Papel de la plasticidad celular en la regeneración intestinalinducida por lesiones / Role of cell plasticity in injury-induced intestinal regeneration

El sistema intestinal posee una capacidad regenerativa intrínseca y fisiológica que tiene lugar a partir de las células madreLgr5+ ubicadas en el fondo de las criptas intestinales, las cuales se diferencian hacia las células progenitoras secretoras y absortivas con sus respectivas células especializadas mediante la activación de señalizaciones intracelulares como Wnt, Hippo y Notch. Condiciones adversas como lesiones e infecciones tisulares inducen esta actividad regenerativa promovida por variados mecanismos que influyen en el microambiente celular. El sistema inmunológico detecta alteraciones en el tejido intestinal y, a través de la activación de células inmunocompetentes y la secreción de citoquinas proinflamatorias, favorece la desdiferenciación de células especializadas hacia células madre para desencadenar la respuesta regenerativa. En cuanto al sistema nervioso entérico, su influencia está sujeta a modificaciones en la microbiota y los hábitos alimenticios, y se encuentra determinada en gran parte, por las células gliales entéricas y la expresión de distintos marcadores de plasticidad, que permiten limitar la lesión y reparar el tejido. Por su parte, la epigenéticamodifica la expresión genética y consecuentemente, la capacidadregenerativa intestinal, variando de acuerdo a cada paciente porla influencia de factores externos como la dieta o el estadopsicobiológico. De esta forma, la respuesta regenerativa intestinalinducida por lesiones, integra múltiples mecanismos y poseeimportantes repercusiones clínicas en cuanto a EII, disbiosise incluso tumorogénesis; conocer los mecanismos que regulanesta actividad puede sentar las bases para la creación de terapias innovadoras en el mismo ámbito(AU)

The intestinal system has an intrinsic and physiological regenerative capacity that takes place from the Lgr5+ stem cells located at the bottom of the intestinal crypts, which differentiate into secretory and absorptive progenitor cells with their specialized cells by activating intracellular signalslike Wnt, Hippo and Notch. Adverse conditions such asinjuries and tissue infections induce this regenerative activity promoted by various mechanisms that influence the cellular microenvironment. The immune system senses disturbances in the intestinal tissue and, through the activation of immunocompetent cells and the secretion of proinflammatorycytokines, favors the dedifferentiation of specialized cells intostem cells to trigger the regenerative response. Regarding theenteric nervous system, its influence is subject to modificationsin the microbiota and dietary habits, and is largely determinedby enteric glial cells and the expression of different plasticitymarkers, which enable to limit injuries and repair tissue. On the other hand, epigenetics modifies genetic expressionand, consequently, intestinal regenerative capacity, varying according to each patient due to the influence of external factors such as diet or psychobiological status. There fore, the intestinal regenerative response induced by lesions integrates multiple mechanisms and has important clinical repercussions in terms of IBD, dysbiosis, and even tumorigenesis; knowing themechanisms that regulate this activity can lay the foundations for the creation of innovative therapies in the same field (AU)

Ganglioneuromatosis intestinal difusa a lo largo del tubo digestivo / Diffuse intestinal ganglioneuromatosis along the gastrointestinal tract

Resumen Introducción: Los ganglioneuromas son neoplasias histológicamente benignas derivadas del sistema nervioso simpático, cuya ocurrencia en el tubo digestivo es rara y comúnmente sindromática. De acuerdo con el patrón de la lesión y la extensión se dividen en ganglioneuroma polipoide, poliposis ganglioneuromatosa y ganglioneuromatosis difusa. El objetivo de este trabajo es presentar el hallazgo incidental post mortem de ganglioneuromatosis difusa del tubo digestivo en una paciente sin afectación sindromática. Caso clínico: Se describe el caso de un paciente de sexo femenino de 2 años con atresia traqueoesofágica tipo III corregida quirúrgicamente que cursó con recanalización fistulosa, múltiples episodios de neumonía por aspiración y choque séptico. Durante el último ingreso cursó con hemorragia pulmonar masiva y falla multiorgánica. En el estudio post mortem se identificó hipertrofia del píloro y de los troncos y plexos nerviosos entéricos con células ganglionares maduras entremezcladas. Se identificó ganglioneuromatosis que afectaba todos los segmentos del tubo digestivo, con predominio de los plexos mientéricos. Conclusiones: La ganglioneuromatosis intestinal es una rara enfermedad que presenta un espectro de lesiones desde una forma aislada hasta sindromática con morbimortalidad elevada. Por ello, es necesario conocer la enfermedad, indagar sistemáticamente cuando se sospeche y apoyarse de estudios genéticos que confirmen o descarten alguna asociación sindromática.

Abstract Background: Ganglioneuromas are histologically benign neoplasms derived from the sympathetic nervous system, whose occurrence in the gastrointestinal tract is rare and often syndromic. According to the injury pattern and extension, lesions are divided into polypoid ganglioneuroma, ganglioneuromatous polyposis, and diffuse ganglioneuromatosis. This work aimed to present the incidental post mortem finding of diffuse ganglioneuromatosis of the gastrointestinal tract in a patient without syndromic involvement. Case report: We describe the case of a two-year-old female patient with surgically corrected type III tracheoesophageal atresia and fistulous recanalization, multiple episodes of aspiration pneumonia, and septic shock. During the last admission, she developed massive pulmonary hemorrhage and multi-organ failure. Post mortem histopathological study identified hypertrophy of the pylorus and enlarged enteric nerve trunks and plexuses with intermingled mature ganglion cells. We identified ganglioneuromatosis affecting all gastrointestinal tract segments with the predominance of the myenteric plexuses. Conclusions: Intestinal ganglioneuromatosis is a rare disease with a spectrum of lesions ranging from isolated to syndromic with high morbidity and mortality. Therefore, it is necessary to know the condition, investigate systematically when it is suspected, and rely on genetic studies to confirm or rule out any syndromic association.

Eventos de precipitación extrema aumentan la circulación de patógenos infecciosos: detección de rotavirus, norovirus, astrovirus, adenovirus entérico y micobacterias no tuberculosas en agua de las inundaciones en Asunción, Paraguay, año 2014

Las precipitaciones extremas representan uno de los eventos naturales climáticos más importantes y pueden originar inundaciones devastadoras. De junio a agosto del 2014 se registró una de las más graves inundaciones en la historia de la ciudad de Asunción. Ocasionó un incremento considerable del nivel del río Paraguay y el desplazamiento de 300.000 personas a campamentos provisionales. Debido a que el contacto directo con el agua de inundación, el consumo de agua contaminada y la congregación de los afectados en refugios provisorios son factores de riesgo para enfermedades infecciosas, el objetivo de este estudio fue la implementación de una metodología estandarizada para la concentración y detección de virus entéricos y micobacterias no tuberculosas, por PCR en tiempo real y PCR-asociada al análisis de restricción enzimática (PRA), en muestras de agua de inundaciones y el reporte de los patógenos detectados en las zonas afectadas de Asunción y en la Bahía del Río Paraguay. La metodología propuesta demostró poseer buena sensibilidad y se registró la presencia de rotavirus, norovirus (genogrupos I y II), astrovirus, adenovirus entéricos y micobacterias no tuberculosas en 50% (N=4/8) de las muestras de los barrios Sajonia, San Jerónimo y Ricardo Brugada, Chacarita. Además, reportamos datos secundarios de casos de enfermedades infecciosas, registrados en los servicios de salud de los barrios afectados durante el periodo de inundación.

Extreme rainfall represents one of the most important natural climatic events and can cause devastating floods. From June to August 2014, one of the most serious floods in the history of the city of Asunción was recorded. It caused a considerable increase in the level of the Paraguay River and the displacement of 300,000 people to temporary camps. Since direct contact with flood water, consumption of contaminated water and the congregation of those affected in temporary shelters are risk factors for infectious diseases, the objective of this study was the implementation of a standardized methodology for the concentration and detection of enteric viruses and non-tuberculous mycobacteria, by real-time PCR and PCR-associated enzyme restriction analysis (PRA), in samples of flood water and the report of the pathogens detected in the affected areas of Asunción and in the Bay of the Paraguay River. The proposed methodology proved to have good sensitivity and the presence of rotavirus, norovirus (genogroups I and II), astrovirus, enteric adenovirus and non-tuberculous mycobacteria was recorded in 50% (N=4/8) of the samples from the Sajonia, San Jeronimo and Ricardo Brugada, Chacarita neighborhoods. In addition, we report secondary data on cases of infectious diseases, registered in the health services of the affected neighborhoods during the flood period.

Bioaccumulation of Pyrethroid in Parasite Wenyonia acuminata (Cestoda: Caryophyllaeidae) and Host fish Synodontis clarias (Linnaeus, 1758) from Lekki Lagoon, Lagos Nigeria / Bioacumulação de piretroide no parasita Wenyonia acuminata (Cestoda: Caryophyllaeidae) e peixe hospedeiro Synodontis clarias (Linnaeus, 1758) da lagoa de Lekki, Lagos, Nigéria

Abstract This study was aimed at determining the concentration of pyrethroid in the surface water, sediment, Weyonia acuminata and Synodontis clarias fish in Lekki lagoon, Lagos, Nigeria. In-situ physicochemical analysis of the surface water was conducted using a calibrated handheld multi-parameter probe (Horiba Checker Model U-10). Intestinal samples from infected and uninfected fish were analyzed for pyrethroid concentrations, microbial colonization, proteins (PRO), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), reduced glutathione (GSH), malonaldehyde (MDA) and glutathione peroxidase (GPx). The histopathology of infected and uninfected intestinal tissues were analyzed using Haematoxylin and Eosin (H&E) stains and examined under a binocular light microscope (Model 230485). A total of 39 out of 98 S. clarias fish were infected with cestode parasite, Wenyonia acuminate, amounting to 39% parasite prevalence. Among the tested pyrethroids, Cyfluthrin and Alpha -cypermethrin had significant sorption of 1.62 and 3.27 respectively from the aqueous phase to the bottom sediment of the lagoon. Pyrethroid concentration was in the order of sediment > parasite> water > intestine> liver. The cholesterol, triglycerides, and LDL (low density lipids) in the parasite were higher than in the host fish (p<0.05). On the other hand, the fish hepatic protein, high density lipids (HDL) and glucose were higher than the levels in the parasites (p<0.05). There was a high prevalence of gut microbes (30 - 40%), which include Salmonella sp, Escherichia coli, Pseudomonas sp and Bacillus sp among individuals infected with gut Cestodes, Wenyonia sp compared with uninfected individual which had higher gut Staphylococcus sp., Klebsiella sp., and Proteus sp. (10- 40%). among the congeners of pyrethroids analyzed, Cyfluthrin > Alpha-Cyermethrin had significant sorption on the sediment, however unlike a benthopelagic fish, no pyrethroid was accumulated in the S. clarias from the sediment. The fish however accumulated Alpha-Cypermethrin from the aqueous phase. The parasite on the other hand accumulated Bathroid significantly from the surface water and bottom sediment which may be linked to the higher stress levels observed in the parasite than the host fish. The parasite in turn inflicted histological alterations on the host intestine, marked by moderate inflammation of mucosa, alteration of the villi microstructure, moderate stunting of the villous structure and moderate fibrosis of villous structure. The study demonstrated the efficiency of histopathological and microbial analysis in biomonitoring studies enteric parasites and early detection of pyrethroid toxicity respectively compared to bioaccumulation analysis.

Resumo Este estudo teve como objetivo determinar a concentração de piretroide nos peixes de águas superficiais, sedimentos, Wenyonia acuminata e Synodontis clarias na lagoa de Lekki, Lagos, Nigéria. A análise físico-química in situ da água de superfície foi realizada usando uma sonda multiparâmetro manual calibrada (Horiba Checker Modelo U-10). Amostras intestinais de peixes infectados e não infectados foram analisadas quanto a concentrações de piretroides, colonização microbiana, proteínas (PRO), superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa reduzida (GSH), malonaldeído (MDA) e glutationa peroxidase (GPx). A histopatologia dos tecidos intestinais infectados e não infectados foi analisada usando manchas de Hematoxilina e Eosina (H&E) e examinada sob um microscópio de luz binocular (Modelo 230485). Um total de 39 dos 98 peixes de S. clarias foi infectado com o parasita cestoide Wenyonia acuminata, totalizando 39% de prevalência do parasita. Entre os piretroides testados, ciflutrina e alfa-cipermetrina tiveram sorção significativa de 1,62 e 3,27, respectivamente, da fase aquosa ao sedimento de fundo da lagoa. A concentração de piretroides estava na ordem de sedimentos > parasita > água > intestino > fígado. O colesterol, os triglicerídeos e o LDL (lipídios de baixa densidade) no parasita foram maiores que no peixe hospedeiro (p < 0,05). Por outro lado, a proteína hepática dos peixes, os lipídios de alta densidade (HDL) e a glicose foram superiores aos níveis nos parasitas (p < 0,05). Houve uma alta prevalência de micróbios intestinais (30-40%), incluindo Salmonella sp., Escherichia coli, Pseudomonas sp. e Bacillus sp. entre indivíduos infectados no intestino com o parasita cestoide Wenyonia sp. em comparação com indivíduos não infectados com Staphylococcus sp., Klebsiella intestinal sp. e Proteus sp. (10-40%). Entre os congêneres dos piretroides analisados, ciflutrina > alfa-cipermetrina teve sorção significativa no sedimento, porém, diferentemente de um peixe bentopelágico, nenhum piretroide foi acumulado no S. clarias do sedimento. No entanto, os peixes acumularam alfa-cipermetrina a partir da fase aquosa. O parasita, por outro lado, acumulou Bathroid significativamente da água superficial e do sedimento do fundo, o que pode estar relacionado aos níveis mais altos de estresse observados no parasita do que no peixe hospedeiro. O parasita, por sua vez, causou alterações histológicas no intestino hospedeiro, marcadas por inflamação moderada da mucosa, alteração da microestrutura das vilosidades, atrofia moderada da estrutura das vilosidades e fibrose moderada da estrutura das vilosidades. O estudo demonstrou a eficiência da análise histopatológica e microbiana nos estudos de biomonitoramento de parasitas entéricos e detecção precoce da toxicidade dos piretroides, respectivamente, em comparação à análise de bioacumulação.

Location, distribution, and quantification of myenteric plexus neurons of the jejunum of quails fed with different levels of commercial Macleaya cordata extract / Localização, distribuição e quantificação dos neurônios do plexo mioentérico do jejuno de codornas de postura alimentadas com diferentes inclusões do extrato comercial de Macleaya cordata

ABSTRACT: Coturniculture has been promising, progressing from a subsistence to a technical activity due to its quick production, low breeding investment, and rapid economic return. After the restriction of antimicrobials as growth promoters, some studies aimed to evaluate alternative products that would make the farming of healthy birds viable without impacting their performance, with commercial Macleaya cordata extract being one of these substitutes. The functions of the gastrointestinal tract are coordinated mainly by the enteric nervous system, and the myenteric plexus is responsible for the reflex control of contractile activities of the external muscles. Thus, this study located and demonstrated the distribution of the myenteric plexus, quantifing the total population of myenteric neurons (Giemsa+) and the subpopulation of myenteric nitrergic neurons (NADPH-d+), and evaluated the effects of commercial Macleaya cordata extract on these populations of quail jejunum neurons. A total of 240 one-day-old female laying quails were distributed into four treatments, with four repetitions of 15 birds each. The test groups (T1, T2, and T3) were treated with commercial Macleaya cordata extract throughout the experimental period using the following doses: T1 - test group, basal diet added with 150 ppm of the extract in the feed; T2- test group, basal diet added with100 ppm of the extract in the feed; T3 - test group, basal diet added with 50 ppm of the extract in the feed; and T4 - control group, basal diet with no added extract. The study included histological analysis, Giemsa+, and NADPH-d+ myenteric neuron staining. The results showed that the myenteric plexus is located between longitudinal layer fibers and in the transition region between the longitudinal and circular layers of the muscular tunic, with the myenteric population organized into ganglia and isolated in the region of neuronal fiber bundles. The commercial Macleaya cordata extract showed no quantitative changes in the myenteric Giemsa+ population and myenteric NADPH-d+ subpopulation, however, the groups that consumed the extract showed greater NADPH-d+ neuron activity compared to the control group, implying that the food remained longer in the intestinal lumen, therefore, enabling greater nutrient use and resulting in increased productive performance.

RESUMO: A coturnicultura tem apresentado características promissoras, deixando de ser uma atividade de subsistência e ocupando patamares tecnificados devido a sua precocidade produtiva, baixo investimento de criação e rápido retorno econômico. A partir da restrição da utilização de antimicrobianos como promotores de crescimento, estudos foram direcionados com o objetivo de se avaliar produtos alternativos que viabilizassem a criação de aves saudáveis, sem comprometer seu desempenho, sendo o extrato comercial da Macleaya cordata um destes substitutos. As funções do trato gastrintestinal são coordenadas principalmente pelo sistema nervoso entérico, sendo o plexo mioentérico responsável pelo controle reflexo das atividades contráteis da musculatura externa. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo localizar e demonstrar a distribuição do plexo mioentérico, quantificar a população total de neurônios mioentéricos (Giemsa+), e a subpopulação de neurônios mioentéricos nitrérgicos (NADPH-d+), além de avaliar os efeitos do extrato comercial da Macleaya cordata sobre estas populações de neurônios do jejuno de codornas. Foram alojadas 240 codornas de postura, fêmeas, com um dia de idade, distribuídas aleatoriamente em quatro tratamentos, com quatro repetições de 15 aves cada. Os grupos testes (T1, T2 e T3) foram tratados com extrato comercial de Macleaya cordata durante todo o período experimental conforme as doses indicadas, sendo: T1 - grupo teste, com dieta basal adicionada de 150 ppm do extrato na ração; T2 - grupo teste, com dieta basal adicionada de 100 ppm do extrato na ração; T3 - grupo teste, com dieta basal adicionada de 50 ppm do extrato na ração, e T4 - grupo controle, com dieta basal isenta do extrato. Foram realizadas análise histológica e a marcação dos neurônios mioentéricos Giemsa+ e NADPH-d+. Os resultados demonstraram que o plexo mioentérico está localizado entre as fibras do estrato longitudinal, e na região de transição entre os estratos longitudinal e circular da túnica muscular, estando a população mioentérica organizada em gânglios, e também isoladamente na região dos feixes das fibras neuronais. O extrato comercial da Macleaya cordata não alterou quantitativamente os neurônios da população mioentérica Giemsa+ e da subpopulação mioentérica NADPH-d+, mas os grupos que consumiram o extrato apresentaram maior atividade dos neurônios NADPH-d+ em relação ao grupo controle, permitindo inferir que o alimento permaneceu maior tempo no lúmen intestinal e, portanto, possibilitou um maior aproveitamento dos nutrientes, podendo refletir em melhor desempenho produtivo.

Quantification of the neurons of myenteric plexus of the bat molossus rufus / Quantificação dos neurônios do plexo mientérico de morcegos da espécie Molossus rufus

There are no studies that characterize the enteric nervous system (ENS) bats. The organization and density of myenteric neurons may vary according to the animal species, as well as the segment of the digestive tube considered. The nitric oxide is one of the key neurotransmitters present in the myenteric neurons, acting as a mediator in the smooth muscle relaxation. These neurons are evidenced by immunohistochemistry of nitric oxide synthase (NOS) or by NADPH-diaphorase histochemistry. In this sense, this study aimed to characterize the total neuronal population and subpopulation NADPH-d+ of the myenteric plexus present in the jejunum of the insectivore species Molossus rufus quantitatively. Five specimens were collected of M. rufus in a buffer area of the "Reserva Biológica das Perobas" in the microregion of Cianorte/PR. After the euthanasia, in a chamber saturated with isoflurane, segments were collected from the small intestine corresponding to the jejunum intended for two techniques for neuronal marking, Giemsa and NADPH-diaphorase, and a fragment to the histological technique of hematoxylin-eosin and Masson's trichrome. All the procedures were approved by the "Comitê de Ética no Uso de Animais Unipar" (CEUA - protocol No. 34347/2017) and the "Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade" (ICMBio - protocol No. 60061-1) The histological sections allowed to highlight the location of the myenteric plexus between the longitudinal and circular layers of the muscular tunic. The myenteric plexus had an average of total neuronal population (neurons Giemsa+) of 279.23 neurons/mm2, being the nitrergic neurons (neurons NADPH-d+) represented 20.4% of this total population, with an average of 58.14 neuron/mm2. Therefore, the collected data are consistent with previous studies in other mammalian species concerning the location of the myenteric plexus, as well as the neural myenteric proportion NADPH-d+ compared with the population of neurons Giemsa+. The gaps in the knowledge of ENS of bats limits comparative intraspecific and interspecific studies.(AU)

Não há estudos que caracterizem o sistema nervoso entérico (SNE) destes animais, configurando uma lacuna no conhecimento quanto à biologia destes indivíduos. A organização e densidade dos neurônios mientéricos podem variar de acordo com a espécie animal bem como o segmento do tubo digestório considerado. O óxido nítrico é um dos principais neurotransmissores presentes nos neurônios mientéricos, atuando como mediador no relaxamento do músculo liso gastrointestinal, de modo que estes neurônios são evidenciados igualmente pela imunohistoquímica da óxido nítrico-sintase (NOS) ou pela histoquímica da NADPH-diaforase. Neste sentido, objetivou-se caracterizar quantitativamente a população neuronal total e subpopulação NADPH-d+ do plexo mientérico presente no jejuno da espécie Molossus rufus de hábito alimentar insetívoro. Foram coletados cinco espécimes de M. rufus em área de amortecimento da Reserva Biológica das Perobas na microrregião de Cianorte/PR. Após a eutanásia, em câmara saturada com isoflurano, foram coletados segmentos do intestino delgado correspondentes ao jejuno destinados a duas técnicas para marcação neuronal, Giemsa e NADPH-diaforase e, um fragmento para a técnica histológica de hematoxilina-eosina e tricômio de Masson. Todos os procedimentos realizados foram aprovados pelo Comitê de Ética no Uso de Animais da Unipar (CEUA - protocolo nº 34347/2017) e pelo Instituto Chico Mendes de Conservação da Biodiversidade (ICMBio - protocolo nº 60061-1) Os cortes histológicos possibilitaram evidenciar a localização do plexo mientérico entre os estratos longitudinal e circular da túnica muscular. Neurônios Giemsa+ apresentaram uma média de 279,23 neurônios/mm2, já os neurônios nitrérgicos apresentaram em média 20,4% da população neuronal mientérica total, sendo evidenciados 58,14 neurônios NADPH-d+/mm2. Portanto, os dados coletados mostram-se condizentes com estudos anteriores em outras espécies de mamíferos quanto à localização do plexo mientérico, bem como, a proporção neuronal mientérica NADPH-d+ comparada com a população de neurônios Giemsa+. As lacunas existentes quanto ao conhecimento do SNE de morcegos limita possíveis inferências em comparativo intraespecífico e interespecífico.(AU)

A artrite reumatoide afeta o sistema nervoso entérico? / Does the rheumatoid arthritis affect the enteric nervous system?

ABSTRACT BACKGROUND: Few studies regarding arthritic diseases have been performed to verify the presence of the neurodegeneration. Given the increased oxidative stress and extra-articular effects of the rheumatoid arthritis, the gastrointestinal studies should be further investigated aiming a better understanding of the systemic effects the disease on enteric nervous system. OBJECTIVE: To determine whether the rheumatoid arthritis affects the nitrergic density and somatic area of the nNOS- immunoreactive (IR) myenteric neurons, as well as the morphometric areas of CGRP and VIP-IR varicosities of the ileum of arthritic rats. METHODS: Twenty 58-day-old male Holtzmann rats were distributed in two groups: control and arthritic. The arthritic group received a single injection of the Freund's Complete Adjuvant in order to induce arthritis model. The whole-mount preparations of ileum were processed for immunohistochemistry to VIP, CGRP and nNOS. Quantification was used for the nitrergic neurons and morphometric analyses were performed for the three markers. RESULTS: The arthritic disease induced a reduction 6% in ileal area compared to control group. No significant differences were observed in nitrergic density comparing both groups. However, arthritic group yielded a reduction of the nitrergic neuronal somatic area and VIP-IR varicosity areas. However, an increase of varicosity CGRP-IR areas was also observed. CONCLUSION: Despite arthritis resulted in no alterations in the number of nitrergic neurons, the retraction of ileal area and reduction of nitrergic somatic and VIP-IR varicosity areas may suggest a negative impact the disease on the ENS.

RESUMO CONTEXTO: Poucos estudos sobre doenças artríticas têm sido realizados para verificar a presença de neurodegeneração. Diante do aumento do estresse oxidativo e dos efeitos extra-articulares da artrite reumatoide, estudos gastrointestinais devem ser investigados visando uma melhor compreensão dos efeitos sistêmicos da doença no sistema nervoso entérico. OBJETIVO: Determinar se a artrite reumatoide afeta a densidade nitrérgica e a área somática dos neurônios mioentéricos imunorreativos ao nNOS (nNOS-IR), bem como para as áreas morfométricas das varicosidades CGRP-IR e VIP-IR do íleo de ratos artríticos. MÉTODOS: Vinte ratos Holtzmann, com 58 dias de idade, foram distribuídos em dois grupos: controle e artrítico. O grupo artrítico recebeu uma única injeção do adjuvante completo de Freund para induzir o modelo de artrite. Os preparados totais de íleo foram processados para imuno-histoquímica ao VIP, CGRP e nNOS. A quantificação foi utilizada para os neurônios nitrérgicos e as análises morfométricas foram realizadas para os três marcadores. RESULTADOS: A doença artrítica induziu uma redução de 6% na área ileal em relação ao grupo controle. Não foram observadas diferenças significativas na densidade nitrérgica comparando os dois grupos. No entanto, o grupo artrítico produziu uma redução da área somática neuronal nitrérgica e da área das varicosidades do VIP-IR. Entretanto, foi observado um aumento das áreas das viricosidades CGRP-IR. CONCLUSÃO: Apesar da artrite não resultar em alterações no número de neurônios nitrérgicos, a retração da área ileal e a redução das áreas somática nitrérgica e das varicosidades do VIP-IR podem sugerir um impacto negativo da doença no sistema nervoso entérico.

Does Parkinson's disease start in the gut? / A doença de Parkinson começa no intestino?

ABSTRACT Current understanding of the pathophysiology of Parkinson's disease suggests a key role of the accumulation of alpha-synuclein in the pathogenesis. This critical review highlights major landmarks, hypotheses and controversies about the origin and progression of synucleinopathy in Parkinson's disease, leading to an updated review of evidence suggesting the enteric nervous system might be the starting point for the whole process. Although accumulating and compelling evidence favors this theory, the remaining knowledge gaps are important points for future studies.

RESUMO O atual entendimento sobre a fisiopatologia da doença de Parkinson (DP) sugere um papel central do acúmulo de alfa-sinucleína na patogenia da DP Esta revisão crítica revisita marcos, teorias e controvérsias a respeito da origem e progressão da sinucleinopatia, apresentando uma atualização das principais evidências sugerindo que o sistema nervoso entérico seria o local inicial deste processo. Apesar das evidências a favor desta teoria serem crescentes e instigantes, as lacunas de conhecimento a este respeito são importantes pontos para estudos futuros.

Different inoculum loads of Toxoplasma gondii induce reduction of myenteric neurons of the rat colon / Diferentes inóculos de Toxoplasma gondii induzem a redução de neurônios mioentéricos no cólon de ratos

Abstract Toxoplasmosis, a disease caused by Toxoplasma gondii, is an important health problem, especially in immunocompromised hosts. T. gondii uses the gut wall as an infection gateway, with tropism for muscular and nervous tissues causing intestinal alterations, including some in the enteric nervous system. This study aims at investigating the colon of rats infected by T. gondii in order to understand how the amount of oocysts influences in myenteric neuronal changes. Sixty Wistar rats (Rattus norvegicus) were divided into six groups. One group remained as a control and the others received inocula of 10, 50, 100, 500 or 5,000 oocysts of T. gondii. The animals were euthanized after 30 days of infection. The total neuronal population and the nitrergic subpopulation in the colon myenteric plexus of each animal was counted. The data were statistically analyzed showing less weight gain in rats with 10, 500 and 5,000 oocysts. A decrease in the number of total neurons with 50, 100 or 5,000 oocysts and an increase in the nitrergic population with 10, 100, 500 or 5,000 oocysts were verified. These results show that neuronal alterations are more significant when the infection is induced by larger inocula and reinforces the suspicion that neuronal loss is directed at cholinergic neurons.

Resumo A toxoplasmose, doença causada pelo Toxoplasma gondii, é um importante problema de saúde, principalmente em imunocomprometidos. T. gondii utiliza a parede do intestino como porta de entrada no hospedeiro e tem tropismo pelos tecidos muscular e nervoso provocando alterações intestinais, inclusive no sistema nervoso entérico. Este estudo buscou analisar o cólon de ratos infectados por T. gondii para entender como a quantidade de oocistos influencia nas alterações neuronais mientéricas. Foram utilizados 60 ratos Wistar (Rattus norvegicus) em seis grupos. Um dos grupos permaneceu como controle e os demais receberam inóculos de 10, 50, 100, 500 ou 5.000 oocistos de T. gondii. Os animais foram submetidos a eutanásia após 30 dias de infecção. No plexo mientérico do cólon dos animais foram quantificadas a população neuronal total e a subpopulação nitrérgica. Os dados foram analisados estatisticamente demonstrando inferior ganho de peso nos ratos com 10, 500 e 5.000 oocistos. Verificamos diminuição no número de neurônios totais com inóculos de 50, 100 ou 5.000 oocistos e aumento da população nitrérgica com 10, 100, 500 ou 5000 oocistos. Estes resultados mostram que alterações neuronais são mais significativas quando a infecção é induzida por inóculos maiores e reforça a suspeita de perda neuronal direcionada a neurônios colinérgicos.

Bioaccumulation of Pyrethroid in Parasite Wenyonia acuminata (Cestoda: Caryophyllaeidae) and Host fish Synodontis clarias (Linnaeus, 1758) from Lekki Lagoon, Lagos Nigeria

Abstract This study was aimed at determining the concentration of pyrethroid in the surface water, sediment, Weyonia acuminata and Synodontis clarias fish in Lekki lagoon, Lagos, Nigeria. In-situ physicochemical analysis of the surface water was conducted using a calibrated handheld multi-parameter probe (Horiba Checker Model U-10). Intestinal samples from infected and uninfected fish were analyzed for pyrethroid concentrations, microbial colonization, proteins (PRO), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), reduced glutathione (GSH), malonaldehyde (MDA) and glutathione peroxidase (GPx). The histopathology of infected and uninfected intestinal tissues were analyzed using Haematoxylin and Eosin (H&E) stains and examined under a binocular light microscope (Model 230485). A total of 39 out of 98 S. clarias fish were infected with cestode parasite, Wenyonia acuminate, amounting to 39% parasite prevalence. Among the tested pyrethroids, Cyfluthrin and Alpha cypermethrin had significant sorption of 1.62 and 3.27 respectively from the aqueous phase to the bottom sediment of the lagoon. Pyrethroid concentration was in the order of sediment > parasite> water > intestine> liver. The cholesterol, triglycerides, and LDL (low density lipids) in the parasite were higher than in the host fish (p 0.05). On the other hand, the fish hepatic protein, high density lipids (HDL) and glucose were higher than the levels in the parasites (p 0.05). There was a high prevalence of gut microbes (30 - 40%), which include Salmonella sp, Escherichia coli, Pseudomonas sp and Bacillus sp among individuals infected with gut Cestodes, Wenyonia sp compared with uninfected individual which had higher gut Staphylococcus sp., Klebsiella sp., and Proteus sp. (10- 40%). among the congeners of pyrethroids analyzed, Cyfluthrin > Alpha-Cyermethrin had significant sorption on the sediment, however unlike a benthopelagic fish, no pyrethroid was accumulated in the S. clarias from the sediment. The fish however accumulated Alpha-Cypermethrin from the aqueous phase. The parasite on the other hand accumulated Bathroid significantly from the surface water and bottom sediment which may be linked to the higher stress levels observed in the parasite than the host fish. The parasite in turn inflicted histological alterations on the host intestine, marked by moderate inflammation of mucosa, alteration of the villi microstructure, moderate stunting of the villous structure and moderate fibrosis of villous structure. The study demonstrated the efficiency of histopathological and microbial analysis in biomonitoring studies enteric parasites and early detection of pyrethroid toxicity respectively compared to bioaccumulation analysis.

Resumo Este estudo teve como objetivo determinar a concentração de piretroide nos peixes de águas superficiais, sedimentos, Wenyonia acuminata e Synodontis clarias na lagoa de Lekki, Lagos, Nigéria. A análise físico-química in situ da água de superfície foi realizada usando uma sonda multiparâmetro manual calibrada (Horiba Checker Modelo U-10). Amostras intestinais de peixes infectados e não infectados foram analisadas quanto a concentrações de piretroides, colonização microbiana, proteínas (PRO), superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa reduzida (GSH), malonaldeído (MDA) e glutationa peroxidase (GPx). A histopatologia dos tecidos intestinais infectados e não infectados foi analisada usando manchas de Hematoxilina e Eosina (H&E) e examinada sob um microscópio de luz binocular (Modelo 230485). Um total de 39 dos 98 peixes de S. clarias foi infectado com o parasita cestoide Wenyonia acuminata, totalizando 39% de prevalência do parasita. Entre os piretroides testados, ciflutrina e alfa-cipermetrina tiveram sorção significativa de 1,62 e 3,27, respectivamente, da fase aquosa ao sedimento de fundo da lagoa. A concentração de piretroides estava na ordem de sedimentos > parasita > água > intestino > fígado. O colesterol, os triglicerídeos e o LDL (lipídios de baixa densidade) no parasita foram maiores que no peixe hospedeiro (p 0,05). Por outro lado, a proteína hepática dos peixes, os lipídios de alta densidade (HDL) e a glicose foram superiores aos níveis nos parasitas (p 0,05). Houve uma alta prevalência de micróbios intestinais (30-40%), incluindo Salmonella sp., Escherichia coli, Pseudomonas sp. e Bacillus sp. entre indivíduos infectados no intestino com o parasita cestoide Wenyonia sp. em comparação com indivíduos não infectados com Staphylococcus sp., Klebsiella intestinal sp. e Proteus sp. (10-40%). Entre os congêneres dos piretroides analisados, ciflutrina > alfa-cipermetrina teve sorção significativa no sedimento, porém, diferentemente de um peixe bentopelágico, nenhum piretroide foi acumulado no S. clarias do sedimento. No entanto, os peixes acumularam alfa-cipermetrina a partir da fase aquosa. O parasita, por outro lado, acumulou Bathroid significativamente da água superficial e do sedimento do fundo, o que pode estar relacionado aos níveis mais altos de estresse observados no parasita do que no peixe hospedeiro. O parasita, por sua vez, causou alterações histológicas no intestino hospedeiro, marcadas por inflamação moderada da mucosa, alteração da microestrutura das vilosidades, atrofia moderada da estrutura das vilosidades e fibrose moderada da estrutura das vilosidades. O estudo demonstrou a eficiência da análise histopatológica e microbiana nos estudos de biomonitoramento de parasitas entéricos e detecção precoce da toxicidade dos piretroides, respectivamente, em comparação à análise de bioacumulação.

Morphoquantitative study of Rattus norvegicus submucosal plexus by different neuronal evidentiation histochemical techniques / Estudio morfocuantitativo del plexo submucoso de Rattus norvegicus por medio de diferentes técnicas histoquímicas para verificar características neuronales

Enteric nervous plexuses have been the object of several studies, specially the myenteric plexus whose studies describe its organization, functions and alterations. On the other hand, the submucosal plexus has been less studied and still needs descriptive studies. To analyze morphologically and quantitatively submucosal neurons of the jejunum of 90-day-old healthy rats using different techniques for neuronal staining as a way to provide normality data to compare with future experimental studies. Whole mount preparations of the jejunum were submitted to Giemsa, NADH-diaphorase and NADPH-diaphorase techniques to stain the total neuronal population, more metabolically active subpopulation and subpopulation of nitrergic neurons, respectively. Neurons of the submucosal plexus of adult rats are mainly organized in ganglia with varied sized and shapes. Giemsa technique stained 243.93 ± 7.68 neurons per mm2. Regarding the total population stained by Giemsa, NADH- diaphorase positive (139.09 ± 11.14/mm2) neurons represented 57 % and NADPH-diaphorase positive (18.17 ± 0.28/mm2) represented 7.5 %. The area of the cell body was bigger in nitrergic neurons (412.29 ± 150.22) than in the ones stained by Giemsa (254.71 ± 63.32) and NADH-diaphorase positive (243.98 ± 123.82).

El plexo nervioso entérico ha sido objeto de varios estudios, especialmente el plexo mientérico, cuyos estudios consisten en describir su organización, funciones y alteraciones. Por otro lado, el plexo submucoso ha sido menos investigado y todavía necesita estudios descriptivos. Para analizar morfológica y cuantitativamente las neuronas de la submucosa del yeyuno de ratas de 90 días de edad, se realizaron diferentes técnicas de tinción neuronales, en animales sanos, como una forma de proporcionar datos de normalidad y compararlo con futuros estudios experimentales. Se realizaron montajes con preparados enteros del yeyuno que fueron sometidos a las técnicas de Giemsa, de NADPH-diaforasa y NADH-diaforasa para teñir la población total neuronal, subpoblación más activa metabólicamente y subpoblación de neuronas nitrérgicas, respectivamente. Las neuronas del plexo submucoso de ratas adultas se organizan principalmente en los ganglios con variaciones de tamaño y formas. Con la técnica de Giemsa se tiñeron 243.93±7.68 neuronas por mm2. Con respecto a la población total teñida con Giemsa, fueron positivas para NADH- diaforasa en 139.09 ±11.14 / mm2 neuronas, representando el 57% y fueron positivas para NADPH-diaforasa en 18,17 ± 0,28 / mm2 neuronas, lo que representó el 7,5%. El área del cuerpo celular fue mayor en neuronas nitrérgicas (412,29 ± 150.22) que en las teñidas con Giemsa (254,71 ± 63,32) y NADH-diaforasa positivas (243,98 ± 123,82).

Análise morfoquantitativa e ultraestrutural dos componentes do plexo mioentérico do intestino delgado de ratos submetidos à dieta padrão de Moçambique nos períodos pré e pós-natal / Morphoquantitative and ultrastructural analysis on the myenteric plexus components of the rats small intestine with standard Mozambique diet in the pre and postnatal period

Admite-se que mais de 40% das crianças são acometidas pela desnutrição crônica em Moçambique (África Oriental). A doença pode estar relacionada, entre outros fatores, à qualidade da dieta que é oferecida à população, já que é bastante precária, pois exibe sérias deficiências de ferro, gordura e, principalmente, proteína animal em sua composição. Essa insuficiência proteica poderia acarretar em prejuízo ao desenvolvimento do organismo, pois a proteína animal é considerada uma boa fonte de aminoácidos essenciais, em decorrência de sua maior digestibilidade e absorção no intestino delgado, quando comparadas às fontes de origem vegetal. Na presente pesquisa foi reproduzida em laboratório, a dieta básica da população de Moçambique (DM), com o objetivo de avaliar seus efeitos nos componentes do plexo mioentérico e na mucosa dos segmentos do intestino delgado de ratos Wistar. Para isso, os animais foram divididos nos grupos Controle, com dieta AIN-93G com adição de 20% de caseína (NN21 e NN42); Dieta de Moçambique (DM21 e DM42) e Dieta Moçambique suplementada, acrescida de 20% de caseína (NM21 e NM42); e grupo Renutrido (RM42), composto por animais do grupo DM21 que, a partir do 22º dia, receberam a dieta NM até atingirem 42 dias de vida. Os segmentos foram coletados e submetidos às técnicas histoquímicas da NADH-diaforase e da NADPH-diaforase para evidenciação de neurônios do plexo mioentérico; histológicas (HE, Picro-sírius, Weigert) para avaliação da parede intestinal, mucosa, gânglios e seu tecido conjuntivo associado; de microscopia eletrônica de varredura (MEV) para observação da estrutura da mucosa; e de microscopia eletrônica de transmissão (MET) para a ultraestrutura dos componentes ganglionares. Estatisticamente, o peso corporal e o comprimento dos animais submetidos à dieta de Moçambique estavam abaixo dos valores encontrados para os animais controle. Na análise qualitativa, observou-se a presença de fibras elásticas, elaunínicas e oxitalânicas,...

It is assumed that more than 40% of children are affected by chronic malnutrition in Mozambique (East Africa). The disease may be related, among other factors, the quality of diet that is offered to the population, since it is quite precarious, because it displays serious deficiencies of iron, fat and especially animal protein in their composition. This protein failure could result in damage to the development of the organism, as animal protein is considered a good source of essential amino acids, due to its higher digestibility and absorption in the small intestine when compared to vegetable sources. In this research has been reproduced in the laboratory, the staple diet of the population of Mozambique (DM), in order to evaluate its effects on components of the myenteric plexus and the mucosa of the small intestine segments of Wistar rats. For this, the animals were divided into control groups with AIN-93G diet with the addition of 20% casein (NN21 and NN42); Diet Mozambique (DM21 and DM42) and diet supplemented Mozambique, plus 20% casein (NM21 and NM42); and Refeeding group (RM42), consisting of the animals DM21 group, from the 22th day, given NM diet until they reached 42 days of life. The segments were collected and submitted to histochemical techniques of NADH-diaphorase and NADPH-diaphorase for disclosure of neurons of the myenteric plexus; histologic (HE, Sirius red, Weigert) for evaluation of the intestinal wall, mucosa, lymph nodes and its associated connective tissue; scanning electron microscopy (SEM) for observation of mucosal structure; and Transmission electron microscopy (TEM) ultrastructure to ganglion components. Statistically, body weight and length of the animals submitted to Mozambique diet were below the values found for control animals. Qualitative analysis showed the presence of elastic fibers, and elauninic oxytalan, and predominance of type I collagen fibers in the NN42 and DM42 groups, and type III in the NM42 and RM42 groups around...

Papel da via S100B/RAGE/NFkB na patogênese da mucosite intestinal experimental por 5-fluorouracil desregulação de células gliais e de neurônios entéricos

5-Fluorouracil (5-FU) promotesintestinal mucositis and motility alterations. Themucositis affect about40% of patients receiving 5-FU and there arereports of patients presentingmucositis afterthe first dose. Under other inflammatory conditions, the S100βprotein is involved in the RAGE activation with subsequent NFκBtranslocation to the nucleus and transcription of TNF-αand iNOS. The enteric glial cells through several mediators, such asS100β, interact with the intestinal epithelial cells and enteric neurons. Therefore, the aim of this study was investigatethe effect of 5-FU in the enteric glial cells and neurons, as well as studythe role of the via S100β/RAGE/NFκB in the pathogenesis of the experimental intestinal mucositis. Swiss male mice received saline (control, 0.9%, i.p.) or5-FU (450 mg/Kg, i.p., single dose). After24h, mice weretreated with pentamidine, aS100 βinhibitor (P0.8 mg/Kg +5FU; P4 mg/Kg +5FU; or onlyP4mg/Kg, i.p.) during two days and euthanized on the fouth day of the experimental protocol...

O 5-Fluorouracil (5-FU) promove mucosite intestinal e alterações da motilidade.A mucositeatinge cerca de 40% dos pacientes em tratamento com5-FUe há relatos de pacientes que a apresentam na primeira dose administrada.Em outras condições inflamatórias, a proteína S100β está envolvida na ativação de RAGE com consequente translocação de NFκB para o núcleo e transcrição de TNF-αe de iNOS.As células gliais entéricas por meio deS100β,interagem com as células epiteliais intestinais e com os neurônios entéricos.Nesse contexto, oobjetivodeste estudo éinvestigar o efeito do5-FU nas células gliais e nos neurôniosentéricos, bem como estudar o papel da via S100β/RAGE/NFκB na patogênese da mucosite intestinal induzida por esse quimioterápico. Os camundongos Swiss machos receberam salina (0,9%, i.p.) ou 5-FU (450 mg/Kg, i.p. dose única). Após 24h da administração do quimioterápico, administrou-se pentamidina, inibidor de S100β (P0,8 mg/Kg +5FU; P4 mg/Kg +5FU; ou somente P4mg/Kg, i.p.) durante dois dias e os animais foram eutanasiadosno quarto dia do protocolo experimental...

O efeito do uso de antioxidantes na prevenção e tratamento da neuropatia diabética no sistema nervoso entérico / The use of antioxidants in the prevention and treatment of diabetic neuropathy in the enteric nervous system

O Diabetes mellitus (DM) é um distúrbio metabólico, complexo e de etiologia múltipla. Esta doença causa prejuízos aos sistemas vasculares e nervosos que se manifestam na forma de macro e microangiopatias e neuropatias diabéticas com alta incidência e prevalência na população mundial. Entre as neuropatias existentes, a neuropatia autonômica afeta o trato gastrointestinal (TGI) e caracteriza-se por alterações degenerativas em componentes do sistema nervoso entérico, como neurônios e células gliais. Consequentemente, ocorrem modificações na secreção e motilidade do TGI que são responsáveis por sintomas comuns da doença, tais como náuseas, inchaço, dor abdominal, diarreia, entre outros. Estudos experimentais e clínicos sugerem que o estresse oxidativo esteja envolvido na patogênese e na progressão da neuropatia diabética autonômica no sistema nervoso entérico. Assim, compostos antioxidantes que previnem a formação e/ou neutralizam os radicais livres oriundos do estresse oxidativo podem ter um papel relevante no tratamento das complicações neurológicas do diabetes mellitus. Neste artigo, realizou-se uma revisão da literatura sobre os principais aspectos, quadro clínico e patogênese do DM e a ocorrência da neuropatia diabética autônoma no sistema nervoso entérico, abordando as principais pesquisas que empregaram antioxidantes para prevenir e/ou tratar os danos neurológicos que são consequências desta patologia.

Diabetes mellitus (DM) is a metabolic complex disorder of multiple etiology. This disease causes damage to the vascular and nervous systems that are seen as macro- and microangiopathies and diabetic neuropathies, with high incidence and prevalence in the world population. Among the existing neuropathies, the autonomic neuropathy affects the gastrointestinal (GI) tract and is characterized by degenerative changes in components of the enteric nervous system, such as neurons and glial cells. Accordingly, changes occur in secretion and motility of the GIT, which are responsible for common symptoms, such as nausea, bloating, abdominal pain, diarrhea, among others. Experimental and clinical studies suggest that oxidative stress is involved in the pathogenesis and progression of autonomic diabetic neuropathy in the enteric nervous system. Thus, antioxidant compounds that prevent the formation and/or neutralize free radicals derived from oxidative stress may play a role in the treatment of neurological complications of diabetes mellitus. In this article, a literature review is performed on the main aspects of the clinical presentation and the pathogenesis of diabetes and autonomous diabetic neuropathy in the enteric nervous system. It also addresses the main research employing antioxidants to prevent and/or treat neurological damages that are consequences of this disease.

Jejunal hemorrhage syndrome in a Zebu cow in Brazil / Síndrome de jejuno hemorrágico em gado Zebu no Brasil

Clostridium perfringens type A has been incriminated as the etiologic agent in jejunal hemorrhage syndrome (JHS), which is a disease that affects dairy cattle. Although this microorganism is considered an important enteropathogen the pathogenesis of JHS is still not clear, and there have been no reports of its occurrence in Brazil so far. The aim of this study was to describe the occurrence of JHS by infection with a C. perfringens type A strain carrying the beta-2 toxin gene in a zebu cow in Brazil, for the first time.

Clostridium perfringens tipo A tem sido considerado agente etiológico da síndrome do jejuno hemorrágico (SJH), que é uma doença que afeta comumente os rebanhos de gado. Embora este microrganismo seja considerado um importante enteropatógeno, a patogênese da SJH ainda não foi elucidada, e não havia sido reportada no Brasil até então. O alvo deste estudo foi descrever pela primeira vez a ocorrência da SJH causada por C. perfringens tipo A, carreador do gene da toxina beta-2, em um zebuíno no Brasil.

Enteric coated HPMC capsules plugged with 5-FU loaded microsponges: a potential approach for treatment of colon cancer

The work was aimed at developing novel enteric coated HPMC capsules (ECHC) plugged with 5 Florouracil (5-FU) loaded Microsponges in combination with calcium pectinate beads. Modified quasi-emulsion solvent diffusion method was used to formulate microsponges based on 32 factorial design and the effects of independent variables (volume of organic solvent and Eudragit RS100 content) on the dependent variables (Particle size, %EE & % CDR) were determined. The optimized microsponges (F4) were characterized by SEM, PXRD, TGA and were plugged along with calcium pectinate beads in HPMC capsules and the HPMC capsules were further coated with enteric polymer Eudragit L 100 (Ed-L100) and/ or Eudrgit S 100 (Ed-S 100) in different proportions. In vitro release study of ECHC was performed in various release media sequentially SGF for 2 h, followed by SIF for the next 6 h and then in SCF (in the presence and absence of pectinase enzyme for further 16 h). Drug release was retarded on coating with EdS-100 in comparison to blend of EdS-100: EdL-100 coating. The percentage of 5-FU released at the end of 24 h from ECHC 3 was 97.83 ± 0.12% in the presence of pectinase whereas in control study it was 40.08 ± 0.02% drug. The optimized formulation was subjected to in vivo Roentgenographic studies in New Zealand white rabbits to analyze the in vivo behavior of the developed colon targeted capsules. Pharmacokinetic studies in New Zealand white rabbits were conducted to determine the extent of systemic exposure provided by the developed formulation in comparison to 5-FU aqueous solutions. Thus, enteric coated HPMC capsules plugged with 5-FU loaded microsponges and calcium pectinate beads proved to be promising dosage form for colon targeted drug delivery to treat colorectal cancer.

O trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de novas cápsulas com revestimento entérico HPMC (ECHC) conectadas com microesponjas carregadas com fluoruracila (5-FU) em combinação com grânuos de pectinato de cálcio. O método de difusão de solvente modificado quasi-emulsão foi usado para formular microesponjas com base no planejamento fatorial 32 e determinaram-se os efeitos das variáveis independentes (volume de solvente orgânico e conteúdo Eudragit RS100) sobre as variáveis dependentes (tamanho de partícula, EE% e % CDR). As microesponjas otimizadas (F4) foram caracterizadas por SEM, PXRD, TGA e ligadas aos grânulos de pectinato de cálcio em cápsulas de HPMC e estas foram, ainda, revestidas com polímero entérico Eudragit L 100 (Ed-L100) e/ou Eudrgit S 100 (Ed S 100) em diferentes proporções. No estudo de liberação in vitro de ECHC foi realizada em vários meios de liberação sequencial SGF durante 2 h, seguido de SIF para as próximas 6 h, e, em seguida, em SCF (na presença e na ausência de enzima pectinase por mais 16 h). A liberação do fármaco foi retardada em revestimento com a EDS-100, em comparação com mistura de EDS-100: EDL-100, de revestimento. O percentual de 5-FU liberado de ECHC 3 ao final de 24 h foi 97,83 ± 0,12% em presença de pectinase, enquanto que para o controle foi de 40,08 ± 0,02% do fármaco. A formulação otimizada foi submetida a estudos Roentgenográficos in vivo, em coelhos brancos Nova Zelândia, para analisar o comportamento das cápsulas desenvolvidas direcionadas ao cólon. Os estudos de farmacocinética em coelhos brancos da Nova Zelândia foram conduzidos para determinar a extensão da exposição sistêmica propiciada pela formulação desenvolvida, em comparação com solução aquosa de 5-FU. Assim, cápsulas entéricas de HPMC revestidas e conectadas com microesponjas carregadas com 5-FU e grânulos de pectinato de cálcio se mostraram promissoras como formulação para liberação do fármaco no cólon no tratamento do câncer colorretal.

Avaliação da inervação entérica e análise proteômica do intestino delgado de ratos expostos à dose aguda ou crônica de fluoreto / Evaluation of enteric innervation and proteomic analysis of the small intestine of rats exposed to acute or chronic fluoride dose

O trato gastrointestinal (TGI) é a principal rota de exposição ao fluoreto (F) e o seu mais importante sítio de absorção. Acredita-se que a toxicidade do F comprometa a fisiologia do intestino, devido à relevante sintomatologia gastrointestinal relatada em consequência da exposição excessiva ao F. A função intestinal é controlada por uma complexa rede neuronal interligada e incorporada à parede deste órgão, denominada Sistema Nervoso Entérico (SNE). Embora os efeitos tóxicos do F sobre o Sistema Nervoso Central sejam descritos na literatura, não há estudos relacionados à sua toxicidade sobre o SNE. Neste estudo realizado em ratos, foi avaliado o efeito da exposição aguda ou crônica ao F, sobre a população geral de neurônios entéricos e sobre as subpopulações que expressam os principais neurotransmissores entéricos: Acetilcolina (ACh), Óxido Nítrico (NO), Peptídeo Vasoativo Intestinal (VIP), Peptídeo Relacionado ao Gene da Calcitonina (CGRP) e Substância P (SP). Os animais foram divididos em 5 grupos: 3 destinados à exposição crônica (0 ppm, 10 ppm ou 50 ppm de F na água de beber) e 2 à exposição aguda (0 ou 25 mgF/Kg por gavagem gástrica). Foram coletados os 3 segmentos do intestino delgado (duodeno, jejuno e íleo) e processados para a detecção da HuC/D, ChAT, nNOS, VIP, CGRP e SP, através de técnicas de imunofluorescência, no plexo mioentérico. Foram obtidas imagens para a realização da análise quantitativa dos neurônios da população geral (HuC/D) e nitrérgicos (imunorreativos à nNOS); e morfométrica dos neurônios imunorreativos à HuC/D ou nNOS; e das varicosidades imunorreativas à ChAT, VIP, CGRP ou SP. Amostras dos 3 segmentos intestinais foram preparadas e coradas em Hematoxilina e Eosina para análise histológica da morfologia básica. O segmento intestinal considerado mais afetado na análise morfométrica da população geral de neurônios, o duodeno, foi selecionado para a realização da análise proteômica, com o objetivo de oferecer o seu perfil proteico...

The gastrointestinal tract (GIT) is the main route of fluoride (F) exposure, and the most important site of its absorption. It is believed that F toxicity compromises the intestine physiology, due to the relevant gastrointestinal symptomatology reported in consequence to excessive exposure. The intestinal function is controlled by a complex neuronal net, which is interconnected and embedded in the wall of this organ, named Enteric Nervous System (ENS). Although the toxic effects of F on the Central Nervous system are described in the literature, there are no studies related to its toxicity on the ENS. Therefore, in this study performed in rats, the effects of chronic and acute F exposure were evaluated, on the general population of enteric neurons and on the subpopulations that express the main enteric neurotransmitters: Acetylcholine (Ach), Nitric Oxide (NO), Vasoactive Intestinal Peptide (VIP), Calcitonin gene related peptide (CGRP), and Substance P (SP). The animals were divided into 5 groups: 3 designed to the chronic exposure (0 ppm, 10 ppm ou 50 ppm de F in the drinking water) and 2 to the acute exposure (0 ou 25 mgF/Kg - gastric gavage). Three intestinal segments were collected (duodenum, jejunum, and ileum) and processed for the immunofluorescence techniques to detect HuC/D, ChAT, nNOS, VIP, CGRP and SP, on the myenteric plexus. Images were obtained for the quantitative analysis of the general population of neurons (HuC/D immunoreactive) and the nitrergic neurons (nNOS immunoreactive), for the morphometric analysis of the general population and nitrergic neurons and also for the immunoreactive varicosities to ChAT, VIP, CGRP or SP. Samples of the 3 intestinal segments were prepared and stained with hematoxylin and eosin for histological analysis of the basic morphology. Duodenum, the intestinal segment considered the most affected in the morphological analysis of the general population of neurons, was selected for the proteomic analysis...

Avaliação da inervação entérica e análise proteômica do intestino delgado de ratos expostos à dose aguda ou crônica de fluoreto / Evaluation of enteric innervation and proteomic analysis of the small intestine of rats exposed to acute or chronic fluoride dose

O trato gastrointestinal (TGI) é a principal rota de exposição ao fluoreto (F) e o seu mais importante sítio de absorção. Acredita-se que a toxicidade do F comprometa a fisiologia do intestino, devido à relevante sintomatologia gastrointestinal relatada em consequência da exposição excessiva ao F. A função intestinal é controlada por uma complexa rede neuronal interligada e incorporada à parede deste órgão, denominada Sistema Nervoso Entérico (SNE). Embora os efeitos tóxicos do F sobre o Sistema Nervoso Central sejam descritos na literatura, não há estudos relacionados à sua toxicidade sobre o SNE. Neste estudo realizado em ratos, foi avaliado o efeito da exposição aguda ou crônica ao F, sobre a população geral de neurônios entéricos e sobre as subpopulações que expressam os principais neurotransmissores entéricos: Acetilcolina (ACh), Óxido Nítrico (NO), Peptídeo Vasoativo Intestinal (VIP), Peptídeo Relacionado ao Gene da Calcitonina (CGRP) e Substância P (SP). Os animais foram divididos em 5 grupos: 3 destinados à exposição crônica (0 ppm, 10 ppm ou 50 ppm de F na água de beber) e 2 à exposição aguda (0 ou 25 mgF/Kg por gavagem gástrica). Foram coletados os 3 segmentos do intestino delgado (duodeno, jejuno e íleo) e processados para a detecção da HuC/D, ChAT, nNOS, VIP, CGRP e SP, através de técnicas de imunofluorescência, no plexo mioentérico. Foram obtidas imagens para a realização da análise quantitativa dos neurônios da população geral (HuC/D) e nitrérgicos (imunorreativos à nNOS); e morfométrica dos neurônios imunorreativos à HuC/D ou nNOS; e das varicosidades imunorreativas à ChAT, VIP, CGRP ou SP. Amostras dos 3 segmentos intestinais foram preparadas e coradas em Hematoxilina e Eosina para análise histológica da morfologia básica. O segmento intestinal considerado mais afetado na análise morfométrica da população geral de neurônios, o duodeno, foi selecionado para a realização da análise proteômica, com o objetivo de oferecer o seu perfil proteico...

The gastrointestinal tract (GIT) is the main route of fluoride (F) exposure, and the most important site of its absorption. It is believed that F toxicity compromises the intestine physiology, due to the relevant gastrointestinal symptomatology reported in consequence to excessive exposure. The intestinal function is controlled by a complex neuronal net, which is interconnected and embedded in the wall of this organ, named Enteric Nervous System (ENS). Although the toxic effects of F on the Central Nervous system are described in the literature, there are no studies related to its toxicity on the ENS. Therefore, in this study performed in rats, the effects of chronic and acute F exposure were evaluated, on the general population of enteric neurons and on the subpopulations that express the main enteric neurotransmitters: Acetylcholine (Ach), Nitric Oxide (NO), Vasoactive Intestinal Peptide (VIP), Calcitonin gene related peptide (CGRP), and Substance P (SP). The animals were divided into 5 groups: 3 designed to the chronic exposure (0 ppm, 10 ppm ou 50 ppm de F in the drinking water) and 2 to the acute exposure (0 ou 25 mgF/Kg - gastric gavage). Three intestinal segments were collected (duodenum, jejunum, and ileum) and processed for the immunofluorescence techniques to detect HuC/D, ChAT, nNOS, VIP, CGRP and SP, on the myenteric plexus. Images were obtained for the quantitative analysis of the general population of neurons (HuC/D immunoreactive) and the nitrergic neurons (nNOS immunoreactive), for the morphometric analysis of the general population and nitrergic neurons and also for the immunoreactive varicosities to ChAT, VIP, CGRP or SP. Samples of the 3 intestinal segments were prepared and stained with hematoxylin and eosin for histological analysis of the basic morphology. Duodenum, the intestinal segment considered the most affected in the morphological analysis of the general population of neurons, was selected for the proteomic analysis...

O eixo intestino-cérebro e o papel da serotonina / The brain-intestine axis and the role of serotonin

Este trabalho teve por finalidade buscar informações na literatura que descrevam a interação entre o sistema nervoso central (SNC) e sistema nervoso entérico (SNE), e que demonstrem de que forma a serotonina pode atuar no ?eixo intestino-cérebro?. A serotonina (5-hidroxitriptamina, 5-HT) originalmente descoberta em 1937 por Vittorio Erspamer é uma indolamina, encontrada em células do trato gastrointestinal, plaquetas e no sistema nervoso central de mamíferos, sendo que cerca de 95% da 5-HT corpórea é produzida no intestino. De acordo com a literatura o trato gastrointestinal é inervado por cinco diferentes classes de neurônios: neurônios entéricos, aferentes vagal, aferentes da coluna vertebral, eferentes parassimpáticos e eferentes simpáticos. Os alvos primários da 5-HT que é secretado pelas células enteroendócrinas são as projeções intrínsecas constituída por neurônios aferentes primários da mucosa e plexo mientérico, e projeções extrínsecas, constituída por nervos que transmitem sensações gerais além de náuseas e desconforto para o sistema nervoso central. Após os dados compilados da literatura fica claro que o SNE desempenha papel singular, podendo agir de maneira independente, mas também mantém sinapses com o SNC, por meio do nervo vago. Dessa forma, ambos os sistemas podem influenciar a atividade um do outro mediante o ?eixo intestino-cérebro?. Adicionalmente a 5-HT apresenta-se como um importante neurotransmissor envolvido na interação entre o SNE o SNC, importante na regulação da sensação de motilidade e secreção intestinal e também atua na ativação e condução da informação ao SNC.

This paper aims to seek literature information describing the interaction between the central and enteric nervous system, and to demonstrate how serotonin may be acting on the ?brain-intestine axis.? Serotonin, originally discovered in 1937 by Vittorio Erspamer, is an indoleamine found in cells in the gastrointestinal tract, platelets and in the central nervous system of mammals, with approximately 95% of body 5-HT produced in the intestine. According to literature, the gastrointestinal tract is innervated by five different neuron classes: enteric neurons, vagal afferent, spinal afferent, parasympathetic efferent, and sympathetic efferent. The primary targets of serotonin secreted by entero-endocrine cells are the intrinsic projections composed by primary afferent neurons of the mucosa and myenteric plexus, and extrinsic projections, consisting of nerves that send general sensations as well as nausea and general discomfort to the central nervous system. After the data were compiled from the literature, it is clear that the enteric nervous system plays a unique role and can act independently, but it also keeps synapses in the central nervous system, through the vagus nerve. Therefore, both systems can influence the activity of each other through the ?brain-intestine axis ?. In addition, serotonin seems to be an important neurotransmitter involved in the interaction between the enteric nervous system and the central nervous system, important in regulation of motility sensation and intestinal secretion, as well as acting in the activation and conduction of information to the central nervous system.

Gastric-resistant isoniazid pellets reduced degradation of rifampicin in acidic medium

Isoniazid and rifampicin are considered the first-line medication for preventing and treating tuberculosis. Rifampicin is degraded in the stomach acidic environment, especially when combined with isoniazid, factor contributing to treatment failure. In this study, gastric-resistant isoniazid pellets were obtained to physical contact of this drug with rifampicin and to bypass the stomach´s acidic environment. The pellets were fabricated using the extrusion-spheronization technique. The coating process was conducted in a fluid spray coater using Acrycoat L 100(r) solution as the coating agent. The pellets obtained were submitted to a dissolution test in HCl 0.1 N and phosphate buffer media. The results indicated that optimum gastric-resistance was only attained with the highest amount of coating material, with isoniazid almost fully released in phosphate buffer. The amount of rifampicin released from its mixture with non-coated isoniazid pellets in HCl 0.1 N was less than that released from its mixture with the enteric-coated pellets. Acrycoat L 100(r) was shown to be an effective enteric/gastric-resistant coating since the stability of rifampicin appeared to be enhanced when physical contact of this drug with isoniazid was prevented at low pH.

Isoniazida e rifampicina são fármacos de primeira escolha para a prevenção e tratamento da tuberculose. A rifampicina degrada-se em condições ácidas do estômago, principalmente na presença da isoniazida, o que contribui para a falha do tratamento. O presente trabalho teve como objetivo a obtenção de péletes de isoniazida gastrorresistentes, visando a evitar contato da rifampicina com isoniazida e consequente degradação no meio ácido estomacal. Os péletes foram produzidos pela técnica de extrusão-esferonização. O processo de revestimento foi conduzido em leito fluidizado com solução orgânica de Acrycoat L 100(r). Os péletes obtidos foram submetidos ao teste de dissolução em HCl 0,1 N e tampão fosfato. Os resultados indicam que a gastrorresistência foi obtida somente com a maior quantidade de revestimento, sendo a isoniazida liberada completamente no meio tampão fosfato. A quantidade de rifampicina dissolvida em meio ácido, quando associada a péletes de isoniazida não revestidos, foi menor do que a observada na presença de péletes de liberação entérica. O polímero Acrycoat L 100(r) mostrou-se eficiente para o recobrimento com a função de gastrorresistência, indicando que a instabilidade da rifampicina pode ser reduzida nas associações com a isoniazida através do revestimento entérico da isoniazida.