict the effectiveness of preservative systems in pharmaceutical products and topical cosmetics using the concepts of Quality by design (QbD) and Process Analytical Technology (PAT). The QbD approach was used to determine antimicrobial efficacy against candida albicans (ATCC 10231), Escherichia coli (ATCC 8739) and Staphylococcus aureus (ATCC) microorganisms 6538), in functions of paraben concentrations, and determine the Design Space region, employing the design of central composite (CCD). All 15 prepared formulations were analyzed using a spectrophotometer (FTIR) equipped with Attenuated Total Reflectance (ATR). The Partial Least Squares (PLS) regression models for the prediction of the slopes of microbial death curves as a function of ATR /FTIR spectra were well adjusted, with R2 and R2-prediction 0.9937 and 0.8921, 0.9947 and 0.8783, and 0.9957 and 0.9222 for Candida albicans (ATCC 10231), Escherichia coli (ATCC 8739) and Staphylococcus aureus (ATCC 6538)respectively. The proposed FTIR method applied in a PAT approach was able to predict the effectiveness of the preservative system in reduced time. This method in silico prediction will allow a batch-to-lot control of the effectiveness of the preservative system of pharmaceuticals and cosmetics

Sinergismo de óleos essenciais sobre endósporos de Clostridium sporogenes / Essential oils sinergisms on Clostridium sporogenes endospores

A forma mais comum de inibir a produção de toxina botulínica em produtos cárneos cozidos é pela adição de sais de nitrito, o que pode gerar substâncias carcinogênicas (nitrosaminas), sendo desejável sua substituição. Os óleos essenciais vêm se destacando como agentes antimicrobianos, sendo interessante seu uso como conservante. O objetivo desse trabalho foi avaliar a ação sinergística de óleos essenciais sobre endósporos de Clostridium sporogenes, utilizado como modelo de pesquisa para C. botulinum. As concentrações mínimas esporicidas (CME) dos óleos de alecrim, tomilho, cravo, manjericão, ho wood e alho foram de 3% e de 0,375% para pimenta e canela. Os óleos de orégano e noz moscada não apresentaram ação esporicida nas concentrações testadas. Entre as combinações, as melhores foram de pimenta chinesa (0,1306%), alho (1,1%) e manjericão (1,1%) e pimenta chinesa (0,1306%), alho (1,1%) e tomilho branco (1,1%). Os resultados sugerem o sinergismo entre os óleos, sendo promissor seu uso em alimentos.

Mesilato de desferroxamina como candidato a adjuvante farmacêutico e cosmético / Desferroxamine mesylate as a candidate for pharmaceutical and cosmetic adjuvant

Este trabalho propôs o uso do fármaco quelante mesilato de desferroxamina (DFO) como agente adjuvante para estabilização química e microbiológica de formulações. Soluções de ácido ascórbico (AA) 5,0% (p/v) foram preparadas com sistemas antioxidantes constituídos por diferentes combinações de DFO, ácido etilenodiamino tetra-acético (EDTA) e metabissulfito de sódio, cada adjuvante na concentração máxima de 0,1% (p/v). Os sistemas foram testados previamente quanto à atividade antioxidante, mediante adição de um complexo de ferro (III) redox-ativo e ensaio baseado em fluorescência. Os sistemas também foram associados ao metilparabeno e avaliados quanto à atividade antimicrobiana pelo método turbidimétrico, utilizando-se a técnica de microdiluição em meios líquidos e cepas padrão de bactérias e fungos, incluindo S. aureus (ATCC 6538), E. coli (ATCC 8739), P. aeruginosa (ATCC 9027), C. albicans (ATCC 10231) e A. brasiliensis (ATCC 16404). As soluções de AA foram expostas a condições de teste de estabilidade acelerada e avaliadas quanto à estabilidade química, empregando-se método volumétrico validado para quantificar AA. Verificou-se que o EDTA foi o agente quelante que melhor contribuiu na estabilidade química da solução de AA, entretanto, o DFO apresentou desempenho muito superior ao EDTA para bloquear a atividade pró-oxidante do ferro. Além disso, o DFO foi fator relevante na inibição do crescimento microbiano e demonstrou sinergia com o metilparabeno. A otimização estatística dos resultados indicou que o uso do DFO nos sistemas antioxidante e conservante pode reduzir consideravelmente a concentração dos adjuvantes convencionais, EDTA, metabissulfito e metilparabeno, os quais são muitas vezes associados a reações de hipersensibilidade ou a danos ao meio ambiente

In this work it was proposed the use of the chelating drug desferroxamine mesylate (DFO) as adjuvant for chemical and microbiological stabilization of formulations. Ascorbic acid (AA) solutions 5.0% (w/v) were prepared with antioxidant systems containing different combinations of DFO, ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) and sodium metabisulphite, using a maximum concentration of 0.1% (w/v) for each adjuvant. Previously, the systems were spiked with a redox-active iron (III) complex and tested for antioxidant activity by fluorescence-based assay. The systems also were associated with methylparaben and evaluated for antimicrobial activity by turbidimetric method, using the microdilution technique and standard strains of bacteria and fungi, including S. aureus (ATCC 6538), E. coli (ATCC 8739), P. aeruginosa (ATCC 9027), C. albicans (ATCC 10231) and A. brasiliensis (ATCC 16404). The AA solutions were exposed to accelerated stability test conditions and evaluated for chemical stability, using a volumetric method that was validated to quantify AA. It was found that EDTA was the chelating agent that most contributed to the chemical stability of AA solution, however, DFO demonstrated a much higher performance to EDTA to block the pro-oxidant activity of iron. In addition, DFO was a relevant factor in the inhibition of microbial growth and showed synergy with methylparaben. The statistical optimization of the results indicated that the use of DFO in the antioxidant and preservative systems might considerably reduce the concentration of the conventional adjuvants, EDTA, metabisulphite and methylparaben, which are often associated with hypersensitivity reactions or environmental damage

EFECTO DE LA COMBINACIÓN DE GLUCOSA OXIDASA/ GLUCOSA SOBRE EL CRECIMIENTO DE BACTERIAS DEL GÉNERO Salmonella AISLADAS DE AVES DE CORRAL / EFFECT OF THE GLUCOSE OXIDASE /GLUCOSE COMBINATION ON THE GROWTH OF THE GENUS Salmonella BACTERIA ISOLATED FROM POULTRY

RESUMEN En la industria avícola, las infecciones por Salmonella son un problema, debido a los efectos sobre la producción y los riesgos a la salud pública. En las aves infectadas puede ocurrir una diseminación sistémica de las bacterias, que afecta los órganos y favorece, tanto la transmisión entre las aves como la contaminación de los productos avícolas, tales como las carnes, durante el proceso de sacrificio de los animales. Se decidió evaluar el efecto que diferentes combinaciones de glucosa oxidasa (GOX) y glucosa tienen sobre el crecimiento de diversos serotipos de Salmonella aislados de aves en crecimiento y de engorde, y determinar su potencial como antibacteriano. Se tomaron muestras de corazón y de ciego de aves de 7 y 42 días de edad y se aislaron e identificaron S. typhimurium y S. enteritidis. Estas bacterias fueron cultivadas en medio Luria-Bertani (LB) en presencia de GOX (0,5; 1 y 2U/mL) y glucosa (0,5, 1 y 2%), en combinaciones bajo un diseño factorial 32. El crecimiento fue monitoreado por el cambio de absorbancia a 600 nm, durante 6 horas de incubación. Se observó una reducción significativa del crecimiento de ambos serotipos al utilizar 2U/mL de GOX y diferentes concentraciones de glucosa, lo cual, demostró la capacidad antibacteriana que posee el sistema GOX/glucosa sobre este género, por lo que se podría emplear como un aditivo para la conservación de carnes de aves y productos derivados, a fin de alargar su vida de anaquel y minimizar riesgos a la salud.

SUMMARY In the poultry industry, Salmonella infections are a problem due to the effects on production and risks to public health. In infected birds, a systemic spread of bacteria can occur, which affects the organs and favors both the transmission between birds and the contamination of poultry products, such as meat, during the animal´s slaughter process. It was evaluated the effect that different combinations of glucose oxidase (GOX) and glucose have on the growth of different Salmonella serotypes isolated from broilers, and thus determine their potential as antibacterial. Heart and caecal samples were taken from birds 7 and 42 days old. S. typhimurium and S. enteritidis were isolated and identified. These bacteria were cultured in Luria-Bertani medium (LB) in the presence of GOX (0.5, 1 and 2U/mL) and glucose (0.5, 1 and 2%) in combinations under a factorial design 32. Growth was monitored by absorbance change at 600nm for 6 hours of incubation. A significant reduction of the growth of both serotypes was observed when using 2 U/mL of GOX and different concentrations of glucose. This demonstrated the antibacterial capacity that the GOX/glucose system has on this genus, so it could be used as an additive for the preservation of poultry meats and derived products, in order to lengthen its storage time and minimize health risks.

Passion fruit and apple: from residues to antioxidant, antimicrobial and anti-Alzheimer's potential / Maracujá e maçã: de resíduos ao potencial antioxidante, antimicrobiano e anti-Alzheimer

ABSTRACT: The waste in the fruit production chain, including the juice and pulp industries, produces large quantities of leftover husks, seeds and bagasse. This volume of waste generates huge environmental and economic impact. The objective of this research was to determine the potential of using residues from passion fruit (Passiflora edulis) and apple (Malus domestica) varieties in the production of functional flours. Passion fruit flour showed greater reduction of DPPH (EC50%: 50.4μg/mL) radicals, showing antioxidant potential, as well as a more efficient inhibition of Staphylococcus aureus (71.3±1.2μg/mL), with a modest; however efficient, inhibition of acetylcholinesterase (10%). All Apple flours were good antioxidants and the fuji apple flour stood out inhibiting Pseudomonas aeruginosa (78.6±3.1μg/mL). All the residues showed potential for use as a functional product either as a source of antioxidants, a natural (antimicrobial) preservative for dry foods or supplementary use by patients with Alzheimer's disease.

RESUMO: O desperdício na cadeia produtiva de frutos, incluindo as indústrias de suco e polpa, produz grandes quantidades de resíduos, como cascas, sementes e bagaços. Esse volume de resíduos gera impacto ambiental e econômico. O objetivo deste trabalho foi determinar o potencial de aproveitamento de resíduos de maracujá (Passiflora edulis) e de variedades de maçã (Malus domestica) na produção de farinhas funcionais. A farinha de maracujá apresentou maior redução de radicais DPPH (EC50%: 50,4μg/mL), demonstrando potencial antioxidante, maior inibição de Staphylococcus aureus (71,3±1,2μg/mL) e da acetilcolinesterase (10%). Todas as farinhas de maçã foram boas antioxidantes e a fuji destacou-se inibindo Pseudomonas aeruginosa (78,6±3,1μg/mL). Todos os resíduos mostraram potencial para aproveitamento como produto funcional, seja como fonte de antioxidantes, conservante natural (antimicrobiano) para alimentos secos ou uso suplementar no tratamento de Alzheimer.

Effects of a dietary added formaldehyde-propionic acid blend on feed enterobacteria counts and on growing pig performance and fecal formaldehyde excretion / Efeitos da adição de uma mistura de formaldeído e ácido propiônico na dieta sobre a contagem de enterobactérias na ração e sobre o desempenho e excreção fecal de formaldeído de suínos em crescimento

The purpose of this study was to evaluate the effects of a dietary added formaldehyde-propionic acid blend on feed enterobacteria counts and on growing pig performance and fecal formaldehyde excretion. Forty pigs (34.2±1.8kg BW) were used in a randomized complete block design experiment with four treatments, five replications per treatment and two animals per experimental unit (pen). The treatments were: 0.0, 1.0, 2.0, and 3.0g of blend kg-1 of feed. No effects (P>0.05) of dietary added blend levels were observed on average daily gain, average daily feed intake and feed:gain ratio during 1 to 14 and 1 to 28 days of experiment. Increasing dietary levels of blend reduced quadratically (P<0.01) total Enterobacteriaceae counts on 1st and 14th day after feed mixing, allowing to estimate, respectively, 2.63 and 3.35g kg-1 (average 2.99g kg-1) as the formaldehyde-propionic acid blend levels with lowest feed Enterobacteriaceae counts. Therefore, formaldehyde-propionic acid blend can reduce and/or control feed Enterobacteriaceae growth. There was no effect (P>0.05) of blend on fecal formaldehyde excretion on the 28th day of the experimental period. Therefore, the addition of dietary formaldehyde-propionic acid blend up to 3.0g kg-1 of feed reduces the Enterobacteriaceae counts until the 14th day after feed mixing, without any effects on growing pig performance and fecal formaldehyde excretion.

O objetivo deste estudo foi avaliar os feitos de um blend de formaldeído e ácido propiônico em dietas para suínos em crescimento sobre a contagem de enterobactérias na ração armazenada, o desempenho zootécnico e a excreção fecal de formaldeído. Quarenta suínos (34,2±1,8kg de peso vivo) foram utilizados em um experimento em blocos completos casualizados, com quatro tratamentos, cinco repetições por tratamento e dois animais por unidade experimental (baia). Os tratamentos foram: 0,0, 1,0, 2,0 e 3,0g de blend kg-1 de ração. Não foram observados efeitos (P>0,05) dos níveis de blend sobre o ganho diário de peso, consumo diário de ração e conversão alimentar durante os períodos 1 a 14 e 1 a 28 dias de experimento. O aumento dos níveis de blend na dieta reduziu quadraticamente (P<0,01) a contagem total de Enterobacteriaceae no 1o e 14o dias após a fabricação das dietas, sendo estimados, respectivamente, 2,63 e 3,35g kg-1 (média 2,99g kg-1) como os níveis do blend de formaldeído e ácido propiônico com as menores contagens de Enterobacteriaceae na ração. Portanto, o blend de formaldeído e ácido propiônico pode reduzir e/ou controlar o crescimento de Enterobacteriaceae na ração. Não houve efeito (P>0,05) do blend sobre a excreção fecal de formaldeído no dia 28 do período experimental. Portanto, a inclusão de um blend de formaldeído e ácido propiônico até o nível de 3,0g kg-1 de ração reduz a contaminação de Enterobacteriaceae até 14 dias após a fabricação da ração, sem quaisquer efeitos sobre o desempenho e a excreção fecal de formaldeído.

Avaliação do efeito do uso de conservante e dos diferentes momentos de coleta para a determinação de iodo na urina / The effect of the use of preservative and of the different samples collection times on the iodine determination in urine

A determinação do iodo urinário é o marcador bioquímico mais utilizado para avaliação de suas concentrações, auxiliando em estudos epidemiológicos e na clínica médica. Neste trabalho, foi avaliado o efeito do uso de conservante na coleta de urina em frasco coletor, nos períodos antes (A) e após (B) o almoço, e nas amostras distribuídas em tubos com (C) e sem (S) conservante para determinar as concentrações de iodo e creatinina. A dosagem de creatinina foi utilizada para aferir a função renal. Foram analisadas amostras de 20 indivíduos entre 18 a 40 anos de ambos os sexos. Houve concordância nas concentrações de iodo no (A), sendo o coeficiente de correlação intraclasse (CCI) = 0,769 nos tubos (C) e CCI = 0,724 nos tubos (S), assim como entre (A) CCI = 0,941 e (B) CCI = 0,983. Não houve concordância nas concentrações de creatinina nos tubos (C) CCI = 0,369 e (S) CCI = 0,264 nos dois períodos e, também, entre (A) (CCI =0,916) e (B) (CCI = 0,998). Por não terem sido detectadas variações nas concentrações de iodo nas amostras de urina, ambos os tubos, (C) ou (S), podem ser utilizados com igual confiabilidade. Não foi detecta da variabilidade na determinação de iodo na amostras de urina coletadas nos períodos (A) e (B).

Produção de nisina em leite desnatado diluído por Lactococcus lactis subsp. lactis ATCC 11454 em biorreator / Nisin production in diluted skimmed milk utilizing Lactococcus lactis subsp. lactis ATCC 11454 in bioreactor

Nisina é um peptídeo antimicrobiano natural produzido por Lactococcus lactis subsp. lactis ATCC 11454 durante a fase exponencial de crescimento. A bacteriocina é usada como conservante natural de alimentos, uma vez que mostra atividade antimicrobiana contra bactérias Gram-positivas e esporos. Tem potencial aplicação em inúmeros campos (farmacêutico, veterinário e cosméticos). O objetivo deste trabalho foi estudar a cinética de crescimento bacteriano e a produção de nisina em biorreator, utilizando leite desnatado diluído, como um meio de cultura a baixo custo. Também foram avaliados os consumos de açúcar e proteína, formação de ácido lático e adsorção de nisina nas células produtoras durante os processos de produção de nisina. Pré-cultivos com 107 UFC.mL-1 de Lactococcus lactis foram cultivados em biorreator de 2 L contendo 25 por cento de leite desnatado diluído em água (1,5 L, pH 6,7). Os ensaios foram esenvolvidos a 30°C por 52 horas, variando a agitação e aeração: (i) 200 rpm (0,0, 0,5, 1,0 e 2,0 L.min-1) e (ii) 100 rpm (0,0 e 0,5 L.min-1). A atividade de nisina foi avaliada pelo método de difusão em ágar, utilizando Lactobacillus sakei ATCC 15521 como microrganismo sensível à ação de nisina. A melhor concentração de nisina (62,68 mg.L-1 ou 2511,89 AU.mL-1), foi obtida em 16 horas, 200 rpm e sem aeração (kLa = 5,29 x 10-3 h-1). A adsorção de nisina nas células produtoras foram baixas (6,8 - 15,1 por cento), quando comparadas com a atividade do sobrenadante. Estes resultados mostraram que o meio de cultivo composto por leite desnatado diluído favoreceu o crescimento celular e produção associada ao crescimento da nisina. Foram realizados estudos preliminares de liofilização (bioconservação) e purificação por cromatografia da nisina produzida em biorreator. A liofilização apresentou perda da atividade de nisina (24,8 por cento), enquanto a purificação por cromatografia de interação hidrofóbica com resina Butyl-Sepharose,...

Nisin is a natural antimicrobial peptide produced by Lactococcus lactis subsp. lactis ATCC 11454 during its exponential growth phase. The bacteriocin is used as natural food preservative due to its antimicrobial activity against Gram-positive bacteria and outgrowth of spores. This property allows its application in numerous fields (pharmaceutical, veterinary and cosmetic). The aim of this work was to study the bacterial growth kinetics of L. lactis and respective nisin production in bioreactor, using diluted skimmed milk as an inexpensive medium. During the production, the consumption of sugar and protein, lactic acid formation and nisin adsorption on the producer strain cells were evaluated. Pre-cultivation with 107 UFC.mL-1 of L. lactis were expanded in a 2 L bioreactor containing 25 percent diluted skimmed milk in water (1.5 L, pH 6.7). The assays were performed at 30°C for 52 hours, varying agitation and airflow rate: (i) 200 rpm (0.0, 0.5, 1.0 and 2.0 L.min-1) and (ii) 100 rpm (0.0, 0.5 L.min-1). Nisin activity was evaluated through diffusion assays using Lactobacillus sakei ATCC 15521 as sensitive strain. The best nisin concentration (62.68 mg.L-1 or 2511.89 AU.mL-1), was achieved at 16 hours, 200 rpm and with no airflow rate (kLa = 5.29 x 10-3 h-1). The quantity of nisin adsorbed by the producer cells were low (6.8 -15.1 percent) when compared to the quantity released in the supernatant. These results showed that diluted skimmed milk supported cell growth and growth-associated nisin. Preliminary assays of lyophilization (biopreservation) and purification by chromatography of nisin produced in bioreactor were performed. Lyophilization presented a loss of nisin activity (24.8 percent) while purification by hydrophobic interaction chromatography with Butyl-Sepharose column recovered 40 percent of the activity, showing that both processes can be applied to the bacteriocin.

Avaliação da eficácia e segurança do extrato de folhas de Rubus rosaefolius Sm. visando a aplicação como conservante em produtos cosméticos / Effectiveness and safety evaluation of Rubus rosaefolius Sm. leaves, regarding to the preservative use in cosmetic products

Os produtos cosméticos e farmacêuticos contendo componentes de origem natural têm aumentado significativamente nos últimos anos. Com o objetivo de utilizar esses componentes como conservante em formulações cosméticas, determinou-se a atividade antimicrobiana do extrato bruto de folhas de Rubus rosaefolius Sm. e suas frações. Aquele de melhor desempenho foi avaliado quanto à toxicidade in vitro e seu comportamento em formulações cosméticas (creme, gel e xampu), relacionado à estabilidade, eficácia do sistema conservante e compatibilidade epidérmica. A atividade antimicrobiana foi determinada pelo método de microdiluição e a concentração de 0,2% (p/v) do extrato bruto apresentou melhor desempenho. O teste de toxicidade do extrato bruto foi realizado por meio do método colorimétrico Cell Titer 96®, MTS, em cultura de queratinócitos humanos, constatando-se índice de citotoxicidade (IC50) de 1,0 mg/mL. As formulações cosméticas contendo o extrato foram analisadas quanto à estabilidade e as de melhor desempenho foram submetidas ao teste de eficácia do sistema conservante, de acordo com os procedimentos descritos na CTFA. O sistema conservante mostrou-se efetivo frente à Escherichia coli IAL 2393 (ATCC 10536), a Pseudomonas aeruginosa IAL 1874 (ATCC 9027), ao Staphylococcus aureus IAL 1875 (ATCC 6548), a Burkholderia cepacia IAL 1834 ATCC (17759) e a Candida albicans IAL 1611 (ATCC 10231). Avaliouse a compatibilidade epidérmica das formulações em equivalentes dermo-epidérmicos, sistema tridimensional cultivados na superfície ar-líquido. Os resultados mostraram que houve diferenças na compatibilidade epidérmica dependendo das características dos componentes das formulações. Concluiu-se que o extrato bruto de folhas de Rubus rosaefolius Sm. a 0,2% (p/v) pode ser utilizado como candidato a conservante em formulações cosméticas, sendo estável e apresentar compatibilidade epidérmica.

Cosmetic and pharmaceuticals products contained natural compounds have increased in the last few years. To verify the use of these compounds as preservative in formulations, the antimicrobial activity from the raw extract of the Rubus rosaefolius Sm. leaves and its fractions was determined. The toxicity in vitro and the behavior in cosmetic formulations (gel, emulsion and shampoo), regarding to the stability, effectiveness of the preservative system, and epidermal compatibility were evaluated in the extract, which had the best preservative action. The antimicrobial activity was determined by the micro dilution method, and the 0.2% concentration (w/v) of the raw extract had the best performance. The toxicity of the extract was analyzed by Cell Titer 96® colorimetric; MTS method in human keratinocytes culture, and the index of cytotoxicity (IC 50) found was 1.0 mg/mL. The cosmetic formulations with the raw extract were analyzed regarding to the stability and the best formulations were submitted to preservative challenge test, according to CTFA procedures. The preservative system was effective against Escherichia coli IAL 2393 (ATCC 10536), Pseudomonas aeruginosa IAL 1874 (ATCC 9027), Staphylococcus aureus IAL 1875 (ATCC 6548), Burkholderia cepacia IAL 1834 ATCC (17759), and Candida albicans IAL 1611 (ATCC 10231). The epidermal compatibility of the formulations was verified by skin (dermo-epidermal) equivalent, three-dimensional system, cultivated in the air-liquid surface. The results showed there were differences in the epidermal compatibility depended on the ingredient of formulation. In conclusion, the raw extract from the Rubus rosaefolius Sm leaves 0.2% (w/v) can be used as preservative candidate in the cosmetic formulations analyzed due to stability and it presented epidermal compatibility.