Two methods for isolation of endophytic and edaphic Bacillus spp. from sugarcane fields / Dois métodos para isolamento de Bacillus spp. endofíticos e edáficos de canaviais

Bacillus has been widely studied and used for the control of pests and diseases. The adapted protocol proposed by POLANCZYK (2004) proved to be more efficient than the one by the World Health Organization (WHO, 1985) to isolate edaphic strains of Bacillus. However, it has not been assessed for isolation of endophytic strains, which are much less abundant in the nature and more difficult to be isolated. This study aimed to compare two methodological procedures for isolation of Bacillus, established by the WHO (1985) and by POLANCZYK (2004), regarding their efficiency for isolation of endophytics and edaphics Bacillus strains from inside the root tissue of sugarcane, as well as from the associated soil sample, collected from 11 locations; and to compare the density of bacteria in both environments. Endophytic and edaphic strains of Bacillus were isolated by both procedures. However, the isolation protocol performed by POLANCZYK (2004) made more efficient by having a greater number of colony forming units (CFU) per gram of soil and root indicating that this procedure is more useful, especially for isolation of endophytic strains of Bacillus, which are much less abundant in the nature than edaphic strains, being therefore more difficult to be isolated. Using the Polanczyk protocol (2004), Bacillus strains were recovered from all roots (endophytic) and soil (edaphic) samples of all the 11 fields, suggesting that the plant root may be another important source for isolation of Bacillus besides the soil. Higher densities of Bacillus were isolated from the edaphic environment compared with the endophytic environment, with significant differences when isolated by Polanczyk method (2004).(AU)

Bacillus tem sido amplamente estudado e usado para o controle de pragas e doenças. O protocolo adaptado proposto por POLANCZYK (2004) mostrou-se mais eficiente do que o da Organização Mundial de Saúde (WHO, 1985) para isolar cepas edáficas de Bacillus. No entanto, não foi avaliado quanto ao isolamento de estirpes endofíticas, que são muito menos abundantes na natureza e mais difíceis de isolar. Este estudo teve como objetivos comparar dois procedimentos metodológicos para o isolamento de Bacillus, o estabelecido pela OMS (WHO, 1985) e o de POLANCZYK (2004), quanto a sua eficiência para o isolamento de estirpes endofitas e edáficas de Bacillus originárias do interior do tecido radicular de cana-de-açúcar, bem como de amostras de solos associados, coletada de 11 locais; e comparar a densidade de bactérias em ambos os ambientes. As cepas endofíticas e edáficas de Bacillus foram isoladas por ambos os procedimentos. No entanto, o protocolo de isolamento realizado por POLANCZYK (2004) demonstrou-se mais eficiente por gerar maior número de unidades de formação de colônias (CFU) por grama de solo e raiz, indicando que esse procedimento é mais útil, especialmente para isolamento de estirpes endofíticas de Bacillus, que são muito menos abundantes na natureza do que as cepas edáficas, sendo, portanto, mais difíceis de serem isoladas. Usando o protocolo de POLANCZYK (2004), as cepas de Bacillus foram isoladas de todas as amostras de raízes (endofíticas) e de solo (edáficas) de todos os 11 campos, sugerindo que a raiz da planta pode ser outra fonte importante de isolamento de Bacillus além do solo. As densidades mais altas de Bacillus foram isoladas do ambiente edáfico em comparação com o ambiente endofítico, com diferenças significativas quando isoladas pelo método de POLANCZYK (2004).(AU)

Influência do meio suporte na inativação de endósporos de Bacillus atrophaeus em resíduos de serviços de saúde por micro-ondas / Support influence on microwave inactivation of Bacillus atrophaeus spores in healthcare waste

A Norma Técnica CETESB P2.111/2007 foi tomada como base para avaliar a desinfecção de resíduos de serviços de saúde (RSS) por micro-ondas, através da comparação dos resultados provenientes da utilização da norma, ou seja, com endósporos de Bacillus atropheus em suspensão no interior de ampolas introduzidas nos RSS, com os obtidos nos endósporos dispersos na superfície das partículas. Os resultados foram ajustados à cinética de primeira ordem e à Lei de Arrhenius para obtenção das energias de ativação (Ea) e dos fatores pré-exponenciais (k0). A Ea obtida nos endósporos em suspensão nas ampolas (99-45 J.mol-1) foram sensivelmente menores quando comparadas com as Ea (9.203-5.782 J.mol-1) provenientes da inativação dos endósporos dispersos sobre os RSS, para k0 praticamente constantes (0,26 e 0,23 min-1, respectivamente). Portanto, a resistência à inativação dos endósporos foi bastante afetada pelo meio suporte utilizado, tendo sido mais sensíveis à exposição a micro-ondas no meio líquido do que no meio sólido.

The Technical Standard CETESB P2.111/2007 was tested to evaluate the microwave healthcare waste disinfection, by comparing the results obtained using the standard procedure, i.e. Bacillus atropheus spores in suspension inside vials distributed in the waste, with those obtained with spores dispersed on the particles surface. The experimental results were adjusted based on first-order kinetic model and Arrhenius Law to determine the activation energies (Ea) and the pre-exponential factors (k0). The Ea in spores suspension inside vials (99-45 J.mol-1) were significantly lower when compared with Ea (9,203-5,782 J.mol-1) from the inactivation of dispersed spores in the waste to k0 practically constant (0.26 and 0.23 min-1, respectively). Therefore, spore resistance to inactivation was greatly affected by the support medium used, since the spores were more susceptible to microwave exposition in liquid medium than in the solid one.